扶正解毒顆粒對染鎳大鼠腎損傷的影響

1、扶正解毒顆粒對染鎳大鼠腎損傷的影響        【摘要】     目的 觀察扶正解毒顆粒對硫酸鎳染毒大鼠腎損傷的干預作用及其促排鎳作用。方法 將Wistar大鼠隨機分為正常組、模型組、二巰基丁二酸(DMSA)組及扶正解毒顆粒大、中、小劑量組。除正常組外,其余大鼠以硫酸鎳2.5 mg/(kg?d)腹腔注射染毒造模,扶正解毒顆粒大、中、小劑量組分別以扶正解毒顆粒5、10、20 mg/(kg?d)灌胃處理,DMSA組以DMSA 50 mg/(kg?d)灌胃,正常組與模型

2、組予生理鹽水灌胃。實驗第4周末檢測大鼠腎功能、血鎳、尿鎳水平,并進行腎臟組織病理學檢查。結果 隨著造模時間的延長,扶正解毒顆粒各組大鼠血尿素氮、肌酐及血鎳水平較模型組明顯降低(P<0.05和P<0.01),尿中鎳排泄增加(P<0.05和P<0.01),腎小管上皮變性、腎小管擴張、間質炎性細胞浸潤等病理改變亦較模型組明顯減輕。結論 扶正解毒顆粒對染鎳大鼠具有良好的促排鎳作用,對鎳暴露腎損傷有一定的拮抗作用。     【關鍵詞】  扶正解毒顆粒;硫酸鎳;腎功能;腎臟組織病理學;大鼠   

3、0;Abstract：Objectives To study the interventing and nickel-excreting promoting effects of Fuzheng Jiedu granula on rats renal damage induced by nickel. Methods Wistar rats were divided into six groups：normal group, model group, DMSA group, and low-, medium-, high-dose of Fuzheng Jiedu granula group.

4、 Model rats were induced with intraperitoneal injection of NiSO4 2.5 mg/(kg?d). Fuzheng Jiedu granula group was administered by gavage of Fuzheng Jiedu granula 5, 10, 20 mg/(kg?d). DMSA group was given DMSA 50 mg/(kg?d), and normal goup and model group were given normal saline. At the end of four we

5、eks, the levels of BUN, SCr, blood nickel and urine nickel were measured and the renal pathological changes were observed, respetively. Results In Fuzheng Jiedu granula groups, BUN, Cr and blood nickel were all decreased (P<0.05, P<0.01), urine nickel increased obviously (P<0.05, P<0.01)

6、, and some pathological changes, such as the degeneration of renal tubularepithelial cell, the dilatation of tubule and interstitial infiltration of inflammatory cell appeared late and were attenuated as time progressed, compared with that of model group. Conclusion Fuzheng Jiedu granula can promote

7、 nickel excretion in rats exposed to nickel and has antagonistic effect on renal damage induced by nickel.Key words：Fuzheng Jiedu granula;nickel sulfate;renal function;renal histopathology;rats鎳化合物是一類多器官毒物,可累及肝、腎、肺及心血管、血液等系統(tǒng)。腎臟為鎳化合物毒性作用的重要靶器官。本課題組前期研究表明,扶正解毒顆粒對鎳化合物毒性具有較好的拮抗作用1-3。本研究通過觀察扶正解毒顆粒對硫酸鎳暴露大

8、鼠腎功能、血鎳、尿鎳水平及腎組織病理學變化的影響,探討扶正解毒顆粒的促排鎳作用及其對鎳性腎損傷的保護作用,旨在為扶正解毒顆粒的臨床應用提供依據。1 實驗材料1.1 動物清潔級Wistar大鼠70只,雌雄各半,體質量(180±20)g,蘭州大學醫(yī)學實驗動物中心提供(甘動準14-006)。1.2 試劑和儀器硫酸鎳為分析純,含量>99%(西安化學試劑廠);二巰基丁二酸(DMSA),美國Sigma公司;尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、尿蛋白試劑盒(南京建成生物工程研究所)。AAS6000系列原子吸收分光光度計(江蘇天瑞儀器股份有限公司)。1.3 藥物扶正解毒顆粒由紅芪、當歸、枸杞

9、、丹參和茯苓等中藥組成,甘肅省食品藥品監(jiān)督管理局批準(甘藥制字Z07031625),蘭州太寶制藥有限公司生產。2 實驗方法2.1 分組、造模及給藥70只大鼠稱重后隨機分為7組。正常組：生理鹽水灌胃,每日0.5 mL/只,并同時處死,作為空白對照;模型組：腹腔注射硫酸鎳2.5 mg/(kg?d),連續(xù)7 d,此后隔日注射1次,造成染毒模型,同時每日生理鹽水0.5 mL/只灌胃,直至處死;扶正解毒顆粒大、中、小劑量組(簡稱FJG大、中、小組)：染毒第8日起以扶正解毒顆粒20、10、5 g/(kg?d)灌胃處理,并予生理鹽水0.5 mL/只灌胃,1次/d;DMSA組：除以DMSA 50 mg/(kg

10、?d)灌胃外,余同扶正解毒顆粒組,作為陽性對照。2.2 腎功能及血鎳、尿鎳水平檢測各組灌胃第4周末,給予受試物后禁食不禁水24 h,以大鼠代謝籠收集大鼠24 h尿液,同時眼底靜脈叢采集血樣,分離血清,依據試劑盒操作說明進行BUN、SCr、24 h尿蛋白定量(24 h-UP)測定,石墨爐原子吸收分光光度法測定血、尿鎳含量。2.3 腎臟組織病理學檢查各組灌胃第4周末,斷頭處死,迅速摘取腎臟,剝去包膜,腎門縱切,4%多聚甲醛溶液固定、包埋、切片,HE染色,光鏡下常規(guī)腎臟病理觀察。3 統(tǒng)計學方法采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件,數據以x±s表示,進行兩因素析因設計資料的方差分析及多均數間兩兩比較

11、的q檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。4 結果4.1 藥物對染鎳大鼠腎功能的影響(見表1)表1 各組大鼠BUN、SCr 及24 h-UP變化比較4.2 藥物對大鼠血鎳、尿鎳的影響(見表2)表2 各組大鼠血清、尿液鎳含量變化比較4.3 藥物對大鼠腎臟病理組織學變化的影響正常組大鼠腎組織結構清晰,形態(tài)正常。模型組腎間質、皮質腎小管腫脹、淤血,管腔變狹窄,腎小管上皮細胞顆粒變性,部分水腫壞死,脫落于管腔內,部分近曲小管上皮細胞內充滿嗜堿性均質狀物,集合管可見散在的蛋白管型,腎小球毛細血管充血、擴張,球囊腔狹窄,部分腎小球體積增大、炎細胞浸潤。扶正解毒顆粒大、中劑量組僅見腎小管上皮細胞輕度顆

12、粒變性,未見明顯腎小球毛細血管擴張、充血,球囊腔狹窄,腎小管腫脹,管內蛋白管型及炎細胞浸潤等改變。扶正解毒顆粒小劑量組、DMSA組腎小球病理損害程度略輕于模型組外,其余與模型組相比無明顯差異。表明扶正解毒顆?？蓽p輕腎組織病理改變。5 討論硫酸鎳是鎳礦生產過程中的主要鎳化合物之一,由于其溶解度較大,接觸面較廣,因此,進行硫酸鎳毒性的干預研究尤為重要。研究表明,水溶性鎳鹽(如NiSO4)暴露,鎳在腎臟中有較高的分布與蓄積1,4。鎳暴露可致實驗動物腎臟重量增加,尿白蛋白含量及BUN升高,出現氨基酸尿,腎近曲小管廣泛壞死、炎癥、纖維化等一系列損害5-7。本研究發(fā)現,經硫酸鎳腹腔注射染毒,大鼠血清鎳、尿

13、鎳水平增高,并伴隨明顯的腎功能損害及一系列腎小球、腎小管病理改變。經扶正解毒顆粒灌胃處理后,大鼠腎功能改善,腎臟病理改變明顯減輕,血清鎳水平降低,尿中鎳的排泄顯著增加,其中大劑量扶正解毒顆粒促排鎳作用接近DMSA。研究表明,扶正解毒顆粒不但具有“類螯合劑”樣作用而影響機體鎳代謝,還可能通過多途徑、多靶點機制而發(fā)揮抗鎳性腎損傷的綜合效應,包括扶正解毒顆粒對鎳誘發(fā)機體微量元素失衡、ATP酶活性抑制、氧化應激以及遺傳毒性的拮抗等8-9,3。    【參考文獻】  1 Cempel M, Janicka K. Distribution of nicke

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