制劑藥學(xué)研究的技術(shù)要求內(nèi)容

1、制劑藥學(xué)研究的技術(shù)要求一、名稱及命名依據(jù)申報制劑首先應(yīng)確定名稱,制劑的名稱包括中文名、漢語拼音、拉丁名.制劑的命名應(yīng)參照?補(bǔ)充規(guī) 定?附件十和衛(wèi)生部下發(fā)的?中藥命名原那么?.二、制備工藝及其研究資料新藥的研究在處方?jīng)Q定以后,首先要進(jìn)行與質(zhì)量研究相結(jié)合的制備工藝的研究,在得到穩(wěn)定的工藝以 后,才能制備出質(zhì)量可靠、能充分發(fā)揮療效的樣品,以保證在新藥的藥理、毒理、臨床、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及質(zhì)量 穩(wěn)定性研究中獲得可靠的結(jié)果.工藝不合理,會影響新藥的療效,工藝不穩(wěn)定,會影響各項實驗的結(jié)果, 工藝不成熟,會影響新藥的正式投產(chǎn).例如有些工藝中采用了毒性大,易燃易爆本錢高的有機(jī)溶劑提取或洗滌,無法進(jìn)行放大生產(chǎn).有些含有

2、以揮發(fā)性有效成分為主的處方,采用水煎煮較長時間的提取方法,使揮發(fā)性成分大量逸失, 如桂皮醛、丹皮酚等,影響療效.有些藥味中的主要有效成分遇熱不穩(wěn)定,卻采用長時間加熱提取、濃縮、枯燥、使有效成分遭到破壞, 影響療效.有些藥味的有效成分在醇中不溶,卻采用水煎酒沉的工藝,使有效成分在高濃度醇中被大量沉淀而損 失,影響療效.有些藥味中的有效成分在水中不易溶出,用一般的煎煮時間,提取不完全,有效成分仍大量存在于殘 渣中,影響療效.因此工藝研究是新藥研究中十分重要的組成部份,它具有提升療效、穩(wěn)定質(zhì)量,便于生產(chǎn)的作用.一工藝研究的要求1 .制劑研究目的首先應(yīng)根據(jù)臨床對治療作用的需要選擇適宜的劑型,如要求奏效

3、的快慢,作用時間的長短、給藥的途 徑,給藥的方式,作用的部位,全身或局部作用等.其次再進(jìn)一步考慮應(yīng)盡可能使制劑的有效部份含量高, 生物利用度好、治療劑量小、質(zhì)量穩(wěn)定性好.質(zhì)量可控性強(qiáng),平安度高及使用方便等.2 .工藝設(shè)計原那么按中醫(yī)藥理論和臨床時治療作用的要求,分析處方的容和復(fù)方由各藥味之間的關(guān)系,參考各藥味所含 成分的理化性質(zhì)及藥理作用的研究結(jié)果,根據(jù)與治療作用相關(guān)的有效成分或有效部位的理化性質(zhì),結(jié)合劑 型制備上的要求,進(jìn)行提取和制劑的工藝路線的設(shè)計和篩選.如某些具有活血化瘀功能的藥物,根據(jù)其理 化性質(zhì)的研究結(jié)果,其活血化瘀的有效部位為水溶性,因此工藝設(shè)計可以其水溶性成分的提取為主.又如某些

4、具有健脾功能的藥物,根據(jù)其藥理作用的研究結(jié)果,其健脾作用與其增強(qiáng)動物胃腸運(yùn)動的功 能相關(guān),那么即可利用其增強(qiáng)胃腸運(yùn)動功能的藥理作用為指標(biāo),作為篩選工藝路線的依據(jù).3 .提職工藝(1)提取提取效果的好壞直接關(guān)系到產(chǎn)品的質(zhì)量,影響提取效果的因素有被提取藥材的粒徑；加溶劑量;提取溫度；提取時間；提取次數(shù)等.在研究提取工藝中對提取效果的評價,不宜單純用浸膏中總固體量作為評價指標(biāo),因總固體量的上下 往往并不代表提取效果的優(yōu)劣,可采用處方某藥味的指標(biāo)成分在浸膏中的總量作為評價的指標(biāo).例如四物湯的提取工藝研究,四物湯由當(dāng)歸、川穹、熟地、白芍四味藥組成,以四味藥的粒徑(黃豆大,310目)提取水量(10倍量、1

5、5倍量),提取溫度(95C、 80C),提取時間(1小時、2小時) 等四項因素二水平用正交設(shè)計安排、經(jīng)過試驗,以其中芍藥玳在干浸膏中的總量為指標(biāo),得出最正確工藝為 藥材粉碎成黃豆大,加水 10倍量.在95c提取二小時所得的效果最正確.(2)固液別離經(jīng)提取后將藥渣與提取液別離,根據(jù)處方不同和制劑的需要可采用過濾、離心等方法,由于在藥渣仍 包含一局部藥液,如將藥渣通過離心,可擠出藥渣所吸附的藥液,有利于浸膏得率的提升.所得藥液也可 通過振動篩除去藥液中的懸浮物,或通過超速離心機(jī)進(jìn)一步除去藥液中的混懸物,提升藥液的澄清度.(3)濃縮應(yīng)根據(jù)藥物性質(zhì)不同選用不同的濃縮方法,如減壓濃縮、薄膜濃縮(離心式、

6、外循環(huán)式、強(qiáng)制循環(huán)式) 等、濃縮時的藥液溫度和受熱時間的長短對藥效均有影響,因此在制備工藝中宜規(guī)定濃縮的方法和溫度, 如在濃縮過程中因升溫過高或藥液流動小使在鍋壁結(jié)焦,將影響濃縮液的質(zhì)量,可用測定濃縮液中水不溶 物量占總固體量的上下作為濃縮液的質(zhì)量的評價,濃縮物應(yīng)有適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量限制要求,如測定相對密度或其 總固體量,或某藥味指標(biāo)成分的量等.(4)精制根據(jù)藥物所含有效成分或有效部位的理化性質(zhì)選擇不同的精制方法,進(jìn)一步別離精制,如 采用有機(jī)溶劑萃取,沉淀,樹脂吸附,膜別離技術(shù)等.(5)枯燥根據(jù)藥物性質(zhì)不同選用不同的枯燥方法,如真空枯燥、噴霧枯燥、冷凍枯燥等方式,在枯燥過程中溫 度對藥品的質(zhì)量影響較大

7、,應(yīng)在工藝中規(guī)定方法和溫度及枯燥程度,可測定干浸膏中水不溶物量及某藥味 指標(biāo)成分的含量作為枯燥物質(zhì)量的評價指標(biāo).4 .劑型工藝制型的選擇應(yīng)根據(jù)藥物性質(zhì)和臨床需要,各類劑型的制備工藝要求可按現(xiàn)行版藥典有關(guān)附錄的劑型通 那么,各類劑型均應(yīng)符合有關(guān)該制劑的質(zhì)量要求.(二)制備工藝及其研究資料的要求l .處方；各組分的名稱及數(shù)量(處方量按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)化寫法,并注明生產(chǎn)工藝X倍投料及最終成品 的制成量).5 .制備工藝中藥制劑的制備工藝與質(zhì)量的關(guān)系十分密切,制備工藝的表達(dá)要能反映出工藝的全過程,要突出對質(zhì) 量有影響的關(guān)鍵工藝局部,并列出限制其質(zhì)量的技術(shù)條件,如時間、溫度、壓力、真空度等.對關(guān)鍵半成 品應(yīng)

8、有其質(zhì)量要求,如濃縮成浸膏后其得率的限幅度及能反映其在質(zhì)量的測定工程,如相對密度或某指標(biāo) 成分的含量等.工藝的表達(dá)應(yīng)按中試生產(chǎn)規(guī)模條件,因各項技術(shù)條件均與制備的數(shù)量有關(guān),實驗室規(guī)模所決定的技術(shù) 條件往往不適用生產(chǎn)規(guī)模,例如在提取、濃縮、枯燥時藥品受熱時間的長短與制備數(shù)量的大小有關(guān),又如 滲漉時收集滲漉液的速度和規(guī)定的幅度也與制備量有關(guān).6 .工藝流程圖,簡要顯示各步驟的過程7 .研究資料(1)應(yīng)能反映出所訂工藝的合理性,要說明采取此工藝的依據(jù),要從處方由各藥味的理化性質(zhì),各類 成分的藥理作用,結(jié)合在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下的臨床應(yīng)用要求來選擇適宜的工藝路線.(2)在確定工藝路線后應(yīng)對工藝的技術(shù)條件進(jìn)行

9、篩選比照,決定最正確的工藝技術(shù)條件.(3)列出以上各項工藝研究的方法與比照數(shù)據(jù)(成功或失敗).(4)對工藝篩選過程中決定該工藝優(yōu)劣的指標(biāo)及測試方法也應(yīng)列出.(5)對關(guān)鍵半成品定出限制質(zhì)量的要求及其說明.(6)對確定工藝后,應(yīng)有三批以上的中試結(jié)果,從其各項質(zhì)量指標(biāo)上來反映此工藝的穩(wěn)定性和成熟程 度.三、與質(zhì)量有關(guān)的理化性質(zhì)研究資料及文獻(xiàn)資料此項資料是反映中藥新藥研制過程中對其主要藥味或制劑的最終產(chǎn)品與質(zhì)量有關(guān)的理化性質(zhì)研究的 容.一般包括文獻(xiàn)資料查考的容和研制單位本身的實驗研究材料.制劑工藝的研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂均應(yīng) 在此資料的根底上進(jìn)行.一類、二類新藥制劑中的主要成分必須根本清楚,應(yīng)有其化學(xué)成

10、分的理化常數(shù)、結(jié)構(gòu)測定等有關(guān)數(shù)據(jù)； 三類新藥制劑多數(shù)為復(fù)方制劑,應(yīng)有各組份尤其是主要組份的主要成分或有效部位的一般理化性質(zhì)的文獻(xiàn) 資料或研制過程中試驗材料及結(jié)果.文獻(xiàn)報道的材料必要時應(yīng)在研制的新藥原料、藥材,半成品及成品中 加以驗證是否確實存在,與一、二類新藥制劑的理化研究不同,一般做通性鑒別,色譜或紫外光譜鑒別即 可.如為單方制劑,所含成分無文獻(xiàn)報道的應(yīng)進(jìn)行植化研究,搞清大類成分及至少一個單體成分,藉以建 立鑒別及含量測定工程是完全必要的.四、五類新藥制劑可引述文獻(xiàn)報道的資料.查閱文獻(xiàn)資料應(yīng)注意文獻(xiàn)來源的原始性和數(shù)據(jù)的可靠性,對間接引述的文獻(xiàn)資料引用時尤應(yīng)注意其真 實性.引用文獻(xiàn)應(yīng)結(jié)合新藥研

11、制的實際,如制劑中某一藥材的藥用部位是根,那么一般不必引述該植物其他 部位的無關(guān)資料,文獻(xiàn)記述的成分應(yīng)考慮在研制的新藥制劑中該種成分是否確實被提取出來和是否確實在 最終產(chǎn)品中存在,如白術(shù)含蒼術(shù)酮,但如用水煎煮那么不可能提取出來,或者即使提取出來也已破壞,所以, 雖然文獻(xiàn)報道白術(shù)含有此成分,但在研制的制劑中此成分是不存在的,因此要求在引用文獻(xiàn)資料時,還須 對研制的樣品作必要的試驗加以驗證,以保證引用文獻(xiàn)有計、針對性；又如含女貞子的制劑,文獻(xiàn)報道含 有齊墩果酸,但如該制劑是采用水提取的工藝,那么齊墩果酸難以溶出,成品中是否存在此成分.必要時需 要以試驗驗證；如為該制劑中的主要組份,而文獻(xiàn)查到的成分

12、又未被提取出,那么需要盡可能地探索其有效 成分或有效部位,在申報臨床時,應(yīng)有研究資料并加以說明.對于測試的光譜和色譜,研制單位除提供清楚準(zhǔn)確的圖譜外,還須提供相應(yīng)的文字資料,如所用儀器、 試驗條件及圖譜解析數(shù)據(jù)等一、二類新藥制劑的文字說明尤須詳盡.復(fù)方制劑在制備過程中有時可能發(fā)生由于多個藥味成分之間的影響或化學(xué)反響,導(dǎo)致成品的理化性質(zhì) 與原組份已有變化的情況,應(yīng)注意觀察、研究、結(jié)合藥效學(xué)研究,以確定制備工藝的是否合理,以免取 粗"去"精".四、臨床研究用藥品的原料藥材和成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案及起草說明本資料是為保證臨床研究用藥品的質(zhì)量一致性和穩(wěn)定性.一原料藥材的質(zhì)量標(biāo)

13、準(zhǔn)1 .藥材標(biāo)準(zhǔn)：包括基原名稱及科、屬、種的拉丁學(xué)名和藥用部位,實際的主要產(chǎn)地或來源,而非文獻(xiàn) 資料,并說明屬何級法定標(biāo)準(zhǔn)藥典、部頒、省市自治區(qū)藥品標(biāo)準(zhǔn)收載.復(fù)方制劑中的藥材假設(shè)已制定省級藥品標(biāo)準(zhǔn)的,須附上該藥材的第1、17、18項資料及衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)件復(fù)印件；對未制定藥品標(biāo)準(zhǔn)的藥材應(yīng)先制定其省級質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)藥材申報資料工程中的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、17、18、19 項的要求報送資料.單方制劑中的藥材必須是國家藥品標(biāo)準(zhǔn).假設(shè)原為省級藥品標(biāo)準(zhǔn)的,必須補(bǔ)報相應(yīng)資料,并同省級藥品 標(biāo)準(zhǔn)資料,按三類藥材的要求整理后與制劑一并上報,如符合要求,該藥材可作為國家藥品標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)可.藥材須經(jīng)

14、鑒定.如成品中收載的檢驗工程歸屬于某藥材,而該藥材品種雖收載于法定標(biāo)準(zhǔn)中,但未列入該檢驗工程者, 應(yīng)補(bǔ)有關(guān)工程.例如成品處方中有人參,成品標(biāo)準(zhǔn)中收載了人參總皂玳的含量測定,而藥典中雖收載了人 參藥材標(biāo)準(zhǔn),但未規(guī)定含量測定工程,那么應(yīng)在原料人參標(biāo)準(zhǔn)中制定人參總皂玳的含量測定工程,目的為保 證成品質(zhì)量,以防盲目投料.有些制劑確因處方藥味多、干擾大,或擬測定藥味含量極少,但不屬于實驗設(shè)計不合理或操作技術(shù)問 題所致,含量測定困難,成品未收載此項者,可以暫時對藥材(主藥之一)規(guī)定含量測定工程,間接限制 成品質(zhì)量.2 .原料系指處方中的提取物、有效部位或化學(xué)單體,根據(jù)?補(bǔ)充規(guī)定?的要求均制定相應(yīng)的法定國家

15、 藥品標(biāo)準(zhǔn),對未制定國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的,須按相應(yīng)類別報有關(guān)資料并隨制劑一起上報審定.(二)成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中藥制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)必須在處方(藥味、用量)固定和各組份質(zhì)量穩(wěn)定、制備工藝穩(wěn)定的前提下,方 可制訂.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的容一般包括：名稱、漢語拼音、處方、制法、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測定、 功能與主治、用法與用量、禁忌、注意、規(guī)格、貯藏、使用期限等工程,依次予以說明.1 .名稱、漢語拼音、拉丁名：按?補(bǔ)充規(guī)定?附件十和衛(wèi)生部下發(fā)的?中藥命名原那么?制定.2 .處方(1)處方中的藥材名稱：凡中國藥典、部標(biāo)準(zhǔn)收載的藥材,一律采用最新版規(guī)定的名稱.地方藥品標(biāo) 準(zhǔn)收載的品種與國家藥品標(biāo)準(zhǔn)名稱不同,而來源相同

16、的,應(yīng)采用國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的名稱；地方藥品標(biāo)準(zhǔn)收載 的品種與國家藥品標(biāo)準(zhǔn)名稱相同來源不同的,應(yīng)另起名稱；國家藥品標(biāo)準(zhǔn)未收載的藥材,可采用地方藥品 標(biāo)準(zhǔn)收載的名稱,并注明出處.(2)處方中的各藥味,均應(yīng)符合其法定藥品標(biāo)準(zhǔn),藥味的排列次序,應(yīng)根據(jù)中醫(yī)藥理論,按"君臣佐使"順序排列,或按藥品作用主次排列.(3)處方中凡需炮制的藥材,均需用括號注明,與藥典方法不同的,應(yīng)另加注明.(4)處方中藥味的用量一律用法定計量單位,重量以"g"、容量以"ml"表示.處方的總量一般在 500-1500g圍.片劑、液體制劑等總出藥量一般以1000片、1000ml

17、計算.實驗應(yīng)用時,可按比例增減折算.(5)處方中藥味僅為藥典附錄收載者應(yīng)補(bǔ)充制定標(biāo)準(zhǔn).如為省級炮制規(guī)中收載者,應(yīng)按省級藥品標(biāo)準(zhǔn) 要求補(bǔ)充相應(yīng)申報資料.3 .制法在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制法項下可根據(jù)制備工藝寫出簡明的工藝全過程,對質(zhì)量有影響的關(guān)鍵工藝,應(yīng)列出控 制的技術(shù)條件.4 .性狀一種制劑的性狀往往與投料的原料質(zhì)量及工藝有關(guān),原料質(zhì)量保證,工藝恒定那么成品的性狀應(yīng)該是基 本一致的,故質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定制劑的性狀,能初步反映其質(zhì)量狀況.制劑的性狀指成品的顏色、形態(tài)、氣味等.片劑、丸劑如有包衣的還應(yīng)描述除去包衣后的片芯、丸芯 的顏色及氣味,硬膠囊劑應(yīng)寫明除去膠囊后容物的性狀.制劑色澤如以二種色調(diào)組合的,描寫時

18、以后者為 主,如棕紅色,以紅色為主.書寫時顏色、形態(tài)后用分號(；).小量研制品與中試或大量生產(chǎn)的成品,其色澤等可能不完全一致,故制訂制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)根據(jù)中試 或大量生產(chǎn)的產(chǎn)品為依據(jù),并至少觀察 35批樣品.有的中藥制劑在貯藏期間顏色會變深,因此可根據(jù)實 際觀察情況規(guī)定幅度.各種劑型的描述舉例如下.(1 )丸劑1 .水丸沉香化氣丸：本品為灰棕色至黃棕色的水丸；氣香,味微甜、苦.梅花點舌丸：本品為朱紅色的水丸,除去外衣顯棕黃色至棕色；氣香,味苦、麻舌.2.蜜丸艾附曖宮丸；本品為深褐色至黑色的小蜜丸或大蜜丸；氣微,味甘而后苦、辛.(2)散劑 玉真散：本品為黃白色至淡黃色的粉末；氣香,味麻辣.(3)片

19、劑牛黃解毒片：本品為素片或包衣片,素片或除去包衣后的片芯顯棕黃色；有冰片香氣,味 微苦、辛.安胃片：本品為類白色至淡黃色的片；氣微,味澀、微苦.(4)沖劑午時茶沖劑：本品為棕黃色的顆粒；氣微香,味甜、微苦.(5)錠劑 紫金錠：本品為暗棕色至褐色的長方形或棍狀的塊體；氣特異,味辛而苦.(6)煎膏劑(膏滋) 二冬膏；本品為棕黃色稠厚的半流體；味甜、微苦.(7)糖漿劑 川貝枇耙糖漿；本品為棕紅色的粘稠液體；氣香,味甜、微苦、涼.(8)合劑小建中合劑：本品為棕黃色的液體；氣微香,味甜、微辛.口服液 生脈飲：本品為黃棕色至淡紅色澄清液體,久置,可有輕搖易散的微量混濁；氣香,味酸甜、 微苦.口服液一般顏色

20、較深,也難以到達(dá)透明或澄明.其性狀不應(yīng)描寫為透明或澄明的液體.(9)滴丸劑 滿山紅油滴丸：本品為黃棕色的滴丸；有特異香氣.(10)膠囊劑龜齡集：本品為膠囊劑、容物為棕褐色.氣特異,味咸.(11)酒劑 舒筋活絡(luò)酒：本品為棕紅色的澄清液體；氣香,味微甜、略苦.(12)酊劑顛茄酊：本品為棕紅色或棕綠色的液體；有微臭.(13)流浸膏及浸膏劑流浸膏甘草流浸膏：本品為棕色或紅褐色的液體；味甜、略苦澀.浸膏 甘草浸膏：本品為棕褐色的固體,有微弱的特殊臭氣和持久的特殊甜味；遇熱軟化,易吸潮.(14)膏藥狗皮膏：本品為攤于獸皮或布上的黑膏藥.(15)橡膠膏劑 傷濕止痛膏：本品為淡黃綠色至淡黃色的片狀橡皮膏；氣芳

21、香.5.鑒別根據(jù)中醫(yī)藥理論,依處方原那么首選君藥與臣藥進(jìn)行鑒別,貴重藥,毒劇藥也須鑒別,選擇鑒別藥味也 應(yīng)結(jié)合藥物本身的根底研究工作情況,如其成分不清楚,或通過試驗摸索,干擾成分難以排除,那么也可鑒 別其它藥味；但應(yīng)在起草說明中寫明理由.鑒別方法一般包括顯微鑒別,一般理化鑒別及色譜鑒別.(1)顯微鑒別中藥成方制劑中含有藥材粉末組分的,可根據(jù)處方中所含藥材粉末的組織細(xì)胞及其含物特征進(jìn)行中成 藥的顯微鑒別.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中顯微鑒別容應(yīng)按藥典的格式和術(shù)語描述,每味藥的顯微特征用句號分開.中成藥顯微鑒定時,一般需要根據(jù)處方的配比,抓住主要藥味的鑒別特征,并對各組成藥材逐一分析 比擬,排除某些類似細(xì)胞組織和含

22、物的干擾,選取各藥材在該中成藥中具有專屬性的顯微特征作為鑒別依 據(jù).如左金丸由黃連、吳茱萸兩味藥組成.因它們均含有石細(xì)胞,故不采用石細(xì)胞作為某一味藥的顯微特 征,而分別采用纖維束和非腺毛、腺毛作為黃連和吳茱萸的顯微特征.某一粉末藥材的某些主要特征在成 方制劑中有干擾時,可以選擇次要特征.所收載的顯微特征必須明顯、易察見.經(jīng)制作5片子均能察見該顯微特征.多來源的藥材要考慮多來源共有的顯微特征.如黃連有黃連、三角葉黃連或云連三個來源,而前二種 均含有石細(xì)胞,云連沒有石細(xì)胞,故不能將石細(xì)胞作為黃連的顯微特征.取樣注意代表性,一般取 10片(丸)研成細(xì)粉,混勻后,取少量裝片鏡檢.水丸可粉碎后直接取樣,

23、 蜜丸、濃縮丸半浸膏片(含有生藥粉末)和混懸性沖劑可事先加水?dāng)嚢柘礈?離心取沉淀裝片.蠟丸可加 極性小的有機(jī)溶劑攪拌,傾去溶劑,反復(fù)處理洗盡蠟質(zhì).包衣材料事先應(yīng)洗去或刮凈.鑒別時,用水或甘油醋酸試液裝片觀察淀粉粒、粘膠細(xì)胞或糊化的淀粉團(tuán)塊等；用水合氯醛試液不加 熱觀察菊糖等一些多糖類物質(zhì),加熱觀察組織細(xì)胞特征.加水合氯醛試液加熱透化時,注意溫度不能過高,以防水合氯醛試液沸騰使組織碎片帶入氣泡.透化 后參加少量稀甘油裝片.裝片后,在顯微鏡下觀察要有次序,可以先左后右、先上后下的次序,全部看遍,不能跳躍式觀看.長寬度的測量用經(jīng)載臺量尺標(biāo)定的顯微量尺測量.每次測量記下數(shù)據(jù),并分析數(shù)據(jù)的最小量值和最大

24、量值和多見量值.如淅貝母淀粉粒直徑656"m表示最小和最大值,如為64056Vm中間的數(shù)值表示多見量值.需要觀察單個管胞、導(dǎo)管、纖維、石細(xì)胞的完整形狀時,可根據(jù)?中國藥典?現(xiàn)行版附錄有關(guān)的組織解離法解離后觀察.細(xì)胞壁性質(zhì)的檢定,可按?中國藥典?現(xiàn)行版附錄有關(guān)的檢定法對細(xì)胞壁的木質(zhì)化、木栓化、角質(zhì)化、硅 質(zhì)化進(jìn)行檢定.細(xì)胞含物亦按?中國藥典?附錄有關(guān)檢定法對淀粉粒、脂肪油、揮發(fā)油或樹脂、菊糖、粘 液、草酸鈣結(jié)晶、碳酸鈣結(jié)晶鐘乳體、硅質(zhì)進(jìn)行鑒定.植物藥材的各類組織碎片觀察時應(yīng)注意的容：薄壁細(xì)胞.注意細(xì)胞的大小或排列.一般皮層薄壁細(xì)胞較大,等徑類圓形,細(xì)胞間隙明顯而韌皮部 薄壁細(xì)胞窄長,間

25、隙少或沒有.注意細(xì)胞有無淀粉粒、草酸鈣結(jié)晶等含物,以及含物排列情況.有時可見紡錘狀薄壁細(xì)胞.觀察其壁有否增厚,有否交叉的紋理.如當(dāng)歸的韌皮薄壁細(xì)胞.表皮保護(hù)組織.觀察外壁有否增厚,有無氣孔及氣孔的軸式不定式、不等式、直軸式、平軸式、 環(huán)狀圍繞式、環(huán)狀輻射式.木栓組織.現(xiàn)實木栓細(xì)胞垂周壁平直還是彎曲,有否木栓化增厚,如均勻增厚形成木栓石細(xì)胞其 細(xì)胞間沒有間隙,可區(qū)分其他部位的石細(xì)胞群.粘液細(xì)胞.觀察有無草酸鈣針晶束.分泌細(xì)胞和分泌腔.分泌揮發(fā)油細(xì)胞又稱油細(xì)胞,注意其形狀和色澤.分泌揮發(fā)油的腔室又稱油室,注意其生成方式有裂生、溶生、裂溶生.裂生的注意油室周圍的1列分泌細(xì)胞形狀,溶生的周圍細(xì)胞破碎不

26、完整.乳汁細(xì)胞和乳汁管.前者是單獨的細(xì)胞,可以數(shù)個相連成管狀；后者是軸向連而末端壁局部或全部溶解,錯綜連接而成網(wǎng)狀系統(tǒng).觀察時注意區(qū)分并可用 20%醋酸溶液一滴加熱至近干,趁熱加丹W乙醇液, 稍放置,加甘油乙醇液蓋片后觀察被染成紅橙色的乳汁管.導(dǎo)管和管胞.注意單個或成群的散在情況,量取其直徑,觀察壁增厚的形式有環(huán)紋、螺紋、梯紋、 網(wǎng)紋和緣紋孔等.心材藥材的導(dǎo)管注意有無侵填體.纖維.韌皮纖維的壁有纖維素增厚或木質(zhì)化增厚兩種,壁不具紋孔,斷后的斷面有平整或掃帚狀. 木質(zhì)部纖維,常見的有纖維管胞和韌型纖維兩類.典型的木纖維具有木質(zhì)化的次生壁,為長軸的紡錘狀細(xì) 胞,胞腔一般較小,壁上具有退化的具緣紋孔

27、纖維管胞至裂隙狀單紋孔韌型纖維.晶纖維也稱晶鞘纖雄,注意纖維四周含晶細(xì)胞的壁有否增厚,其結(jié)晶的形狀大局部是方晶也有少數(shù)為 簇晶.描述纖維時注意形狀、大小長、寬、壁的厚度和有無紋孔.石細(xì)胞.注意其形狀有否分枝、大小長寬、直徑、壁厚度、層紋和紋孔、孔徑.注意其單 個、成群、成帶的散在情況,胞腔有否含物淀粉位、草酸鈣結(jié)晶.10毛茸.毛茸是花類、葉類藥材的重要顯微特征.毛茸有非腺毛、腺毛兩種.其組成細(xì)胞和形態(tài)及其 分布情況是重要的特征.多細(xì)胞非腺毛需注意其形狀有無分枝,頂端尖鈍否,底部有否擴(kuò)大,壁的厚度, 有否壁疣.多細(xì)胞非腺毛注意單列性和多列性的排列的方式,星狀毛注意輻射狀或疊生狀的排列形狀.單 列

28、式多細(xì)胞非腺毛,注意觀察其色澤、全長、頂端細(xì)胞長度,直徑、壁厚度及其排列方向編彎、倒抑、 彎曲等.腺毛注意腺頭部和柄部的細(xì)胞數(shù)、腺鱗的頭部細(xì)胞均系偶數(shù)型的對稱式排列,還應(yīng)注意生于細(xì) 胞間隙之間的間隙腺毛.毛茸在粉碎時易碎斷,尤其注意腺毛脫落后留下的痕跡及其周圍表皮細(xì)胞是否具有特征的排列.11花粉粒.是花類藥材的重要顯微特征.需分別描述立體形狀,極面觀、赤道面觀的輪廓.立體形狀通常以極軸為滾動軸的形狀,常見的有扁 球形、球形或類圓球形、近球形、長球形等.從赤道面可見萌發(fā)孔溝的外表,極面觀只能看到前發(fā)孔 溝的切面.花粉粒大小除圓形只需測量直徑外,一般需分別測量極軸及赤道軸長度.花粉粒萌發(fā)器官 是花

29、粉的重要形態(tài)特征.萌發(fā)器官有為萌發(fā)溝及孔萌發(fā)孔兩種,其形狀、數(shù)目、位置、大小是花 粉分類的依據(jù).12含物A.淀粉粒；有單?；蚨翑?shù)個分粒聚合而成復(fù)粒,有的可見半復(fù)粒.觀察其大小形狀、臍點有無及其 位置,層紋是否明顯.B.草酸鈣結(jié)晶：觀察其形狀方晶、族晶、針晶、砂晶、柱晶,大小及其在細(xì)胞排列方式.C.碳酸鈣結(jié)晶：一般以"鐘乳體"形狀存在.動物藥材和礦物藥材參考有關(guān)資料進(jìn)行.2 一般理化鑒別應(yīng)首先選擇處方中的主要藥味,即"君藥"和"臣藥"中的有效成分,如有效成分尚不明確的也可鑒別其特征成分,但選擇特性成分應(yīng)經(jīng)多方面的比擬試驗加以確定.如已

30、有文獻(xiàn)報道,該藥材含有的有效成 分者,應(yīng)首選的有效成分的鑒別試驗,如確不能檢出時方可選擇其他未知的 "特征"成分作為鑒別工程根本要求和根本情況可參見中藥材的有關(guān)局部.貴重藥、劇毒藥也應(yīng)建立鑒別工程.復(fù)方制劑所含成分更為復(fù)雜,相互干擾也更為嚴(yán)重.作為共性特征的理化鑒別,如呈色反響、沉淀反 應(yīng)、熒光反響、泡沫試驗等對復(fù)方制劑中的某個藥材的鑒別專屬性更差,在選用時尤需謹(jǐn)慎.至少供試液 應(yīng)經(jīng)預(yù)處理,并需進(jìn)行陰性對照試驗,確證沒有干擾,而且確有鑒別意義時方可采用.3色譜鑒別色譜鑒別在復(fù)方制劑中最常應(yīng)用的是薄層鑒別.由于復(fù)方制劑成分比單一的藥材或單味中藥制劑復(fù)雜,也應(yīng)注意鑒別的專屬性,

31、特別是 "特征"成分采用通用顯色劑得到的色斑或是一般的熒光斑點,或在紫外光 254nm燈觀察硅膠GF254薄層板在熒光背景下的暗色吸收斑點時,必須有足夠的試驗結(jié)果確證具有良好的 重現(xiàn)性和專屬性.對實驗的設(shè)計、操作和結(jié)果的判斷等都應(yīng)嚴(yán)格.目前,最多應(yīng)用的還是以手工鋪制薄層板或預(yù)制板為主的常規(guī)薄層色譜,而且用的最多的是硅膠G板或另加竣甲基纖維素鈉作粘合劑,黃酮類和酚類化合物也可選用聚酰胺板,氨基酸類也可用纖維素板,有條件的應(yīng)逐步使用質(zhì)量可靠的預(yù)制板.不管用何種類型的薄層板,均要求薄層極的質(zhì)量要保證.點樣、展開、顯色等均需符合規(guī)化要求.薄層鑒別試驗必需注意目的性、針對性、重現(xiàn)性和

32、準(zhǔn)確性.供試液的制備不僅要考慮多種藥味所含成 分的相互干擾和影響,還要考慮到不同工藝和不同劑型各自的特點,譬如一個制劑中含人參同時又含有黃 芭,在設(shè)計人參皂玳薄層鑒別時就應(yīng)考慮到黃芭皂玳對它的影響,不管在供試液制備還是展開劑的選擇都 要考慮周到.有些藥味所含的玳類成分種類既多,極性又大,經(jīng)多種條件均很難展開別離時,也可考慮用 水解后鑒別玳元的方法.如在多味藥材組成的復(fù)方制劑中含人參皂玳的藥材不少,有的品種由于眾多成分 的嚴(yán)重干擾,鑒別人參皂玳確有困難時,可采用水解后鑒別人參二醇或人參三醇的方法.但這只能說明在 該品種中含有人參皂玳類的成分,不能說明其含何種人參皂玳,所以一般不應(yīng)作為首選的方法.

33、不同劑型 所加添加劑也互不相同,供試液的制備就不可能用同一種方法,如口服液或糖漿劑既是液體制劑,又含有 較大量的糖,供試液的制備就不應(yīng)完全照搬不加糖的固體劑型如片劑,這時萃取方法固然不同,而且 除糖也就成為供試液制備要考慮的主要問題.供試液的制備可采用傳統(tǒng)的液液萃取的方法,也可采用固液 萃取的方法,而且后者的優(yōu)點更多, 也更方便.固液萃取所用的介質(zhì)常見的有硅烷基化硅膠C-18小柱、硅膠小柱、氧化鋁小柱、大孔樹脂柱、離子交換樹脂柱、硅藻土小柱等,可以有選擇的使用.試驗設(shè)計應(yīng)有對照品及對照藥材,并需作陰性對照即除去欲鑒別的藥味的"陰性"對服液.實驗條件應(yīng)有二個以上不同選擇性的展

34、開劑,如均能證實供試品中的欲鑒別成分與對照品的層析行為一致,再從 中選取較好的條件列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的正文中.如用對照藥材,要求供試品的色譜與對照品的色譜的主要斑點 能一致.由于樣品供試液中還有其他藥味,不可能與單一的藥材的色譜完全一致,因此應(yīng)反復(fù)試驗,仔細(xì) 比擬,以便作出準(zhǔn)確的判斷.氣相色譜適宜于制劑中含有揮發(fā)性成分的藥材的鑒別,如冰片、薄荷、麝香麝香酮,丹皮丹皮 酚,以及以揮發(fā)油為主的藥油類制劑.有的是結(jié)合含量測定工程進(jìn)行.如樣品中含有多種揮發(fā)油,需注 意色譜的別離度能將各主要組分分開,以免作出模糊的或錯誤的判斷.設(shè)計試驗時,應(yīng)注意制劑的生產(chǎn)工 藝,如有的藥材雖然含有揮發(fā)油,但是如果采用的水煮工

35、藝,那么揮發(fā)油根本上提取不出來,這就不宜再對 成品中該藥材的揮發(fā)油進(jìn)行鑒別.如以出峰的相對保存時間作為鑒別特征時,必須提供氣相色譜中的該峰 的特征參數(shù),確證無誤,方可成立.高效液相色譜很少直接用于中藥制劑的鑒別,如果含量測定采用了高效液相色譜法,那么可在含量測定 工程的進(jìn)行中考察可否間接地用于定性鑒別.尤其在用其他鑒別手段均無效時,可以考慮采用.設(shè)計試驗 時也同樣要注意色譜條件的優(yōu)化和方法學(xué)驗證.附：薄層色譜規(guī)化的根本技術(shù)要求由于中藥材及中藥制劑的鑒別采用薄層色譜法比擬普遍,為了提升試驗的重現(xiàn)性及別離度,以下的技 術(shù)要求可作為設(shè)計和進(jìn)行薄層色譜試驗時的參考.薄層色譜的規(guī)化技術(shù)要求儀器與材料A薄

36、層板可用手工自制板或預(yù)制板,用于制備薄層板的玻璃板要求外表光潔,平整,最好使用厚度為l-2mm的優(yōu)質(zhì)平板玻璃,普通窗玻璃一般不宜用于制作薄層極,玻璃板需用洗液或堿液洗凈至不掛水,晾干,貯存 于枯燥潔凈處備用；反復(fù)使用時應(yīng)注意需再用洗液或堿液清洗,如選用預(yù)制板應(yīng)注意生產(chǎn)廠家提供的有關(guān) 參數(shù),挑選,檢查并試用是否符合要求.最常用的吸附劑通常是加有石膏作粘合劑的商品硅膠G,或加有熒光劑的硅膠 GF254,有的另加其他粘合劑如竣甲基纖維素鈉以加固薄層板面；為了到達(dá)更好的別離的品種要求使用加有酸如硼酸,堿加 氫氧化鈉或緩沖溶液等薄層板.不同生產(chǎn)廠家或不同批次的商品硅膠質(zhì)量不可能完全相同,常常會影響 分析

37、結(jié)果的重現(xiàn)性,在重復(fù)實驗時尤須注意、硅月5 G因長期貯放可能使粘合力降低,薄層厚度一般為250 300Vm有的品種也使用纖維素板、氧化鋁板或聚酰胺板.B涂布器應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層.商品有手工、半自動及自動薄層板涂布 器.涂布的厚度有固定厚度如 250V m或可以調(diào)節(jié)的兩種.C點樣器材：最常用也最方便的是定量點樣毛細(xì)管微升毛細(xì)管,規(guī)格有 0.5ul , 1.0ul、2.0ul、3.0ul、4.0ul、 5.0ul及10ul等.對點樣用的微升毛細(xì)管的要標(biāo)示容量準(zhǔn)確,管端平整光滑,管壁潔凈,液流通暢,無堵 塞,無污染,商品最常用的是 DrummondScientifi

38、c Co.美國的產(chǎn)品,也可選用色譜用微量注射器應(yīng) 選用針尖平頭適合薄層點樣的.為了提升點樣效率,還可選用點樣輔助設(shè)備,如點樣支架,半自動或自動點樣器.選用點樣器材和輔 助設(shè)備應(yīng)注意器材本身的質(zhì)量.D展開箱層析缸應(yīng)當(dāng)用薄層色譜專用的展開箱,有平底展開箱和雙槽展開箱,還有一種水平式展開箱.雙槽展開箱具 有節(jié)約溶劑、減少污染、便于預(yù)平衡及限制展開條件等優(yōu)點.水平式展開箱可以從薄層板的兩側(cè)向中間展 開,展距5cm 特別是高效薄層板,所以一塊薄層板所承受的樣品個數(shù)比常規(guī)上行法展開增加了一倍.用不合格的玻璃器皿如生物標(biāo)本缸等不能保證展開的質(zhì)量.E顯色與檢測儀器薄層極展開后,有的需用試劑顯色劑顯色.涂布顯色

39、劑有噴霧法和浸漬法.噴霧瓶應(yīng)能在一定壓 力下使試劑噴成均勻的細(xì)霧狀.薄層掃描定量測定,顯色劑可限制噴灑的數(shù)量和噴霧的壓力.浸漬法用浸 漬槽為特制的浸漬槽,將展開后的薄層板平穩(wěn)放入有顯色劑的浸漬槽中數(shù)十秒至1分鐘后取出指凈薄層板背后的殘存試劑顯色.浸漬槽可用適當(dāng)?shù)牟Ａ髅蟠?紫外光燈有長波段365nnj和短波段254nnj紫外光管,前者用于觀察具有熒光的色譜,后者一般 用于觀察硅膠GFS254板色譜在薄層板面的熒光背景下出現(xiàn)的暗藍(lán)紫色吸收斑點,選用紫外光燈應(yīng)注意熒光管的功率和濾光片的性能.薄層掃描儀不僅可以進(jìn)行原位定量,薄層掃描全圖譜對定性鑒別也能提供有用的信息操作方法A薄層板的制備除另有規(guī)定

40、外,將1份吸附劑如硅膠 G加3份左右的水在研缽中用研杵沿一個方向充分研磨,調(diào)成 均勻糊狀物,倒入已準(zhǔn)備好的涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地以直線方向移動涂布器,使硅膠漿均勻地涂布. 須注意的是不同廠家不同批號的硅膠G加水量及研磨時間要求有所不同,如加有其他改性劑更是如此.薄層厚度一般為0.20.3mm由于國產(chǎn)常用的硅膠顆粒大小分布圍較寬1040Vm ,如果顆粒分布不夠均勻,而粗顆占比例較多時,涂布的太薄反而降低別離水平,有的品種,如人參甚至要求用0.5mm薄層板.涂布好的薄層板于室溫下在水平臺上晾干,再在105110c活化約30分鐘,置枯燥器中備用.使用前應(yīng)在反射光和透射光下檢查板面及紋理是否均勻,如

41、不均勻,有氣泡或有麻點、有破損或已污染如灰塵、 纖維者應(yīng)棄去不用.預(yù)制薄層板分常規(guī)薄層板及高效板兩種,由于商品供給來源不一,需注意并記錄生產(chǎn)廠家及生產(chǎn)批號, 必要時需測定板效,以保證較好的重現(xiàn)性.在質(zhì)量保證的前提下,應(yīng)盡量選用預(yù)制薄層極,以提升時效和 色譜的重現(xiàn)性.B點樣除另有規(guī)定外,點樣用的定量微升毛細(xì)管或其他符合要求的點樣工具按規(guī)定吸取溶液后,以垂直 方向小心接觸板面使成圓點狀,點樣基線與底邊的距離,視所用板的大小而定,如采用長度為10cm的板,點樣距離底邊以1cm為宜,點間距離視情況為 1、1.5或2cm,原點直徑應(yīng)不大于 3mm如樣品容量較大, 或為了改善別離度,也可點成寬約23mm同

42、長度的條帶.點樣時須注意盡量不要損害薄層外表.一般的自制硅膠G薄層板,板面的牢度不夠,定量測定時需特別注意小心點樣,不要使原點局部的板面破損.C展開點樣后的薄層板置入加有展開劑的薄層展開箱中,密閉,一般采用上行展開,薄層板浸入展開劑深度 一般要求溶劑最初的前沿距原點約5mm展開至規(guī)定展開距后立即將薄層權(quán)取出,晾干,以備檢測.多數(shù)品種展距79cm已夠,少數(shù)需用長度為 15或20cm的板；展開可在10cm以上.如規(guī)定需用展開劑或其他 溶劑的蒸氣預(yù)平衡者可在雙槽展開箱的一側(cè)參加適量的溶劑,如需到達(dá)飽和狀態(tài),可在展開箱壁貼一被溶 劑濕潤的濾紙使展開箱易于被蒸氣平衡,如規(guī)定薄層板需要同時預(yù)平衡者,應(yīng)將薄

43、層板放入箱沒有溶劑的 一側(cè)槽中,平衡后再將溶劑傾入此糟中展開.展開劑要求新鮮配制,如需分層那么按規(guī)定要求放置分層后,分取需要的一相上層或下層各用.D檢測色譜斑點本身有顏色者可直接在日光下觀察色譜中的色斑,本身在紫外光激發(fā)下可發(fā)射熒光者可直接 置紫外光燈下觀察熒光色譜、需加試劑前方能顯色或發(fā)射熒光者,那么可將試劑用噴霧器均勻噴灑于薄層板 面或用浸漬法,再按規(guī)定直接觀察或加熱后觀察.浸漬法板面顯色均勻是其優(yōu)點,但有的樣品經(jīng)試劑 浸漬后斑點容易被浸潤擴(kuò)散,那么不適用.涂布試劑后如加熱顯色需注意限制加熱溫度和時間,尤其含竣甲 基纖維素鈉的薄層板溫度過高或加熱時間過長易焦化,如用硫酸等試劑那么可使板面碳

44、化而影響顯色效果； 有的成分加試劑后加熱溫度和加熱時間不同,顯色效果可能有差異、有的品種用蒸氣熏蒸如碘蒸氣顯色者,可在密閉器皿中放置適當(dāng)時間至斑點顯色清楚,薄層色譜還可在薄層掃描儀中進(jìn)行光密度掃描或熒 光掃描.影響薄層色譜分析的主要因素常規(guī)薄層色譜由于是一種"敞開系統(tǒng)的色譜技術(shù),與柱色譜的區(qū)別之一是除材料及器材以外,外界環(huán) 境條件對被別離物質(zhì)的層析行為影響很大,別離機(jī)制也很復(fù)雜；操作技巧也明顯的影響色譜質(zhì)量；為了充 分發(fā)揮薄層色譜技術(shù)在中藥分析方面的優(yōu)勢,提升色譜的別離度和重現(xiàn)性,注意限制影響色譜質(zhì)量的因素 是非常重要的.以下所述的幾個方面不僅對定量分析是必須注意的問題,對提升定性分

45、析的質(zhì)量也是不可 無視的.A.樣品的預(yù)處理及供試液的制備一般認(rèn)為薄層色譜所用固定相薄層板可即用即棄,不怕供試液中雜質(zhì)的污染,因而樣品無需凈化 精制.但在實踐中,由于中藥的成分復(fù)雜,未知成分多,供試液中溶出的物質(zhì)較多,其中既有欲測成分也 有其他"雜質(zhì)".常常由于相互干擾或背景污染而難以得到滿意的分高效果,甚至難以識別,尤其成方制劑 更是如此.所以在許多情況下為了得到一個較為清楚的色譜.樣品提取物經(jīng)預(yù)處理,使供試液得以凈化, 往往是一個重要的有時甚至是關(guān)鍵的步驟,制各樣品供試液所用的溶劑一般要求溶解度不宜太大,粘度不 宜太高,沸點適中；但中藥制劑往往希望將各成分盡量多地提取出來

46、,最常被選用的是甲醇或乙醇,欲測 成分和許多其他"雜質(zhì)"均可能被提取出來.因此供試液的凈化就顯得更為必要.樣品供試液凈化的方法通常有 1 .單一溶劑萃取法,2.分段萃取法；3.液液萃取法；4.固液萃取法cB、薄層色譜的點樣技術(shù)點樣是薄層色譜的第一步,也是關(guān)鍵的一步,它既關(guān)系到能否得到可以重現(xiàn)的薄層色譜,也關(guān)系到定 量測定結(jié)果的準(zhǔn)確與否,由于不良的點樣是測定誤差的最主要的來源.一般在常規(guī)薄層板上原點的直徑不 大于3mm高效薄層板要求原點直徑不大于 2mm點樣量不宜過大,最好限制在 10Ml以下,如在一個位置 重復(fù)屢次點樣時,須注意盡量不將原點點成一個空心圈.選用溶劑沸點不宜太

47、高如正丁醇或太低如 己酸.如用乙醛提取,可將最終溶液改用其他非極性溶劑.如用親水性溶劑,或在較高相對濕度環(huán)境下 點樣,點樣后應(yīng)將薄層板再枯燥如真空枯燥.點樣時需注意盡量不要損傷薄層板外表.C、吸附劑的活性與相對濕度的影響吸附劑的活性是由吸附劑如硅膠的外表能和外表積決定的.硅膠的硅醇基是親水性基團(tuán),很易吸附水 分子而成為水合硅醇基而失去活性.自制的硅膠薄層板在105110c加熱假設(shè)干時間,就是使水合硅醇基脫水變?yōu)橛坞x硅醇基而活化.反之,活化后的薄層板也可以吸附大氣中的水分子而降低活性.說明硅膠外表 吸附水份的作用是可逆的,在日常操作時,當(dāng)活化后的硅膠或氧化鋁薄層板從枯燥器中取出,自開始 點樣到展

48、開前,薄層板一般是暴露在實驗室的大氣中,其活性取決于實驗室環(huán)境的相對濕度.在其他條件 相同的情況下,相對濕度對許多樣品色譜質(zhì)量的影響是很明顯的.通常認(rèn)為薄層色譜重現(xiàn)性差,在不同的 相對濕度下點樣和展開即是原因之一.限制展開時的相對濕度可在雙槽展開箱的一側(cè)用一定濃度的硫酸溶 液,密閉放置一定時間如 1530分鐘,再參加展開劑于另一側(cè)展開.也可將點樣后的薄層板放入一定 的容器中或特制的濕度限制箱中有一定濃度的硫酸溶液或其他調(diào)節(jié)相對濕度的無機(jī)鹽水溶液,密閉放 置一定時間后,取出,立即在箱中展開.試驗結(jié)果必須有展開時的相對濕度的記錄.限制相對濕度用的硫 酸溶液配制可參考下表表限制相對濕度用的硫酸溶液相

49、對濕度為所需硫酸溶度V/V硫酸ml水ml326810042571005839.510065341007227.51008810.889D、溶劑蒸氣在薄層色譜中的作用薄層色譜與柱色譜的區(qū)別之一就是溶劑的蒸氣相在展開箱中也參與色譜的展開而形成三維的層析過 程.展開箱的空間氣體在薄層層析過程中起著重要的作用.在常規(guī)薄層色譜分析中,層析過程是很復(fù)雜的, 特別是使用多元又能形成兩相的展開劑時,即有吸附行為也有分配行為.這時,對薄層色譜的層析過程和 結(jié)果有很大的影響.在實驗中應(yīng)注意觀察并真實記錄試驗條件,如展開前有無預(yù)平衡,平行時間等.E、溫度的影響溫度也是影響層析行為的因素之一.最直觀的影響是被別離物質(zhì)

50、的 Rf值和物質(zhì)的相互別離度以及斑點的擴(kuò)散等,在溫差較大的不同地點或時間,其它條件相同展開同樣的樣品,所得色譜可能含有差異.目前 還沒有可以限制溫度的展開裝置,因此記錄展開時的溫度也是保證良好重現(xiàn)性的一個舉措.6 .檢查中藥制劑檢查項照現(xiàn)行版藥典附錄各有關(guān)通那么如丸劑、散劑、片劑等項下規(guī)定的檢查工程進(jìn)行檢 查,要列出具體數(shù)據(jù)或結(jié)果.如與通那么中某項檢查要求不同的,要說明理由及列出具體數(shù)據(jù)；有些品種如 還有通那么規(guī)定以外的檢查工程時,要說明理由、方法及數(shù)據(jù),通那么以外的劑型要另行制訂要求.中藥制劑所用藥材均應(yīng)是經(jīng)檢驗符合規(guī)定的藥材,故一般制成制劑后不再作總灰分等檢查.但對新藥, 根據(jù)國外要求需作

51、重金屬、碑鹽等有害物質(zhì)的考察,要提供檢測的積累數(shù)據(jù).必要時,將重金屬、碑鹽列 入正文檢查工程中.重金屬、碑鹽檢查工程說明可見藥材申報資料5,檢查及有關(guān)工程說明中有關(guān)重金屬、碑鹽局部.止匕外,服酒劑、酊劑是否含有甲醇,可用氣相色譜法進(jìn)行檢測,提供檢測的積累數(shù)據(jù),必要時列入正 文檢測工程中.中藥制劑的某些品種,除按現(xiàn)行版藥典附錄劑型通那么規(guī)定有關(guān)工程檢查外,有的尚需另制訂檢查工程, 以保證質(zhì)量.如有的外用藥含醋酸,在此成分揮發(fā)后影響藥品質(zhì)量,應(yīng)將醋酸作為檢查工程列入正文之中.中藥制劑凡規(guī)定有限度指標(biāo)的品種指重金屬、碑鹽或甲醇等要有足夠的數(shù)據(jù),至申報生產(chǎn)用質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)時,必須至少累積10批樣品數(shù)據(jù).將

52、限度指標(biāo)列入正文之中.凡未列入正文中的檢查工程研究,也應(yīng) 提供方法及檢測的積累數(shù)據(jù),列入起草說明之中.7 .浸出物中藥制劑亦可測定浸出物以限制質(zhì)量.必須指出,在確實無法建立含量測定時,可暫按浸出物測定作 為質(zhì)量限制工程,但必須具有針對性和限制質(zhì)量的意義,如含量測定項所測含量值甚微時,應(yīng)同時建立浸 出物工程.含糖類等輔料比擬多的中藥制劑,如選擇水、乙醇、甲醇為溶劑建立浸出物測定意義不大,難以反映 在質(zhì)量,應(yīng)選溶劑時,還要考慮中藥制劑中輔料對溶劑的影響.如處方中含揮發(fā)性成分,可以用乙醴作溶 劑,測定揮發(fā)性酸浸出物,例如中國藥典1990年版一部中九味羌活丸；含揮發(fā)性成分較多,可作為含量測定項,例如中

53、國藥典1990年版一部中流浸膏含量測定.如處方中藥味含皂玳成分較多, 可先用乙醛去脂后,用正丁醇作溶劑測定正丁醇浸出物.中藥制劑浸出物制訂原那么與要求,見中藥材中浸出物局部.8 .含量測定含量測定的意義除與中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所述相同外,并作如下補(bǔ)充：中藥含多種成分,制劑多為復(fù)方,按君、臣、佐、使配伍,為中藥特色之一,故應(yīng)擇其重點建立含量 測定工程.1 1工程選定原那么新藥制劑一至五類均應(yīng)研究建立含量測定工程注射劑詳見第三章.制劑應(yīng)首先擇其君藥及所含貴重藥建立含量測定項,如含毒性藥,更應(yīng)研究建立含量測定項,量微 者也要規(guī)定限度試驗,列入檢查項中.對前述有關(guān)藥味根底研究薄弱或在測定中干擾成分多,也可

54、依次選定臣藥等其他藥味進(jìn)行含量測定.有效成分清楚的可行針對性定量；有效成分不清楚也可選擇其它成分作為指標(biāo)性成分進(jìn)行定量；大 類成分清楚的,可對總成分如總黃酮、總生物磴、總皂玳進(jìn)行測定；如成藥中含有的藥味一般兩味具 有相同成分或同系物也可測定其總成分,但同時須分別測定其藥材原料所含該成分含量,并規(guī)定限度.在 確定無法建立含量測定時,可暫將浸出物測定作為質(zhì)控工程,但必須具有針對性和限制質(zhì)量的意義.有些 制劑確因處方藥味多,干擾大,或含量極少,而非實驗設(shè)計不合理或操作技術(shù)問題所致,含量測定困難, 未收載此項者,可以暫時只對原料藥材主藥之一規(guī)定含量測定工程,間接限制成藥的質(zhì)量,并繼續(xù)進(jìn) 行成品的含量測

55、定方法研究.中西藥結(jié)合制劑中的西藥組分那么必須另做含量測定.2含量測定方法同藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項下,但應(yīng)注意專屬性與可控性.計算分光光度法,由于干擾組分不穩(wěn)定,一般不列 入法定方法,可作控方法應(yīng)用.3含量測定方法的考察含量測定方法可參考有關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)或有關(guān)文獻(xiàn),也可自行研究后建立,但均應(yīng)作方法學(xué)考察試驗.一般考察工程如下：提取條件的選定.別離、純化,以說明干擾物質(zhì)的排除情況,特別是采用色譜分析方法更應(yīng)注意此點,以提升分析準(zhǔn) 確性并可保護(hù)色譜柱.測定條件的選擇,如分光光度法包括比色法、色譜法最大吸收波長的選擇、液相色譜法中固定相、 流動相、標(biāo)物的選擇,薄層掃描法層析與掃描條件的選擇等.線性關(guān)系的考察,分

56、光光度法包括比色法須制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,用以確定取樣量并計算含量,但色譜法一般均采用對照品比擬法、外標(biāo)或標(biāo)法測定,但也必須進(jìn)行線性考察,目的：A.樣品濃度與峰面積或峰高是否呈線性關(guān)系；B.線性圍,即適用樣品點樣或進(jìn)樣量確實定；C.直線是否通過原點,以確定是以1種濃度或2種濃度對照品即一點法或二點法測定并計算.標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)即 丫值要求0.999以上, 薄層掃描方法可在0.995以上,應(yīng)提供標(biāo)準(zhǔn)曲線圖、回歸方程,并說明線性圍.測定方法的穩(wěn)定性試驗：用紫外分光光度法、比色法或薄層掃描法等測定時,應(yīng)對被測液或薄層色 譜色斑的吸收值穩(wěn)定性進(jìn)行考察,以確定適當(dāng)?shù)臏y定時間.精密度試驗；如氣相、液相色譜法對同一

57、供試液屢次進(jìn)樣測定,薄層掃描法同薄展板及異板多個同 量斑點掃描測定,可考察其精密度,對同一薄層斑點連續(xù)進(jìn)行屢次測定,那么可考察儀器的精密度.重復(fù)性試驗；按擬定的含量測定方法,對同一批樣品進(jìn)行屢次測定平行試驗至少5次以上,即n>5計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD , 一般要求應(yīng)根據(jù)樣品含量上下和含量測定方法的繁簡；如含量很低一般 不大于5%;含量較高的,那么應(yīng)從嚴(yán)要求.回收率測定；含量測定方法的建立,多以回收率估計分析的誤差和操作過程的損失以評價方法的可靠性,回收率試驗要求與藥材申報資料含量測定方法考察根本相同.加樣回收試驗,即于被測成分含量的成藥中再精密參加一定量的被測成分純品,依法測定.測定 值應(yīng)在線性圍,用實測值與原樣品含被測成分量之差,除以參加純品量,計算回收率.A:樣品所含被測成分量B:參加純品量C:實測值回收率試驗至少需進(jìn)行 5次試驗n=5,或三組平行試驗n=6,加人欲測樣品或成分量相同或不 同,后者那么可進(jìn)一步驗證測定方法取樣量多少更為適合.為了反映各次回收率的實驗波動情況,建議除寫出各次試驗的實測數(shù)據(jù),并計算實測值的均數(shù),標(biāo)準(zhǔn) 差S及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD o相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較小的實驗波動較小,重復(fù)性較好.計算方法如下：n為每次實測數(shù)據(jù)的個數(shù),