土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(上課)..

1、思考思考2該培養(yǎng)基對(duì)微生物該培養(yǎng)基對(duì)微生物 （具有，（具有，不具有）選擇作用。如果具有，其選擇不具有）選擇作用。如果具有，其選擇機(jī)制是機(jī)制是 。具有具有只有能夠以尿素作只有能夠以尿素作為氮源的微生物才為氮源的微生物才能在該培養(yǎng)基上生能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)長(zhǎng)（比例計(jì)數(shù)法）（比例計(jì)數(shù)法）待測(cè)樣品待測(cè)樣品等量的已知含量的紅細(xì)胞等量的已知含量的紅細(xì)胞 混勻混勻涂抹涂抹測(cè)定：測(cè)定： 紅細(xì)胞數(shù)目紅細(xì)胞數(shù)目細(xì)菌數(shù)目細(xì)菌數(shù)目計(jì)算單位體積內(nèi)的細(xì)菌數(shù)目計(jì)算單位體積內(nèi)的細(xì)菌數(shù)目 將含已知數(shù)目的紅細(xì)胞液體與待測(cè)的菌液按將含已知數(shù)目的紅細(xì)胞液體與待測(cè)的菌液按1：1均勻混合，在顯微鏡下數(shù)出各自的數(shù)目，然后求菌液均勻混合，在顯

2、微鏡下數(shù)出各自的數(shù)目，然后求菌液中的細(xì)胞數(shù)目。中的細(xì)胞數(shù)目。細(xì)菌細(xì)菌紅細(xì)胞紅細(xì)胞【補(bǔ)充】顯微鏡直接計(jì)數(shù)是測(cè)定微生物的方法。【補(bǔ)充】顯微鏡直接計(jì)數(shù)是測(cè)定微生物的方法。舉例：已知紅細(xì)胞濃度為舉例：已知紅細(xì)胞濃度為M個(gè)個(gè)/mL，從，從體積為體積為N mL的大腸桿菌培養(yǎng)液中取出大桿的大腸桿菌培養(yǎng)液中取出大桿菌液與紅細(xì)胞液等量均勻混合后，涂片，染菌液與紅細(xì)胞液等量均勻混合后，涂片，染色，鏡檢。在同一視野中發(fā)出有紅細(xì)胞色，鏡檢。在同一視野中發(fā)出有紅細(xì)胞W個(gè)，個(gè)，大腸桿菌大腸桿菌Y個(gè)，求個(gè)，求NmL大腸桿培養(yǎng)液中大腸大腸桿培養(yǎng)液中大腸桿菌的個(gè)數(shù)桿菌的個(gè)數(shù)X是多少？是多少？XNM YW(個(gè)個(gè))觀察到的紅細(xì)胞平

3、均數(shù)觀察到的紅細(xì)胞平均數(shù)/觀察到的細(xì)菌平均數(shù)觀察到的細(xì)菌平均數(shù)紅細(xì)胞含量紅細(xì)胞含量/細(xì)菌含量細(xì)菌含量 公公 式式 恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵，恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵，如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)？樣品中的菌落數(shù)？ 統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算值，然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算教材教材P22實(shí)例分析實(shí)例分析P22 你認(rèn)為哪個(gè)同學(xué)的結(jié)果更接近真實(shí)你認(rèn)為哪個(gè)同學(xué)的結(jié)果更接近真實(shí)值？

4、值？ 你認(rèn)為這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)你認(rèn)為這兩位同學(xué)的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)嗎？如果需要，如何改進(jìn)？嗎？如果需要，如何改進(jìn)？實(shí)例分析實(shí)例分析P22 第一同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，第一同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，沒(méi)有設(shè)置沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說(shuō)服力。重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說(shuō)服力。 第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問(wèn)題，第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問(wèn)題，涂布了三個(gè)平板，但是涂布了三個(gè)平板，但是其中其中1個(gè)平板的計(jì)個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與數(shù)結(jié)果與2個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地將將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均

5、值。菌落計(jì)數(shù)菌落計(jì)數(shù)配制土壤配制土壤溶液溶液系列稀釋系列稀釋涂布平板涂布平板與培養(yǎng)與培養(yǎng)根據(jù)圖示根據(jù)圖示27填寫以下實(shí)驗(yàn)流程：填寫以下實(shí)驗(yàn)流程：試驗(yàn)設(shè)計(jì)：試驗(yàn)設(shè)計(jì)： 從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣。先鏟去表層從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣。先鏟去表層土土3cm3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。信封中。 取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。用前都要滅菌。 制制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。 準(zhǔn)備準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和和選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基將菌將菌液稀釋相

6、同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為對(duì)照對(duì)照，用來(lái)，用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。由于初次判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。由于初次實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因此選擇了一實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因此選擇了一個(gè)較為寬泛的范圍：稀釋倍數(shù)為個(gè)較為寬泛的范圍：稀釋倍數(shù)為10103 310107 7。每個(gè)。每個(gè)稀釋度下需要稀釋度下需要3 3個(gè)個(gè)選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基，1 1個(gè)牛肉膏蛋白胨個(gè)牛肉膏蛋白胨

7、培養(yǎng)基，因此共需要培養(yǎng)基，因此共需要1515個(gè)選擇培養(yǎng)基，個(gè)選擇培養(yǎng)基，5 5個(gè)牛肉個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。此外，還需要準(zhǔn)備膏蛋白胨培養(yǎng)基。此外，還需要準(zhǔn)備8 8個(gè)個(gè)滅菌的試滅菌的試管和管和1 1個(gè)個(gè)滅菌的移液管。滅菌的移液管。 由于初次實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因由于初次實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因此選擇了一個(gè)較為寬泛的范圍：稀釋倍數(shù)為此選擇了一個(gè)較為寬泛的范圍：稀釋倍數(shù)為10103 310107 7。每個(gè)稀釋度下需要。每個(gè)稀釋度下需要3 3個(gè)個(gè)選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基，1 1個(gè)牛肉個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此共需要膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此共需要1515個(gè)選擇培養(yǎng)基，個(gè)選擇培養(yǎng)基，5 5個(gè)牛肉

8、膏蛋白胨培養(yǎng)基。此外，還需要準(zhǔn)備個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。此外，還需要準(zhǔn)備8 8個(gè)個(gè)滅滅菌的試管和菌的試管和1 1個(gè)個(gè)滅菌的移液管。滅菌的移液管。 為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？實(shí)驗(yàn)時(shí)要實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)培養(yǎng)皿作對(duì)培養(yǎng)皿作好標(biāo)記。注好標(biāo)記。注明培養(yǎng)基類明培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)時(shí)型、培養(yǎng)時(shí)間、稀釋度、間、稀釋度、培養(yǎng)物等。培養(yǎng)物等。 當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在3030300

9、300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下，的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下，至少對(duì)至少對(duì)3 3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值，并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)平均值，并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)

10、關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)關(guān)注菌落的形態(tài)、大小、邊緣、突起、顏色、質(zhì)地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。地等等，都是區(qū)分細(xì)菌的重要手段。 思考在研究未知微生物時(shí)務(wù)必規(guī)范操作，思考在研究未知微生物時(shí)務(wù)必規(guī)范操作，以防被以防被致病微生物致病微生物感染，實(shí)驗(yàn)后一定要洗手。感染，實(shí)驗(yàn)后一定要洗手。（六）鑒定（六）鑒定：篩選后必鑒定：篩選

11、后必鑒定 鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基：加入某種指示劑或化加入某種指示劑或化學(xué)藥品，不影響微生物的生存學(xué)藥品，不影響微生物的生存1 1、酚紅培養(yǎng)基：、酚紅培養(yǎng)基： 鑒定分解尿素的細(xì)菌。鑒定分解尿素的細(xì)菌。 原理：脲酶催化尿素分解成氨原理：脲酶催化尿素分解成氨培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)培養(yǎng)基堿性增強(qiáng) 酚紅變紅酚紅變紅脲脲酶陽(yáng)性酶陽(yáng)性2 2、伊紅、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基：美藍(lán)培養(yǎng)基： 鑒定大腸桿菌。鑒定大腸桿菌。 原理：代謝產(chǎn)物與伊紅原理：代謝產(chǎn)物與伊紅美藍(lán)美藍(lán)結(jié)合結(jié)合 菌落呈深紫色并帶有金屬光菌落呈深紫色并帶有金屬光澤。澤。伊紅伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，可以是鑒別培養(yǎng)基，可以用來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，

12、因用來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，因?yàn)榈臑榈拇x產(chǎn)物與伊紅代謝產(chǎn)物與伊紅美藍(lán)結(jié)合美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈，使菌落呈深紫色并帶有金屬光澤深紫色并帶有金屬光澤，使大腸桿菌的菌落，使大腸桿菌的菌落顯示出來(lái)，并沒(méi)有促進(jìn)大腸桿菌的生長(zhǎng)和抑顯示出來(lái)，并沒(méi)有促進(jìn)大腸桿菌的生長(zhǎng)和抑制其他微生物的生長(zhǎng)。制其他微生物的生長(zhǎng)。例如：鑒別大腸桿菌培養(yǎng)基例如：鑒別大腸桿菌培養(yǎng)基大腸桿菌呈大腸桿菌呈 黑色中心黑色中心 , ,有或無(wú)金屬光澤有或無(wú)金屬光澤大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊脂大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB)(EMB)上典型特征上典型特征 課題成果與評(píng)價(jià)課題成果與評(píng)價(jià) （一）培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以（一）培養(yǎng)物中是否有雜菌污染

13、以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目培養(yǎng)基的數(shù)目，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。出一些菌落。如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，需要進(jìn)一步果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，需要進(jìn)一步分析產(chǎn)生差異的原因。分析產(chǎn)生差異的原因。（二）樣品的稀釋操作是否成功（二）樣品的稀釋操作是否成功 如果得

14、到了如果得到了2 2個(gè)或個(gè)或2 2個(gè)以上菌落數(shù)目在個(gè)以上菌落數(shù)目在3030300300的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并能夠的平板，則說(shuō)明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。 （三）重復(fù)組的結(jié)果是否一致（三）重復(fù)組的結(jié)果是否一致課后練習(xí)課后練習(xí) 2.提示：反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生提示：反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會(huì)死亡，因此分離其中能分解尿素的微生會(huì)死亡，因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外，還應(yīng)參照物除了

15、需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外，還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。六、例題解析六、例題解析 例例1 1對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是A A在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行 B B至少接種一種細(xì)菌至少接種一種細(xì)菌 C C接種一個(gè)細(xì)菌接種一個(gè)細(xì)菌 DD及時(shí)補(bǔ)充消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)補(bǔ)充消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 解析：細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定是人們?cè)谝欢l件下進(jìn)行的。解析：細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定是人們?cè)谝欢l件下進(jìn)行的。這些條件是：這些條件是：一種細(xì)菌、恒定容積的培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基、定一種細(xì)菌、恒定容積的培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基、定時(shí)測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。時(shí)測(cè)

16、定細(xì)菌總數(shù)。在這些條件下，才能測(cè)定出細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律。在這些條件下，才能測(cè)定出細(xì)菌的生長(zhǎng)規(guī)律。測(cè)定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表達(dá)微生物的測(cè)定時(shí)只能用一種細(xì)菌的子細(xì)胞群體的變化規(guī)律表達(dá)微生物的生長(zhǎng)；恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境；液體培養(yǎng)基生長(zhǎng)；恒定容積是給微生物提供一定的生存環(huán)境；液體培養(yǎng)基才能通過(guò)樣品推測(cè)細(xì)菌總數(shù)。若接種多種細(xì)菌，則會(huì)發(fā)生種間才能通過(guò)樣品推測(cè)細(xì)菌總數(shù)。若接種多種細(xì)菌，則會(huì)發(fā)生種間斗爭(zhēng)而不能測(cè)定一種微生物的生長(zhǎng)規(guī)律。在接種時(shí)，要保證一斗爭(zhēng)而不能測(cè)定一種微生物的生長(zhǎng)規(guī)律。在接種時(shí)，要保證一定的接種量。定的接種量。答案：答案：A A1.1.對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正

17、確的表述是（對(duì)細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律測(cè)定的正確的表述是（ ） A.A.在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行在液體培養(yǎng)基上進(jìn)行 B.B.至少接種一種細(xì)菌至少接種一種細(xì)菌 C.C.接種一個(gè)細(xì)菌接種一個(gè)細(xì)菌 D.D.及時(shí)補(bǔ)充消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及時(shí)補(bǔ)充消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2.2.使用選擇培養(yǎng)基的目的是（使用選擇培養(yǎng)基的目的是（ ） A.A.培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌 B.B.培養(yǎng)真菌培養(yǎng)真菌 C.C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.D.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別其他微生物加以區(qū)別3.3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是( )( ) A

18、.CO A.CO2 2和和N N2 2 B. B.葡萄糖和葡萄糖和NHNH3 3 C.COC.CO2 2和尿素和尿素 D.D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素A AC CD D4.4.下列說(shuō)法不正確的是（下列說(shuō)法不正確的是（ ） A.A.科學(xué)家從科學(xué)家從70708080度熱泉中分離到耐高溫的度熱泉中分離到耐高溫的TaqDNATaqDNA聚聚合酶合酶 B.B.統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值 C.C.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因設(shè)置

19、對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 D.D.同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。種類最多。5.5.為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養(yǎng)基中加入（）加入（） A.A.較多的氮源物質(zhì)較多的氮源物質(zhì) B.B.較多的碳源物質(zhì)較多的碳源物質(zhì) C.C.青霉素類藥物青霉素類藥物 D.D.高濃度食鹽高濃度食鹽B BC C（09，寧夏，寧夏，15分）分）（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮）在大腸桿菌

20、培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。 （2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行進(jìn)行_（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能

21、使蛋白質(zhì)變性，還能_。 （3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。 （4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的細(xì)菌進(jìn)行初步的_。 （5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢

22、測(cè)方法是_。 （6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案答案:（1）溫度）溫度 酸堿度酸堿度 易培養(yǎng)易培養(yǎng) 生活周期短生活周期短 （2）滅菌）滅菌 消毒消毒 損傷損傷DNA的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu) （3）比例合適）比例合適 （4）鑒定）鑒定(或分類或分類) （5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生. （6）滅菌）滅菌例例3 3（20052005年江蘇）抗生素作為治療細(xì)菌感年江蘇）抗生素作為治療細(xì)菌感染的藥物，其高效性和巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值使抗生素工業(yè)染的藥物，其高效性和巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值使抗生素工業(yè)經(jīng)久不衰。其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用具有劃時(shí)代的意經(jīng)久不衰。其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用具有劃時(shí)代的意義。義。青霉素發(fā)酵產(chǎn)生青霉素。青霉菌的新陳代謝類型青霉素發(fā)酵產(chǎn)生青霉素。青霉菌的新陳代謝類型是是 ，