顯微鏡的構造原理及使用

1、反光鎮(zhèn)人的眼睛只能識別大小為0.1伽的物體。顯微鏡是精密的放大儀器，是生 物學研究不可缺少的工具。我們用它可以觀察肉眼看不見的微小生物的結構。中學最常用的是光學顯微鏡，為了正確操作、妥善保管和維護顯微鏡，使之延長使 用年限，我們必須首先了解顯微鏡的結構和功能。一臺顯微鏡包括機械裝置和光學系統(tǒng)兩大部分，注意比較和識別。(一) 、顯微鏡的基本結構：顯微鏡構造很復雜，種類很多，但基本結構是由機械和光學兩大部分構成， 現(xiàn)分述如下：1、機械部分：它是為光學部分服務的部件，包括以下九部分：(1) 、鏡座：顯微鏡最下面呈馬蹄形或園形的部分， 起穩(wěn)定和支持鏡身作用。(2) 、鏡柱：從鏡座向上直立的短柱。上連鏡

2、臂，下連鏡座，可以支持鏡臂 和載物臺。(3) 、鏡臂：彎曲成馬蹄形的部分，便于手持，下端與鏡柱相連接的地方有 一個傾斜關節(jié)，可使鏡臂傾斜，便于觀察。(4) 、載物臺： 自鏡臂下端向前伸出，放置標本用的平臺，其中央有一個園 孔，叫通光孔。臺上有一移動器(老式的左右各有一個壓片夾)，用以固定和移 動標本。(5) 、鏡筒： 和鏡臂上方連接的園筒部分。有的顯微鏡鏡筒內(nèi)有一抽管，可 適當抽長，一般長度是160170毫米。 鏡筒上端裝有目鏡，下端有一個可 轉動的園盤，叫物鏡轉換器(或叫物鏡旋轉盤，固著在鏡筒下端，分兩層，上層 固著不動，下層可自由轉動。轉換器上有 24個圓孔，用來安裝不同倍數(shù)的低 倍或高倍

3、物鏡)。作用是保護成像的光路與亮度。(6) 、調(diào)節(jié)器(也叫調(diào)節(jié)螺旋)： 為鏡壁上兩種可轉動的螺旋，一大一小， 能使鏡筒上下移動， 調(diào)節(jié)焦距。 大的叫粗準焦螺旋， 位于鏡臂的上方， 可以轉動， 以使鏡筒能上下移動，從而調(diào)節(jié)焦距，升降鏡筒較快，用于低倍鏡對焦；小的叫 細準焦螺旋，位于鏡臂的下方，它的移動范圍較粗準焦螺旋小，升降鏡筒較慢， 可以細調(diào)焦距。(7) 、傾斜關節(jié)： 鏡柱和鏡臂交界處有一個能活動的關節(jié)。它可以使顯微鏡 在一定的范圍內(nèi)后傾(一般傾斜不得超過 45°)便于觀察。但是在使用臨時封 片觀察時， 禁止使用傾斜關節(jié)， 尤其是裝片內(nèi)含酸性試劑時嚴禁使用， 以免污損 鏡體。(8)

4、、載物臺： 從鏡臂向前方伸出的金屬平臺。呈方形或圓形，是放置玻片 標本的地方。 其中央具有通光孔， 在通光孔的左右有一個彈性的金屬壓片夾， 用 來壓住載玻片。 較高級的顯微鏡， 在載物臺上常具有推進器， 它包括夾片夾和推 進螺旋，除夾住切片外，還可使切片在載物臺上移動。2、光學部分：由目鏡、物鏡、反光鏡、聚光器等四部件組成。(1) 、目鏡： 裝于鏡筒上方，由兩組透鏡構成，接目鏡的作用是把接物鏡所 形成的倒立實像再放大成為一個虛像。接目鏡上刻有5X，8X，10X，15 X，25X等符號，表示放大倍數(shù)。我們所觀察到的標本的物像，其放大倍數(shù)是 接物鏡和接目鏡放大倍數(shù)的乘積。 如接物鏡是1 0X,接目

5、鏡是8X，其物像的 放大倍數(shù)是1 0X8 = 80倍。在接目鏡內(nèi)兩個透鏡間的光欄上可裝一根剪短的毛發(fā)， 做為指針， 用以指示 要觀察的材料。(2) 、物鏡：裝在鏡筒下端物鏡轉換器的孔中，一般的顯微鏡有24個接 物鏡鏡頭，每個鏡頭都是由一系列的復式透鏡組成的，其上也有放大倍數(shù)記號， 有4X，10X，40X及10 0X°4X及10X接物鏡是低倍鏡，40X是 高倍鏡，100X是油鏡。低倍鏡常用于搜索觀察對象及觀察標本全貌，高倍鏡則用于觀察標本某部分或較細微的結構， 油鏡則常用于觀察微生物或動植物更細 微的結構。（3）、聚光器（集光器）： 位于載物臺（通光孔）下方，由兩塊或數(shù)塊鏡組 成，它能

6、將反光鏡反射來的光線集中以射入接物鏡和接目鏡， 有的聚光器可升降， 便于調(diào)光，集光器下有一可伸縮的園形光圈， 叫虹彩光圈， 可調(diào)集光器口徑的大 小和照射面，以調(diào)節(jié)光線強弱（有的顯微鏡只有遮光極而無集光器）。光線過強 時，可縮小虹彩光圈。（4）、反光鏡： 是顯微鏡觀察時獲得光源的裝置，位于顯微鏡鏡座中央，一 面為平面鏡，一面為凹面鏡。 轉動反光鏡，可使外面光線通過集光器照射到標本 上。使用時，光線強用平面鏡，光線弱用凹面鏡。顯微鏡的成像原理（放大原理）光線一反光鏡T遮光器T通光孔一標本（一定要透明）一物鏡的透鏡（第- 次放大成倒立實像）T鏡筒T目鏡（再放大成虛像）T眼。物鏡的作用： 使被觀察物體

7、成一個倒立的放大的實像。像投影儀的鏡頭。目鏡的作用： 把物鏡成的實像，再一次放大成虛像。像放大鏡的鏡頭，把物 體的像放大。（二）顯微鏡的使用方法：1、取鏡安放：取鏡 右手握住鏡臂，左手平托鏡座，保持鏡體直立。（特別要禁止單手 提著顯微鏡走，防止目鏡從鏡筒中滑脫）。安放 放置桌邊時動作要輕。一般應在身體的前面，略偏左，鏡筒向前， 鏡臂向后，距桌邊710 cm處，以便觀察和防止掉落。安放目鏡和物鏡。2、取好光源（調(diào)光）： 用顯微鏡觀察標本前，先要取好光源。首先把顯微 鏡放在自己左肩一側臺前，鏡座距桌邊約兩寸，鏡臂朝自己，鏡筒朝外。用手轉 動物鏡轉換器， 使低倍接物鏡和鏡筒成一直線， 正對通光孔。

8、用左眼從接目鏡向 下注視，同時用手撥動反光鏡，讓鏡面對著光源，當看到園形鏡界（視野）呈現(xiàn) 光亮而均勻的時候即調(diào)好光了，如視野陰暗不明，則需再調(diào)節(jié)反光鏡和集光器， 直到視野明亮均勻為止。3、低倍鏡的使用：觀察任何標本都必須先用低倍鏡。（1）放置切片 升高鏡筒，把玻片標本放在載物臺中央，標本材料正對通 光孔的中心，用壓片夾壓住載玻片的兩端。（2）調(diào)焦 將要觀察的玻片標本放在載物臺通光孔的中央，玻片標本兩端 用壓片夾夾緊， 再用手沿順時針方向旋轉粗調(diào)節(jié)器， 把鏡筒徐徐降到接物鏡頭差 不多接近玻片標本（約半厘米）為止（從側面觀察下降鏡筒）。然后左眼觀察， 邊觀察邊用調(diào)節(jié)器將鏡筒徐徐上升（逆時針方向旋轉

9、粗調(diào)節(jié)器）直到發(fā)現(xiàn)物象， 觀察清晰為止。如果不夠清楚，可用細準焦螺旋調(diào)節(jié)。 （不可以在調(diào)焦時邊觀察 邊使鏡筒下降，以免壓碎裝片和鏡頭。）（3）低倍鏡的觀察 由所用的目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)相乘， 即為原物 被放大的倍數(shù)。 如果物像不在視野中央， 要慢慢移動到視野中央， 適當再進行調(diào) 節(jié)。4、高倍鏡的使用（1）選好目標 如果要觀察視野內(nèi)某部分更細微的結構， 則需要用高倍鏡觀 察。先用低倍物鏡確定要觀察的目標，將其移至視野中央。轉動轉換器，把低倍 物鏡輕輕移開，原位置小心換上高倍物鏡。再用粗調(diào)節(jié)器徐徐將鏡筒距離調(diào)整， 至視野中出現(xiàn)物象， 然后用細調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)到看清物象止。 （用高倍物鏡工作距離 較

10、短，操作要十分仔細，以防鏡頭碰擊玻片）。（2）調(diào)焦 在正常情況下， 當高倍物鏡轉正之后， 在視野中央即可見到模糊 的物像，只要向反時針方向略微調(diào)動細準焦螺旋，既可獲得清晰的物像。在換上高倍物鏡觀察時， 視野變小變暗， 要重新調(diào)節(jié)視野亮度， 可升高聚光 器或利用凹面反光鏡。5、油鏡的使用：高倍鏡下觀察的標本，如果放大倍數(shù)還不夠，可用油鏡，換用前，同樣要先 在高倍鏡下觀察，把要觀察的部分放在視野的正中央。觀察到清晰的物象之后， 在蓋玻片上表面的中央滴一小滴香柏油， 再換上油鏡頭，使油鏡頭與香柏油接觸， 然后由目鏡觀察 。一邊觀察，一邊用手稍移動細調(diào)節(jié)器（切忌用粗調(diào)節(jié)器） 以看清物象。 用油鏡觀察完

11、畢后， 轉開油鏡，必須用擦鏡紙點二甲苯擦去鏡頭上 的香柏油。下降鏡筒，直立反光鏡，使光學部件的光線不再對在一條直線上。應當了解的是，在顯微鏡中觀察到的物象是倒象，因此移動玻片時，應注 意移動方向。如果要使物象左移動就要向右移動玻片，同樣要使物象向前移動， 就要向后移動玻片。6、使用后的整理觀察結束，應先將鏡筒升高，聚光器下降，再取下切片，然后轉動轉換器， 使物鏡與通光孔錯開，做好清潔工作。清潔完畢，再下降鏡筒，使兩個物鏡位于 載物臺上通光孔的兩側， 呈“八”字形， 將反光鏡轉至與載物臺垂直， 罩上防塵 罩，仍用右手握住鏡臂，左手平托鏡座，按號放回鏡箱中。三)、顯微鏡的保養(yǎng)：(1) 取送顯微鏡時

12、，必須右手握住鏡臂，左手托住鏡座，輕拿輕放。(2) 顯微鏡的使用，一定要按實驗指導寫的方法和步驟，認真仔細去做，不 然，容易損壞標本和鏡頭，又達不到看清物象的目的。(3) 觀察標本時，一定要先用低倍鏡觀察，再用高倍鏡，低倍鏡能看清，就 不必用高倍鏡。(4) 不能用硬紙擦透鏡，必須用干凈的擦鏡紙或細軟紗布，朝一個方向擦試 透鏡，以免損壞鏡頭。(5) 不要隨便轉動粗細調(diào)節(jié)器，以免機器損傷，調(diào)節(jié)失靈。(6) 載物臺要保持清潔、干凈，不要讓水或其他液體(酸、堿或其他化學藥 品等)流到臺上，以免生銹或腐蝕。(7) 避免陽光直接照射，要防潮濕、防灰塵，經(jīng)常保持鏡體和鏡體箱的干燥 和清潔顯微鏡是一種精密的光

13、學儀器， 已有 300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡， 人們 看到了過去看不到的許多微小生物和構成生物的基本單元細胞。 目前，不僅 有能放大千余倍的光學顯微鏡， 而且有放大幾十萬倍的電子顯微鏡， 使我們對生 物體的生命活動規(guī)律有了更進一步的認識。 在普通中學生物教學大綱中規(guī)定的實 驗中，大部分要通過顯微鏡來完成， 因此，顯微鏡性能的好壞是做好觀察實驗的 關鍵。一、顯微鏡的光學系統(tǒng)顯微鏡的光學系統(tǒng)主要包括物鏡、 目鏡、 反光鏡和聚光器四個部件。 廣義的 說也包括照明光源、濾光器、蓋玻片和載玻片等。(一) 、物鏡物鏡是決定顯微鏡性能的最重要部件， 安裝在物鏡轉換器上， 接近被觀察的 物體，故叫做物鏡

14、或接物鏡。1、物鏡的分類物鏡根據(jù)使用條件的不同可分為干燥物鏡和浸液物鏡； 其中浸液物鏡又可分 為水浸物鏡和油浸物鏡(常用放大倍數(shù)為 90100 倍)。根據(jù)放大倍數(shù)的不同可分為 低倍物鏡(10倍以下)、中倍物鏡(20 倍左右) 高倍物鏡( 4065 倍)。根據(jù)像差矯正情況， 分為消色差物鏡 （常用， 能矯正光譜中兩種色光的色差 的物鏡）和復色差物鏡（能矯正光譜中三種色光的色差的物鏡， 價格貴，使用少）2、物鏡的主要參數(shù)：物鏡主要參數(shù)包括：放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑和工作距離。 、放大倍數(shù)是指眼睛看到像的大小與對應標本大小的比值。 它指的是長度 的比值而不是面積的比值。例：放大倍數(shù)為 100X，指的是長度

15、是1卩m的標本, 放大后像的長度是ioo卩m要是以面積計算，則放大了 10,000倍。顯微鏡的總放大倍數(shù)等于物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。 、數(shù)值孔徑也叫鏡口率，簡寫 NA或A,是物鏡和聚光器的主要參數(shù)，與 顯微鏡的分辨力成正比。 干燥物鏡的數(shù)值孔徑為 0.05-0.95 ，油浸物鏡（香柏油） 的數(shù)值孔徑為 1.25。 、工作距離是指當所觀察的標本最清楚時物鏡的前端透鏡下面到標本的蓋 玻片上面的距離。 物鏡的工作距離與物鏡的焦距有關， 物鏡的焦距越長， 放大倍 數(shù)越低，其工作距離越長。例： 10倍物鏡上標有 10/0.25 和 160/0.17，其中 10 為物鏡的放大倍數(shù)； 0.25 為數(shù)值孔徑

16、； 160為鏡筒長度（單位 mm）；0.17 為蓋 玻片的標準厚度（單位 mm）。 10倍物鏡有效工作距離為 6.5mm， 40倍物鏡有效 工作距離為 0.48mm 。3、物鏡的作用是將標本作第一次放大，它是決定顯微鏡性能的最重要的部 件分辨力的高低。分辨力也叫分辨率或分辨本領。 分辨力的大小是用分辨距離 （所能分辨開的 兩個物點間的最小距離）的數(shù)值來表示的。在明視距離（25cm之處，正常人眼 所能看清相距0.073mm的兩個物點，這個0.073mm的數(shù)值，即為正常人眼的分辨 距離。顯微鏡的分辨距離越小， 即表示它的分辨力越高， 也就是表示它的性能越 好。顯微鏡的分辨力的大小由物鏡的分辨力來決

17、定的， 而物鏡的分辨力又是由它 的數(shù)值孔徑和照明光線的波長決定的。當用普通的中央照明法 （使光線均勻地透過標本的明視照明法） 時，顯微鏡 的分辨距離為d=0.61入/NA式中d物鏡的分辨距離，單位nm。入一一照明光線波長，單位nm。NA 物鏡的數(shù)值孔徑例如油浸物鏡的數(shù)值孔徑為 1.25 ，可見光波長范圍為 400700nm ，取其平 均波長550 nm,則d=270 nm,約等于照明光線波長一半。一般地，用可見光照 明的顯微鏡分辨力的極限是0.2卩m（二）、目鏡因為它靠近觀察者的眼睛,因此也叫接目鏡。安裝在鏡筒的上端。1、目鏡的結構通常目鏡由上下兩組透鏡組成, 上面的透鏡叫做接目透鏡, 下面的

18、透鏡叫做 會聚透鏡或場鏡。 上下透鏡之間或場鏡下面裝有一個光闌 （它的大小決定了視場 的大小） ,因為標本正好在光闌面上成像, 可在這個光闌上粘一小段毛發(fā)作為指 針,用來指示某個特點的目標。 也可在其上面放置目鏡測微尺, 用來測量所觀察 標本的大小。目鏡的長度越短, 放大倍數(shù)越大（因目鏡的放大倍數(shù)與目鏡的焦距成反比） 。2、目鏡的作用是將已被物鏡放大的, 分辨清晰的實像進一步放大, 達到人眼能容易分辨清 楚的程度。常用目鏡的放大倍數(shù)為 516 倍。3、目鏡與物鏡的關系物鏡已經(jīng)分辨清楚的細微結構, 假如沒有經(jīng)過目鏡的再放大, 達不到人眼所 能分辨的大小, 那就看不清楚； 但物鏡所不能分辨的細微結

19、構, 雖然經(jīng)過高倍目 鏡的再放大, 也還是看不清楚, 所以目鏡只能起放大作用, 不會提高顯微鏡的分 辨率。有時雖然物鏡能分辨開兩個靠得很近的物點, 但由于這兩個物點的像的距 離小于眼睛的分辨距離,還是無法看清。所以,目鏡和物鏡即相互聯(lián)系,又彼此 制約。（三）、聚光器聚光器也叫集光器。 位于標本下方的聚光器支架上。 它主要由聚光鏡和可變 光闌組成。其中,聚光鏡可分為明視場聚光鏡（普通顯微鏡配置）和暗視場聚光 鏡。1、光鏡的主要參數(shù)數(shù)值孔徑（ NA ）是聚光鏡的主要參數(shù),最大數(shù)值孔徑一般是 1.21.4 ,數(shù) 值孔徑有一定的可變范圍, 通?？淘谏戏酵哥R邊框上的數(shù)字是代表最大的數(shù)值孔 徑,通過調(diào)節(jié)下

20、部可變光闌的開放程度, 可得到此數(shù)字以下的各種不同的數(shù)值孔徑，以適應不同物鏡的需要。 有的聚光鏡由幾組透鏡組成， 最上面的一組透鏡可 以卸掉或移出光路，使聚光鏡的數(shù)值孔徑變小，以適應低倍物鏡觀察時的照明。2、聚光鏡的作用聚光鏡的作用相當于凸透鏡， 起會聚光線的作用， 以增強標本的照明。 一般 地把聚光鏡的聚光焦點設計在它上端透鏡平面上方約1.25mm處。（聚光焦點正在所要觀察的標本上，載玻片的厚度為 1.1mm左右）3、可變光闌可變光闌也叫光圈， 位于聚光鏡的下方， 由十幾張金屬薄片組成， 中心部分 形成圓孔。其作用是調(diào)節(jié)光強度和使聚光鏡的數(shù)值孔徑與物鏡的數(shù)值孔徑相適 應?？勺児怅@開得越大，數(shù)

21、值孔徑越大（觀察完畢后，應將光圈調(diào)至最大）。在可變光闌下面，還有一個圓形的濾光片托架。說明：在中學實驗室只有教師用顯微鏡（1600X或1500X ）才配有聚光器， 學生用顯微鏡（640X或500X ）配的是旋轉光欄。緊貼在載物臺下，能做圓周 轉動的圓盤，旋轉光欄（也稱為遮光器），光欄上有大小不等的圓孔，叫光圈。 直徑分別為2、3、& 12、16mm轉動旋轉光欄，光欄上每個光圈都可以對正通 光孔，通過大小不等的光圈來調(diào)節(jié)光線的強弱。（四）反光鏡反光鏡是一個可以隨意轉動的雙面鏡，直徑為 50mm面為平面，一面為 凹面，其作用是將從任何方向射來的光線經(jīng)通光孔反射上來。 平面鏡反射光線的 能力

22、較弱， 是在光線較強時使用， 凹面鏡反射光線的能力較強， 是在光線較弱時 使用。反光鏡通常一面是平面鏡， 另一面是凹面鏡， 裝在聚光器下面， 可以在水平 與垂直兩個方向上任意旋轉。反光鏡的作用是使由光源發(fā)出的光線或天然光射向聚光器。 當用聚光器時一 般用平面鏡，不用時用凹面鏡；當光線強時用平面鏡，弱時用凹面鏡。觀察完畢后，應將反光鏡垂直放置。（五）照明光源顯微鏡的照明可以用天然光源或人工光源1 、天然光源光線來自天空，最好是由白云反射來的。不可利用直接照來的太陽光2、人工光源 、對人工光源的基本要求：有足夠的發(fā)光強度；光源發(fā)熱不能過多。 、常用的人工光源：顯微鏡燈；日光燈（六）濾光器安裝在光源

23、和聚光器之間。 作用是讓所選擇的某一波段的光線通過， 而吸收 掉其他的光線， 即為了改變光線的光譜成分或削弱光的強度。 分為兩大類： 濾光 片和液體濾光器。（七）蓋玻片和載玻片蓋玻片和載玻片的表面應相當平坦，無氣泡，無劃痕。最好選用無色，透明 度好的，使用前應洗凈。蓋玻片的標準厚度是0.17 ± 0.02mn，如不用蓋玻片或蓋玻片厚度不合適， 都回影響成像質量。載玻片的標準厚度是1.1 ± 0.04mm 一般可用范圍是1 1.2mn，若太厚會影 響聚光器效能，太薄則容易破裂。二、顯微鏡的機械裝置顯微鏡的機械裝置是顯微鏡的重要組成部分。其作用是固定與調(diào)節(jié)光學鏡 頭，固定與移動

24、標本等。主要有鏡座、鏡臂、載物臺、鏡筒、物鏡轉換器、與調(diào) 焦裝置組成。（一）、鏡座和鏡臂1、鏡座 作用是支撐整個顯微鏡，裝有反光鏡，有的還裝有照明光源。2 、鏡臂 作用是支撐鏡筒和載物臺。分固定、可傾斜兩種。（二）、載物臺（又稱工作臺、鏡臺） 載物臺作用是安放載玻片，形狀有圓形和方形兩種，其中方形的面積為120mrK 110mm中心有一個通光孔，通光孔后方左右兩側各有一個安裝壓片夾用 的小孔。 分為固定式與移動式兩種。 有的載物臺的縱橫坐標上都裝有游標尺， 一 般讀數(shù)為0.1mm游標尺可用來測定標本的大小，也可用來對被檢部分做標記。（三）、鏡筒鏡筒上端放置目鏡， 下端連接物鏡轉換器。 分為固定

25、式和可調(diào)節(jié)式兩種。 機 械筒長（從目鏡管上緣到物鏡轉換器螺旋口下端的距離稱為鏡筒長度或機械筒長）不能變更的叫做固定式鏡筒， 能變更的叫做調(diào)節(jié)式鏡筒， 新式顯微鏡大多采 用固定式鏡筒， 國產(chǎn)顯微鏡也大多采用固定式鏡筒， 國產(chǎn)顯微鏡的機械筒長通常 是 160mm。安裝目鏡的鏡筒，有單筒和雙筒兩種。單筒又可分為直立式和傾斜式兩種， 雙筒則都是傾斜式的。 其中雙筒顯微鏡， 兩眼可同時觀察以減輕眼睛的疲勞。 雙 筒之間的距離可以調(diào)節(jié)， 而且其中有一個目鏡有屈光度調(diào)節(jié) （即視力調(diào)節(jié)）裝置， 便于兩眼視力不同的觀察者使用。（四）、物鏡轉換器物鏡轉換器固定在鏡筒下端，有 34 個物鏡螺旋口，物鏡應按放大倍數(shù)高

26、 低順序排列。 旋轉物鏡轉換器時， 應用手指捏住旋轉碟旋轉， 不要用手指推動物 鏡，因時間長容易使光軸歪斜，使成像質量邊壞。（五）、調(diào)焦裝置顯微鏡上裝有粗準焦螺旋和細準焦螺旋。 有的顯微鏡粗準焦螺旋與裝在同一 軸上，大螺旋為粗準焦螺旋，小螺旋為細準焦螺旋；有的則分開安置，位于鏡臂 的上端較大的一對螺旋為是粗準焦螺旋， 其轉動一周，鏡筒上升或下降 10mm。 位 于粗準焦螺旋下方較小的一對螺旋為細準焦螺旋，其轉動一周，鏡筒升降值為 0.1mm細準焦螺旋調(diào)焦范圍不小于1.8mm三、顯微鏡及其部件的使用1 、使用單筒顯微鏡時，要養(yǎng)成用左眼觀察的習慣（因一般用右手畫圖）， 觀察時要兩眼同時睜開， 不要

27、睜一只閉一只， 因為這樣易于疲勞。 為了訓練學生 習慣于兩眼同時睜開觀察，可剪一塊長約 14cm寬約6cm的長方形硬紙片，在 靠近左端處挖一個直徑比鏡筒上端外徑略小的圓孔， 把圓孔套在鏡筒上段， 觀察 時兩眼同時睜開， 利用紙片的右端擋住右眼的視線， 這樣訓練一段時間后， 就能 習慣于兩眼同時睜開，然后把紙片去掉。2、直筒顯微鏡的鏡臂與鏡座連接處，是一個機械關節(jié)，可用于調(diào)節(jié)鏡筒的 傾斜度，便于觀察，鏡臂不能過于后傾，一般不超過 40°。但是在使用臨時裝 片觀察時，禁止使用傾斜關節(jié)（當鏡筒傾斜時，載物臺也隨之傾斜，載玻片上的 液體易流出），尤其是裝片內(nèi)含酸性試劑時嚴禁使用，以免污損鏡體

28、。3、目鏡和物鏡的使用一般都是用一個放大倍數(shù)適中的目鏡 （10X）和最低倍的物鏡開始觀察，逐 步改用倍數(shù)較高的物鏡，從中找到符合實驗要求的放大倍數(shù)。轉換物鏡時，先用低倍鏡觀察，調(diào)節(jié)到正確的工作距離（成像最清晰）。如 果進一步使用高倍物鏡觀察， 應在轉換高倍物鏡之前， 把物像中需要放大觀察的 部分移至視野中央 （將低倍物鏡轉換成高倍物鏡觀察時， 視野中的物像范圍縮小 了很多）。低倍物鏡和高倍物鏡基本齊焦（同高調(diào)焦），在用低倍物鏡觀察清晰 時，換高倍物鏡應可以見到物像， 但物像不一定很清晰， 可以轉動細準焦螺旋進 行調(diào)節(jié)。通常認為，使用任何一個物鏡時，有效放大倍數(shù)的上限是1，000 乘它的數(shù)值孔徑

29、，下限是250乘它的數(shù)值孔徑。如40X物鏡的數(shù)值孔徑是0.65，則上、 下限分別為：1000X 0.65=650倍和250X 0.65163倍，超過有效放大倍數(shù)上限 的叫做無效放大， 不能提高觀察效果。 低于下限的放大倍數(shù)則人眼無法分辨， 不 利于觀察。一般最實用的放大倍數(shù)范圍是 500700乘數(shù)值孔徑之間的數(shù)字。4、油浸物鏡的使用使用油浸物鏡時， 一般不要使用同高調(diào)焦。 同高調(diào)焦只適用于每臺顯微鏡的 原配物鏡， 在使用低倍和高倍物鏡時， 是一個極有利的方便條件， 但在使用油浸 物鏡時，則受到一定限制， 一般地說， 用油鏡觀察未加蓋玻片的標本片 （載玻片） 時，利用同高調(diào)焦的安全度較大，而對于

30、有蓋玻片的標本片，要小心使用，因為 油浸物鏡的工作距離很短，在設計和裝配時所考慮的同高是對標準厚度蓋玻片 的。用油浸物鏡時， 只在標本片上滴香柏油。 觀察完畢后，要及時進行清潔工作， 如不及時進行， 香柏油粘上灰塵， 擦拭時灰塵粒子可能磨損透鏡， 香柏油在空氣 中暴露時間長，還會變稠、變干，擦拭很困難，對儀器很不利。擦拭要細心，動 作要輕。油浸物鏡前端先用干的擦鏡紙擦一兩次， 把大部分油去掉， 再用二甲苯 滴濕的擦鏡紙擦兩次， 最后再用干的擦鏡紙擦一次。 標本片上的香柏油可用“拉 紙法”（即把一小張擦鏡紙蓋在香柏油上， 然后在紙上滴一些二甲苯， 趁濕把紙 往外拉，這樣連續(xù)三四次，即可干凈，一般

31、不會損壞未加蓋玻片的涂片標本）擦 凈。擦鏡紙也要防塵，一般在使用前，將每頁剪成 8 小塊，貯存在一個干凈的小 培養(yǎng)皿中，用起來既節(jié)省又方便。5、聚光器的使用方法、使用聚光器的原因當放大倍數(shù)增加時， 一方面由于放大倍數(shù)越高， 透鏡數(shù)目越多， 被透鏡吸收 的光線也越多；另一方面由于視場 （指的是所能看到被檢標本的范圍） 的亮度與 放大倍數(shù)的平方成反比，即放大倍數(shù)越高，視場越暗。為了得到足夠的亮度，必 須安裝聚光器，把光線集中到所要觀察的標本上。、觀察時聚光器應處的高度觀察時，要保證得到最好的觀察效果， 聚光器的聚光焦點應正好落在標本上。 要實現(xiàn)這個條件， 就必須調(diào)節(jié)聚光器的高度。 當用平行光照明時

32、， 聚光器的聚光 焦點是在它上端透鏡平面中心上方約 1.25mm之處，因此，人們常常要求在觀察 時將聚光器上升到它上端透鏡平面僅稍稍低于載物臺平面的高度， 這樣聚光焦點 就可能落到位于標準厚度載玻片上的標本上。 當使用比標準厚度薄的載玻片來承放標本時，聚光器的位置要相應地降低一些， 而當使用過厚地載玻片時，聚光焦 點只能落在標本下方，不利于精細的觀察。 、聚光器與物鏡的配合這里所謂的配合，就是使聚光器和物鏡這兩者的數(shù)值孔徑取得一致， 以更好 的進行較為精細的觀察。假如聚光器的數(shù)值孔徑低于物鏡，那物鏡的部分數(shù)值孔 徑就浪費了，從而達不到它的最高分辨力。假如把聚光器的數(shù)值孔徑大于物鏡的 數(shù)值孔徑，

33、則一方面不能提高物鏡的規(guī)定分辨力，另一方面反會由于照明光束過 寬，使物象的清晰度下降。聚光器與物鏡配合的操作方法是：在完成照明、調(diào)焦 操作后，取下目鏡直接向鏡筒中看，把聚光器下的可變光闌關到最小，再慢慢地 開大。開到它的口徑與所見視場的直徑恰好一樣大， 然后按上目鏡，即可進行觀 察。每轉換一次物鏡，都要隨著進行依次這樣的配合操作。 有的聚光器可變光闌 的邊框上刻有表示開啟口徑的尺度，可以根據(jù)刻度來進行配合。歷史上顯微鏡的發(fā)明和顯微鏡的每一次創(chuàng)新都給人類的認知帶來了飛躍式 的發(fā)展；給人類的生活帶來了空前的拓展。 在提倡科技創(chuàng)新的今天，顯微鏡的使 用已經(jīng)成為中學生的一項基本技能，掌握結構，科學使用

34、，良好維護，使之成為 廣大青少年探索未來世界的一個窗口目的要求學會并練習使用顯微鏡。材料用具顯微鏡，擦鏡紙，紗布。方法步驟、取鏡和安放1.右手握住鏡臂，左手托住鏡座。2 把顯微鏡放在實驗臺上，略偏左（顯微鏡放 在距實驗臺邊緣7厘米左右處）。安裝好目鏡和物 鏡。、對光3.轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔（物鏡的 前端與載物臺要保持2厘米的距離）。4 把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目 鏡內(nèi)（右眼睜開，便于以后同時畫圖）。轉動反光鏡，使光線通過通光孔反射 到鏡筒內(nèi)。通過目鏡，可以看到白亮的視野。、觀察5把所要觀察的玻片標本（也可以用印有“6 字的薄紙片制成）放在載物臺上，用壓片夾壓住, 標本要

35、正對通光孔的中心。6 轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物 鏡接近玻片標本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰 到玻片標本）。7左眼向目鏡內(nèi)看，同時反方向轉動粗準焦螺 旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微 轉動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。注意事項： 實驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動轉換器，把兩 個物鏡偏到兩旁，并將鏡筒緩緩下降到最低處。 最后把顯微鏡放進鏡箱里， 送回原處學生在使用顯微鏡過程中常犯的錯誤顯微鏡是學習和研究生物學的重要工具。 學會正確使用顯微鏡是學生必須掌握的 一項基本技能。 但據(jù)調(diào)查， 很多初中生甚至高中生不能正確使用顯微鏡。 現(xiàn)根據(jù) 我多年的教學實踐，談談學生

36、在使用顯微鏡過程中常犯的錯誤。（1）顯微鏡安放位置不當，有礙操作顯微鏡安放不是靠前就是靠后，或位置靠右，甚至把鏡筒向著自己。顯 微鏡應安放在離桌邊緣5 cm鏡筒向前，并講清顯微鏡位置稍靠左側的道理 （兩 眼同時睜開觀察，眼不易疲勞，便于繪圖。）（ 2 ）對光顧此失彼對光時往往忘記了反光鏡的正確使用，不能根據(jù)光線的強弱來選擇平面 鏡或凹面鏡；用高倍鏡進行對光，不把低倍鏡位置放低；在轉動轉換器時，物鏡 沒有到位，光圈也沒有調(diào)節(jié)好，視野光線不均勻、明亮。（ 3 ）不能迅速找到要觀察的物像沒有按簡明、 合理的程序操作。 先使用視野寬的低倍鏡， 把要觀察的材料放 通光孔中央，放下鏡筒使物鏡下端與裝片的距

37、離約 1 cm，沿逆時針方向徐徐調(diào) 節(jié)粗準焦螺旋， 同時左眼注視視野， 直到看清物像。 如果第一次標本未進入視野， 那么要重新操作，在調(diào)節(jié)粗準焦螺旋的同時，移動裝片，直到看見物像為止。在 具體操作時， 也可以裝片表面雜質或氣泡為參照物， 當雜質出現(xiàn)時， 表明物距基 本調(diào)好，再移動裝片，即可找到所要觀察的物像。（4）高倍物鏡的使用方法不正確由于高倍物鏡的工作距離小，有的學生害怕把鏡頭損壞，一旦用高倍物 鏡時就把鏡筒升上來， 結果在低倍鏡下觀察到的物像換成高倍鏡后就再也找不到 了。因此，在教學時要向學生反復強調(diào)用高倍物鏡前先換上高倍的目鏡， 再直接 換上高倍物鏡，并且把光圈開大。（ 5）忽視準焦螺

38、旋的使用有的學生在使用高倍物鏡時，仍然調(diào)節(jié)粗準焦螺旋，其結果往往把物鏡 損壞、裝片壓爛。6）認為倍數(shù)越大，越清晰如果目鏡倍數(shù)過大，得到的放大虛像則很不清晰。因此，給學生講明， 在低倍鏡下能看清楚的物像，不必用高倍鏡觀察。（7）忽視顯微鏡的保養(yǎng)顯微鏡是精密的放大儀器，要教育學生愛護顯微鏡。輕拿輕放，不能用 手或布去擦試鏡頭，使用傾斜關節(jié)時，傾斜角度不能太大。實驗完畢，蓋上鏡頭 蓋，移去載物臺上的玻片，轉動轉換器，使兩個物鏡分開至兩旁，降下鏡筒，裝 入鏡箱內(nèi)?？傊?，教師在教學中要做到心中有數(shù)， 防患于未然， 及時糾正學生在顯微鏡 的使用中所犯的錯誤， 通過嚴格訓練，學生一定會逐步正確、 熟練地操作

39、顯微鏡， 激發(fā)起學生對生物學的濃厚興趣顯微鏡油鏡物鏡的基本原理和使用油鏡物鏡的基本原理微生物學研究用的顯微鏡的物鏡通常有低倍物鏡（10X），高倍物鏡（40X）,和油鏡（100X）三種。也有“ Ol”（ oil immersion ）字樣表示，它是三者中放 大倍數(shù)最大的。根據(jù)使用不同放大倍數(shù)的目鏡，可使被檢物體放大10001600倍。 本商城出售的規(guī)格中稱之為油彈。使用時，油鏡與其他物鏡的不同是載玻片與物鏡之間不是隔一層空氣， 而是 隔一層油質稱為油浸系。這種油常選用香柏油，因香柏油的折射率 n= 1.52，與 玻璃相同。 當光線通過載玻片后， 可直接通過香柏油進入物鏡而不發(fā)生折射。 如 果玻片

40、與物鏡之間的介質為空氣， 稱為干燥系， 當光線通過載玻片后， 受折射發(fā) 生散射現(xiàn)象，進入物鏡的光線顯然減少，這就降低了視野的照明度。利用油鏡不但能增加照明度， 更主要能增加數(shù)值孔徑， 因為顯微鏡的放大效 能是由其數(shù)值孔徑?jīng)Q定的。 所謂數(shù)值孔徑， 即光線投射到物鏡的最大角度 （稱為 鏡口角）的一半正弦乘上玻片與物鏡間介質的折射率所得的乘積， 可用下列公式 表示：NA=n< sin a式中 NA=數(shù)值孔徑；n =介質折射率；a二最大入射角的半數(shù)，即鏡口角的半數(shù)。因此，光線投射到物鏡的角度越大， 顯微鏡的效能就越大， 該角度的大小決 定于物鏡的直徑和焦距。同時，a的理論限度為90。sin90。=1，故以空氣為 介質時（n= 1），數(shù)值孔徑不能超過1,如以香柏油為介質時，則n增大，其數(shù) 值孔徑也隨之增大。如光線入射角為120o,其半數(shù)的正弦為sin60o = 0.87，貝以空氣為介質時：NA= 1X 0.87 = 0.87以水為介質時：NA= 1.33 X 0.87 = 1.15以香柏油為介質時：NA= 1.52 X 0.87 = 1.32顯微鏡的分辨力是指顯微鏡能夠辨別兩點之間最小距離的能力。 它與物鏡的 數(shù)值孔徑成正比，與波長長度成反比。因此，物鏡的數(shù)值孔徑越大