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文檔簡介

1、生物化學(xué)名詞解釋 結(jié)構(gòu)式 簡答 論述1、 糖和糖代謝糖異生作用:是指從非糖前體(包括丙酮酸、乳酸、檸檬酸循環(huán)中間體、大部分氨基酸的碳骨架及甘油)合成葡萄糖的過程。循環(huán):又稱三羧酸循環(huán)、檸檬酸循環(huán)或Krebs循環(huán),是將葡萄糖酵解生成的丙酮酸繼續(xù)氧化為二氧化碳和水,同時產(chǎn)生大量能量的過程。淀粉的糊化:當(dāng)干淀粉懸于水中并加熱時,淀粉粒吸水溶脹并發(fā)生破裂、淀粉分子進(jìn)入水中形成半透膜的膠懸液,同時失去晶態(tài)和雙折射性質(zhì),這一過程稱凝膠化或糊化。淀粉的老化:當(dāng)凝膠化的淀粉液緩慢冷卻并長期放置時,淀粉分子會自動聚集并借助分子間的氫鍵鍵合形成不溶性微晶束而重新沉淀,此現(xiàn)象稱退行或老化。異型乳酸發(fā)酵:葡萄糖經(jīng)糖酵

2、解途徑后除主要產(chǎn)生乳酸外還產(chǎn)生乙醇、乙酸、二氧化碳等多種產(chǎn)物的發(fā)酵。酵母菌的酒精發(fā)酵:酵母菌在無氧條件下,首先將葡萄糖經(jīng)酵解過程轉(zhuǎn)化為丙酮酸,丙酮酸脫羧酶再以焦磷酸硫胺素(TPP)作為輔酶,催化丙酮酸脫羧生成乙醛,最后,乙醇脫氫酶一NADH為輔酶,將乙醛還原為乙醇。酵母菌的甘油發(fā)酵:正常的乙醇發(fā)酵會產(chǎn)生少量甘油,這是因?yàn)橐掖及l(fā)酵之初,細(xì)胞內(nèi)沒有足夠的乙醛作為氫受體,致使NADH濃度升高,被-磷酸甘油脫氫酶用于磷酸二羥丙酮的還原反應(yīng),生成-磷酸甘油,NADH被氧化成NAD+,-磷酸甘油則在-磷酸甘油磷酸酯酶的水解作用下生成甘油。發(fā)酵過程中將受氫體乙醛去除作為控制發(fā)酵的條件,從而使發(fā)酵液中積累甘油

3、,這是酵母菌甘油發(fā)酵的基本原理。酒精發(fā)酵過程中通風(fēng)量、PH對酒精發(fā)酵有何影響:通風(fēng):酵母菌繁殖需要氧,在完全的無氧條件,酵母菌只能繁殖幾代,然后就停止。這時,只要給予少量的空氣,它們又能出芽繁殖。如果缺氧時間過長,多數(shù)酵母菌就會死亡。 在進(jìn)行中國好酒招商網(wǎng)精發(fā)酵以前,對葡萄的處理(破碎、除梗、泵送以及對白葡萄汁的澄清等)保證了部分氧的溶解。在發(fā)酵過程中,氧越多,發(fā)酵就越快、越徹底。因此,在生產(chǎn)中常用倒罐的方式來保證酵母菌對氧的需要。 酸度:酵母菌在個性或微酸性條件下,發(fā)酵能力最強(qiáng),如在pH4.0的條件下,其發(fā)酵能力比在pH3.0時更強(qiáng)。9在pH很低的條件下,酵母菌活動生成揮發(fā)酸或停止活動??梢?/p>

4、,酸度高并不利于酵母菌的活動,但卻能抑制其他微生物(如細(xì)菌)的繁殖。如何去鑒定還原糖和非還原糖,有何方法:如鑒別葡萄糖和果糖、麥芽糖和蔗糖,葡萄糖和麥芽糖的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或a-羥基)。用斐林試劑、班氏試劑、銀氨溶液等可以檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否。(1)斐林試劑:斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1gmL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05gmL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與還原糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下: CH2OH(CHOH)4CHO 2Cu(OH)2 CH2OH

5、 (CHOH)4COOH Cu2O 2H2O(2)利用班氏試劑:班氏試劑由A液(硫酸銅溶液),B液(檸檬酸鈉和碳酸溶液)配制而成。將A溶液注入B液中,邊加邊攪,如有沉淀可過濾。實(shí)驗(yàn)原理與斐林試劑相似,所不同的是班氏試劑可長期使用。(3)利用銀氨溶液:銀氨溶液是在2的AgNO3溶液中逐滴滴人2的稀氨水,至最初產(chǎn)生的沉淀恰好溶解為止,這時得到的溶液就是銀氨溶液。銀氨溶液中含有Ag(NH3) 20H(氫氧化二氨合銀),這是一種弱氧化劑,能把醛基氧化成羧基,同時Ag+被還原成金屬銀。還原生成的銀附著在試管壁上,形成銀鏡。反應(yīng)方程式是:CH2OH(CHOH)4CHO +2 Ag(NH3)OH CH2OH

6、(CHOH)4COONH4 + 3NH3+ 2Ag+ 2H2O四種淀粉酶的作用機(jī)制:-淀粉酶:是一種內(nèi)切酶,能在淀粉鏈的內(nèi)部隨機(jī)切割-D-1,4-葡萄糖苷鍵,生成小分子糊精和葡萄糖,生成的麥芽糖和葡萄糖都是型。ß-淀粉酶:是一種外切酶,作用于淀粉時,從淀粉鏈的非還原性末端開始,水解它的-D-1,4-葡萄糖苷鍵,水解時沿著淀粉鏈每次水解掉兩個葡萄糖單位,水解產(chǎn)物為麥芽糖。-淀粉酶:是一種外切酶,能水解淀粉的-D-1,4-葡萄糖苷鍵和-D-1,6-葡萄糖苷鍵.其作用方式是從淀粉鏈的非還原性末端開始,依次水解它的-D-1,4-葡萄糖苷鍵,將葡萄糖一個一個水解下來,對于支鏈淀粉,當(dāng)水解到分支

7、點(diǎn)時,一般先將-D-1,6-葡萄糖苷鍵斷開,然后繼續(xù)水解,所以能將支鏈淀粉全部水解成葡萄糖異淀粉酶:是一種內(nèi)切酶,能水解支鏈淀粉分子中的-D-1,6-葡萄糖苷鍵,使支鏈淀粉變成直鏈狀的糊精。如何合理選用酶制劑完成淀粉到葡萄糖的快速高效轉(zhuǎn)化:糖化:在工業(yè)生產(chǎn)上將淀粉水解為葡萄糖的過程,得到的水解糖液叫淀粉糖。糖化的原料:薯類淀粉、玉米淀粉、小麥淀粉、大米淀粉等。淀粉酶一般選用可在低ph條件下反應(yīng)的耐高溫淀粉酶;糖酵解途徑中:什么是糖酵解?概念、途徑、反應(yīng)、特點(diǎn)都要知道糖酵解:糖酵解(glycolysis EMP):即糖的發(fā)酵分解、是葡萄糖經(jīng)16一二磷酸果糖和3磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)楸嵬瑫r生成ATP

8、的過程。 從糖酵解的反應(yīng)歷程看,它有三步是大量釋放自由能的不可逆反應(yīng),即已糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶催化的反應(yīng),這三步是控制糖酵解速度的限速步驟,其中以磷酸果糖激酶催化的反應(yīng)最為關(guān)鍵。此外,3一磷酸甘油醛脫氫酶也是一個調(diào)控點(diǎn)。(一)磷酸果糖激酶的調(diào)節(jié): ATP是磷酸果糖激酶的底物,也是它的變構(gòu)抑制劑,ATP濃度高 (ADP或AMP濃度低)則磷酸果糖激酶的活性低,反之亦然; 檸檬酸也可對磷酸果糖激酶進(jìn)行別構(gòu)抑制,高濃度的檸檬酸,使磷酸果糖激酶的活性下降,糖酵解減速; 磷酸果糖激酶的活性還受 NADH和脂肪酸的抑制。 (二)已糖激酶的調(diào)控:此酶受6磷酸葡萄糖的抑制,6磷酸葡萄糖濃度升高則抑制

9、已糖激酶的活性,使糖酵解下降。(三)丙酮酸的調(diào)節(jié): ATP抑制丙酮酸激酶的活性; 16二磷酸果糖可以使丙酮酸激酶活化(四)3一磷酸甘油醛脫氫酶的調(diào)控:此酶可被NAD+激活??傊谔墙徒獾恼麄€過程中,是多個因素參與了有關(guān)酶活性的調(diào)節(jié)。(1)過程為10個酶催化的11步反應(yīng)1)葡萄糖在己糖激酶的催化下生成6-磷酸葡萄糖:消耗第一個ATP,該反應(yīng)位不可逆反應(yīng),時葡萄糖代謝的第一個限速反應(yīng);2)6-磷酸葡萄糖被磷酸葡萄糖異構(gòu)酶催化為6-磷酸果糖;3)6-磷酸果糖在磷酸果糖激酶催化(PFK)的催化下磷酸化,消耗第二個ATP該反應(yīng)為不可逆的限速反應(yīng);4)1,6-二磷酸果糖由醛縮酶催化裂解,產(chǎn)生兩個三碳糖,

10、即3-磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮;5)磷酸丙糖異構(gòu)酶催化磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛;6)3-磷酸甘油醛在3-磷酸甘油醛脫氫酶催化轉(zhuǎn)化為1,3-二磷酸甘油酸,第一個高能中間物的生成:,并需要無機(jī)磷酸和NAD+參與反應(yīng),產(chǎn)物為NADH和1,3-二磷酸甘油酸,其中1,3-二磷酸甘油酸是高能化合物;7)磷酸甘油酸激酶催化生成3-磷酸甘油酸,第一對ATP生成:屬于底物水平磷酸化作用, 8)3-磷酸甘油酸被磷酸甘油酸變位酶轉(zhuǎn)化為2-磷酸甘油酸;9)烯醇化酶催化2-磷酸甘油酸脫氫生成磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)是第二個高能化合物;10)丙酮酸激酶催化磷酰基從PEP轉(zhuǎn)到ADP上,生成丙酮酸和第二對ATP,屬

11、于底物水平磷酸化作用,該反應(yīng)位不可逆反應(yīng),是糖酵解過程第三個限速反應(yīng);烯醇式丙酮酸不穩(wěn)定,無需酶的作用即可形成丙酮酸??偡磻?yīng)方程式:CHO COOH| |(CHOH)4 + 2H3PO4 + 2NAD+ + 2ADP 2 C=O + 2ATP +2NADH +2H+ + 2H2O| |CH2OH CH3(2)EMP途徑有三個不可逆反應(yīng):1)、3)、10);有兩次底物水平磷酸化作用:7)、10)以糖酵解途徑為基礎(chǔ)的發(fā)酵種類:1、 同型乳酸發(fā)酵:就是利用乳酸菌產(chǎn)生活性很強(qiáng)的乳酸脫氫酶,在無氧條件下,將丙酮酸還原為乳酸的過程。2、 乙醇發(fā)酵:酵母菌在無氧條件下,首先假將葡萄糖經(jīng)酵解過程轉(zhuǎn)化為丙酮酸,

12、丙酮酸脫羧酶再以焦磷酸硫胺素(TPP)為輔酶,催化丙酮酸脫羧生成乙醛,最后,乙醇脫氫酶一NADH為輔酶,將乙醛還原生成乙醇。3、 甘油發(fā)酵:正常的乙醇發(fā)酵會產(chǎn)生少量甘油,這是因?yàn)橐掖及l(fā)酵之初,細(xì)胞內(nèi)沒有足夠的乙醛作為受氫體,致使NADH濃度升高,被-磷酸甘油脫氫酶用于磷酸二羥丙酮的還原反應(yīng),生成-磷酸甘油,NADH被氧化成NAD+。-磷酸甘油則在-磷酸甘油酸酯酶的水解作用下生成甘油。發(fā)酵過程中將受氫體乙醛去除作為控制發(fā)酵的條件,從而使發(fā)酵液中積累甘油,這是酵母菌甘油發(fā)酵的基本原理。TCA循環(huán)中:主要步驟、關(guān)鍵反應(yīng)的酶、輔助因子、生理意義三羧酸循環(huán)(tricarboxylic acid cycl

13、e TCA):Krebs提出,在有氧的條件下,糖酵解產(chǎn)生的丙酮酸氧化脫羧形成乙酰CoA,乙酰CoA必須通過一組循環(huán)反應(yīng)才能徹底氧化成C02和水,并產(chǎn)生大量ATP,這個循環(huán)的第一個產(chǎn)物是檸檬酸,檸檬酸上有三個羧基,因此叫三羧酸循環(huán)。它是物質(zhì)代謝的樞紐,是生物體獲取能量(ATP)的主要途徑。三羧酸循環(huán)具有普遍的生物學(xué)意義:提供大量的能量,供有機(jī)體生命活動的需要;三羧酸循環(huán)是各種營養(yǎng)物質(zhì)氧化的最終途徑,是物質(zhì)代謝的樞紐,通過三羧酸循環(huán)使三大代謝彼此聯(lián)系在一起;三羧酸循環(huán)產(chǎn)生的各種中間產(chǎn)物是合成其它生命物質(zhì)的碳骨架來源;對某些植物來說,三羧酸循環(huán)中的二羧酸、三羧酸是某些器官的積累物,并影響果實(shí)品質(zhì),如

14、檸檬酸、蘋果酸等等。檸檬酸合成酶、異檸檬酸脫氫酶和-酮戊二酸脫氫酶三羧酸循環(huán)關(guān)鍵酶 三羧酸循環(huán)的關(guān)鍵酶檸檬酸合酶(限速酶):受ATP、NADH、琥珀酰CoA及脂酰CoA抑制。 受乙酰CoA、草酰乙酸激活異檸檬酸脫氫酶:NADH、ATP可抑制此酶;ADP可活化此酶,當(dāng)缺乏ADP時就失去活性。-酮戊二酸脫氫酶:受NADH和琥珀酰CoA抑制。反應(yīng)過程:TCA循環(huán):每輪循環(huán)有2個C原子以乙酰CoA形式進(jìn)入,有2個C原子完全氧化成CO2放出,分別發(fā)生4次氧化脫氫,共釋放12ATP。1.乙酰CoA+草酰乙酸檸檬酸檸檬酸合酶,TCA中第一個調(diào)節(jié)酶:受ATP、NADH、琥珀酰CoA、和長鏈脂肪酰CoA的抑制;

15、受乙酰CoA、草酸乙酸激活。2.檸檬酸異檸檬酸這是一個不對稱反應(yīng),由順鳥頭酸酶催化3.異檸檬酸氧化脫羧生成-酮戊二酸和NADH 這是三羧酸循環(huán)中第一次氧化脫羧反應(yīng),異檸檬酸脫氫酶,TCA中第二個調(diào)節(jié)酶:Mg2+(Mn2+ )、NAD+和ADP可活化此酶,NADH和ATP可抑制此酶活性。細(xì)胞在高能狀態(tài):ATP/ADP、NADH/NAD+比值高時,酶活性被抑制。4.-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰CoA和NADH-酮戊二酸脫氫酶系,TCA循環(huán)中的第三個調(diào)節(jié)酶:受NADH、琥珀酰CoA、Ca2+、ATP、GTP抑制-酮戊二酸脫氫酶系為多酶復(fù)合體,與丙酮酸脫氫酶系相似(先脫羧,后脫氫)5.琥珀酰CoA生成

16、琥珀酸和GTP琥珀酰CoA合成酶(琥珀酸硫激酶)這是TCA中唯一的底物水平磷酸化反應(yīng),直接生成GTP。在高等植物和細(xì)菌中,硫酯鍵水解釋放出的自由能,可直接合成ATP。在哺乳動物中,先合成GTP,然后在核苷二磷酸激酶的作用下,GTP轉(zhuǎn)化成ATP。6.琥珀酸脫氫生成延胡索酸(反丁烯二酸)和FADH琥珀酸脫氫酶是TCA循環(huán)中唯一嵌入線粒體內(nèi)膜的酶。丙二酸是琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制劑,可阻斷三羧酸循環(huán)。7.延胡索酸水化生成L-蘋果酸 延胡索酸酶具有立體異構(gòu)特性,OH只加入延胡索酸雙鍵的一側(cè),因此只形成L-型蘋果酸。8.L-蘋果酸脫氫生成草酰乙酸和NADH L-蘋果酸脫氫酶步驟一、丙酮酸的生成:經(jīng)糖酵解

17、等途徑生成丙酮酸。二、丙酮酸氧化脫羧生成乙酰輔酶A丙酮酸+ NAD+ + CoA-SH 乙酰-CoA+ CO2 + NADH+H+ 三、乙酰CoA進(jìn)入三羧酸循環(huán)徹底氧化 乙酰CoA與草酰乙酸縮合形成檸檬酸乙酰CoA+草酰乙酸 檸檬酸合成酶 檸檬酸 + CoA-SH 檸檬酸異構(gòu)化生成異檸檬酸檸檬酸 順烏頭酸酶 異檸檬酸 異檸檬酸氧化脫羧生成-酮戊二酸異檸檬酸+NAD+ 異檸檬酸脫氫酶 -酮戊二酸 +CO2+NADH+ H+ -酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰輔酶A-酮戊二酸 + CoA-SH+ NAD+ -酮戊二酸脫氫酶系 琥珀酰CoA + CO2 + NADH+ H+ 琥珀酰CoA轉(zhuǎn)變?yōu)殓晁徵牾?/p>

18、CoA + GDP + Pi 琥珀酰CoA合成酶 琥珀酸+ GTP + CoA-SH 琥珀酸氧化脫氫生成延胡索酸琥珀酸 + FAD 琥珀酸脫氫酶 延胡索酸 +FADH2 延胡索酸水化生成蘋果酸延胡索酸 + H2O 延胡索酸酶 蘋果酸 蘋果酸脫氫生成草酰乙酸蘋果酸 + NAD+ 蘋果酸脫氫酶 草酰乙酸 + NADH+H+ 一分子Glc徹底氧化產(chǎn)生的ATP數(shù)量反應(yīng)酶ATP消耗產(chǎn)生ATP方式ATP數(shù)量合計糖 酵 解已糖激酶1-18磷酸果糖激酶1-1磷酸甘油醛脫氫酶NADH呼吸鏈氧化磷酸化2×3磷酸甘油酸激酶底物水平磷酸化2×1丙酮酸激酶底物水平磷酸化2×1TCA丙酮酸脫

19、氫酶復(fù)合物NADH2×330異檸檬酸脫氫酶NADH2×3-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合物NADH2×3琥珀酸脫氫酶FADH22×2蘋果酸脫氫酶NADH2×3琥珀酰CoA合成酶底物水平磷酸化2×1凈產(chǎn)生:38ATP在骨骼肌、腦細(xì)胞中,凈產(chǎn)生:36ATP甘油磷酸穿梭,1個NADH生成2個ATP蘋果酸穿梭,1個NADH生成3個ATPTCA循環(huán)在糖、脂肪和蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝中的作用:TCA循環(huán)是中心環(huán)節(jié)代謝途徑交叉形成網(wǎng)絡(luò),主要聯(lián)系物:丙酮酸、乙酰CoA、檸檬酸、-酮戊二酸、草酰乙酸。 糖的有氧分解代謝產(chǎn)生的能量最多,是機(jī)體利用糖或其他物質(zhì)氧化而獲得能

20、量的最有效方式。 三羧酸循環(huán)之所以重要在于它不僅為生命活動提供能量,而且還是聯(lián)系糖、脂、蛋白質(zhì)三大物質(zhì)代謝的紐帶。 三羧酸循環(huán)所產(chǎn)生的多種中間產(chǎn)物是生物體內(nèi)許多重要物質(zhì)生物合成的原料。在細(xì)胞迅速生長時期,三羧酸循環(huán)可提供多種化合物的碳架,以供細(xì)胞生物合成使用。發(fā)酵工業(yè)上利用微生物三羧酸循環(huán)生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物。催化EMP產(chǎn)生的丙酮酸到乙酰輔酶A的丙酮酸脫氫酶系(氧化脫羧酶系)包括哪三種酶及其輔助因子:丙酮酸進(jìn)入線粒體,在丙酮酸脫氫酶系的催化下氧化脫羧生成乙酰CoA。 丙酮酸脫氫酶系由三種酶單體構(gòu)成:丙酮酸脫氫酶(E1),二氫硫辛酸乙?;D(zhuǎn)移酶(E2),二氫硫辛酸脫氫酶(E3)。該多酶復(fù)合體有五種輔

21、助因子:TPP,硫辛酸,NAD+,F(xiàn)AD,HSCoA。 酶 輔酶 每個復(fù)合物亞基數(shù)丙酮酸脫羧酶(E1) TPP 24二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙酰酶(E2) 硫辛酸 24二氫硫辛酸脫氫酶(E3) FAD、NAD+ 12此外,還需要CoA、Mg2+作為輔因子結(jié)構(gòu)式:麥芽糖 蔗糖 -D-吡喃半乳糖 ß-D-呋喃果糖(注意、ß型) 乙酰輔酶A 草酰乙酸2、 脂類和脂類代謝人體必需脂肪酸:是人體功能必不可少的但自身不能合成的,或者不能足量合成的氨基酸,必須從食物中獲取,稱為人體必需氨基酸。這8種氨基酸是蘇氨酸、纈氨酸、賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸。脂肪酸代謝:脂肪酸的&#

22、223;氧化:定義、計算能量生成(課后習(xí)題)氧化作用:脂肪酸在體內(nèi)氧化時在羧基端-碳原子上進(jìn)行氧化,碳鏈逐次斷裂,每次斷下一個二碳單位,即乙酰CoA,該過程稱作-氧化。舉例說明脂肪酸的降解:(1)-氧化過程:脂肪酸首先在線粒體外或胞漿中,在脂酰CoA合成酶的催化下,將脂肪酸轉(zhuǎn)變成脂酰CoA,然后進(jìn)入線粒體中進(jìn)行氧化。b-氧化過程由四個連續(xù)的酶促反應(yīng)組成:1)脂酰CoA氧化脫氫:脂酰CoA在脂酰CoA脫氫酶的作用下,在C2和C3之間脫氫,生成烯脂酰CoA,輔基時FAD。2)脂酰CoA 水化:在悕脂酰CoA水化酶作用下水化,生成L-b-羥脂酰CoA。3)L-b-羥脂酰CoA的氧化脫氫:L-b-羥脂

23、酰CoA在脫氫酶的作用下,C3位脫氫,生成L-b-羥脂酰CoA,輔酶時NAD+ 。4)硫解:L-b-羥脂酰CoA在硫解酶的作用下發(fā)生裂解,形成乙酰CoA和一個少了2個C原子的脂酰CoA。(2)氧化生產(chǎn)ATP的計算1分子FADH2進(jìn)入呼吸鏈可生成1.5 分子ATP,1分子NADH可生成2.5分子ATP,故一次b-氧化循環(huán)可生成4分子ATP。1分子乙酰CoA進(jìn)入三羧酸循環(huán)經(jīng)徹底氧化分解,每分子乙酰CoA可生成10分子ATP。以16C的軟脂酸為例來計算,則生成ATP的數(shù)目為:7次b-氧化循環(huán)產(chǎn)生4×7=28分子ATP8分子乙酰CoA可生成10×8=80分子ATP因此,軟脂酸經(jīng)-氧

24、化完全氧化生成108分子ATP對于任一偶數(shù)碳原子的長鏈飽和脂肪酸,其凈生成的ATP數(shù)目可按下式計算:ATP生成數(shù)=(碳原子數(shù)/2)-1 ×4 +(碳原子數(shù)/2)×10 -2脂肪酸的完全氧化可以產(chǎn)生大量的能量。例如軟脂酸(含16碳):經(jīng)過7次b-氧化,可以生成8個乙酰CoA, A:每一次b-氧化,生成1分子FADH2和1分子NADH+H+。 B: 1個乙酰CoA完全氧化(參加TCA)產(chǎn)生10個ATP(按照一個NADH產(chǎn)生2.5個ATP,1個FADH2產(chǎn)生1.5個ATP)C: 計算1分子軟脂酰CoA在分解代謝過程中共生成ATP的數(shù)目為:  7次-氧化分解產(chǎn)生4

25、5;7=28分子ATP; 8分子乙酰CoA可得10×8=80分子ATP;共可得108分子ATP,由于軟脂酸轉(zhuǎn)化成軟脂酰CoA時消耗了1分子ATP中的兩個高能磷酸鍵的能量(ATP分解為AMP, 可視為消耗了2個ATP),故1分子軟脂酸徹底氧化分解可凈生成106分子ATP。 造化價(值):定義為皂化1公克的油脂所需要之堿(即做皂常用的為氫氧化鈉)的毫克數(shù)(即1:10)。結(jié)構(gòu)式:軟脂酸CH3(CH2)14COOH 硬脂酸CH3(CH2)16COOH 油酸CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH9 磷脂通式 脂肪通式3、 蛋白質(zhì)及蛋白及代謝信號肽:分泌蛋白新生肽鏈N端的一段2030氨

26、基酸殘基組成的肽段。將分泌蛋白引導(dǎo)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng),同時這個肽段被切除?,F(xiàn)這一概念已擴(kuò)大到?jīng)Q定新生肽鏈在細(xì)胞中的定位或決定某些氨基酸殘基修飾的一些肽段。鹽析:在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽,以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì),使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出,稱為鹽析。變性:天然蛋白質(zhì)分子受到某些理化因素的作用,有序的空間結(jié)構(gòu)被破壞,生物活性喪失,并伴隨發(fā)生理化性質(zhì)的異常變化被稱為變性作用。變性劑有哪些?變性前后理化性質(zhì)有哪些改變?影響因素?變性劑:尿素和鹽酸胍蛋白質(zhì)變性后,往往出現(xiàn)下列現(xiàn)象:結(jié)晶及生物活性喪失是蛋白質(zhì)變性的主要特征。硫水側(cè)鏈基團(tuán)外露。理化性質(zhì)改變,溶解度降低、沉淀,粘度增加,分子伸展。生理化學(xué)性質(zhì)改變。

27、分子結(jié)構(gòu)伸展松散,易被蛋白酶水解。影響變性的因素: 強(qiáng)酸和強(qiáng)堿; 有機(jī)溶劑,破壞疏水作用; 去污劑、去污劑都是兩親分子,破壞疏水作用; 還原性試劑:尿素、b-硫基乙醇; 鹽濃度、鹽析、鹽溶; 重金屬離子,Hg2+、pb2+,能與-SH或帶電基團(tuán)反應(yīng)。 溫度; 機(jī)械力:如攪拌和研磨中的氣泡。寡聚蛋白:由兩個以上、十個以下亞基或單體通過非共價連接締合而成的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)亞基:寡聚蛋白分子中的每個三級結(jié)構(gòu)單位稱為一個亞基或亞單位。蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)每一級結(jié)構(gòu)主要研究內(nèi)容是什么?對于每一級來說靠什么化學(xué)鍵來維持?1. 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)(Primary structure)包括: (1)組成蛋白質(zhì)的多肽鏈數(shù)

28、目. (2)多肽鏈的氨基酸順序, (3)多肽鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵的數(shù)目和位置。一級結(jié)構(gòu)的連接鍵:肽鍵(主要)、二硫鍵2. 二級結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)是指多肽鏈骨架中原子的局部空間排列,不涉及側(cè)鏈的構(gòu)象,也就是該肽段主鏈骨架原子的相對空間位置,主要有-螺旋、-折疊、-轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲。維持二級結(jié)構(gòu)的力量為氫鍵。3. 蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)是指在一條多肽鏈中所有原子的整體空間排布,包括主鏈和側(cè)鏈。三級結(jié)構(gòu)的形成使得在序列中相隔較遠(yuǎn)的氨基酸側(cè)鏈相互靠近。次級鍵維系:疏水鍵、鹽鍵、氫鍵、范德華力、二硫鍵4.具有三級結(jié)構(gòu)的亞單位,通過離子鍵、范德華力、氫鍵等聚集而成的特定構(gòu)象維持四級結(jié)構(gòu)的作用有:氫鍵、疏水作用、靜

29、電作用、共價健實(shí)驗(yàn)室常用分離分析蛋白質(zhì)的方法有哪些?(鹽析、凝膠過濾層析、聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳原理、用途)鹽析:蛋白質(zhì)在高濃度中性鹽溶液中會沉淀析出,稱為鹽析,主要原理:高濃度鹽離子與蛋白質(zhì)分子爭奪水化水,破壞蛋白質(zhì)分子表面的水膜,同時鹽離子也會影響蛋白質(zhì)分子所帶電荷,從而引起蛋白質(zhì)沉淀但通常不會導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性。 用途:使蛋白質(zhì)濃縮,同時可除去少量雜質(zhì),并可將蛋白質(zhì)粗提取液初步分為幾份。純化方法就屬于粗分級。分子篩層析:原理:稱為凝膠過濾層析,以多孔性凝膠材料為支持物,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液流經(jīng)此支持物時,分子大小不同的蛋白質(zhì)所受到的阻滯作用不同而先后流出,從而達(dá)到分離純化的目

30、的。 用途:蛋白質(zhì)細(xì)分級,按照蛋白質(zhì)分子大小對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離的。離子交換層析:原理:蛋白質(zhì)是兩性分子,在一定的PH條件下帶有電荷,不同的蛋白質(zhì)所帶有電荷的種類和數(shù)量不同,因此它們與帶電的凝膠顆粒間的電荷相互作用不同,這樣,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合物流經(jīng)帶電凝膠時,電荷吸引作用小的蛋白質(zhì)先流過,而電荷吸引作用大的蛋白質(zhì)后流過,從而把不同的蛋白質(zhì)分開。用途:離子交換層析層析分離蛋白質(zhì)主要取決于各種蛋白質(zhì)所帶凈電荷對不同蛋白質(zhì)進(jìn)行分離。聚丙烯酰胺凝膠電泳:基本原理:聚丙烯酰胺凝膠灌裝在雙層玻璃板之間,在凝膠頂端上樣,然后分別在凝膠的底部和頂端接上正負(fù)電極,在凝膠中形成電場,在電場的作用下,蛋白質(zhì)由凝膠頂端向下移

31、動,移動的速度與蛋白質(zhì)所帶電荷,分子大小和形狀有關(guān),從而把不同的蛋白質(zhì)分開。 用途:根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷,分子大小和形狀有關(guān),從而把不同的蛋白質(zhì)分開。SDS-PAGE變性聚丙烯酰胺凝膠電泳:原理:在電泳系統(tǒng)中加入SDS,SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合后,會引起蛋白質(zhì)變性,蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和特殊幾何形狀消失,變?yōu)榘魻罱Y(jié)構(gòu),所有伸展肽鏈與SDS的棒狀復(fù)合物直徑幾乎相同,其差別只在于肽鏈的長短,由此消除了不同蛋白質(zhì)分子形狀的差異。SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合的數(shù)量很大,使蛋白質(zhì)帶上大量的負(fù)電荷,由此減弱或消除了不同蛋白質(zhì)間電荷的差異,蛋白質(zhì)在凝膠中的遷移速度只與分子大小有關(guān)。 用途:SDS-PAGE大致按照肽鏈大小對不同蛋

32、白質(zhì)進(jìn)行分離。結(jié)構(gòu)式:谷氨酸 半胱氨酸 天冬氨酸 丙氨酸(注意構(gòu)型)常見氨基酸三字母縮寫要會:名稱三字母縮寫名稱三字母縮寫丙氨酸Ala亮氨酸Leu精氨酸Arg賴氨酸Lys天冬酰胺Asn甲硫氨酸Met天冬氨酸Asp苯丙氨酸Phe半胱氨酸Cys脯氨酸Pro谷氨酰胺Gln絲氨酸Ser谷氨酸Glu蘇氨酸Thr甘氨酸Gly色氨酸Trp組氨酸His酪氨酸Tyr異亮氨酸Ile纈氨酸Val已知氨基酸等電點(diǎn)、溶液PH,用離子交換樹脂分離不同等電點(diǎn)氨基酸,判斷氨基酸的洗脫順序:離子交換層析層析分離蛋白質(zhì)主要取決于各種蛋白質(zhì)所帶凈電荷,分為陽離子和陰離子交換層析。在進(jìn)行離子交換層析時,時刻要想到這樣的原則:處于等電

33、點(diǎn)(pI)的蛋白質(zhì)所帶凈電荷為零;當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)所處溶液pH > pI時,該蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷,如果pH < pI時,蛋白質(zhì)帶正電荷。 蛋白質(zhì)分解代謝中氨基酸的脫氨基作用方式有哪些?脫氨基作用主要在肝臟中進(jìn)行一氧化脫氨基第一步,脫氫,生成亞胺。第二步,水解。催化氧化脫氨基反應(yīng)的酶(氨基酸氧化酶)2 非氧化脫氨基作用(大多數(shù)在微生物的中進(jìn)行)3 轉(zhuǎn)氨基作用轉(zhuǎn)氨作用是a.a脫氨的重要方式,除Gly、Lys、Thr、Pro外,a.a都能參與轉(zhuǎn)氨基作用。轉(zhuǎn)氨基作用由轉(zhuǎn)氨酶催化,輔酶是維生素B6(磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺)。轉(zhuǎn)氨酶在真核細(xì)胞的胞質(zhì)、線粒體中都存在。 轉(zhuǎn)氨基作用:是-氨基酸和-酮酸之間氨基

34、轉(zhuǎn)移作用,結(jié)果是原來的a.a生成相應(yīng)的酮酸,而原來的酮酸生成相應(yīng)的氨基酸。四聯(lián)合脫氨基單靠轉(zhuǎn)氨基作用不能最終脫掉氨基,單靠氧化脫氨基作用也不能滿足機(jī)體脫氨基的需要,因?yàn)橹挥蠫lu脫氫酶活力最高,其余L-氨基酸氧化酶的活力都低。機(jī)體借助聯(lián)合脫氨基作用可以迅速脫去氨基 。以谷氨酸脫氫酶為中心的聯(lián)合脫氨基作用氨基酸的-氨基先轉(zhuǎn)到-酮戊二酸上,生成相應(yīng)的-酮酸和Glu,然后在L-Glu脫氨酶催化下,脫氨基生成-酮戊二酸,并釋放出氨。通過嘌呤核苷酸循環(huán)的聯(lián)合脫氨基做用骨骼肌、心肌、肝臟、腦都是以嘌呤核苷酸循環(huán)的方式為主蛋白質(zhì)合成代謝中:密碼子及其特性:. 遺傳密碼子是三聯(lián)體密碼:一個密碼子由信使核糖核酸

35、(mRNA)上相鄰的三個堿基組成。 密碼子具有通用性:不同的生物密碼子基本相同,即共用一套密碼子。 遺傳密碼子無逗號:兩個密碼子間沒有標(biāo)點(diǎn)符號,密碼子與密碼子之間沒有任何不編碼的核苷酸,讀碼必須按照一定的讀碼框架,從正確的起點(diǎn)開始,一個不漏地一直讀到終止信號。 遺傳密碼子不重疊,在多核苷酸鏈上任何兩個相鄰的密碼子不共用任何核苷酸。 密碼子具有簡并性:除了甲硫氨酸和色氨酸外,每一個氨基酸都至少有兩個密碼子。這樣可以在一定程度內(nèi),使氨基酸序列不會因?yàn)槟骋粋€堿基被意外替換而導(dǎo)致氨基酸錯誤。 有搖擺性:根據(jù)擺動假說,在密碼子與反密碼子的配對中,前兩對嚴(yán)格遵守堿基配對原則,第三對堿基有一定的自由度,可以

36、“擺動”,因而使某些tRNA可以識別一個以上的密碼子。有起始密碼子和終止密碼子,起始密碼子有兩種,一種是甲硫氨酸(AUG),一種是纈氨酸(GUG),而終止密碼子(有3個,分別是UAA、UAG、UGA)沒有相應(yīng)的轉(zhuǎn)運(yùn)核糖核酸(tRNA)存在,只供釋放因子識別來實(shí)現(xiàn)翻譯的終止蛋白質(zhì)生物合成的過程:原核生物:真核生物:四、酶酶的抑制作用:由于酶活性中心的化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變而引起酶活力下降或喪失的作用,稱為酶的抑制作用。抑制劑:造成酶的抑制作用的物質(zhì)稱為抑制劑。抑制劑和變性劑的區(qū)別:變性劑對酶的變性作用無選擇性,而一種抑制劑只能使一種酶或一類酶產(chǎn)生抑制作用,因此抑制劑對酶的抑制作用是有選擇的。所以,抑制

37、劑與變性劑是不同的。競爭性抑制與非競爭性抑制的區(qū)別:競爭性抑制:抑制劑I和底物S競爭酶的結(jié)合部位,從而影響了底物與酶的正常結(jié)合。因?yàn)槊傅幕钚圆课徊荒芡瑫r既與底物結(jié)合又與抑制劑結(jié)合,因而在底物和抑制劑之間產(chǎn)生競爭,形成一定的平衡關(guān)系。大多數(shù)競爭性抑制劑的結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)類似,因此能與酶的活性部位結(jié)合,與酶形成可逆的EI復(fù)合物,但EI不能分解成產(chǎn)物P,酶反應(yīng)速率下降。其抑制程度取決于底物及抑制劑的相對濃度,這種抑制作用可通過增加底物濃度而解除。非競爭性抑制:這類抑制作用的特點(diǎn)是底物和抑制劑同時和酶結(jié)合,兩者沒有競爭作用。酶與抑制劑結(jié)合后,還可以與底物結(jié)合:EI+SESI;酶與底物結(jié)合后,還可以與抑制

38、劑結(jié)合:ES+IESI。但是中間的三元復(fù)合物不能進(jìn)一步分解為產(chǎn)物,因此酶活力降低。這類抑制劑與酶活性部位以外的基團(tuán)相結(jié)合,其結(jié)構(gòu)與底物無共同之處,這種抑制作用不能用增加底物濃度來解除抑制,故稱非競爭性抑制。輔酶:與酶蛋白結(jié)合不牢固,能用透析等簡單方法與酶蛋白分離的有機(jī)小分子。 輔基:與酶蛋白結(jié)合牢固,不能用透析等簡單方法與酶蛋白分離的有機(jī)小分子同工酶:指催化相同的化學(xué)反應(yīng),但其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫性能等方面都存在明顯差異的一組酶。酶原:酶的無活性的前體酶原激活:無活性的酶前體轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿傅倪^程影響酶促反應(yīng)的因素有哪些:底物濃度的影響:所有的酶反應(yīng),如果其它條件恒定,則反應(yīng)速度決定

39、于酶濃度和底物濃度,如果酶濃度保持不變,當(dāng)?shù)孜餄舛仍黾?,反?yīng)速度隨著增加,并以雙曲線形式達(dá)到最大速度。pH值對酶促反應(yīng)速度的影響:pH值對酶反應(yīng)速度有顯著的影響,酶有最適的pH值,在最適Pu值兩側(cè),酶促反應(yīng)速度呈下降趨勢,大部分酶的pH值一酶活性曲線近于鐘罩形。溫度對酶促反應(yīng)速度的影響:每種酶都有最適的反應(yīng)溫度,在最適溫度兩側(cè),反應(yīng)速度也呈鐘罩形曲線。溫度對酶促反應(yīng)的影響有兩個方面,一方面是當(dāng)溫度升高時,反應(yīng)速度加快;另一方面,隨著溫度的升高而使酶逐步變性,降低了酶的反應(yīng)速度。酶濃度對酶反應(yīng)速度的影響:在酶促反應(yīng)中,如果底物濃度足夠大,足以使酶飽和,則反應(yīng)速度與酶濃度呈正比。激活劑對酶促反應(yīng)速

40、度的影響:激活劑能夠提高酶的活性或通過除去抑制劑而解除對酶的抑制作用。抑制劑對酶反應(yīng)的影響:抑制劑可以降低酶的活性,但不引起酶蛋白的變性,根據(jù)抑制劑與酶的作用方式可將抑制作用分為兩大類:不可逆的抑制作用、可逆的抑制作用。酶的代謝調(diào)控中,酶的共價修飾:酶分子中的某些基團(tuán),在其它酶的催化下,可以共價結(jié)合或脫去,引起酶分子構(gòu)象的改變,使其活性得到調(diào)節(jié),這種方式稱為酶的共價修飾。目前已知有六種修飾方式:磷酸化/去磷酸化,乙?;?去乙?;?,腺苷?;?去腺苷?;?,尿苷?;?去尿苷?;谆?去甲基化,氧化(S-S)/還原(2SH)。反饋抑制:反饋抑制(feedback inhibition):是指最終產(chǎn)

41、物抑制作用,即在合成過程中有生物合成途徑的終點(diǎn)產(chǎn)物對該途徑的酶的活性調(diào)節(jié),所引起的抑制作用。反饋抑制與反饋?zhàn)瓒舻膮^(qū)別在于:反饋?zhàn)瓒羰寝D(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié),產(chǎn)生效應(yīng)慢,反饋抑制是酶活性水平調(diào)節(jié),產(chǎn)生效應(yīng)快。此外,前者的作用往往會影響催化一系反應(yīng)的多個酶,而后者往往只對是一系列反應(yīng)中的第一個酶起作用。反饋?zhàn)瓒簦杭丛诤铣蛇^程中有生物合成途徑的終點(diǎn)產(chǎn)物對該途徑的一系列酶的量調(diào)節(jié),所引起的阻遏作用。反饋?zhàn)瓒羰寝D(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié),產(chǎn)生效應(yīng)慢。4、 核酸及核酸代謝核酸的變性:多聚核苷酸之間的氫鍵斷裂,使核酸的空間結(jié)構(gòu)由有序的立體排列變?yōu)闊o序的伸展或卷曲狀態(tài)。DNA分子由雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈成單鏈的過程即為DNA分子的變性。

42、核酸的復(fù)性:變性DNA在適當(dāng)(一般低于Tm2025)條件下,兩條鏈重新締合成雙螺旋結(jié)構(gòu)。DNA熔點(diǎn):能使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)失去一半時的溫度稱為該DNA的熔點(diǎn)或熔解溫度Tm。RNA有哪些類型?所占比例,各自的結(jié)構(gòu)與功能:細(xì)胞中的RNA,按其在蛋白質(zhì)合成中所起的作用,主要可分為三種類型。核糖體RNA rRNA tRNA約占全部RNA的80%信使RNA mRNA 5%轉(zhuǎn)移RNA tRNA 占全部RNA的15%左右    信使RNA(mRNA)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和功能:不同分子大小差異大,原核生物mRNA為多順反子,真核生物mRNA為:單順反子,并且在3端有一段多聚腺苷酸,即pol

43、yA,在5端有一個“冒子”結(jié)構(gòu),即m7G5PPP5Nm,在蛋白質(zhì)合成中起決定氨基酸順序的模板作用。    轉(zhuǎn)移RNA(tRNA)的結(jié)構(gòu)和功能:tRNA分子一般含7090核苷酸,各種tRNA分子結(jié)構(gòu)相似,二級結(jié)構(gòu)都呈三葉草型,三級結(jié)構(gòu)象個倒寫的“L”字母,在蛋白質(zhì)合成中主要起攜帶活化的氨基酸以及識別mRNA上密碼子的作用。    核糖體RNA(rRNA)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和功能:rRNA存在于核糖體中與蛋白質(zhì)結(jié)合。構(gòu)象不固定受各種因子的影響,原核生物有23S、16S、5S三種rRNA,真核生物有28S、18S、5S,有的還含有5.5SrRNA。

44、功能是與蛋白質(zhì)結(jié)合,組成蛋白質(zhì)合成的場所一核糖體。結(jié)構(gòu)式:CMP cAMP已知DNA一條鏈,寫出另一條鏈的序列,mRNA序列,肽鏈的序列順序倒過來,把T換成U例如:給出DNA序列:5AGTCGTCAAGC3轉(zhuǎn)錄的mRNA序列:5GCUUGACGACU3(下冊P511的遺傳密碼字典)逆轉(zhuǎn)錄:以RNA為模板,依靠逆轉(zhuǎn)錄酶的作用,以四種脫氧核苷三磷酸(dNTP)為底物,合成DNA鏈。半保留復(fù)制:親代雙鏈分離后,每條單鏈均作為新鏈合成的模板,復(fù)制完成時子代DNA分子中僅保留一條親代鏈,另一條鏈則是新合成的,每個分子的核苷酸序列均與親代分子相同。DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯過程DNA復(fù)制:原核生物: DNA解

45、螺旋酶解開雙鏈DNA。 SSB結(jié)合于DNA單鏈。 DNA旋轉(zhuǎn)酶引入負(fù)超螺旋,消除復(fù)制叉前進(jìn)時帶來的扭曲張力。 DNA引物酶(在引發(fā)體中)合成RNA引物。 DNA pol.在兩條新生鏈上合成DNA。 DNA pol切除RNA引物,并補(bǔ)上DNA。 DNA ligase連接一個岡崎片段。真核生物:DNA轉(zhuǎn)錄:原核生物:(一)轉(zhuǎn)錄起始過程1. RNA聚合酶全酶(2ßßc)與模板結(jié)合 ;2. DNA雙鏈解開; 3. 在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物;(2) 轉(zhuǎn)錄延長1. 亞基脫落,RNApol聚合酶核心酶變構(gòu),沿著DNA模板前移;2. 在核心酶作用下,NTP不斷聚合,RNA鏈不斷延長。(三)轉(zhuǎn)錄終止指RNA聚合酶在DNA模板上停頓下來不再前進(jìn),轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來。 分類:依賴Rho ()因子的轉(zhuǎn)錄終止;非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止。真核生物:一、轉(zhuǎn)錄的起始(2) 轉(zhuǎn)錄延長真核生物轉(zhuǎn)錄延長過

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