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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上高中生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié) 整理者:吳海媛實(shí)驗(yàn)一:使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞(必修一P7)1是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明亮?為什么?低倍鏡的視野大,通過的光多,放大的倍數(shù)??;高倍鏡視野小,通過的光少,但放大的倍數(shù)高。2.為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察?如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對(duì)象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。3.用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后,轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋行不行?不行。用高倍鏡觀察,只需轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋即可。轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,容易壓壞玻片。4.

2、使用高倍鏡觀察的步驟和要點(diǎn)是什么?答:(1)首先用低倍鏡觀察,找到要觀察的物像,移到視野的中央。(2)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,用高倍鏡觀察,并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直到看清楚材料為止。5.總結(jié):四個(gè)比例關(guān)系a.鏡頭長(zhǎng)度與放大倍數(shù):物鏡鏡頭越長(zhǎng),放大倍數(shù)越大,而目鏡正好與之相反。b.物鏡鏡頭放大倍數(shù)與玻片距離:倍數(shù)越大(鏡頭長(zhǎng))距離越近。c.放大倍數(shù)與視野亮度:放大倍數(shù)越大,視野越暗。d.放大倍數(shù)與視野范圍:放大倍數(shù)越大,視野范圍越小。實(shí)驗(yàn)二  檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一P18)一、實(shí)驗(yàn)原理:某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1可溶性還原糖(如葡萄糖、果

3、糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。葡萄糖+ Cu(OH)2  葡萄糖酸 + Cu2O(磚紅色)+ H2O,即Cu(OH)2被還原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍(lán)色。3蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)二 實(shí)驗(yàn)材料1做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因?yàn)榻M織的顏色較淺,易于觀察。)2做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實(shí)驗(yàn)前

4、一般要浸泡34小時(shí)(也可用蓖麻種子)。3做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1. 可溶性糖的鑒定a.應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲(chǔ)存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時(shí),生成的Cu(OH)2在7090下分解成黑色CuO和水;b. 切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測(cè)。甲、乙液分別加入時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無Cu(OH)2生成。2. 蛋白質(zhì)的鑒定a. A液和B液也要分開配制,儲(chǔ)存。鑒定時(shí)先加A液后加B液;先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)致Cu2+

5、變成Cu(OH)2沉淀,而失效。b. CuSO4溶液不能多加;否則CuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色。c. 蛋清要先稀釋;如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。3.斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別:斐林試劑雙縮脲試劑試劑的成分0.1g/mLNaOH溶液0.1g/mLNaOH溶液(雙縮脲試劑A)0.05g/mLCuSO4溶液0.01g/mLCuSO4溶液(雙縮脲試劑B)是否混合混合后再滴加先加雙縮脲試劑A后加雙縮脲試劑B是否加熱水浴加熱不加熱 *考點(diǎn)提示: (1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些? 葡萄糖、果糖、麥

6、芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。 (2)還原性糖植物組織取材條件? 含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。 (3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響? 加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。 (4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用? 混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。 (5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序?yàn)椋?淺藍(lán)色 棕色 磚紅色 (6)花生種子切片為何要?。?只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。 (7)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)

7、,若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么? 切片的厚薄不均勻。 (8)脂肪鑒定中乙醇作用? 洗去浮色。 (9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的?怎樣通過對(duì)比看顏色變化? 不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對(duì)比。實(shí)驗(yàn)三:觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布(必修一P26)實(shí)驗(yàn)原理:1甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色,吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。2鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色體中的DNA

8、和蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合。分布:真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中,線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。 過程:制片水解沖洗涂片染色觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色. 體驗(yàn)制備細(xì)胞膜的方法(必修一P40)實(shí)驗(yàn)材料:人和其他哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器,用這樣的紅細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料就只有細(xì)胞膜一種膜結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)四:通過模擬實(shí)驗(yàn)探究膜的透性(必修一P60)在一個(gè)長(zhǎng)頸漏斗的漏斗口外密封上一層玻璃紙,往漏斗內(nèi)注入蔗糖溶液,然后將漏斗浸入盛有清水的燒杯中,使漏斗管內(nèi)外的液面高度相等。過一段時(shí)間后,漏斗內(nèi)液面上升。玻璃紙(又叫賽璐玢)是一種半透膜

9、,水分子可以透過它,而蔗糖分子則不能。討論:1.漏斗管內(nèi)的液面為什么會(huì)升高?由于單位時(shí)間內(nèi)透過玻璃紙進(jìn)入長(zhǎng)頸漏斗的水分子數(shù)量多于從長(zhǎng)頸漏斗滲出的水分子數(shù)量,使得管內(nèi)液面升高。2.如果用一層紗布代替玻璃紙,漏斗管內(nèi)的液面還會(huì)升高嗎?用紗布代替玻璃紙時(shí),因紗布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不會(huì)升高。3.如果燒杯中不是清水,而是同樣濃度的蔗糖溶液,結(jié)果會(huì)怎樣?半透膜兩側(cè)溶液濃度相等時(shí),單位時(shí)間內(nèi)透過半透膜進(jìn)入長(zhǎng)頸漏斗的水分子數(shù)量等于滲出水分子數(shù)量,液面不會(huì)升高。實(shí)驗(yàn)五:用高倍顯微鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一P47)一 實(shí)驗(yàn)原理:1.葉綠體的辨認(rèn)依據(jù):葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球

10、形。2.線粒體辨認(rèn)依據(jù):線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。3.健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料,可以使活細(xì)胞中線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色二 實(shí)驗(yàn)材料:觀察葉綠體時(shí)選用:蘚類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個(gè)小葉直接制片,所以作為實(shí)驗(yàn)的首選材料。若用菠菜葉作實(shí)驗(yàn)材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因?yàn)楸砥ぜ?xì)胞不含葉綠體。三 討論1.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體,是不是靜止不動(dòng)的?為什么?答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運(yùn)動(dòng),這種運(yùn)動(dòng)能隨時(shí)改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能

11、有什么關(guān)系?答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。實(shí)驗(yàn)六 觀察植物細(xì)胞的吸水和失水(必修一P61“探究”)觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原一 實(shí)驗(yàn)原理:1質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過滲透作用而失水,細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁分離。2質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞就會(huì)通過滲透作用而吸水,外界溶液中

12、的水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。二  實(shí)驗(yàn)材料和方法:紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因?yàn)橐号莩首仙?,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對(duì)細(xì)胞無毒害作用。質(zhì)壁分離的方法(引流法):制作洋蔥鱗片葉外表皮的臨時(shí)裝片。然后,從蓋玻片的一側(cè)滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在蓋玻片的另一側(cè)用吸水紙吸引。這樣重復(fù)幾次即可。    質(zhì)壁分離復(fù)原的方法:改用清水實(shí)驗(yàn)。1、條件:細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度差,活細(xì)胞,大液泡 2、材料:紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞(具紫色

13、大液泡),質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。 3、步驟:制作洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片觀察蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離)蓋玻片一側(cè)滴清水, 另一側(cè)用吸水紙吸引觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原) 4、結(jié)論: 細(xì)胞外溶液濃度 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度,細(xì)胞失水 質(zhì)壁分離 細(xì)胞外溶液濃度 細(xì)胞內(nèi)溶液濃度,細(xì)胞吸水 質(zhì)壁分離復(fù)原 知識(shí)概要:制片 觀察 加液 觀察 加水 觀察 考點(diǎn)提示: (1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦? 紫色的洋蔥有紫色的大液泡,便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈,使用平面鏡,使視野變暗些。 (2)洋蔥表皮應(yīng)撕還是削?為何?

14、 表皮應(yīng)撕不能削,因?yàn)橄鞯谋砥ね瘛?(3)植物細(xì)胞為何會(huì)出現(xiàn)質(zhì)壁分離? 動(dòng)物細(xì)胞會(huì)嗎? 當(dāng)細(xì)胞失去水分時(shí),其原生質(zhì)層的伸縮性大于細(xì)胞壁的伸縮性;動(dòng)物細(xì)胞不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離,因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁。 (4)質(zhì)壁分離時(shí),液泡大小和顏色的變化?復(fù)原時(shí)呢? 細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí),液泡變小,紫色加深;當(dāng)細(xì)胞質(zhì)壁分離復(fù)原時(shí),液泡變大,紫色變淺。 (5)若發(fā)生質(zhì)壁分離后的細(xì)胞,不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原,其原因是什么? 細(xì)胞已經(jīng)死亡(可能是外界溶液濃度過大,細(xì)胞失水過多或質(zhì)壁分離時(shí)間過長(zhǎng)) (6)高倍鏡使用前,裝片如何移動(dòng)? 若要把視野中上方的物像移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向上移動(dòng)。若要把視野中左方的物像

15、移到視野的正中心,則要將裝片繼續(xù)向左方移動(dòng),因?yàn)轱@微鏡視野 中看到的是倒像。 (7)換高倍物鏡后,怎樣使物像清晰?視野明暗度會(huì)怎樣變化?如何調(diào)亮?換高倍物鏡后,應(yīng)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋使物像變得清晰;視野會(huì)變暗,可調(diào)大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。 (8)所用目鏡、物鏡的長(zhǎng)度與放大倍數(shù)的關(guān)系? 目鏡越長(zhǎng),放大倍數(shù)越?。晃镧R越長(zhǎng),放大倍數(shù)越大。 (9)物像清晰后,物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數(shù)的關(guān)系? 物鏡與載玻片之間的距離越小,放大倍數(shù)越大。 (10)總放大倍數(shù)的計(jì)算方法?放大倍數(shù)具體指面積的放大倍數(shù)還是長(zhǎng)度的放大倍數(shù)? 總放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積;放大倍數(shù)是指細(xì)小物體長(zhǎng)

16、度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù)。 (11)放大倍數(shù)與視野中細(xì)胞大小、多少、視野明暗的關(guān)系? 放大倍數(shù)越大,視野中細(xì)胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。 (12) 更換目鏡,若異物消失,則異物在目鏡上;更換物鏡,若異物消失,則異物在物鏡上、移動(dòng)載玻片,若異物移動(dòng),則異物在載玻片上。 (13)怎樣利用質(zhì)壁分離現(xiàn)象來測(cè)定植物細(xì)胞液的濃度? 配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液 分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細(xì)胞的臨時(shí)裝片 用顯微鏡觀察某植物細(xì)胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。某植物細(xì)胞液的濃度就介于不能引起質(zhì)壁分離的濃度和能引起質(zhì)壁分離的濃度之間。三  討論   1如果將上述表皮細(xì)胞浸潤(rùn)在與細(xì)胞液濃度相

17、同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?答:表皮細(xì)胞維持原狀,因?yàn)榧?xì)胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?答:不會(huì)。因?yàn)榧t細(xì)胞不具細(xì)胞壁。實(shí)驗(yàn)七 比較過氧化氫在不同條件下的分解(必修一P78)探究影響酶活性的因素一 實(shí)驗(yàn)原理鮮肝提取液中含有過氧化氫酶,過氧化氫酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。經(jīng)計(jì)算,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。二 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.不讓H2O2接觸皮膚,H2O2有一定的腐蝕性2

18、. 不可用同一支滴管,由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性3.肝臟研磨液必須是新鮮的,因?yàn)檫^氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過久,可受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低4.肝臟研磨要充分,研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來,增加酶與底物的接觸面積。實(shí)驗(yàn)七 影響酶活性的條件(必修一P83)實(shí)驗(yàn)原理:1淀粉遇碘后,形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖,麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約60實(shí)驗(yàn)八 探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91) 實(shí)驗(yàn)原理:1.酵母菌是一種單細(xì)胞真菌,在有氧和無

19、氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。方程式(略)2.CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時(shí)間長(zhǎng)短,可以檢測(cè)酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。3.橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),在酸性條件下,變成灰綠色。注意事項(xiàng):增加水中氧氣的方法:用橡皮球或氣泵通入空氣,并用NaOH溶液除去空氣中的CO2實(shí)驗(yàn)九  葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)一  實(shí)驗(yàn)原理與方法1色素的提取原理:葉綠體中的色素是有機(jī)物,不溶于水,易溶于無水乙醇等有機(jī)溶劑中。提取

20、方法:用無水乙醇等能提取色素。2色素分離的原理:層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。葉綠體中的色素不只一種,它們都能溶解在層析液中。然而,它們?cè)趯游鲆褐械娜芙舛炔煌?,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢。分離方法:紙層析法。用毛細(xì)吸管在濾紙條的下端沿鉛筆線劃一條濾液細(xì)線,待濾液干后再劃一兩次,然后將濾紙條插入層析液中(濾液細(xì)線不能接觸層析液)。分離結(jié)果:濾紙條上從上到下出現(xiàn)四條色素帶:橙黃色(最窄,胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍(lán)綠色(最寬,葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。胡蘿卜素與葉黃素之間距離最大,葉綠素a與葉綠素b之間距離最小。二 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1.加SiO2

21、為了研磨得更充分。2.加CaCO3防止研磨時(shí)葉綠素受到破壞。因?yàn)槿~綠素含鎂,可被細(xì)胞液中的有機(jī)酸產(chǎn)生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡破壞釋放的有機(jī)酸,防止葉綠體被破壞。3.加無水乙醇是因?yàn)槿~綠體色素易溶于無水乙醇等有機(jī)溶劑。三 實(shí)驗(yàn)討論: 1濾紙條上的濾液細(xì)線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細(xì)線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會(huì)溶解在層析液中,實(shí)驗(yàn)就會(huì)失敗。2提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關(guān)鍵是:葉片要新鮮、濃綠;研磨要迅速、充分;濾液收集后,要及時(shí)用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關(guān)鍵是:一是濾液細(xì)線要細(xì)且直,而且要重復(fù)劃幾次

22、;二是層析液不能沒及濾液線。實(shí)驗(yàn)十 觀察有絲分裂 1、材料:洋蔥根尖(蔥,蒜) 2、步驟:(一)洋蔥根尖的培養(yǎng) (二)裝片的制作 制作流程:解離漂洗染色制片 1. 解離: 藥液: 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1 : 1混合液). 時(shí)間: 35min .目的: 使組織中的細(xì)胞相互分離開來. 2. 漂洗: 用清水漂洗約3min. 目的: 洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色. 3. 染色: 用質(zhì)量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3 5min 目的: 使染色體著色,利于觀察. 4. 制片: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把

23、根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按壓載玻片. 目的: 使細(xì)胞分散開來,有利于觀察. (三)觀察 1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。 2、換高倍鏡下觀察:分裂中期分裂前、后、末期分裂間期。(注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn))。其中,處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。 *考點(diǎn)提示: (1)培養(yǎng)根尖時(shí),為何要經(jīng)常換水? 增加水中的氧氣,防止根進(jìn)行無氧呼吸造成根的腐爛。 (2)培養(yǎng)根尖時(shí),應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么? 應(yīng)選用舊洋蔥,因?yàn)樾卵笫[尚在休眠,不易生根。 (3)為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時(shí)間是何時(shí)?為何?

24、 因?yàn)楦夥稚鷧^(qū)的細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂;上午10時(shí)到下午2時(shí);因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞分裂活躍。 (4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時(shí)為何要再加一塊載玻片? 解離是為了使細(xì)胞相互分離開來,壓片是為了使細(xì)胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破。 (5)若所觀察的組織細(xì)胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么? 壓片時(shí)用力過大。 (6)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎? 分解和溶解細(xì)胞間質(zhì);不能,而硝酸可代替。 (7)為何要漂洗? 洗去鹽酸便于染色。 (8)細(xì)胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么? 染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。 (9)若所觀察的細(xì)胞各部分全是紫色,其原因是什么? 因?yàn)樵诟?/p>

25、尖只有分生區(qū)的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂;分生區(qū)的特點(diǎn)是:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài);不能用高倍鏡找分生區(qū),因?yàn)楦弑剁R所觀察的實(shí)際范圍很小,難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。 (10)為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點(diǎn)是什么?用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么? 染液濃度過大或染色時(shí)間過長(zhǎng)。 (11)分生區(qū)細(xì)胞中,什么時(shí)期的細(xì)胞最多?為什么? 間期;因?yàn)樵诩?xì)胞周期中,間期時(shí)間最長(zhǎng)。 (12)所觀察的細(xì)胞能從中期變化到后期嗎?為什么? 不能,因?yàn)樗^察的細(xì)胞都是停留在某一時(shí)期的死細(xì)胞。 (13)觀察洋蔥表皮細(xì)胞能否看到染色體?為什么? 不能,因?yàn)檠笫[表皮細(xì)胞一般不分裂。 (14)若觀察時(shí)不能看到染色體,其原因是什

26、么? 沒有找到分生區(qū)細(xì)胞;沒有找到處于分裂期的細(xì)胞;染液過??;染色時(shí)間過短。實(shí)驗(yàn)十一  細(xì)胞大小與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)年P(guān)系(必修一P110)模擬探究細(xì)胞表面積與體積的關(guān)系一實(shí)驗(yàn)原理:用瓊脂塊模擬細(xì)胞。瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(zhì)(NaOH)在瓊脂塊中的擴(kuò)散速度。方法:用含酚酞的瓊脂塊模擬細(xì)胞。2、現(xiàn)象:NaOH和酚酞相遇呈紫紅色。二.結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小;NaOH擴(kuò)散的體積與整個(gè)瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。實(shí)驗(yàn)十二 觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂 1、目的要求:通過觀察蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片,識(shí)別減數(shù)分裂不同階段的染色體的形態(tài)、位

27、置和數(shù)目,加深對(duì)減數(shù)分裂過程的理解。 2、材料用具:蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片,顯微鏡。 3、方法步驟: (1)在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片,識(shí)別初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞和精細(xì)胞。 (2)先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細(xì)胞,再在高倍鏡下仔細(xì)觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目。 4、討論:(1)如何判斷視野中的一個(gè)細(xì)胞是處于減數(shù)第一次分裂還是減數(shù)第二次分裂? (2)減數(shù)第一次分裂與減數(shù)第二次分裂相比,中期細(xì)胞中的染色體的不同點(diǎn)是什么?末期呢? 實(shí)驗(yàn)十三 低溫誘導(dǎo)染色體加倍 1、原理:用低溫處理植物分生組織細(xì)胞,能夠抑制紡錘體的形成,以致影響染

28、色體被拉向兩極,細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞,于是,植物細(xì)胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。 2、方法步驟: (1)洋蔥長(zhǎng)出約1cm左右的不定根時(shí),放入冰箱的低溫室內(nèi)(4),誘導(dǎo)培養(yǎng)36h。 (2)剪取誘導(dǎo)處理的根尖約0.51cm,放入卡諾氏液中浸泡0.51 h,以固定細(xì)胞的形態(tài),然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精沖洗2次。 (3)制作裝片:解離漂洗染色制片 (4)觀察,比較:視野中既有正常的二倍體細(xì)胞,也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細(xì)胞. 3、討論:秋水仙素與低溫都能誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍,這兩種方法在原理上有什么相似之處? 實(shí)驗(yàn)十四 調(diào)查常見的人類遺傳病 1、 要求:調(diào)查的群體應(yīng)足夠大;選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳

29、病。如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等. 2、 方法: 分組調(diào)查,匯總數(shù)據(jù),統(tǒng)一計(jì)算. 3、計(jì)算公式:某種遺傳病的發(fā)病率= (患病人數(shù)/被調(diào)查人數(shù))×100% 4、討論: 所調(diào)查的遺傳病的遺傳方式, 發(fā)病率是否與有關(guān)資料相符, 分析原因. 實(shí)驗(yàn)十五 探究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插枝條生根的作用 1、常用的生長(zhǎng)素類似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等 2、方法: 浸泡法:把插條的基部浸泡在配置好的溶液中,深約3cm,處理幾小時(shí)或一天。處理完畢就可以扦插了。這種處理方法要求溶液的濃度較低,并且最好是在遮蔭和空氣濕度較高的地方進(jìn)行處理。 沾

30、蘸法:把插條的基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。 3、預(yù)實(shí)驗(yàn):先設(shè)計(jì)一組濃度梯度較大的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行探索,在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)細(xì)致的實(shí)驗(yàn). 4、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的幾項(xiàng)原則: 單一變量原則(只有溶液的濃度不同);等量原則(控制無關(guān)變量,即除溶液的濃度不同外,其他條件都相同);重復(fù)原則(每一濃度處理35段枝條) ;對(duì)照原則(相互對(duì)照、空白對(duì)照);科學(xué)性原則 實(shí)驗(yàn)十六 模擬尿糖的檢測(cè)1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、檢測(cè)方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙 3、結(jié)果:(用斐林試劑檢測(cè))試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。 4、分

31、析:因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原糖,與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀,而正常人尿液中無還原糖,所以沒有發(fā)生反應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)十七 探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化 1、培養(yǎng)酵母菌(溫度、氧氣、培養(yǎng)液):可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng) 2、計(jì)數(shù):血球計(jì)數(shù)板(2mm×2mm方格,培養(yǎng)液厚0.1mm) 3、推導(dǎo)計(jì)算 4、討論:根據(jù)7天所統(tǒng)計(jì)的酵母菌種群數(shù)量畫出酵母菌種群數(shù)量的增長(zhǎng)曲線;推測(cè)影響影響酵母菌種群數(shù)量變化的因素。 實(shí)驗(yàn)十八 土壤中動(dòng)物類群豐富度的研究 1、豐富度的統(tǒng)計(jì)方法通常有兩種:記名計(jì)算法和目測(cè)估計(jì)法 記名計(jì)算法:指在一定面積的樣地中,直接數(shù)出各種群的個(gè)體數(shù)目,這一般用于個(gè)體較大,種群數(shù)量有

32、限的群落。 目測(cè)估計(jì)法:按預(yù)先確定的多度等級(jí)來估計(jì)單位面積上個(gè)體數(shù)量的多少。等級(jí)的劃分和表示方法有:“非常多、多、較多、較少、少、很少”等等。 2、設(shè)計(jì)數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計(jì)表,分析所搜集的數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)十九 探究水族箱(或魚缸)中群落的演替要求:(1)水族箱必須是密封的,且是透明的,放置于室內(nèi)通風(fēng)、光線良好的地方,但要避免陽(yáng)光直接照射。 (2)組成成分:非生物成分、生產(chǎn)者、消費(fèi)者和分解者 (3)各生物成分的數(shù)量不宜過多,以免破壞食物鏈 實(shí)驗(yàn)二十 選修三實(shí)驗(yàn) DNA的粗提取與鑒定【復(fù)習(xí)目標(biāo)】本課題通過嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNA進(jìn)行粗提取,了解DNA的物理化學(xué)性質(zhì),理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理。

33、【復(fù)習(xí)重點(diǎn)與難點(diǎn)】復(fù)習(xí)重點(diǎn):DNA的粗提取和鑒定方法。復(fù)習(xí)難點(diǎn):DNA的粗提取和鑒定方法。【知識(shí)回顧】一、實(shí)驗(yàn)原理1、提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對(duì)于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA、 蛋白質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。1) DNA的溶解性 思考題1:DNA在氯化鈉溶液中的溶解度有什么特點(diǎn)?對(duì)此有什么應(yīng)用? DNA的溶解度隨氯化鈉的濃度變化而變化,DNA在0.14mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低。利用這一原理,選擇適當(dāng)?shù)柠}溶液就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀。思考題2:利用什么原理

34、來將DNA與蛋白質(zhì)分離開? DNA不溶于灑精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于灑精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。2)DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對(duì)DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫,而DNA在80以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對(duì)DNA沒有影響。3)DNA的鑒定 思考題3:依據(jù)什么原理來鑒定DNA? 在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、實(shí)驗(yàn)材料的選取 凡是含有DNA的生物材料都可以考慮,但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織,成功的可能性更大。在下面的生物材料中選

35、取適合的實(shí)驗(yàn)材料:魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌2、 破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液 1) 制備和提取細(xì)胞核物質(zhì):動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例。在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,得到雞血細(xì)胞液。過濾后收集研磨液;如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和 食鹽 ,進(jìn)行充分的攪拌和研磨。過濾后收集研磨液。思考:為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂?答:蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹裂,再加上

36、攪拌的機(jī)械作用,就加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?答:洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。如果研磨不充分,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響?答:研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分?答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。2)溶解細(xì)胞核的DNA:向收集的濾液中加入2mol/L的氯化鈉溶液,攪拌使DNA呈溶解狀態(tài)。3、去除濾液中的雜質(zhì) 方案一的原理

37、是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液濃度的嘗試去除雜質(zhì)。具體做法是:在濾液中加入NaCl,使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2mol/L,過濾除去不溶的雜質(zhì),再調(diào)節(jié)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L,析出DNA,過濾去除溶液中的雜質(zhì);方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解DNA。具體做法:直接在濾液中加入嫩肉粉,反應(yīng)1015min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì);方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。具體做法:將濾液放在6075的恒溫水浴箱中保溫1015min注意嚴(yán)格控制溫度范圍。思考:為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?答:用高鹽濃度的溶液

38、溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。方案二與方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與DNA分離。4、DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液,靜置23min,溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為0.0

39、15mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝?,將試管置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)。三、實(shí)驗(yàn)案例:以雞血細(xì)胞DNA的提取和鑒定為例:1制備雞血細(xì)胞液:在雞血中加入質(zhì)量濃度為01g/mL的檸檬酸鈉溶液,離心處理;制備雞血細(xì)胞液時(shí),要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因:制備雞血細(xì)胞液時(shí),要在新鮮的雞血中加入抗凝劑檸檬酸鈉,防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發(fā)生反應(yīng),生成檸檬酸鈣絡(luò)合物,血漿中游離的Ca2+大大減少,血液便

40、不會(huì)凝固,因?yàn)殡u血紅細(xì)胞,白細(xì)胞都有細(xì)胞核,DNA主要存在于細(xì)胞核中,所以在離心或靜置沉淀后,要棄出上層清液血漿。2提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì):向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水,攪拌、過濾;思考1:加入蒸餾水的目的是什么?為什么能達(dá)到此目的? 加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA;蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi),使血細(xì)胞脹裂。3溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA:加入2mol/L的氯化鈉溶液,攪拌,使DNA呈溶解狀態(tài);4析出含DNA的黏稠物:加入蒸餾水,用玻璃棒攪拌;思考題2:此時(shí)加入蒸餾水的目的是什么? 使氯化鈉溶液濃度接近014mol/L,使DNA最大限度地

41、析出。5濾取含DNA的黏稠物:過濾;思考題3:這次過濾與上次過濾的目的一樣嗎?為什么? 不一樣;這次過濾是為了去除不溶于氯化鈉溶液的雜質(zhì),而上次過濾是為了去除破裂的細(xì)胞膜等物質(zhì)。6將DNA的黏稠物再溶解:加入2mol/L的氯化鈉溶液,攪拌,使DNA呈溶解狀態(tài);7過濾含有DNA的氯化鈉溶液:過濾;思考題4:這一步驟的目的是什么? 除去含有DNA濾液中的雜質(zhì)思考題5:為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)? 用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。8提

42、取含雜質(zhì)較少的DNA:加入冷卻的95%的酒精,攪拌;思考題6:這一步驟的目的是什么? 去除溶于酒精的雜質(zhì)思考題7:為什么加入的酒精需要冷卻的?可抑制核酸水解酶的活性,防止降解DNA;降低分子的運(yùn)動(dòng),易于形成沉淀析出;低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂。9DNA的鑒定:取兩支試管,各加入0015mol/L的氯化鈉溶液5mL,一支加入提取的DNA,兩支各加入4mL的二苯胺試劑?;旌暇鶆蚝笾糜诜兴屑訜?。四、操作提示1、以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉,防止 血液凝固。2、加入洗滌劑后,動(dòng)作要輕緩、 柔和 ,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻

43、璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要輕緩,以免 加劇DNA分子的斷裂 ,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3、二苯胺試劑要 現(xiàn)配現(xiàn)用 ,否則會(huì)影響鑒定的效果。4、DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當(dāng)NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時(shí),隨濃度升高,DNA的溶解度升高。5、盛放雞血細(xì)胞液的容器,最好是塑料容器。雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于細(xì)胞內(nèi)DNA的含量本來就比較少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就會(huì)更少。因此,實(shí)驗(yàn)過程中最好使用塑料的燒杯和試管,這樣可以減少提取過程的DNA的損失。6、提

44、取DNA的第一步是材料的選取,其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料,否則會(huì)由于實(shí)驗(yàn)過程中或多或少的損失而造成檢測(cè)的困難;第二步是DNA的釋放和溶解,這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵,要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的DNA全部溶解;第三步是DNA的純化,即根據(jù)DNA的溶解特性、對(duì)酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與雜質(zhì)分開;最后一步是對(duì)DNA進(jìn)行鑒定,這是對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測(cè)。7、在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時(shí),注意動(dòng)作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。典例解析本實(shí)驗(yàn)中有三次過濾:過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液過濾含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液

45、過濾溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次過濾分別為了獲得( )A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA粘稠物、含DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA粘稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液答案:A解析:用蒸餾水稀釋雞血細(xì)胞液,使血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜破裂,釋放出核物質(zhì),此時(shí)過濾只能得到含DNA和其他物質(zhì)如蛋白質(zhì)的濾液,這種濾液必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)中其他步驟得相繼處理,方能得到較純的DNA。DNA在0.13mol/LNaCl溶液中溶解度最低,成絲狀粘稠物,可經(jīng)過濾留在紗布上。 【習(xí)題鞏固】一、選擇題(10個(gè))1.在研究

46、DNA的基因樣本前,采集來的血樣需要蛋白水解酶處理,然后用有機(jī)溶劑除去蛋白質(zhì)。用蛋白水解酶處理血樣的目的是( )A.除去血漿中的蛋白質(zhì) B.除去染色體上的蛋白質(zhì) C.除去血細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)D.除去血細(xì)胞中的所有的蛋白質(zhì),使DNA釋放,便于進(jìn)一步提純2與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述,不正確的是( )A.操作時(shí)緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度 B.在操作A時(shí),用玻璃棒輕緩攪拌,以保證DNA分子完整 C.加蒸餾水可同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出D.當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí),此時(shí)NaCl的濃度相當(dāng)于0.14mol/L3洗滌劑能夠瓦解( ),但對(duì)DNA沒有影響。A.細(xì)胞壁 B.細(xì)胞膜 C.細(xì)

47、胞核 D.細(xì)胞質(zhì)4在沸水浴的條件下,DNA遇( )會(huì)被染成藍(lán)色。A.斐林試劑 B.蘇丹染液 C.雙縮脲試劑 D.二苯胺5在DNA提取過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是( )A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA的損失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷6下列操作中,對(duì)DNA的提取量影響最小的是( )A.使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,放出DNA等核物質(zhì)B.攪拌時(shí),要使用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪拌C.在“析出DNA粘稠物”時(shí),要緩緩加蒸餾水,直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA時(shí),要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻E在DNA的溶解和再溶解時(shí),要充分?jǐn)嚢?DNA的粗提取中,將與濾

48、液體積相等的、冷卻的( ),靜置23min,溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物。A.09%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液 C.質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%的HCl D.體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液8.以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),需要向血液中加入( ),防止血液凝固。A.醋酸鈉 B.龍膽紫 C.檸檬酸鈉 D.醋酸洋紅9.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是( )A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解雜質(zhì)的速度 C.減少DNA的溶解度,加快DNA析出 D.減小雜質(zhì)的溶解度,加快雜質(zhì)的析出10.去除濾液中的雜質(zhì)時(shí),直接在濾液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的( )分解蛋白質(zhì)。A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.腸肽酶二、非選擇題(3個(gè))1提取雞血中DNA時(shí),要除去血液中的上清液,這是因?yàn)槭裁矗?填寫本實(shí)驗(yàn)完成下列實(shí)驗(yàn)操作時(shí)所用試劑。提取雞血細(xì)胞

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