藥物分子設(shè)計

1、Drug design 發(fā)現(xiàn)（discover）：以天然產(chǎn)物為主 藥物發(fā)展 發(fā)展（develop）：以合成藥物為主 設(shè)計（design）：QSAR、3D- QSAR設(shè)計、基于受 體、配體的設(shè)計 天然產(chǎn)物天然產(chǎn)物是生物體為保護自己和繁衍物種而產(chǎn)生的防御性或引誘性的物質(zhì)。一般認為防御和繁衍機制是多數(shù)次級代謝產(chǎn)物的主要作用。天然產(chǎn)物往往與特異性受體有強結(jié)合作用，從而呈現(xiàn)較高藥理活性。另一方面，天然產(chǎn)物的化學結(jié)構(gòu)比較復雜和獨特。 以磺胺類磺胺類藥物為代表，標志著藥物開發(fā)進入了發(fā)展階段。 20世紀60年代發(fā)生的“反應(yīng)停反應(yīng)?！笔录录?，警示著人們對新藥安全性的重視。加速了藥物設(shè)計的發(fā)展。藥藥物發(fā)發(fā)展 藥

2、物分子設(shè)計：以理性的構(gòu)思和科學的策略方法， 構(gòu)建具有預期藥理活性的新化學實體（NCE）。劑型設(shè)計 ：確定劑型、給藥途徑、處方組成、單元劑量等。 劑量設(shè)計：用藥劑量、頻率和療程等。藥藥物物設(shè)計內(nèi)設(shè)計內(nèi)容容 靶標的確定靶標的確定 模型的建立模型的建立 先導化合物的發(fā)現(xiàn)先導化合物的發(fā)現(xiàn) 先導化合物的優(yōu)化先導化合物的優(yōu)化 新藥設(shè)計與研藥設(shè)計與研究靶標的確定 過去談到藥物設(shè)計研究的方法和途徑時，往往僅提兩后者。而現(xiàn)今的新藥設(shè)計與研究的起點，已經(jīng)由過去的化學驅(qū)動轉(zhuǎn)變?yōu)樯飳W主導。一方面是由于后基因組時代陸續(xù)提供豐富和新穎的靶標；另一方面是選擇病種和靶標，除旨在創(chuàng)制非盈利和社會公益性藥物外，大都是為了市場的

3、需求和回收投入的經(jīng)濟因素。 人類基因組計劃完成測序后，人們曾經(jīng)樂觀地認為，只要是將與疾病相關(guān)的基因解析后，新藥即可跟著研發(fā)上市。事實證明，發(fā)現(xiàn)（Identification）可能成為藥物的靶標是一回事，證實（Validation）確為藥物的靶標、而且能夠開發(fā)出新藥則是另一回事。只有確證靶標后才能開始新藥研究，因此，靶標的確證是新藥研究中眾多新技術(shù)的推動力。C lNO HSOON H2T e n id a p 脂氧合酶 ( 5- LOX)環(huán)氧合酶( COX)雙效抑制。花生四烯酸經(jīng)歷COX和5-LOX兩種酶的代謝,在NSAID阻斷前列腺素合成的同時,LOX催化的代謝產(chǎn)物白三烯( LTS) 之生成將

4、相對增加,而LTS又是一類重要的致炎物質(zhì),這就要求新型NSAID必須對COX和5-LOX產(chǎn)生雙重抑制作用。OCH3SO2ONNNH2SO2CF3NONH2SO2CH3RofecoxibCelecoxibValdecoxib以環(huán)氧合酶(COX1和COX2)作用機制為基礎(chǔ)發(fā)現(xiàn)新藥建立生物學模型，以篩選和評價化合物的活性。建立的模型可有不同的層次，但均應(yīng)反映出是針對所選定的靶標的作用。 除了建立藥效學模型外，還應(yīng)建立評價藥代動力學性質(zhì)的模型，在早期研究中同時評價藥效和藥代性質(zhì)，可降低后期開發(fā)的風險。模型的建立模型的建立優(yōu)化先導化合物優(yōu)化先導化合物（Lead optimization） 相似性原理相似

5、性原理 拼合原理拼合原理 藥物設(shè)計的經(jīng)典原理和方法藥物設(shè)計的經(jīng)典原理和方法 前藥原理前藥原理 軟藥原理軟藥原理 4729101323除去OAc基活性O(shè)OAcOHOOHOHAcO OOOOHNHO除去乙酰基或乙酰 氧基活性沒有顯著變化，轉(zhuǎn)MDR作用某些類似物有逆還原后活性略增酯化、差向異構(gòu)化或消除后活性沒有顯著降低四元環(huán)氧或類似結(jié)構(gòu)是必需的降低；某些?；黾踊钚怎；潜匦璧模承┤〈郊柞；推渌；够钚栽黾踊钚月詼p使游離或成可羥基化酯是必需的苯基或類似物是必需的N-?；匦璩ハ嗨菩栽硐嗨菩栽硐葘Щ衔飪?yōu)化途徑通常是基于相似性原理制備一系列化合物，評價活性和吸收，建立結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系（SA

6、R）。分子的相似性：分子結(jié)構(gòu)相似（相對分子量、分子式、功能基團、分子骨架、原子類型和位置、分子構(gòu)象、范德華表面和分子力場等）的化合物簡稱為類似物。通常說來，類似物具有相同/相似的藥效基團和/或結(jié)構(gòu)骨架。分子的相似性與多樣性，是兩個相互聯(lián)系而又對立的概念。多樣性意味著分子不相似性，所以相似性結(jié)構(gòu)不可能是多樣的。 為了發(fā)現(xiàn)苗頭物或先導物，開始設(shè)計的化合物結(jié)構(gòu)應(yīng)盡可能多樣和不相似性。為了優(yōu)化先導物，就應(yīng)體現(xiàn)有控制地相似性和一定限度內(nèi)的多樣性，在不改變或丟失藥效基團的前提下盡可能地體現(xiàn)多樣性。 與分子的多樣性不同的是，相似性原理在很大程度上不需要以了解藥物作用靶標的分子結(jié)構(gòu)為前提，即使不清楚先導物的作

7、用機理，也可根據(jù)一定的法則從其本身的結(jié)構(gòu)出發(fā)進行變換，實現(xiàn)分子的優(yōu)化操作。 當然，在藥物中并非含有相同藥效基團的類似物都有相似的生物活性。這是因為藥物的生物活性是在復雜的體系中呈現(xiàn)的，在與生物靶標結(jié)合時，分子的大小、結(jié)構(gòu)、形狀（構(gòu)型或構(gòu)象）的不同，都會導致不同的活性。但這并不影響相似性原理在藥物設(shè)計中的廣泛應(yīng)用。 療效更好類似物設(shè)計目的 毒副作用更小/少 更便于合成 藥效保持或更好 藥效減小或消失類似物設(shè)計結(jié)果 毒副作用減少/小 毒副作用減多/大 新的藥效利用生物電子等排體進行似物的設(shè)計，既可產(chǎn)生相似的生物效應(yīng)，也可產(chǎn)生相反的生物效應(yīng)。例1：哌替啶衍生物的鎮(zhèn)痛活性 OONR Comp. 相對鎮(zhèn)

8、痛作用 H 1 -O-Ph 12 -CH2-Ph 20 -NH-Ph 80 -S-Ph 1.5 生物生物電電子等排取代子等排取代NHNHOOFNHNHOOHNNNHNOHNH2NNNHNSHNH2NNNHNOHNNNHNSH產(chǎn)生相反的生物效應(yīng) 飽和鏈環(huán)合成環(huán)狀物，或環(huán)狀物開環(huán)成鏈狀分子，均改變了分子的形狀、構(gòu)象和表面積，會影響與受體的識別和結(jié)合，也影響藥代動力學性質(zhì)。 合環(huán)與開環(huán)合環(huán)與開環(huán)將鏈狀結(jié)構(gòu)連接成環(huán)的分子設(shè)計，目的是限制分子的構(gòu)象，減少低能構(gòu)象體數(shù)目，有助于提高選擇性。此外，還可用合環(huán)操作來推斷藥物的藥效構(gòu)象。例1：苯丙醇胺修飾苯丙醇胺（Phenylpropanolamine）具有受體

9、阻斷、奎尼丁樣、降壓和局麻等多種作用，這是因為它是柔性分子，有多種低能構(gòu)象，可與不同受體結(jié)合的緣故。通過不同的合環(huán)方式，可生成不同的構(gòu)象限制體，從而提高化合物的選擇性。合合 環(huán)環(huán)ONOHCH3CH3CH3ONOHCH3OCH3OOHNH2OOHNNOOOHNCab如將叔丁基環(huán)合到苯環(huán)上（a），則成為苯并氮氧雜環(huán)辛烯，為強效受體阻斷劑，將亞胺水解得到開鏈苯乙酮化合物，活性只為環(huán)狀物的25%；若將連接胺基的亞甲基環(huán)合到苯環(huán)上（b），得苯并二氫吡喃化合物，再經(jīng)適當修飾，則消除了受體阻斷作用，為鉀離子通道開放劑，具有降壓活性。 例例2：5-HT3受體拮抗劑受體拮抗劑昂丹司瓊（Ondansetron）廣

10、泛用于腫瘤化療后抑制惡心嘔吐等副作用的5-HT3受體拮抗劑。將其吲哚環(huán)和環(huán)已酮環(huán)再稠合成環(huán)，得到的西蘭司瓊（Cilansetron）活性提高10倍。NCH3ONNCH3ONNCH3NOndansetronCilansetronOHCH3NH2CH3NHOEphedrinePhenmetrazine例3：平喘藥麻黃堿的修飾合環(huán)操作也可能引起活性發(fā)生質(zhì)的變化。如將平喘藥麻黃堿（Ephedrine）環(huán)合成芬美曲秦（Phenmetrazine），無支氣管解痙作用，而是食欲抑制劑。環(huán)狀物的開環(huán)，伴以分子剖裂的操作，常見于天然活性產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)簡化和修飾，同時也是確定藥效團的過程。例1：鎮(zhèn)痛藥嗎啡的修飾從嗎啡

11、到芬太尼不僅簡化了結(jié)構(gòu)，而且不含手性中心，活性也提高了80倍。 OHONCH3OHNC2H5ONMorphineFentanyl開開 環(huán)環(huán)雌二醇（Estrsdiol）C、D環(huán)的開環(huán)類似物阿侖雌酚（Allenestrol）仍是雌二醇受體激動劑，分子中的羥基和羧基在優(yōu)勢構(gòu)象的空間位置與雌二醇的3，17-二羥基相對應(yīng)。OHOHOHOHOEstradiolAllenestrol雌二醇的開環(huán)類似物開環(huán)的分子操作有時也會導致活性降低。色滿卡林（開環(huán)的分子操作有時也會導致活性降低。色滿卡林（Cromakalim）為）為鉀離子通道開放劑，具有降壓活性。將其分子中的鉀離子通道開放劑，具有降壓活性。將其分子中的4

12、-吡咯酮環(huán)開環(huán)后吡咯酮環(huán)開環(huán)后，活性降低，活性降低60%。這可能是由于分子的柔性增大不利于結(jié)合的緣故。這可能是由于分子的柔性增大不利于結(jié)合的緣故。OHONOCH3CH3NCOHONOCH3CH3NC色滿卡林開環(huán)修飾色滿卡林開環(huán)修飾烴鏈同系化：烴鏈的增長或縮短會影響化合物烴鏈同系化：烴鏈的增長或縮短會影響化合物的疏水性，改變分配系數(shù)，導致體內(nèi)藥動學的疏水性，改變分配系數(shù)，導致體內(nèi)藥動學性質(zhì)的變化。同時還會影響立體性，以及引性質(zhì)的變化。同時還會影響立體性，以及引起占位性的位阻，影響分子的構(gòu)象。起占位性的位阻，影響分子的構(gòu)象。烴鏈同系化、環(huán)大小改變及環(huán)位置異構(gòu)體烴鏈同系化、環(huán)大小改變及環(huán)位置異構(gòu)體例

13、例1：影響疏水性：影響疏水性3-（2-烷氧基-3-哌嗪基）-1,2,5,6-四氫-1-甲基吡啶是M1受體激動劑。當由甲氧基變換到丁氧基時，化合物的疏水性增大，與受體的親和力（Ki）從850 mol/L降低至17mol/L。提示較大的烷基有利于激動作用。NNNORCH3例2：影響立體性如果烷基鏈在分子中的作用是支撐藥效團在空間的位置，則變換碳鏈長度可引起活性強度的變化，甚至活性的翻轉(zhuǎn)。膽堿能受體激動劑：雙季銨離子作用強度隨亞甲基鏈的長度變化而改變。當n=5或6時，為膽堿能受體激動劑，具有擴張血管和降低血壓作用；當n=10時，藥理作用翻轉(zhuǎn)，成為膽堿受體拮抗劑。C H3- N - ( C H2) n

14、 - N - C H3C H3C H3C H3C H3+ 嗎 啡嗎啡分子中N上的甲基被烯丙基、環(huán)丙甲基或環(huán)丁甲基置換，由激動劑轉(zhuǎn)變?yōu)榘⑵荏w拮抗劑。這是由于受體結(jié)合叔胺的腔穴不能容納較大基團的緣故。O HONOHC H3環(huán)的大小、位置及環(huán)上取代基位置均可影響分子的電子分布電子分布。因此，環(huán)的擴大或縮小，以及環(huán)位置異構(gòu)體會對活性產(chǎn)生影響，尤其是環(huán)位置的異構(gòu)體，它也是最常見的結(jié)構(gòu)優(yōu)化方式。有些取代基在環(huán)上的位置是不可改變的，如磺胺類藥物。環(huán)的大小改變和環(huán)位置異構(gòu)體環(huán)的大小改變和環(huán)位置異構(gòu)體立體異構(gòu)體和幾何異構(gòu)體立體異構(gòu)體和幾何異構(gòu)體 光學異構(gòu)體之間除旋光性質(zhì)相反外，其余理化性質(zhì)完全相同。但在體內(nèi)，

15、由于人體的細胞膜、酶和受體具有不對稱性，它們能夠“識別”兩個手性分子的差異，在吸收、分布、代謝、排泄與受體的作用類型和強度等方面通常中不同的，因而造成藥效、藥代和/或毒性差異。對映體有相同的藥理活性例：氟卡尼抗心律失常藥氟卡尼（Flecainide）R 型和S型異構(gòu)體的抗心律失常和對心肌鈉通道作用相同，藥代動力學性質(zhì)也無顯著差異，因此，臨床使用其消旋體。類似的藥物還有：普羅帕酮（Propafenone）、美西律（Mexiletine）等。 F3CCH2CONHCH2OCH2CF3NHFlecainide例：氧氟沙星作用于Top II的抗菌藥氧氟沙星（Ofloxacin）S-（-）-異構(gòu)體的抑酶

16、活性強于R-（+）-異構(gòu)體9.3倍，是消旋體的1.3倍，對各種細菌的抑菌活性前者強于后者8128倍，原因是手性中心的甲基在母核平面的取向不同，導致與酶活性中心結(jié)合能力的不同，決定了它們的抗菌效力的差異。NOFNONCH3CH3CO2H對映體活性相似但強度不同 手性藥物中最常見的現(xiàn)象是只有一個對映體有藥理活性，而另一個沒有或幾乎沒有活性。例：芳氧丙醇胺阻斷劑此類藥物均是S-異構(gòu)體有強效，而R型作用很弱，兩者強度差異通常為數(shù)十至一百倍。A rOO HNHC H3C H3NONSNA r=只有一個對映體有藥理活性只有一個對映體有藥理活性例：沙利度胺（反應(yīng)停）沙利度胺（Thalidomide）由于其致

17、畸性曾曾被認為藥物發(fā)展史上的一個悲劇。后經(jīng)深入研究發(fā)現(xiàn)，它的S-（-）-異構(gòu)體有強致畸作用，而R-（+）-異構(gòu)體即使劑量達400mg/kg，對小鼠也無致畸作用，可用于治療關(guān)節(jié)炎和治療乳腺癌。NNHOOOO對映體有不同或相反的藥理活性 結(jié)構(gòu)復雜結(jié)構(gòu)復雜 結(jié)構(gòu)簡化結(jié)構(gòu)簡化 合成困難合成困難 便于合成便于合成天然產(chǎn)物先導物天然產(chǎn)物先導物 修飾修飾/改造改造 資源有限資源有限 利于工業(yè)化利于工業(yè)化 療效欠佳療效欠佳 療效提高療效提高 例如：嗎啡和局麻藥可卡因的結(jié)構(gòu)修飾和改造。先導物分子的碎片類似物先導物分子的碎片類似物拼合原理：將兩種藥物的結(jié)構(gòu)或藥效團拼合在一拼合原理：將兩種藥物的結(jié)構(gòu)或藥效團拼合在一

18、個分子內(nèi)，使形成的藥物或個分子內(nèi)，使形成的藥物或兼具兼具兩者的性質(zhì)，強兩者的性質(zhì)，強化藥理作用，減小各自相應(yīng)的毒副作用；或使兩化藥理作用，減小各自相應(yīng)的毒副作用；或使兩者取長補短，發(fā)揮各自的藥理活性，者取長補短，發(fā)揮各自的藥理活性，協(xié)同協(xié)同地完成地完成治療作用。治療作用。一般說來，通過拼合原理得到的多數(shù)藥物都是前一般說來，通過拼合原理得到的多數(shù)藥物都是前藥。藥。阿斯匹林阿斯匹林-對乙酰氨基酚的拼合：對乙酰氨基酚的拼合：OCOCH3CO2HOHNHCOCH3OCOCH3COONHCOCH3Aspirin+ParacetamolBenorilate雙氯芬酸雙氯芬酸-對乙酰氨基酚的拼合對乙酰氨基酚的

19、拼合NHClClCO2HOHNHCOCH3ONHCOCH3NHClClCODiclofenac +Paracetamol雷尼替丁雷尼替丁-枸椽酸鉍的拼合枸椽酸鉍的拼合ONCH3CH3SNHNHCH3NO2OHCO2-CO2-CO2-Bi3+.同生型孿藥（雙分子孿藥，相同孿藥）由兩個相同的分子相連接，裂解作用于同一受體或同一受體的兩個位點產(chǎn)生更強的藥理作用拼合的結(jié)構(gòu)組成拼合的結(jié)構(gòu)組成 由兩個不同的分子相連接，作用于兩個不同受體或同一受體的兩個位點，產(chǎn)生雙重作用共生型孿藥（雙重作用孿藥，不相同孿藥）共生型孿藥（雙重作用孿藥，不相同孿藥） 1964年，年，C. Hansch提出了下面的自由能關(guān)系提出

20、了下面的自由能關(guān)系的參數(shù)方程來表示化合物的生理活性：的參數(shù)方程來表示化合物的生理活性：立體參數(shù)電性疏水性活性 1lg3122cEkkkkCs 活性活性C：1、用、用LD50，IC50等等表示；等等表示；2、用取代基、用取代基或分子表示，但是三個參數(shù)中不能一個用取代基另外的或分子表示，但是三個參數(shù)中不能一個用取代基另外的用分子。用分子。 ：疏水性參數(shù)，根據(jù)化合物及其母體在正辛醇和疏水性參數(shù)，根據(jù)化合物及其母體在正辛醇和水中的分配系數(shù)推導出來；水中的分配系數(shù)推導出來；而而2項則表示藥物在輸送過項則表示藥物在輸送過程中有最適宜的數(shù)值存在。程中有最適宜的數(shù)值存在。 表達式中各系數(shù)的絕對值表明各相應(yīng)物化

21、性質(zhì)對活表達式中各系數(shù)的絕對值表明各相應(yīng)物化性質(zhì)對活性影響的程度，而符號則表示影響的方向。性影響的程度，而符號則表示影響的方向。 HanschHansch方程意方程意義義 油相主要采用正辛醇：1、含有羥羥基，較較容易使化合物在其中有很好的溶解度；2、具有較較好的在水中溶解的能力；3、締締合特性，用水飽飽和的正辛醇極極性很強，可以與與被溶解的分子結(jié)結(jié)合而藥藥物分子本身不發(fā)發(fā)生彼此的締締合；4、不易揮發(fā)揮發(fā)，不易光解，化學學性質(zhì)穩(wěn)質(zhì)穩(wěn)定；5、正辛醇具有OH，類類似于生物膜，有提供和接受氫鍵氫鍵的能力。OHOilOHOilOilOHDrugDrugPDrugDrugPDrugDrug222lglg

22、P是處于熱力學平衡態(tài)時化合物在正辛醇是處于熱力學平衡態(tài)時化合物在正辛醇水中水中濃度的比值。濃度的比值。 大部分采用搖瓶搖瓶法測測定，也就是一種種直接測測定法：三種種物質(zhì)質(zhì)混合在一起達達到平衡后可以分析各相中的濃濃度。優(yōu)優(yōu)點：所得到的lgP較為較為準確，而且測測得的數(shù)數(shù)據(jù)物化意義義明確。缺點：1、測試時間長測試時間長；2、需要大量的供試樣試樣品；3、溶劑純劑純度和樣樣品純純度要求較較高。 芳香化合物取代基的值值的化合物的分配系數(shù)；取代基為：母體的分配系數(shù)xPPPPxxxHH: loglog常用疏水性參數(shù)常用疏水性參數(shù)盡管盡管lgPlgP值可以用來表征整個藥物分子的疏水性，但在對同源值可以用來表征

23、整個藥物分子的疏水性，但在對同源物的疏水性進行比較時，可將分子的相同結(jié)構(gòu)部分的疏水貢獻物的疏水性進行比較時，可將分子的相同結(jié)構(gòu)部分的疏水貢獻視作恒定值，因此在視作恒定值，因此在QSARQSAR分析時，只考慮各個取代基的相對分析時，只考慮各個取代基的相對疏水性。疏水性。 的定義就是由于某個取代基的引入引起的母體化合的定義就是由于某個取代基的引入引起的母體化合物疏水性的變化，也就是取代基對化合物疏水性的貢獻：物疏水性的變化，也就是取代基對化合物疏水性的貢獻：苯環(huán)苯環(huán)上氯氯取代基的值值可以由氯苯氯苯的logP與苯與苯的logP計計算得到：71. 013. 284. 2loglog6656HCClHC

24、ClPP值的正負號意味著什么？氫原子本身的值的正負號意味著什么？氫原子本身的值？值？X=ClX=FX=NO2X=CH3PhX0.710.14-0.280.56XPhOCH2COOH0.780.150.240.52XPhOH0.930.310.500.49XPhNO20.54-0.390.52值隨化合物的不同會有所改變，也就是說，同一個取代基值隨化合物的不同會有所改變，也就是說，同一個取代基對不同系列化合物所計算出的對不同系列化合物所計算出的值可能有所差別。值可能有所差別。 取代基的疏水性常數(shù)有加和性：nixHiPP1loglog) 39. 3(55. 3271. 013. 22loglog)

25、20. 3(25. 312. 113. 22loglog663664, 1factinPPfactinPPClHCnzenedichlorobeCHHC間二甲苯碎片常數(shù)碎片常數(shù)f值值 前面提到的前面提到的lgP和取代基疏水常數(shù)和取代基疏水常數(shù)是實驗數(shù)據(jù)，是實驗數(shù)據(jù)，一般是正辛醇一般是正辛醇水系統(tǒng)中的測定值。水系統(tǒng)中的測定值。1973年年Rekker用統(tǒng)計學方法對已知分配系數(shù)的化合物進行處用統(tǒng)計學方法對已知分配系數(shù)的化合物進行處理，求出了組成有機分子的原子或片段的疏水貢獻，理，求出了組成有機分子的原子或片段的疏水貢獻，化合物的分配系數(shù)由片段的疏水常數(shù)通過加和得到：化合物的分配系數(shù)由片段的疏水常數(shù)

26、通過加和得到：的數(shù)目所含碎片結(jié)構(gòu)類型片段）型碎片常數(shù)（取代基或：fn:a logn1nffaPnninnlogP與以及f之間有以下關(guān)系：HxxHHHHxHxHHHxxfffPffPPP2loglogloglog（3）液相色譜保留因子）液相色譜保留因子 將正辛醇涂在硅膠柱上，制成類正辛醇柱，根據(jù)測得的保將正辛醇涂在硅膠柱上，制成類正辛醇柱，根據(jù)測得的保留時間來估算化合物的留時間來估算化合物的logP值：值： logP=logK+K K=(tR-t0)/t0式中式中t tR R為測定化合物的保留時間；為測定化合物的保留時間； t t0 0為標準化合物的保留時間，為標準化合物的保留時間，K稱為容量因

27、子。稱為容量因子。 優(yōu)點：樣品用量少，純度要求不高，重現(xiàn)性較好，溫度要優(yōu)點：樣品用量少，純度要求不高，重現(xiàn)性較好，溫度要求不高。求不高。 缺點：裝備昂貴，對保留時間過長的化合物，往往由于峰缺點：裝備昂貴，對保留時間過長的化合物，往往由于峰形不好而影響測定的精確度。形不好而影響測定的精確度。（4）薄層層色譜譜法Rm值值采用反相薄層層層層析： Rm=lg(1/Rf-1), Rm=alogP+b測測定Rm值時值時一般用液體石蠟或正辛醇浸過過的硅膠膠或硅藻土作固定相，用聚酰胺酰胺作固定相時時也可以較較好的反映藥藥物的疏水性，流動動相常用丙酮酮水或甲醇水。優(yōu)優(yōu)點：用藥藥量少，迅速，便宜，一次可以測試測試多個個化合物，對對