
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文檔簡介
1、生物實驗匯總、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、呈像原理、放大倍數(shù)計算方法一、目鏡無旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越??;物鏡有旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越大。放大倍數(shù):目鏡和物鏡二者放大倍數(shù)的乘積)注:顯微鏡放大倍數(shù)是指直徑倍數(shù),即長度和寬度,而不是面積。二、顯微鏡的使用:1 .安放。顯微鏡放置在桌前略偏左,距桌緣 810cm處2 .高倍鏡的轉(zhuǎn)換。順序:移裝片一轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器一調(diào)反光鏡或光圈一調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋注:換高倍物鏡時只能移動轉(zhuǎn)換器,換鏡后,只準(zhǔn)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦和反光鏡(或光圈)。6 .污點判斷:1)污點隨載玻片的移動而移動,則位于載玻片上;2)污點不隨載玻片移動,換目鏡后消失,則位于目鏡;換物鏡后消失,則位于
2、物鏡;3)污點不隨載玻片移動,換鏡后也不消失,則位于反光鏡上。7 .完畢工作。使用完畢后,取下裝片,轉(zhuǎn)動鏡頭轉(zhuǎn)換器,逆時針旋出物鏡,旋 進鏡頭盒;取出目鏡,插進鏡頭盒,蓋上。把顯微鏡放正。注:擦拭鏡片用拭鏡紙實驗一:觀察 DNA RNAft細(xì)胞中的分布(必修一 P26)二.實驗原理:1 .甲基綠和叱羅紅兩種染色劑對 DNAffi RNA勺親和力不同,甲基綠使 DNAg現(xiàn) 綠色,叱羅紅使RNAg現(xiàn)紅色。利用甲基綠、叱羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色,可 以顯示DNAF口 RNAft細(xì)胞中的分布。2 .鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進入細(xì)胞,同時使染色休中的DNA 和蛋白質(zhì)分離,有利于DNAt染色
3、劑結(jié)合。方法步驟:操作步驟注意問題解釋取口腔上 皮細(xì)胞制 片載玻片要潔凈,除滴質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為0.9%的NaCl溶液用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi) 側(cè)壁上輕刮幾卜取細(xì)胞將載玻片在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果保持細(xì)胞原啟形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失敗固定裝片水解將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 8%勺鹽酸溶液中,用300C水浴保 溫 5min改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色 劑進入細(xì)胞,促進染色體的 DNA 與蛋白質(zhì)分離而被染色沖洗涂片用蒸儲水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸染色滴2滴叱羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、 色澤淺的區(qū)域,移至視野中央, 調(diào)節(jié)
4、清晰后才換用高倍物鏡觀察使觀察效果最佳實驗二 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一 P18)一.實驗原理:某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。1 .可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,加熱可生 成磚紅色的Cu 2O沉淀。2 .脂肪可以被蘇丹田染液染成橘黃色 (或被蘇丹IV染液染成紅色)。淀粉遇碘變 藍(lán)色。3 .蛋白質(zhì)與雙縮月尿試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。二.實驗材料1 .做可溶性還原性糖鑒定實驗,應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)2 .做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實
5、驗前一般 要浸泡34小時(也可用篦麻種子)。3 .做蛋白質(zhì)的鑒定實驗,可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。四、實驗試劑斐林試劑(包括甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mLNaOHS液和乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mLCuSO4§液)、蘇丹田或蘇丹IV染液、雙縮月尿試劑(包括A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mLNaOHS液和B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4§液)、體積分?jǐn)?shù)為50%勺酒 精溶液,碘液、蒸儲水。五、方法步驟:(一)可溶性糖的鑒定操作方法注意問題解釋1.制備組織樣液。(去皮、切塊、研磨、過 濾)蘋果或梨組織液必須臨時 制備。因蘋果多酚氧化酶含量 高,組織液很易被氧化
6、 成褐色,將產(chǎn)生的顏色 掩蓋。2.取1支試管,向試管 內(nèi)注入2mLffl織樣液。3.向試管內(nèi)注入1mL新 制的斐林試劑,振揚。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、 乙液分別配制、儲存,使用 前才將甲、乙液等量混勻成 斐林試劑;切勿將甲液、乙液分別加入 蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、 乙液混合保存時,生成 的 Cu ( OH ) 2 在 70900c下分解成黑色 CuOffi水;甲、乙液分別加入時可 能會與組織樣液發(fā)生反應(yīng),無Cu(OH)2 生 成。4.試管放在盛有 50-650C溫水的大燒杯 中,加熱約2分鐘,觀察 到溶液顏色:淺藍(lán)色 一 棕色一磚紅色(沉淀)最好用試管夾夾住試管上 部,使
7、試管底部不觸及燒杯 底部,試管口不朝向?qū)嶒?者。也可用酒精燈對試管直接 加熱。防止試管內(nèi)的溶液沖出 試管,造成燙傷;縮短實驗時間。(二)脂肪的鑒定操作方法注意問題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一 些子葉薄片,將薄片放在載玻 片的水滴中,用吸水紙吸去裝 片中的水。干種子要浸泡34 小時,新花生的浸 泡時間可縮短。因為浸泡時間短,不易切 片,浸泡時間過長,組織較 軟,切卜的薄片不易成形。 切片要盡可能薄些,便于觀 察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹山 或蘇丹IV染液,染色1分鐘。染色時間不宜過 長。用吸水紙吸去薄片周圍染液, 用50%酉精洗去浮色,吸去酒 精。酒精用于洗去浮色,不洗去 浮色,會影響對橘黃色
8、脂肪 滴的觀察。同時,酒精是脂 溶性溶劑,可將花生細(xì)胞中 的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精, 滴上12滴蒸儲水,蠱上蓋坡 片。滴上清水可防止蓋蓋玻片 時產(chǎn)生氣泡。低倍值下找到花生子葉薄片的 最溥處,口看到細(xì)胞中后染成 橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙 醇中。、蛋白質(zhì)的鑒定操作方法注意問題解釋制備組織樣液。(浸泡、去皮研磨、過 濾。)黃豆浸泡1至2天,容易 研磨成漿,也可購新鮮豆 漿以節(jié)約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml于試 管中,加入雙縮胭試劑A, 搖勻;再加入雙縮月尿試劑 B液34滴,搖勻,溶液 變紫色。A液和B液也要分開配制, 儲存。鑒定時先加A液
9、后 加B液。CuSO給液/、能多加。先力口 NaOH容液,為Cu2+ 與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個 堿性的環(huán)境。A、B液混裝 或同時加入,會導(dǎo)致Cu2+ 變成Cu ( OH ) 2沉淀, 而失效。否則CuSO4勺藍(lán)色會遮蓋 反應(yīng)的真實顏色??捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中 蛋清粘在試管壁,與雙縮 月尿試劑反應(yīng)后會粘固在 試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)/、容 易徹底,并且試管也不易 洗干凈。附:淀粉的檢測和觀察 用試管取2ml待測組織樣 液,向試管內(nèi)滴加2滴碘 液,觀察顏色變化。碘液/、要滴太多以免影響顏色觀察實驗三 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一 P47)一.實驗原理:葉綠體的辨認(rèn)依據(jù):
10、葉綠體是綠色的,呈扁平的橢圓球形或球形。線粒體辨認(rèn)依據(jù):線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠染液是專一性染線粒體的活細(xì)胞染料,可以使活細(xì)胞中線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色。二.實驗材料:觀察葉綠體時選用:薛類的葉、黑藻的葉。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體清楚,可取整個小葉直接制片,所以作為實驗的首選材料。若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細(xì)胞不含 葉綠體。四.方法步驟:步驟注意問題分析1.制片。用銀子取一片 黑藻的小葉,放入載玻片 的水滴中,蓋上蓋玻片。制片和鏡檢時,臨時裝片 中的葉片不能放干了,要 隨時保持宿水狀態(tài)否則細(xì)胞或葉綠體失水 收縮,將影響
11、對葉綠體形 態(tài)和分布的觀察。2 .低倍值下找到葉片細(xì) 胞3.高倍值下觀察葉綠體 的形態(tài)和分布4.制作人的口腔上皮細(xì) 胞臨時裝片在潔凈載玻片中央外 滴健那綠染液一用牙簽 取碎屑玻片5.觀察線粒體藍(lán)綠色的是線粒體,細(xì)胞 質(zhì)接近無色。討論:1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體,是不是靜止不動的?為什么?答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動, 這種運動能隨時改 變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強光灼傷。2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關(guān)系?答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照, 完成光合作用。如葉綠體在不同光 照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下
12、面的多, 這可以接 受更多的光照。實驗四觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原(必修一 P61 “探究”)一.實驗原理:1 .質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細(xì)胞就會通過滲透作用而失水,細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中,使細(xì)胞壁和原生 質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失 水時,原生質(zhì)層就會與細(xì)胞壁分離。2 .質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,細(xì)胞就會通 過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細(xì)胞液中,整個原 生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài), 緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分 離復(fù)原。二、實驗材料:
13、紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。0.3g/ml 的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細(xì)胞無毒害作用。三、實驗步驟:步 驟注意問題分 析1.制作洋蔥表皮的臨時 裝片。在載玻片上除滴水,撕 取洋蔥鱗片葉外表皮放 在水滴中展平(也可挑取 幾條水綿放入水滴中)。蓋上蓋玻片0蓋蓋玻片應(yīng)讓 蓋玻片的一側(cè) 先觸及載玻 片,然后輕輕 放平。防止裝片產(chǎn)生氣泡。2.觀察洋蔥(或水綿) 細(xì)胞可看到:液泡大,呈紫色, 原生質(zhì)層緊貼著細(xì)胞壁。(或水綿細(xì)胞中肩帶狀 葉綠體,原生質(zhì)層呈綠 色,緊貼著細(xì)胞壁。液泡含花青素,所以液泡呈紫色。先觀察正常細(xì)胞與后面的“質(zhì)壁分 離”起對照作用。3.觀
14、察質(zhì)壁分離現(xiàn)象。從蓋玻片的一側(cè)滴入 0. 3g/ml的庶糖溶液,在 另一側(cè)用吸水紙吸引,重 復(fù)幾次。鏡檢。觀察到: 液泡由人變小,顏色由淺 變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁 分離。原生質(zhì)層與細(xì)胞壁 之間充滿蔗糖溶液。重復(fù)幾次 糖液濃度不能 過高蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度,細(xì) 胞通過滲透作用失水,細(xì)胞壁伸縮 性小原生質(zhì)層的伸縮性大,液泡和 原生質(zhì)層/、斷收縮,所以發(fā)生質(zhì)壁 分離。為了使細(xì)胞完全浸入蔗糖溶液中。 否則,細(xì)胞嚴(yán)重失水死亡,看/、到 質(zhì)壁分離的復(fù)原。4.觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離的 復(fù)原現(xiàn)象。從蓋玻片的一側(cè)滴入清 水,在另一側(cè)用吸水紙吸 弓1,重復(fù)幾次。鏡檢。觀 察到:液泡由小變大,顏 色由深變淺,原生質(zhì)
15、層恢 復(fù)原狀。發(fā)生質(zhì)壁分離 的裝片,不能 久置,要馬上 滴加清水,使 其復(fù)原。重復(fù)幾次。細(xì)胞液的濃度高于外界溶液,細(xì)胞 通過滲透作用吸水,所以發(fā)生質(zhì)壁 分離復(fù)原現(xiàn)象。因為細(xì)胞失水過久,也會死亡。為了使細(xì)胞完全浸入清水中。實驗五探究影響酶活性的因素(必修一 P7& P83)實例1:比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率)方法步驟:步驟注意問題解釋取4支潔凈試管,編號,不讓H2O2H2O2tf的腐蝕性分別加入2mL H2O2容液接觸皮膚將2號試管放在900C左 右的水浴中加熱,觀察氣 泡冒出情況,與1號對照向3號、4號試管內(nèi)分別/、口用同由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液滴入2滴FeCl
16、3溶液和2一支滴管中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準(zhǔn)滴肝臟研磨液,觀察氣泡 產(chǎn)生情況肝臟研磨確性液必須是因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過久,可新鮮的受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子 數(shù)減少,活性降低肝臟在制 成研磨液研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)的酶釋 放出來,增加酶與底物的接觸面積2-3min后,將點燃的衛(wèi)生放衛(wèi)生香現(xiàn)象:3號試管產(chǎn)生氣泡多,冒泡時間短,香分別放入3號和4號試時,動作衛(wèi)生香猛烈復(fù)燃,4號試管產(chǎn)生氣泡少,管內(nèi)液面的上方,觀察復(fù)要快,不冒泡時間長,衛(wèi)生香幾乎無變化燃情況要插到氣 泡中避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅實例2:溫度對酶活性的影響)方法步驟:操作注意問題解釋取3支試管,編上號
17、,然后 分別注入2mL可溶性淀粉 溶液另取3支試管,編上號,然 后分別注入1mL新鮮淀粉 酶溶液將裝有淀粉溶液和酶溶液 的試管分成3組,分別放入 熱水(約600。、沸水和冰 塊中,維持各自的溫度5min不能只用/、同溫 度處理淀粉溶液 或酶溶液防止混合時,由于兩種溶液的溫 度不H而使混合后溫度發(fā)生變 化,反應(yīng)溫度/、是操作者所要控 制的溫度,影響實驗結(jié)果。分別將淀粉酶溶液注入相 同溫度卜的淀粉溶液中,搖 勻后,維持各自的溫度5min保持各自溫度時 間/、能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定 時間在3支試管中各滴入1-2滴碘液,搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并碘液/、能滴加太 多防止影響實驗現(xiàn)象
18、的觀察記錄實例3: PH值對酶活性的影響操作步驟:用表格開式顯示實驗步驟:(注意操作順序不能錯)廳P加入試劑或處理方法試管1231注入新鮮的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸儲水1mL/3注入氫氧化鈉溶液/1mL/4注入鹽酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保溫5min7加入斐林試劑,邊加邊振蕩2mL2mL2mL8水浴加熱煮沸1min9觀察3支試管中溶液顏色變化變記錄實驗六葉綠體色素的提取和分離(必修一 P97)一.實驗原理:1 .葉綠體中的色素是有機物,不溶于水,易溶于丙酮等有機溶劑中,所以用丙 酮、乙醇等能提取色素。2 .層析液是一種脂溶性很強的有機溶劑。 葉綠
19、體色素在層析液中的溶解度不同, 分子量小的溶解度高,隨層析液在濾紙上擴散得快,溶解度低的隨層析液在濾紙 上擴散得慢。所以用層析法來分離四種色素。二、實驗材料:幼嫩、鮮綠的菠菜葉 三、實驗步驟:步 驟注意問題分 析1 .提取色素5克綠葉剪碎,放入研缽,加 SiO2、CaCO和 5mL內(nèi)酮(或10mL無水 乙醇)迅速、充分研磨。 (若沒后無水乙醇,也可用體積分?jǐn)?shù)為95%勺 乙醇,但要加入適量的 無水碳酸鈉,除去水分)力口 SiO2力口 CaCO3加內(nèi)酮 迅速加SiO2為了研磨得更充分。加CaCO新止研磨時葉綠素受到破壞。 因為葉綠素含鎂,可被細(xì)胞液中的有機 酸產(chǎn)生的氫代替,形成去鎂葉綠素, CaC
20、O3T中和液泡破壞釋放的有機酸, 防止葉綠體被破壞。葉綠體色素易溶于丙酮等有機溶劑。減少研磨過程葉綠素的分解,減少有毒 性的丙酮揮發(fā)。2.收集濾液漏斗基部放一單層尼龍 布,研磨倒入漏斗內(nèi)擠 壓,將濾液收集到小試 管中,用棉花塞塞住試 管口。尼龍布起過濾作用。試管口用棉花塞塞緊是為了防止丙酮 揮發(fā)。3.制備濾紙條將干燥的濾紙,順著紙紋剪成長10cm 寬1cm 的紙條,一端剪去二個干燥順著紙紋剪成 長條可吸收更多的濾液。層析時,色素分離效果好。 可使層析液同時到達濾液細(xì)線。角,并在距這一端1cm 處劃一鉛筆線。一端剪去二個 角4.劃濾液細(xì)線用毛細(xì)吸管吸取少量濾 液,沿鉛筆線劃出細(xì)、 齊、直的一條濾
21、液細(xì)線, 干后重復(fù)三次。濾液細(xì)線越 細(xì)、越齊越好。 重復(fù)三次。防止色素帶之間部分重疊。增加色素在濾紙上的附著量,實驗結(jié)果 更明顯。5.紙層析法分離色素 將3mL層析液倒入燒杯 中,將濾紙條(劃線一 端朝下)插入層析液中, 用培養(yǎng)皿蓋蓋上燒杯。層析液/、能沒 及濾紙條。短杯要皿培力 皿蓋。防止色素溶解在層析液中,層析液中的苯、丙酮、石油醴易揮發(fā)。6.觀察實驗結(jié)果 由上至卜分別為: 胡蘿卜素(橙黃色) 葉黃素(黃色) 葉綠素a (監(jiān)綠色) 葉綠素b (黃綠色)擴散最快是胡蘿卜素,擴散最慢是葉綠素b,含量最多的是葉綠素a四種色素之所以能被分離,是因為四種色素隨層析液在濾紙上的擴散速度不同。五:實驗討
22、論:1 .濾紙條上的濾液細(xì)線,為什么不能觸及層析液?答:濾紙條上的濾液細(xì)線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液 中,實驗就會失敗。2 .提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵是什么?答:提取葉綠體色素的關(guān)鍵是:葉片要新鮮、濃綠;研磨要迅速、充分; 濾液收集后,要及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關(guān) 鍵是:一是濾液細(xì)線要細(xì)且直,而且要重復(fù)劃幾次;二是層析液不能沒及濾液線。實驗七 探究酵母菌的呼吸方式(必修一 P91)一.實驗原理:1 .酵母菌是一種單細(xì)胞真菌,在有氧和無氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。方程式(略)2 . CO2可使澄清石
23、灰水變混濁,也可使澳麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或澳麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。3 .橙色的重銘酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學(xué)反應(yīng),在酸性條件下,變成灰綠色。方法步驟1 .酵母菌培養(yǎng)液的配制取20g新鮮的食用酵母菌,分成兩等份,分別放入錐形瓶 A (500mL和錐形瓶B(500mL中,冉分別向瓶中注入240mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%勺葡萄糖溶液2 .檢測CO2的產(chǎn)生用錐形瓶和其他材料用具組裝好實驗裝置(如圖),并連通橡皮球(或氣泵),讓 空氣間斷而持續(xù)地依次通過3個錐形瓶(約50min)。然后將實驗裝置放到25-350C
24、的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。3 .檢測灑精的產(chǎn)生各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液,分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加 0.5mL溶有0.1g重銘酸鉀的濃硫酸溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%-97%并輕輕振蕩,使 它們混合均勻,觀察試管中溶液的顏色變化。實驗八 觀察細(xì)胞的有絲分裂(必修一 P115)一.實驗原理:1 .在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個細(xì)胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細(xì)胞。2 .染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各 個時期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂 的哪個時
25、期,進而認(rèn)識有絲分裂的完整過程。二.實驗材料:洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因為根尖生長點屬于分生組織,細(xì)胞 分裂能力強,易觀察到有絲分裂各個時期的細(xì)胞。三.實驗步驟:步驟注意問題分析、根大的培加實驗前34天,讓洋蔥放在廣口 瓶上,底部接觸清水。根長約5cm 時可用。置于溫暖處,常換 水。因為細(xì)胞分裂和生長需要 水分、適宜的溫度和氧氣。二、裝片的制作(解離一漂洗一染色一制片)1 .解離:上午10時至卜午2時, 剪取洋蔥根尖23mm立即放入 盛后質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%勺鹽酸和體 積分?jǐn)?shù)為95%勺酒精溶液的混合 液(1: 1)的玻璃皿中,室溫下 解離 35min。解離時間要保證, 細(xì)胞才能分散開 來。解離時間
26、也不宜過 長。目的:溶解細(xì)胞間質(zhì),使 組織中的細(xì)胞相互分離開 來。此時,細(xì)胞已被鹽酸 殺死。否則,根尖過于酥軟,無 法取出。2 .漂洗:待根尖酥軟后,用銀 子取出,放入盛后清水的玻璃皿 中漂洗約10 min 0漂洗要充分,可換 水12次。目的:洗去解離液,便于 染色。3 .染色:把洋蔥根尖放進盛有質(zhì)量濃度為 0.01g/mL 或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃 皿中染色35min。染色時間不宜過 長,否則顯微鏡卜 一片紫色,無法觀 察。龍膽紫等為堿性染料,可 使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色 體著色4.制片:用銀子將這段洋蔥根 尖取出來,放在裁玻片上,加一 滴清水,并用銀子尖把洋蔥根尖
27、弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上 再加一片載玻片。然后,用拇指 輕輕地壓載玻片,使細(xì)胞分散開 來。要弄碎根尖,再垂 直向卜均勻用力壓 片,/、口移動蓋坡 片,目的:使細(xì)胞分散,避免 細(xì)胞重疊,便于觀察。做 得成功的裝片,標(biāo)本被壓 成云霧狀。三、觀察1 .低倍鏡觀察:把裝片放在低 倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū) 細(xì)胞。2 .高倍鏡觀察:移走低倍鏡, 換上高倍鏡,用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反 光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細(xì)觀 察,找出處于細(xì)胞分裂期中期的 細(xì)胞,再找出前期、后期、末期 的細(xì)胞。一定要找到分生 區(qū)。在一個視野里,往 往不容易找全有絲 分裂過程中各個時 期的細(xì)胞。如果是 這樣,可以慢慢地 移動裝片,從鄰近
28、 的分生區(qū)細(xì)胞中尋 找。分生區(qū)細(xì)胞特點是:細(xì)胞 呈止力形,排列緊密,有 的細(xì)胞正處于分裂期。討論:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?答:(1)剪取洋蔥根尖材料時,應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細(xì)胞殺死,細(xì)胞間質(zhì)被溶解,使細(xì)胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細(xì)胞分散開。實驗九模擬探究細(xì)胞表面積與體積的關(guān)系(必修一 P110)一.實驗原理:用瓊脂塊模擬細(xì)胞。瓊脂塊越小,其表面積越大,則其與外界效 換物質(zhì)的表面積越大,經(jīng)交換進來的物質(zhì)在瓊脂塊中擴散的速度快; 瓊脂塊中含 有酚酥,與NaOHf目遇,呈紫紅色,可顯示物質(zhì)(NaOH在瓊脂
29、塊中的擴散速度。.操作步驟:操作方法注意問題解釋用塑料餐刀將含酚酥的瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cmi 2cmi 1cm的止力體將3塊瓊脂塊放在燒杯內(nèi),加入 NaOH容液,將瓊脂塊淹沒,浸泡10min。用塑料勺不時翻 動瓊脂塊。不要用勺子將瓊脂 塊切開或挖動其表 面避免干擾 實驗結(jié)果戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從 NaOH容液中 取出。用紙巾把它們吸干,用塑料刀把瓊脂塊 切成兩半。仔細(xì)觀察切間的顏色變化,變成紅 色的部分代表NaOHT散的深度,測量每一塊 上NaOHT散后著色的濃度。記錄測量結(jié)果應(yīng)避免NaOH與皮 膚和眼睛等接觸。 如潑灑出來,應(yīng)立 即用水沖洗潑灑 處。每兩次操作之間必 須把刀擦干
30、NaOH有腐 蝕性避免干擾 實驗結(jié)果根據(jù)測量結(jié)果進行計算,并將結(jié)果填在記錄表 中結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減?。籒aOHT散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。四.課后討論題答案:1 .當(dāng)NaOHf含酚酥的瓊脂塊相遇時,其中的酚吹變成紫紅色,這是常用的檢測 NaOH勺方法,從瓊脂塊的顏色變化就知道NaOHT散到多遠(yuǎn);在相同時間內(nèi),NaOH 在每一瓊脂塊內(nèi)擴散的深度基本相同,說明 NaOHt每一瓊脂塊內(nèi)擴散的速率是 相同的。2 .細(xì)胞不會無限漲大的原因:1)細(xì)胞體積與表面積關(guān)系2)細(xì)胞核的控制能力 實驗十觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂(必修二 P21)一.實驗原理:蝗蟲
31、的精母細(xì)胞進行減數(shù)分裂形成精細(xì)胞, 再形成精子。此過程要經(jīng)過兩次連續(xù) 的細(xì)胞分裂:減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂。 在此過程中,細(xì)胞中的染色體 形態(tài)、位置和數(shù)目都在不斷地發(fā)生變化,因而可據(jù)此識別減數(shù)分裂的各個時期。二.方法步驟:低儲僮圓富生圖在喻救下雙察堤曳喝擎山用曦分姻定裝片即I 相察!昔哪E膽,這里鶻如國而樗綢但 先在低脩崗下依次戰(zhàn)到濾媒T史分耍門鬼、后娜和 近敬第二瓶分襄中劃、后期的卵11床 瓢袍高倍暇下修 黜班察梁愷除的形森、位置僦目相摩覲!笳TWL盡可tit多地繪制蹴分泰不同同州的 甄區(qū)睡I實驗H一低溫誘導(dǎo)染色體加倍(必修二 P88)一.實驗原理:1 .進行有絲分裂的植物分生組織細(xì)胞
32、, 在有絲分裂后期,染色體的著絲點分裂, 子染色體在紡纏絲的作用下分別移向兩極,最終被平均分配到兩個子細(xì)胞中去。2 .低溫處理植物組織細(xì)胞,紡纏體的形成受抑制,以致影響染色體被拉向兩極現(xiàn)蒙一單用顯微筐觀察,并尋找發(fā)生了染色庫數(shù)目變化的細(xì)胞二.實驗步驟方法步驟:實驗十三調(diào)查常見的人類遺傳?。ū匦薅?P91)一.實驗原理:顯性遺傳病具有世代相傳的特點,隱性遺傳病隔代出現(xiàn)。伴X染色體隱性遺 傳病的遺傳特點是交叉遺傳,隔代出現(xiàn),患者男性多于女性。伴X染色體顯性遺 傳病的遺傳特點是世代相傳,患者女性多于男性。二注意事項:1 .調(diào)查時,最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病,如紅綠色盲、白 化病、高度近視
33、(600度以上)等2 .為保證調(diào)查的群體足夠大,小組調(diào)查的數(shù)據(jù),應(yīng)在班級和年級中進行匯 總3 .苴淮年后m 某種遺傳病的患病人數(shù)果施傳病Itl 發(fā)病率=某腫遺傳病的被調(diào)查人數(shù) X 100° °4 .人類常見的遺傳病類型概括常染色體隱性遺傳病.鐮刀型細(xì)胞竟血癥,尸隱性遺傳病臼化病、先天性聾明不丙酮尿癥x染色體幅性遺傳病;單基因遺傳病,'人類紅獴色盲癥I常染色體顯性遺傳?。欢嘀?,并指、軟骨發(fā)JL顯性遺傳病J苜不全警滁色體顯性遢傳病;傳病L抗雉生素D佝候病歲基因遺傳?。涸l(fā)性高血壓、冠心病等'治色體舁常遺傳病:21三體綜合征實驗十四探究植物生長調(diào)節(jié)劑對桿插枝條生根
34、的作用(必修三 P51)一.實驗原理:植物插條經(jīng)植物生長調(diào)節(jié)劑處理后, 對植物插條的生根情況有很大的影響, 而且 用不同濃度、不同時間處理其影響程度亦不同。 其影響存在一個最適濃度,在此 濃度下植物插條的生根數(shù)量最多,生長最快。二.方法步驟:1 .配制生長素類似物母液:5 mg/mL (用蒸儲水配制,加少許無水乙醇以促進溶 解)。2 .設(shè)置生長素類似物的濃度梯度:,分別放入小磨口瓶,及時貼上相應(yīng)標(biāo)簽。NAA 有毒,配制時最好戴手套和口罩。3 .選擇插條:以1年生苗木為最好(1年或2年生枝條形成層細(xì)胞分裂能力強、 發(fā)育快、易成活)實驗表明,插條部位以種條中部剪取的插穗為最好,基部較差, 梢部插穗
35、仍可利用。實驗室用插穗長57 cm,直徑11.5 cm為宜。4 .處理插條:枝條的形態(tài)學(xué)上端為平面,下端要削成斜面,這樣在桿插后可增加吸收塔水分的面積,促進成活。每一枝條留3-4個芽,所選枝條的芽數(shù)盡量一 樣多。處理方法:1)浸泡法:把插條的基部浸泡在配制好的溶液中,深約3cm,處理幾小時至一天。(要求的溶液濃度較低,并且最好是在遮陰和空氣濕度較高的地 方進行處理)2)沾蘸法:把插條基部在濃度較高的藥液中蘸一下 (約5s),深約1.5cm即可。5 .研究實驗中出現(xiàn)的問題。 分析不同插條的生根情況。不能生出不定根:有可能是枝條上沒有芽、枝條倒插等。都能生出不定根:促進桿插枝條生根是指刺激枝條的下端生出不定根, 而不是刺 激根生長。不同的枝條可能生出的不定根的數(shù)目多少不一樣, 如枝條上芽多,則 產(chǎn)生的生長素就多,就容易促使不定根的萌發(fā)。分析與本實驗相關(guān)的其他因素。A.溫度要一致;B.設(shè)置重復(fù)組。即每組不能少于3個枝條;C.設(shè)置對照組。清水空白對照;設(shè)置濃度不同的幾個實驗組之間進行對比,目的是探究2, 4-D或a-蔡乙酸促進桿插枝條生根的最適濃度。實驗十五 模擬尿糖的檢測(必修三 P26相關(guān)知識)一.實驗原理:葡萄糖試紙是一種酶試紙,由葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和某種無色的化合 物固定于濾紙上制成。當(dāng)尿液滴加到酶試紙上時,尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化 酶的
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