葉綠素含量的測(cè)定

1、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)題目：葉綠素含量的測(cè)定姓名班級(jí)學(xué)號(hào)供參考一、實(shí)驗(yàn)原理和目的根據(jù)朗伯 比爾定律，某有色溶液的吸光度A 與其中溶質(zhì)濃度C 和液層厚度L 成正比。葉綠素 (丙酮 )在 652nm(混合）、 663nm、 645nm 有最大吸收峰。葉綠素 (95%乙醇 )在 665nm 、 649nm，類(lèi)胡蘿卜素在 470nm 有最大吸收峰，根據(jù)在分光光度計(jì)下測(cè)定的吸光度，求得葉綠素的含量二、實(shí)驗(yàn)器具和步驟植物材料：女貞實(shí)驗(yàn)器具：分光光度計(jì)； 電子天平；研缽；試管；小漏斗；濾紙；吸水紙；移液管；量筒；剪刀試劑：95乙醇（或 80丙酮）；石英砂；碳酸鈣粉步驟： 1.稱(chēng)取剪碎的新鮮樣品0.1g 左右

2、，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3 5ml95乙醇，研成均漿，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3 5min2. 取濾紙 1 張，置漏斗中， 用乙醇濕潤(rùn)， 沿玻棒把提取液倒入漏斗中， 過(guò)濾到 10ml 試管中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次，最后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?.用滴管吸取乙醇， 將濾紙上的葉綠體色素全部洗入漏斗中。 直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。最后用乙醇定容至 10 ml ，搖勻4. 把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm 的比色杯內(nèi)。以 95乙醇為空白，在波長(zhǎng)665nm 、649nm、 470nm 下測(cè)定吸光度5. 計(jì)算公式：葉綠素的含量（mg/g ） = (濃度提取液體積稀釋倍數(shù)）/

3、樣品鮮重。Ca=13.95A 6656.88A 649；Cb=24.96A 6497.32A 665C 類(lèi) =(1000A 470-2.05Ca-114.8Cb)/245單位： mg/L三、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和作業(yè)供參考2、計(jì)算葉綠素含量計(jì)算公式：葉綠素的含量（ mg/g） = (濃度提取液體積稀釋倍數(shù)）/樣品鮮重。Ca=13.95A665 6.88A649；Cb=24.96A649 7.32A665C 類(lèi) =(1000A470-2.05Ca-114.8Cb)/245 單位： mg/L由上面的公式進(jìn)行代入計(jì)算，有：C 類(lèi)=（）/245=2.8901則：葉綠素含量 =（） /0.1=2.9297四、數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)中可能清洗研缽和濾紙不是特別干凈可能造成誤差五、 思考題為什么提取葉綠素時(shí)干材料一定要用80的丙酮，而新鮮的材料可以用無(wú)水丙酮提??？答：因?yàn)槿~綠素存在于葉綠體內(nèi)囊體上