瘧原蟲檢驗(yàn)技術(shù)學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1瘧原蟲檢驗(yàn)技術(shù)瘧原蟲檢驗(yàn)技術(shù)第一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第1頁/共89頁第二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第2頁/共89頁第三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第3頁/共89頁第四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第二步：患都信息的核實(shí)采集血樣涂片時(shí)，首先要核對患者的姓名和年齡并在玻片的右側(cè)編號第4頁/共89頁第五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第5頁/共89頁第六頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。厚血膜厚血膜 用推片的一角，從取用推片的一角，從取血部位刮取約血部位刮取約4 4微升血量微升血量（相當(dāng)于火柴頭大?。ㄏ喈?dāng)于火柴頭大?。?，使血滴與平置的載玻片接使血滴與平置

2、的載玻片接觸，再由里向外一個(gè)方向觸，再由里向外一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)2424圈，涂成直徑圈，涂成直徑0.810.81厘米大小圓形厚血膜厘米大小圓形厚血膜薄血膜薄血膜再取一小滴血再取一小滴血. .將血置將血置于第一張玻片離厚血膜于第一張玻片離厚血膜適適 當(dāng)遠(yuǎn)的地方當(dāng)遠(yuǎn)的地方. .將將 推片的推片的邊緣緊貼載玻片，輕輕上邊緣緊貼載玻片，輕輕上下移動(dòng)，使血液沿邊緣散下移動(dòng)，使血液沿邊緣散開，然后勻速地向前推進(jìn)開，然后勻速地向前推進(jìn)，形成薄而平鋪的薄血膜，形成薄而平鋪的薄血膜第四步：血片制作第四步：血片制作厚血膜薄血膜第6頁/共89頁第七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。制片過程圖示標(biāo)簽第7頁/共8

3、9頁第八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。標(biāo)簽厚血膜血量不宜過多或過少薄血膜平整,無皺折和空泡.顯微鏡下紅細(xì)胞單層排列第8頁/共89頁第九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第9頁/共89頁第十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。血片制作影響因素血片制作影響因素第10頁/共89頁第十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。兩種染色方法:吉氏染色法 1. 染色原液配制 2. 門診快染、慢染 3. 成批染色和溶血染色 瑞氏染色法 WHO推薦使用吉氏染色法第11頁/共89頁第十二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第12頁/共89頁第十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第13頁/共89頁第十四頁，編輯于星期

4、二：四點(diǎn) 四十七分。血片染色薄血膜的固定薄血膜的固定u厚血膜充分干燥, 用甲醇固定薄血膜， 平放待干（要點(diǎn)：甲醇不能觸碰到厚血膜）第14頁/共89頁第十五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。血片染色第15頁/共89頁第十六頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。將已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入3%吉氏染液（3毫升吉氏染色液加緩沖液或凈水97毫升，混勻）浸沒血片，染色30分鐘。（如染液稀釋液不合標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，得酌情增減染色時(shí)間和濃度），然后用清水輕輕將染液漂洗干凈，將染色片插于晾干板上晾干，包裝，待鏡檢。 u成批血片染色第16頁/共89頁第十七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。厚血膜溶血染色放置多時(shí)未染色

5、的血片（3天以上，薄片已用甲醇固定），染色之前，須在厚血膜上用清水進(jìn)行溶血，待血膜全部溶解后用3%-5%吉氏染色液染色30分鐘。然后用清水漂洗干凈,晾干。第17頁/共89頁第十八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。外觀吉氏染色血片偏 酸偏 堿標(biāo) 準(zhǔn)第18頁/共89頁第十九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。配置完吉氏原液時(shí)必須過濾除去雜質(zhì)顆粒，有助于提高配置完吉氏原液時(shí)必須過濾除去雜質(zhì)顆粒，有助于提高鏡檢質(zhì)量鏡檢質(zhì)量；染液稀釋后使用時(shí)間：染液稀釋后使用時(shí)間：原液必須臨用時(shí)稀釋，隨配原液必須臨用時(shí)稀釋，隨配隨用；隨用；染液的稀釋濃度；染液的稀釋濃度；染色時(shí)間。染色時(shí)間。染色質(zhì)量影響因素染色質(zhì)量影響因

6、素第19頁/共89頁第二十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。染色染色稀釋稀釋用水用水: PH7.0-7.2清潔水清潔水。染色質(zhì)量影響因素染色質(zhì)量影響因素第20頁/共89頁第二十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。固定薄血膜時(shí)不要將甲醇觸碰到厚血膜；固定薄血膜時(shí)不要將甲醇觸碰到厚血膜；血膜在制備后應(yīng)盡量能在當(dāng)天染色，一般夏天不血膜在制備后應(yīng)盡量能在當(dāng)天染色，一般夏天不超過超過4848小時(shí)，冬天也不能超過小時(shí)，冬天也不能超過7272小時(shí)小時(shí), ,放置時(shí)間越放置時(shí)間越久，厚血膜越不易脫血，染色效果也差。久，厚血膜越不易脫血，染色效果也差。染色質(zhì)量影響因素染色質(zhì)量影響因素第21頁/共89頁第二十二頁，

7、編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。瘧原蟲鏡檢 瘧原蟲厚、薄血膜鏡檢優(yōu)缺點(diǎn) 瘧原蟲密度計(jì)數(shù)方法 人體四種瘧原蟲的形態(tài)特征第22頁/共89頁第二十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。原蟲鏡檢-金標(biāo)準(zhǔn)第23頁/共89頁第二十四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。瘧原蟲厚、薄血膜鏡檢優(yōu)缺點(diǎn)第24頁/共89頁第二十五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第25頁/共89頁第二十六頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第26頁/共89頁第二十七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。厚血膜厚血膜第27頁/共89頁第二十八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。 不需要計(jì)數(shù)的視野 需要進(jìn)行白細(xì)胞、瘧原蟲計(jì)數(shù)的視野如果該視野無原蟲，則

8、計(jì)數(shù)白細(xì)胞數(shù) 看到第一個(gè)原蟲開始計(jì)數(shù) 白細(xì)胞原蟲密度計(jì)數(shù)方法第28頁/共89頁第二十九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。135（計(jì)數(shù)的瘧原蟲數(shù)）200（計(jì)數(shù)的白細(xì)胞）x 8000（每微升血白細(xì)胞數(shù)） =5400 / l答：該患者的瘧原蟲密度為5400 / l。第29頁/共89頁第三十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。用厚血膜每個(gè)視野中所觀察到瘧原蟲的平均數(shù)粗略地估算出瘧原蟲密度。此方法將密度分為6級：1.全厚血膜查見瘧原蟲數(shù)在10個(gè)以內(nèi)，記錄實(shí)際數(shù)字2.全厚血膜查見瘧原蟲數(shù)在10個(gè)以上，但平均每個(gè)視野不到1個(gè)蟲，記錄“少”3.平均每個(gè)視野15個(gè)蟲，記錄“”4.平均每個(gè)視野6 10個(gè)蟲，記錄“+

9、”5.平均每個(gè)視野11 100個(gè)蟲，記錄“+ ”6.平均每個(gè)視野100個(gè)蟲以上，記錄“+ ”。 如：Pv R+T+S5G少 這種方法簡便，缺點(diǎn)是計(jì)數(shù)的瘧原蟲數(shù)受血膜厚薄影響，只能定性，不宜作定量分析。半定量計(jì)數(shù)法第30頁/共89頁第三十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。如何確定瘧原蟲血片為陰性 檢查全部厚血膜視野未查見瘧原蟲 最少檢查100個(gè)厚血膜視野未查見 瘧原蟲（臨床病人）第31頁/共89頁第三十二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。瘧原蟲鏡檢第32頁/共89頁第三十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第33頁/共89頁第三十四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。, ,型瘧）型瘧）第34頁/

10、共89頁第三十五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。 遍布全球溫帶地區(qū)及大片熱帶地區(qū)。在熱 帶非洲，特別是西非則很少見第35頁/共89頁第三十六頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第36頁/共89頁第三十七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。原蟲鏡檢第37頁/共89頁第三十八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第38頁/共89頁第三十九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第39頁/共89頁第四十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。血小板第40頁/共89頁第四十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。各種血細(xì)胞模式圖 1.紅細(xì)胞 2.嗜酸性粒細(xì)胞 3.嗜堿性粒細(xì)胞 4.中性粒細(xì)胞 5.淋巴細(xì)胞 6.單核細(xì)胞 7

11、.血小板 1234567第41頁/共89頁第四十二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第42頁/共89頁第四十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。核核胞漿胞漿斑點(diǎn)斑點(diǎn)第43頁/共89頁第四十四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。瘧色素：瘧色素：不著色，顏色和顆粒的形狀，因瘧原蟲種類不著色，顏色和顆粒的形狀，因瘧原蟲種類而異，瘧色素在蟲體內(nèi)散在分布或聚集成團(tuán)塊。而異，瘧色素在蟲體內(nèi)散在分布或聚集成團(tuán)塊。間日瘧原蟲：呈短棒狀，黃褐色；間日瘧原蟲：呈短棒狀，黃褐色；惡性瘧原蟲：呈細(xì)砂狀，黑褐色；惡性瘧原蟲：呈細(xì)砂狀，黑褐色；三日瘧原蟲：呈砂粒狀，深褐色；三日瘧原蟲：呈砂粒狀，深褐色；卵形瘧原蟲：與間日瘧

12、原蟲相似。卵形瘧原蟲：與間日瘧原蟲相似。瘧色素瘧色素第44頁/共89頁第四十五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。紅細(xì)胞不漲大紅細(xì)胞不漲大環(huán)狀體纖細(xì)環(huán)狀體纖細(xì), , 常有多常有多重感染，環(huán)狀體內(nèi)重感染，環(huán)狀體內(nèi)可有可有2 2個(gè)核個(gè)核 環(huán)狀體可貼在紅細(xì)胞環(huán)狀體可貼在紅細(xì)胞邊緣邊緣 除環(huán)狀體，配子體除環(huán)狀體，配子體外沒有其他發(fā)育期外沒有其他發(fā)育期配子體呈新月形或臘配子體呈新月形或臘腸形腸形成熟裂殖體約含成熟裂殖體約含16-16-3232個(gè)裂殖子，排列不個(gè)裂殖子，排列不規(guī)則規(guī)則可出現(xiàn)茂氏點(diǎn)可出現(xiàn)茂氏點(diǎn)惡性瘧（惡性瘧（P.falciparum） 鑒定要點(diǎn)鑒定要點(diǎn)第45頁/共89頁第四十六頁，編輯于星期二

13、：四點(diǎn) 四十七分。第46頁/共89頁第四十七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第47頁/共89頁第四十八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第48頁/共89頁第四十九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第49頁/共89頁第五十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。21. A member of the UN forces in East Timor. Presented with high temperature. 第50頁/共89頁第五十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第51頁/共89頁第五十二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。紅細(xì)胞明顯漲大 薛氏點(diǎn)明顯 成熟環(huán)狀體粗大滋養(yǎng)體胞漿有阿米巴樣偽足血

14、片中可見各期的原蟲形態(tài)成熟裂殖體約含12-24個(gè)裂殖子 間日瘧（P. vivax ） 鑒定要點(diǎn)第52頁/共89頁第五十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。2. Intermittent fever; arrived from India 2 months ago. 第53頁/共89頁第五十四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第54頁/共89頁第五十五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第55頁/共89頁第五十六頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第56頁/共89頁第五十七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第57頁/共89頁第五十八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。紅細(xì)胞不漲大或略小紅細(xì)胞不漲大或略

15、小環(huán)狀體中等大小，核較大環(huán)狀體中等大小，核較大，胞漿粗厚，胞漿粗厚胞漿不活躍呈帶狀形成熟胞漿不活躍呈帶狀形成熟滋養(yǎng)體呈滋養(yǎng)體呈菊花狀菊花狀, ,內(nèi)含內(nèi)含6-126-12個(gè)個(gè)裂殖子裂殖子雌雄配子體小于正常紅細(xì)雌雄配子體小于正常紅細(xì)胞，色素呈深褐色胞，色素呈深褐色?？刹橐姼麟A段的瘧原蟲?？刹橐姼麟A段的瘧原蟲三日瘧（三日瘧（P.malariae） 診斷要點(diǎn)診斷要點(diǎn)第58頁/共89頁第五十九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第59頁/共89頁第六十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第60頁/共89頁第六十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第61頁/共89頁第六十二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第

16、62頁/共89頁第六十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。卵形瘧（P. ovale ） 鑒定要點(diǎn)紅細(xì)胞正?；蚵詽q大 常見慧星狀 (也稱齒輪狀)環(huán)粗大 薛氏點(diǎn)明顯 成熟滋養(yǎng)體類似三日瘧原蟲但更粗大成熟裂殖體約含6-12個(gè)裂殖子 第63頁/共89頁第六十四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第64頁/共89頁第六十五頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第65頁/共89頁第六十六頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第66頁/共89頁第六十七頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。18. Recent trip to Southern India- headaches and vaguely unwell. 第6

17、7頁/共89頁第六十八頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。類型周圍血中發(fā)育階段紅細(xì)胞形態(tài)瘧原蟲形態(tài)大小點(diǎn)彩胞漿瘧色素裂 殖 子數(shù)惡 性 瘧原蟲環(huán)狀體配子體正 常 大小茂 氏點(diǎn)小 滋 養(yǎng) 體 纖細(xì) ， 常 見 個(gè) 核 ， 一 個(gè)紅 細(xì) 胞 內(nèi) 常有2個(gè)以上的原蟲粗 黑 ， 配子 體 中 明顯16-32間 日 瘧原蟲各期滋養(yǎng)體裂殖體配子體漲大,可達(dá) 正 常的 1.5-2 倍薛 氏點(diǎn)阿 米 巴 樣 滋養(yǎng) 體 ， 淺 藍(lán)色，活潑金棕色不明顯12-24卵 形 瘧原蟲各期均有正 常 大小 或 略漲大, 薛 氏點(diǎn)卵 圓 形 滋 養(yǎng)體 ， 藍(lán) 色 較深，核較大深棕色明顯6-12三 日 瘧原蟲各期均有裂殖體正?；?/p>

18、略縮小齊氏點(diǎn)（西門氏）但少見圓 形 ， 藍(lán) 色深 ， 核 緊 縮， 滋 養(yǎng) 體 胞漿呈帶狀深棕色，粗明顯6-12第68頁/共89頁第六十九頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第69頁/共89頁第七十頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。厚血膜中容易被誤認(rèn)為瘧原蟲的物質(zhì) 未成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞溶血后的殘影易被誤為薛氏點(diǎn) 重疊的血小板易被誤為裂殖體 混雜在稀釋液中的細(xì)菌、植物孢子、酵母、花粉、藻類等很像血液中的多種寄生蟲，如血孢子蟲等，會(huì)干擾對瘧原蟲的鑒別。第70頁/共89頁第七十一頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第71頁/共89頁第七十二頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第72頁/共89頁第七十三頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第73頁/共89頁第七十四頁，編輯于星期二：四點(diǎn) 四十七分。第74頁/共8