桑葚酒花色苷衍生物形成規(guī)律及生物活性評(píng)價(jià)

1、桑葚酒花色苷衍生物形成規(guī)律及生物活性評(píng)價(jià)桑葚作為一種藥食兩用的資源受到越來越多的關(guān)注,尤其是桑葚花色苷作為桑葚的主要活性成分,其抗氧化、抗腫瘤和預(yù)防糖尿病等生理活性被相繼報(bào)道。桑葚酒是一種新興的果酒,營養(yǎng)價(jià)值高,能滿足現(xiàn)代人們追求營養(yǎng)健康的飲食需求。但是花色苷穩(wěn)定性差,加工過程中受環(huán)境因素影響而發(fā)生降解。本試驗(yàn)研究了陳釀方式、酚酸輔色對(duì)桑葚酒花色苷及衍生物的影響,建立模擬體外消化和氧化損傷細(xì)胞模型,考察桑葚酒花色苷及其衍生物生物活性。主要研究結(jié)果如下:1、采用不銹鋼桶和橡木桶陳釀桑葚酒,考察陳釀方式對(duì)桑食酒中總酚含量、清除DPPH能力、清除ABTS能力、色澤（色度和色調(diào)）、花色苷及衍生物含量的

2、影響。結(jié)果表明,桑葚酒中主要存在兩種花色苷單體,分別是矢車菊-3-葡萄糖苷和矢車菊-3-蕓香糖苷。陳釀80d,不銹鋼桶中矢車菊-3-葡萄糖苷和矢車菊-3-蕓香糖苷分別下降了94.12 %,92.14%,橡木桶中矢車菊-3-葡萄糖苷和矢車菊-3-蕓香糖苷分別下降了96.82 %,96.65%,由此可見,不銹鋼桶桑葚酒在陳釀前期有利于花色苷單體的保留。陳釀期間分別生成了2種花色苷衍生物,即兒茶酚吡喃矢車菊-3-葡萄糖苷和兒茶酚吡喃矢車菊-3-蕓香糖苷,其中不銹鋼桶陳釀的桑葚酒中兒茶酚吡喃矢車菊-3- 葡萄糖苷在60d達(dá)1.36mg矢車菊-3-葡萄糖苷/L。桑葚酒的色澤主要取決于酒中聚合花色苷含量,

3、不銹鋼罐陳釀能使桑葚酒獲得更好的色調(diào);此外,桑葚酒的抗氧化活性與總酚和花色苷及其衍生物含量有密切關(guān)系。2、選用咖啡酸、阿魏酸、芥子酸和對(duì)香豆酸對(duì)桑葚酒進(jìn)行輔色試驗(yàn),結(jié)果表明:所選的4種酚酸與花色苷形成的更穩(wěn)定的衍生物,能使桑葚酒的色調(diào)升高。經(jīng)4種酚酸輔色作用,聚合花色苷含量顯著高于對(duì)照組,其中芥子酸輔色后聚合花色苷所占比例超過90%。桑葚酒經(jīng)咖啡酸輔色主要生成了兒茶酚吡喃矢車菊-3-葡萄糖和兒茶酚吡喃矢車菊-3-蕓香糖,分別是對(duì)照組的9.2倍和13.7倍;經(jīng)阿魏酸輔色主要產(chǎn)生了愈創(chuàng)木酚吡喃矢車菊-3-葡萄糖苷和愈創(chuàng)木酚吡喃矢車菊-3-蕓香糖苷,均在170d達(dá)到最高值,分別是13.29mg矢車菊

4、-3-葡萄糖苷/L和6.14mg矢車菊-3-蕓香糖苷/L;經(jīng)芥子酸輔色主要生成2,6-二甲氧基苯酚吡喃矢車菊-3-葡萄糖甘,在140d達(dá)到最高值17.84mg矢車菊-3-葡萄糖甘/L,2,6-二甲氧基苯酚吡喃矢車菊-3-蕓香糖苷,在110d達(dá)到最高值8.84mg矢車菊-3-蕓香糖苷/L;經(jīng)對(duì)香豆酸輔色主要生成苯酚吡喃矢車菊-3-葡萄糖苷和苯酚吡喃矢車菊-3-蕓香糖苷在陳釀170d達(dá)到最高值,分別是4.74mg矢車菊-3-葡萄糖苷/L和1.82mg矢車菊-3-蕓香糖苷/L。3、建立體外模擬胃腸道消化模型,考察桑葚花色苷衍生物的體外消化特性。結(jié)果表明,桑葚花色苷及其衍生物在模擬胃消化過程中相對(duì)穩(wěn)定

5、,總酚含量、花色昔及衍生物單體含量變化不大，但是抗氧化活性（清除DPPH和ABTS能力以及還原力）均顯著增加,分別由4.95mg/100mL、8.99mg/100mL和0.385增加到5.56mg/100mL、9.27mg/100mL和0.400,由4.92mg/100mL、6.67mg/100mL和0.345增加到5.36mg/100mL、7.40mg/100mL和0.374;模擬腸消化過程中大量花色苷被降解成咖啡酸、阿魏酸、芥子酸和對(duì)香豆酸等酚酸,而花色苷衍生物仍然展現(xiàn)較高的穩(wěn)定性。桑葚花色苷及衍生物在模擬消化過程中均表現(xiàn)出較好的抗氧化能力。4、通過建立H<sub>2</

6、sub>O<sub>2</sub翔導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷模型，考察了桑葚花色苷衍生物對(duì)氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞的保護(hù)作用。結(jié)果表明,桑葚花色苷及衍生物均能通過降低氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞中XO-1(xanthineoxidase-1,XO-1)和MDA(MalonicDialdehyde,MDA)(superoxidedismutase,SOD),增力口細(xì)胞內(nèi)SOD舌性、HO-1(hemeoxygenase-1,HO-1)含量，提高氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞線粒體膜電位等多個(gè)途徑減少人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,HUVEC)內(nèi)ROS(ReactiveoxygenSpecies,ROS)的水平，抑制細(xì)胞凋