發(fā)酵工藝流程

1、發(fā)酵工藝標準操作流程(SOP)創(chuàng)作：歐陽學時間：2021.03. 03_生嚴前準*每次生產前按品種配方將所需原料稱童準備齊全，并確認 生產原料庫存量,保證原 料庫存量 足夠下次生產所需.二生產前檢査1檢查蒸汽、壓縮空氣、冷卻水進出的管路是否暢通，所 有閥門是否良好并關閉所有閥門.2檢查電路、控制柜、開關的狀態(tài)，確?？刂乒襁\行正常.3 檢查空壓機油表油表及軸承、三甬帶、氣缸等是否正 常，確保空壓機運行正常.4檢查發(fā)酵罐攪拌減速機的油量及密封軸降溫水是否正 常.三總過法器滅菌當蒸汽總管路上的壓力為0.2-0.25MPa時,打開總過濾器 進代閥輸入蒸汽，同時打開出耗閥的跑分閥、排氣閥、曲E污 閥，當

2、三個閥均須E出蒸汽時,調整進氣閥、排污閥，穩(wěn)定總過 濾器壓力0.15-0.2MPa,此時打開壓力表下跑分，計時滅菌2- 2.5小時.滅菌結束后啟動空壓機，當空氣輸入管道壓力大于 總過濾器壓力時，關閉蒸汽閥，打開空氣閥，將空氣出入總過 濾器，然后調整進氣閥與排污閥，穩(wěn)定總過濾器壓力在 0.15- 0.2MPa,保持通氣在15-20小時，當出氣閥跑分和排污閥放 出的空代為干燥空氣時，完成滅菌.四分過浹器滅菌1當蒸汽管路壓力為 0.2-0.25MPa時，打開蒸汽過濾器的 進氣閥和須E污閥，當蒸汽管路中無蒸汽凝結液后，再將蒸汽 輸入空代管路，然后打開分過濾器的進氣閥、排污閥及出氣 閥上的跑分，當所有閥

3、門均有蒸汽曲E出后，調整進玄與曲E污 閥,是壓力穩(wěn)定在0.1 l-0.15MPa,計時滅菌30-35分鐘.滅菌 結束后，關閉蒸汽過濾器進出氣閥、污閥，并立即將空氣 輸入預過濾器，使空氣通過預過濾器進入到分過濾器，再調 整分過濾器排污閥使壓力穩(wěn)定在0.110.15MPa,備用.五發(fā)酵維空消（可與分過流壽滅菌同時進行）空消前先將發(fā)酵罐去垢洗凈，添加少量清水，然后密封進 料口，將排氣閥打開少許，同 事將蒸汽引 入盤管（或夾奈）進行 預熱，待罐溫升到80©時（種子罐401：即可），關閉盤管（或夾 套）進氣閥，再從出料口、進氣口、取樣口 三路輸入蒸汽，（蒸 汽管路壓力不低于 0.2-0.25M

4、Pa）,當罐內溫度達到 125- 130*0時，通過三路蒸氣浴出氣閥調整罐內壓力，使其穩(wěn)定在 0.11-0.15MPa,計時滅菌 30-35 分鐘.空消結束后，關閉所有進氣閥并將排氣閥開大，當罐內壓 力下降至 OMPa后,打開進料口和排污閥，再將發(fā)酵罐進行 一次沖洗.六發(fā)醉餛實消打開進水閥，按照生產要求放入所需水量，再根據生產品 種按配方依次投入培養(yǎng)基原料，并同時打開攪拌，攪拌 5-10 分鐘后取樣，用氫氧化鈉和濃鹽酸調 PH 值 7.2-7.5之間，然 后密封進料口將排氣閥打開少許,同時打開盤管（或夾奈）的 進出氣閥門輸入蒸汽進行預熱，等到罐內溫度到達80©以 上后，關閉盤管（或夾

5、奈）進代閥門，并將排代閥關小,然后將 蒸汽從進氣口、出料口、取樣 口三路直接通入罐內，當罐內 溫度上升到121125*0后，打開發(fā)酵罐體上與空氣進代閥上 的所有跑分，再通過 調整三路進氣與排氣閥將罐內壓力穩(wěn)定 在0.1 l0.15MPa,此時開始計時滅菌30-35分鐘，滅菌期間將 攪拌停止.滅菌結束后，關閉所有進蒸汽閥門，將排氣閥開大, 同時開啟攪拌，并立即打開進氣閥，輸入無菌空氣，保證罐壓 不低于0.05-0.06MPa（當發(fā)酵罐通入無菌空玄后，一定注怠 分過濾器與空氣總管路壓力一定要大于發(fā)酵罐內壓力），打 開盤管（或夾套）冷必P水進出閥門（確定蒸汽出閥門關閉），開 始降溫，按照不同菌種接種

6、溫度要求控制降溫纟吉束時間（一 般在34C左右），降溫結束后即可接種.七接種1種子罐接種先將進氣閥逐漸關閉，同時將排氣閥開大，當罐體壓力表 與空玄流量計降到 0刻度時，關閉排氣閥，用酒精棉 圍在接 種 口四周并點燃，然后打開接種口，將制備好的菌種胞子懸 ，孚液在火焰中直接從接種口倒入缶霍內，馬上關閉接種口，同 時迅速打開進氣閥使罐內壓力上升到 0.05MPa以上，打開 排氣閥，調整進代與排氣閥使罐內壓力穩(wěn)定在0.05-0.06MPa2培養(yǎng)罐接種接種前應先將蒸汽輸入接種管道，再把接種管道兩端的跑 分打開，當跑分都有蒸汽排出時，計時滅菌 1530 分鐘，滅菌 結束后關閉跑分和進蒸汽閥，將種子罐排耗

7、閥 關小,當種子 罐內壓力大于培養(yǎng)罐壓力后，先將接種管道進 口閥門打開, 再打開培養(yǎng)罐端出口閥開始接種，接種量按不同菌種生產需 求控制.接種完畢后，先將培養(yǎng)罐端出口閥關閉，再將接種管 道進口閥關閉，完成接種，最后把種子罐所有進出氣閥門關 閉，停止攪拌.八發(fā)酵維培養(yǎng)控制接種后調整進氣閥與排氣閥，將罐內壓力穩(wěn)定在0.05- 0.06MPa,同時按照不同菌種的需求調整好罐內的溫度和通 氣量當 罐內溫度超出或者低于標準溫度時，打開盤管或夾套進 出閥門，出入冷卻水或者蒸汽，等溫度達到標準溫度后關閉 進出閥門，停止冷卻水或者蒸汽的輸入，這就完成了 一次溫 度的控制調建.通氣量的控制，按照不同菌種的要求，在確保管內壓力穩(wěn) 定的前提下，根據空氣流量計的顯示，通過進氣閥和排氣閥 的調整進行通氣量的調整.冬季結冰期到來以后，每次生產停止后，應把蒸汽和空氣 管路及發(fā)酵罐盤管或者夾套的冷凝水和冷卻水排盡，排不盡 的可用空氣把水吹出來，以防止凍裂管路和設備，給生產造 成不便.九取樣與放罐取樣檢測時間，按照生產菌種的種類來制定12-16小時不 等，開始取樣檢測后,前期每2小時一次，后期取樣時間縮短 為 0.51小時，每次取樣前后都要對取樣 口進行105分鐘 滅菌處理,.當取樣檢測，發(fā)現符合芽孑包大量形成，芽孑包含量 70%,雜菌量3%,含菌量30*108CFU/ml的放罐指標時, 即可放罐.十發(fā)醉生產