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1、超聲波輔助提取大豆異黃酮超聲波輔助提取大豆異黃酮 明星 目錄: 1.解釋 2.摘要 3.緒論 4.實(shí)驗(yàn)過(guò)程 5.結(jié)果與討論 6.結(jié)論1.什么是大豆異黃酮一、解釋2.什么是超聲波輔助提取利用超聲波技術(shù)來(lái)強(qiáng)化提取分離過(guò)程,可有效提高提取分離率,縮短提取時(shí)間、節(jié)約成本、甚至還可以提高產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量。他的原理是利用超聲波具有的機(jī)械效應(yīng),空化效應(yīng)和熱效應(yīng),通過(guò)增大介質(zhì)分子的運(yùn)動(dòng)速度、增大介質(zhì)的穿透力以提取生物有效成分。使介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)在其傳播空間內(nèi)產(chǎn)生振動(dòng),從而強(qiáng)化介質(zhì)的擴(kuò)散、傳播,這就是超聲波的機(jī)械效應(yīng)氣泡在超聲波的作用下產(chǎn)生振動(dòng)形成共振腔,然后突然閉合,這就是超聲波的空化效應(yīng)二、摘要超聲波輔助提取與攪拌

2、萃取相比超聲波輔助法提高了大豆異黃酮的提取效率,但過(guò)于依賴于溶劑的使用。還進(jìn)行了樣品的數(shù)量的比例的溶劑的體積和長(zhǎng)度的提取時(shí)間的優(yōu)化。異黃酮可以定量從大豆中提取,最佳提取條件為50%乙醇為溶劑,提取溫度60,超聲時(shí)間20分鐘關(guān)鍵詞:超聲波輔助提??;提取方式;大豆;異黃酮三、緒論異黃酮是在黃酮類化合物中發(fā)現(xiàn)的幾種植物衍生物這些化合物由于其生物學(xué)效應(yīng),包括雌激素和殺真菌毒性的活動(dòng)。大豆異黃酮已證實(shí)可以降低患上乳腺癌,前列腺癌和結(jié)腸癌幾率,正在研究其防治更年期癥狀和預(yù)防骨質(zhì)疏松癥(見(jiàn)參考文獻(xiàn) 2 的一個(gè)評(píng)論)。它們也可能是重要的抗氧化劑,因?yàn)樗麄冇辛u基基團(tuán)在環(huán)羥基和/或B位置,因此能夠給自由基的氫。異

3、黃酮的抗氧化活性可能是羥基的數(shù)目和位置有關(guān)通常,異黃酮提取使用含水甲醇(Me OH)5,乙醇(Et OH)或乙腈(Me CN)7,8。墨菲9等,乙腈和丙酮(Ace)CN,與濃鹽酸,室溫下通過(guò)攪拌萃取2小時(shí)。格里菲斯和克里森比較了,四種不同的溶劑在不同提取異黃酮形式呈現(xiàn)不同的功能尋求更環(huán)保的方法和提高生產(chǎn)力,超聲波輔助提取法是最便宜的技術(shù)和對(duì)儀器要求最低。四、實(shí)驗(yàn)過(guò)程實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料大豆經(jīng)咖啡研磨機(jī)粉碎、220烘干后冷藏待用化學(xué)藥品化學(xué)藥品和溶劑和溶劑The Me CN (Scharlau, Barcelona, Spain), Et OH (Panreac, Barcelona, Spain)

4、和Me OH (Merck, Darmstadt, Germany)使用高效液相色譜法。水是由Milli-Q型凈水器系統(tǒng)從Milipore(Bedford, MA, USA)取得。異黃酮標(biāo)準(zhǔn)溶液和2,5-二羥基苯甲醛取自Sigma (圣路易斯,密蘇里州,美國(guó))提取大豆提取大豆異黃酮異黃酮進(jìn)行高強(qiáng)度超聲波功率200 W和24 k赫茲(200s模型,Hielscher博士,德國(guó))microtip配備2毫米探頭。其超聲振動(dòng)振幅控制器將標(biāo)稱功率的100%。超聲波浴360 W(J.P. Selecta,巴塞羅那,西班牙) 也被測(cè)試作為一種替代的超聲波探頭。拔掉進(jìn)行恒定溫度的溫度控制器耦合超聲波浴。傳統(tǒng)提

5、取方法攪拌萃取被用作參考與超聲波輔助提取法的方法。所有的實(shí)驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行。三種不同的溶劑系統(tǒng),Me OHMe CN,與幾個(gè)水百分比(30 - 70%)和兩個(gè)溫度(10-60)對(duì)大豆異黃酮的提取進(jìn)行了評(píng)估。最初使用提取方法0.5 g的冷凍干燥的大豆萃取溶劑25毫升提取10分鐘。這個(gè)方法進(jìn)一步優(yōu)化了提取工藝。提取后,1毫升的2,5-攪拌萃取二羥基苯甲醛作為內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)。然后將萃取液離心10 min,過(guò)濾,通過(guò)0.45毫米的尼龍注射器過(guò)濾器(微孔濾膜HN、愛(ài)爾蘭)進(jìn)行液相色譜分析高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)高效液相色譜紫外分析的提取物在一個(gè)水系統(tǒng)由自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行(717 +),泵控制器(600)

6、、泵(616),和一個(gè)光電二極管陣列檢測(cè)器(996),使用一個(gè)RP-18柱(李chrospher 100、5毫米,默克)和梯度的酸化水(0.1%乙酸)(溶劑)和乙腈(0.1%乙酸)(溶劑B)在流速為0.3毫升/分鐘的梯度為0 min,10 min,15% B;30% B;20 min,25 min,30% B;100% B;35分鐘100%的紫外從200到400 nm吸光度監(jiān)測(cè)。紫外光譜記錄,并在254納米的異黃酮峰面積進(jìn)行定量。進(jìn)樣體積為10 mL的校準(zhǔn)曲線(相關(guān)系數(shù))對(duì)大豆黃酮、染料木苷、染料木素分別是y=44751x+8805 (r2=0.9980), y=77969x31141(r2=

7、0.9967) 和 y=79785x55987 (r 2=0.9952)。檢出限(g/g) 染料木苷、染料木素和大豆苷元,分別為1.3、1.6和2.1。檢測(cè)極限計(jì)算使用該軟件18。每個(gè)異黃酮的定量是通過(guò)使用相應(yīng)的響應(yīng)因子b-glucoside集團(tuán)和糾正的分子質(zhì)量的差異。據(jù)報(bào)道,這個(gè)方法檢測(cè)值最接近正確值。高效液相色譜質(zhì)譜(MS)的提取物的分析中進(jìn)行Finnigan LCQ質(zhì)耦合系統(tǒng)的Finnigan墊(美國(guó)加利福尼亞州圣何塞熱電子,)。該設(shè)備配備一個(gè)光譜系統(tǒng)2000模型梯度泵(美國(guó)熱分離產(chǎn)品,弗里蒙特,CA)和質(zhì)量檢測(cè)器(模型LCQ),由一個(gè)電噴射接口和一個(gè)離子阱質(zhì)量分析器。軟件的控制設(shè)備,數(shù)

8、據(jù)的采集和處理是Xcalibur,1.2版。在LCUV應(yīng)用相同的梯度。進(jìn)樣體積是100毫升。界面條件是:積極的電離模式中,毛細(xì)管溫度:220,噴涂電壓:4.6 k V,毛細(xì)管電壓:5 V,專注氣體流量:80(任意單元)和輔助氣體流量:10(任意單元)。ESI質(zhì)譜在200600 m/z范圍內(nèi)獲得。分析了異黃酮糖甙黃豆苷,黃豆黃苷、精制和丙二酰萃取精制。每個(gè)異黃酮的識(shí)別是由比較保留時(shí)間與純粹的標(biāo)準(zhǔn),以及光電二極管陣列檢測(cè)和MS譜(圖1)。異黃酮提取物的色譜分析HPLC-UV圖2所示。五、結(jié)果與討論結(jié)果與討論大豆樣本提取使用最初的確定量(0.5 g,25毫升,10分鐘)和不同的溶劑系統(tǒng)在60(等哦,

9、Me OHMe 和CN,30 - 70%)使用攪拌萃取和超聲波輔助提取法的方法。圖3顯示了個(gè)人的收益率(g / g)異黃酮和圖4總異黃酮的收益率(g / g)獲得了鉆井廢棄泥漿在不同的提取方法和提取溶劑在6010分鐘。大豆異黃酮的提取效率提高了因?yàn)槭褂昧顺暡?但依賴于所使用的溶劑。幾乎所有的病例顯示,總用超聲波輔助提取法和個(gè)人異黃酮是(0 - 15%)高于同攪拌萃取。使用攪拌萃取超聲波輔助提取法也顯示類似的行為:當(dāng)使用純攪拌萃取效率低ET OH(50%),Me OH(50%)和Me CN(40%)產(chǎn)生的最高收益率的溶劑總異黃酮,他們之間只有微小的差異。黃豆苷的最佳提取溶劑為ET OH(50%

10、),Me OH(50%)他們之間沒(méi)有區(qū)別。黃豆黃苷,最佳提取溶劑為50% ET OH。為了評(píng)估的影響溫度對(duì)異黃酮糖甙的提取效率表3和表4顯示個(gè)人的收益率(g / g)和總異黃酮,在不同的提取方法和提取溶劑的差異溫度對(duì)異黃酮的提取有很大的影響。增加10到60的溫度顯著增加使用超聲波輔助提取法和攪拌萃取提取效率提取時(shí)間越長(zhǎng),異黃酮的提取效率越高,20最好 20至30分鐘,測(cè)試所有異黃酮的提取量略有下降??赡苁茄趸赡馨l(fā)生20分鐘后收益率(g/g)和總異黃酮獲得,使用50%乙醇,60,提取效率基本沒(méi)有差異,雖然有些差異觀察,但兩個(gè)系統(tǒng)可用于分析規(guī)模評(píng)估提取過(guò)程的可重復(fù)性,一系列的五個(gè)樣品進(jìn)行復(fù)制。獲得的結(jié)果(平均(g / g)標(biāo)準(zhǔn)差)對(duì)黃豆苷(184.277.36),黃豆黃苷(66.893.14),精制(381.166.28)和丙二酰萃取精制(552.

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