中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則

1、中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的目的是證明采用的方法是否適合于相 應(yīng)檢測(cè)要求。在建立中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，分析方法需經(jīng)驗(yàn)證；在處方、 工藝等變更或改變?cè)治龇椒〞r(shí)，也需要對(duì)分析方法進(jìn)行驗(yàn)證。方法 驗(yàn)證過(guò)程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明或修訂說(shuō)明中。需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目有：鑒別試驗(yàn)、限量檢查和含量測(cè)定，以及其 他需控制成分（如殘留物、添加劑等）的測(cè)定。中藥制劑溶出度、釋 放度等檢查中，其溶出量等檢測(cè)方法也應(yīng)坐必要驗(yàn)證。驗(yàn)證內(nèi)容有：精確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、 專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍和耐用性。應(yīng)視具體方法擬定 驗(yàn)證的內(nèi)容。附表中列出的分析項(xiàng)目

2、和相應(yīng)的驗(yàn)證內(nèi)容可供參考。方法驗(yàn)證內(nèi)容如下:準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與其實(shí)值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范 測(cè)試。用于定量測(cè)定的分析方法均需做準(zhǔn)確度驗(yàn)證。1.測(cè)定方法的準(zhǔn)確度 -可用已知純度的對(duì)照品做加樣回收測(cè)定，即于已知被測(cè) 成分含量的供試品中再精密加入一定量的已知純度的被測(cè)成 分對(duì)照品，依法測(cè)定。用實(shí)測(cè)值與供試品中含有量之差，除以 加入對(duì)照品量計(jì)算回收率。在加樣回收試驗(yàn)中須注意對(duì)照品的加入量與供試品中被照品的量要適當(dāng)，過(guò)小則引起較大的相對(duì)誤差，過(guò)大則干擾成 分相對(duì)減少.真實(shí)性差。回收率=C#x】oo%5式中A為供試品所含被洌成分量;B為加入對(duì)

3、照品量jC為實(shí)測(cè)值。2.數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn) 行評(píng)價(jià)；或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度.每個(gè)濃度各分別制備3份供試 品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，一般中間濃度加 人量與所取供試品含量之比控制在i，1左右。應(yīng)報(bào)告供試 品取樣量、供試品中含有量、對(duì)照品加入量、測(cè)定結(jié)果和回收 率（%）計(jì)算值，以及回收率（%）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）或 可信限.二、精密度精密度系指在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng) 多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏 差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相測(cè)成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范之內(nèi)；加入的對(duì)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。精密度包含重夏性、中間精密度

4、和重現(xiàn)性。在相同操作條件下，由同一個(gè)分析人員在較短的間隔時(shí) 間內(nèi)測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性;在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不 同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果之間的精密度稱 為中間精密度；在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果之間 的精密度稱為重現(xiàn)性。用于定最測(cè)定的分析方法均應(yīng)考察方法的精密度。法的精密度。h重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個(gè)潦定結(jié)果進(jìn) 行評(píng)價(jià)3或設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分別制備3份供試 品溶液進(jìn)行測(cè)定，用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)夕L2.中間精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密度的影響，應(yīng)進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同日期，不同分析人員、不同設(shè)備等。3.重現(xiàn)性當(dāng)分析方法將被法定

5、標(biāo)準(zhǔn)采用時(shí)，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。 例如建立藥典分析方法時(shí)通過(guò)不同實(shí)驗(yàn)室的復(fù)核撿驗(yàn)得出 重現(xiàn)性結(jié)果。復(fù)核檢驗(yàn)的目的、過(guò)程和重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記 載在起草說(shuō)明中。應(yīng)注意重現(xiàn)意重現(xiàn)性試驗(yàn)用的樣品本身的質(zhì)量的質(zhì)量 均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素,以免影響重現(xiàn)性 結(jié)果。4.數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限。三、專腐性專腐性專犀性系指在其他成分可能存在下,采用的方法能正確 測(cè)定出被測(cè)成分的特性.鑒別試驗(yàn)、限量檢查含量測(cè)定等方 法均應(yīng)考察其專屬屬性，性，L整別試磴|應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被 測(cè)成分的供試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，均不 得干擾測(cè)定。顯微鑒別、色譜及

6、光譜鑒別等房附相應(yīng)的代表 性圖像或圖譜。2.含量測(cè)定和限量檢查以不含被泌成分的供試品（除去含待測(cè)成分藥材或不含 待測(cè)成分的模擬復(fù)方）試驗(yàn)說(shuō)明方法的專屬性。色譜法、光譜 法等應(yīng)附代表性圖譜，并標(biāo)明相關(guān)成分在圖中的位置,色譜法 中的分離度應(yīng)符合要求。必要時(shí)可采用二極管陣列檢測(cè)和質(zhì) 譜檢測(cè)，進(jìn)行蜂純度檢查。四、檢測(cè)限四、檢測(cè)限檢測(cè)限系指供試品中被河物能被撿測(cè)出的最低曩確定檢測(cè)限常用的方法如下。用一系列已知濃度的供試品進(jìn)行分析.試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量可用于非儀器分析方法，也可用于儀器分析方法。2.信噪比法,僅適用于能顯示基線噪聲的分析方法,即把已知低濃度I供試品酒， 出的信號(hào)與空白樣品測(cè)

7、出的信號(hào)進(jìn)行比較,算出能 被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比為 3，1或2，1 時(shí)相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。3.數(shù)據(jù)要求應(yīng)肘測(cè)試圖譜，說(shuō)明測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)限結(jié)果。五、定限 定量限系指供試品中被溯成分能被定量測(cè)定的最低量,其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。用于限量檢查的定H測(cè)定的分析方法應(yīng)確定定量限.常用信噪比法確定定量限。一般以值喋比為 io r 時(shí)相 應(yīng)濃度或注入儀器的量進(jìn)行確定。六，線性 線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與供試品中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系.可用一貯備液經(jīng)精霍 稀釋，或分別精密稱樣，制備 i 系列供試品的方法進(jìn)行測(cè)定， 至少制

8、答S個(gè)濃度的供試品.以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物 濃度的函數(shù)作圖,觀察是否杲線性，再用嫩小二乘法進(jìn)行線性 回歸。必票時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進(jìn)行線性回歸 計(jì)算。數(shù)據(jù)要求，應(yīng)列出回歸方程，相關(guān)系數(shù)和線性圖，七、范圍范0B系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適 用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圉應(yīng)根據(jù)分析方法的具體直用和綬性、準(zhǔn)確度精密度 結(jié)果及要求確定，對(duì)于有毒的、具特殊功效或藥理作用的成 分，其瓶圍應(yīng)大于被限定含意的區(qū)間。溶出度或釋放度中的 瘩由我測(cè)定范圈應(yīng)為限度的20%.八、咽用性耐用性系指在沔定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影 響的承受程度，為使方法用于常規(guī)檢驗(yàn)提供依據(jù)。開(kāi)始研究 分

9、析方法時(shí)就應(yīng)為虛其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則 應(yīng)在方法中寫(xiě)明.典我的變動(dòng)因素有：被瀏溶液的穩(wěn)定性,樣 品提取次數(shù)，時(shí)間等勺液相色譜法中典型的變動(dòng)因素有；旅動(dòng) 相的組成比例或pH值，不同廠牌或不同批號(hào)的同類型色譜 柱，柱溫，流速及檢避波長(zhǎng)等.氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同 廠牌或批號(hào)的色譜柱，固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進(jìn)樣口 和檢測(cè)器溫度等。薄層色諳的變動(dòng)因素有：不同廠牌的薄層 板，點(diǎn)樣方式及薄層展開(kāi)時(shí)溫度及相對(duì)濕度的變化等.經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)能否通過(guò)設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用性試 驗(yàn),以境保方法有效中附暴檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容附暴檢驗(yàn)項(xiàng)目和驗(yàn)證內(nèi)容f 7* 頊S內(nèi)容、鑒別限量檢查含測(cè)定及1溶出壹熊定一定彖i限度堯確度重復(fù)性+中間精密度+ +重現(xiàn)性+十十溥屬性4- -r+檢誦限1定量限+小線性十,十醇用性+已有重現(xiàn)性驗(yàn)證,不