體外診斷試劑分析性能評價準確度-方法學比對技術審查指導原則

1、附件5:體外診斷試劑分析性能評估（準確度-方法學比對）技術常查指導原則一、前言準確度評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據，也是產品 注冊所需的重要申報資料之一。定量檢測方法的方法學比對試驗是評 估準確度的方法之一， 可以與參考方法或臨床公認質量較好的已上市 產品進行比對。本指導原則基于國家食品藥品監(jiān)督管理局體外診斷試劑注冊管 理辦法（試行）的有關要求，參考CLSI有關標準，對采用方法學比 對進行準確度評估的實驗方法和數據處理方法進行了原則性要求。其目的是為生產企業(yè)采用方法學比對進行準確度評估并準備準確度評 估資料提供原則性指導，也為注冊管理部門審核該部分分析性能評估 資料提供技術參考。由于

2、體外診斷試劑產品發(fā)展速度快、 專業(yè)跨度大，國家食品藥品 監(jiān)督管理局將根據體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時對本指導原則進行 修訂。二、適用范圍本指導原則適用于首次申請注冊、申請許可事項變更的用于定量 檢測的體外診斷產品。因體外診斷產品評價是將儀器、試劑、質控品、 校準品等作為一個系統(tǒng)進行評價，因此方法學比對的評價采用系統(tǒng)的 概念進行描述。如特殊產品不適用于本指導原則， 可進行詳細說明并 采用適當的方法進行準確度評價。三、基本要求(一) 方法學比對實驗的基本要求1.操作者應熟悉待評價系統(tǒng)和比對系統(tǒng)的操作。2.編寫系統(tǒng)標準操作規(guī)程，其中包括校準程序和室內質控程序， 采用合適的校準品、質控品并保持儀器處于

3、正常狀態(tài)。3.比對系統(tǒng)的選擇比對系統(tǒng)應具有以下條件：(1)具有比待評價系統(tǒng)更好的精密度；(2)同待評價系統(tǒng)檢測結果具有相同的單位；(3)如有參考方法應具有與參考方法已知的偏差。比對系統(tǒng)應該選擇正確性經過驗證的系統(tǒng)， 根據實際條件，選擇 的順序如下：參考方法、原裝系統(tǒng)、配套系統(tǒng)、經過驗證的非配套系 統(tǒng)。4.待評價系統(tǒng)的處理進行方法學對比實驗前，應該對待評價系統(tǒng)進行初步評價，并且 對待評價系統(tǒng)進行精密度及線性的評價(參考相關標準)，只有在以 上評價完成并且符合相關標準要求后，才可進行方法學對比實驗。(二) 方法學比對實驗的評估及數據處理方法1.實驗樣本的基本要求(1)按照實驗對樣本的要求收集處理病

4、人樣本，樣本貯存時間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣本。(2)樣本應來白于不同患者，并且此患者所患疾病對于被測組分的影響應該是已知的，樣本不應含有干擾此方法的組分。（3）樣本濃度應在方法的線性范圍內，并覆蓋醫(yī)學決定水平。通?；緩木€性范圍的低限到線性范圍的高限（應至少有50%的樣本在參考范圍以外，但在線性范圍內）。分析樣本的濃度應盡可能在 線性范圍內均勻分布。商品質控物或者校準物可能存在基質效應，應避免使用。2.實驗過程（1）每天選擇8個臨床患者樣本，按1到8的順序編號。用兩種方法同時進行實驗，按照1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 8, 7, 6, 5, 4,

5、 3, 2, 1的樣本順序進行測定。（2）以上實驗至少重復5天，即至少分析40個不同的臨床患者樣本。每天實驗必須進行校準和室內質控， 只有在室內質控合格的情 況下，當天的實驗室數據才有效。3.數據處理及結果報告（1）記錄測定結果（Xj和Yj）,Xij為比對系統(tǒng)測定值Yj為待評價系統(tǒng)測定值i為測定樣本的序號（1、2、340）j為同一樣本同一天測定的次序（1、2）（2）計算每個樣本測定的均值（又和Y；）,樣本重復測定間差值的絕對值（DX和DY）及兩種方法測定結果間的均值差值（V-又） 相關實驗記錄見表1。表1比對系統(tǒng)待評價系統(tǒng)樣本編號iXiX2X；DXYiYi2YiDY123440注：i = 1、

6、2 40-說:L+弛DX=而(3)以列對X；作散點圖。(4)以(Y；-又)對X：做偏倚圖。(5)以(Yj-Xij)對X：做偏倚圖。(6)檢查批內離群點：計算樣本重復測定間差值(的平均數，DXi和DYi)sjs叫+ 叫+-D,DYJ+DYJ+-DY40樣本重復測定間差值超出該平均數4倍時，則判斷為離群點， 如離群點超過1個時，整組數據應舍棄，尋找原因后重新進行評價。 如離群點為1個，可以補充數據后重新進行統(tǒng)計。(7)檢查批間離群點：計算兩種方法測定結果間均值差值(|祐-用I)的平均數，如兩種方法測定結果間均值差值超出該平均數4倍時，則判斷該樣本為離群點，如離群點超過1個時，整組數據應舍 棄，尋找

7、原因后重新進行評價。如離群點為1個，可以補充數據后重 新進行統(tǒng)計。(8)相關系數計算：利用所有樣本雙份測定值進行相關系數計算，如果 r0.975(或 r20.95),貝U認為選擇的數據范圍適合，數據 滿足要求。該分析的誤差可以由數據范圍給以適當補償，并且可以采用簡單的線性回歸來評價斜率和截距。如果r20.95,那么必須通過分析另外一些樣品以擴大數據范圍，然后再檢查全部數據系列，如仍然r20.90,則認為 數據范圍適合，數據滿足要求。(9)回歸計算：利用所有樣本雙份測定的有效數據，計算兩個 方法40間的線性回歸方程：Y= bX+ a。(10)偏差估計：在醫(yī)學決定水平，利用回歸方程計算預期偏差， 預期偏差Bx=a+(b-1)X,相對偏差=Bx/X。(11)結果評估：結果至少應滿足相關國際及國家標準，同時滿 足臨床需求。四、其他應注意的問題（一）采用的患者樣本對于被測組分的影響應該是已知的，樣本 不應含有干擾此檢測方法的組分。（二）樣本貯存時間及條件由被測組分的穩(wěn)定性而定，盡可能避免使用貯存的樣本。（三） 實驗前必須對待評價系統(tǒng)進行精密度及線性的評價， 評價合格后方可進行實驗。五、名詞解釋（一）待評價系統(tǒng)：擬進行性能評估的產品。（二）比對系統(tǒng)：參考方法（系統(tǒng)）或臨