硫酸慶大霉素生產(chǎn)工藝流程圖(共8頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上硫酸慶大霉素生產(chǎn)工藝一、硫酸慶大霉素產(chǎn)品說明1、產(chǎn)品名稱及化學(xué)結(jié)構(gòu)1.1產(chǎn)品名稱：硫酸慶大霉素（Gentamycin sulfate）1.2化學(xué)結(jié)構(gòu)：1.2.1結(jié)構(gòu)式：·2H2SO4C1: R1=R2=CH3C2: R1=CH3 R2=HC1a: R1=R2=H1.2.2分子式：C1: C21H43N5O7=477.61C2: C20H41N5O7=463.58C3: C19H39N5O7=449.551.2.3分子量：C1: 477.61C2: 463.58C3: 449.55C1、C2、C1a為硫酸慶大霉素的三個組分，各組分與2個分子的硫酸相結(jié)合，其成分

2、折干效價為590µ/ml以上。2、理化性質(zhì)2.1性狀：白色或類白色粉末，吸水性強，穩(wěn)定性高，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有機溶劑。2.2比旋度：+1070 +12103、產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(查藥典)二、原材料、包裝材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)格1、發(fā)酵部分名 稱規(guī) 格葡萄糖工業(yè)用：淡黃色粉末，含量70以上，氯含量0.6以下。藥用（口服）：白色結(jié)晶，含量88以上，氯含量0.25以下。淀 粉工業(yè)用：含量80以上，水分14以下，氯含量0.1以下，灰份1以下，無發(fā)霉結(jié)塊。黃豆餅粉工業(yè)用：熱榨，淺黃色粉末，無發(fā)霉結(jié)塊，蛋白質(zhì)37以上，水分12以下，灰份7以下，酸值0.1N,KOH 15mg/g以下。細度8

3、0目90以上。蛋白胨工業(yè)用：淺黃色粉末，總氮14以上，水分7以下，總磷0.3以下。魚粉工業(yè)用：淺黃色粉末，無發(fā)霉變質(zhì)現(xiàn)象，蛋白質(zhì)含量50以上，水分12以下，含油量9以下，總灰份 3以下，無魚骨等特大物，60目90以上。碳酸鈣工業(yè)用：輕質(zhì)，白色粉末，含量96以上，堿度0.2,AS<5ppm硝酸鉀工業(yè)用：白色結(jié)晶，含量98以上。氯化鈷化學(xué)純：紅紫色結(jié)晶，含量95以上。硫酸銨工業(yè)用：白色結(jié)晶，含量96以上消沫劑GP級：淺黃色澄明液體，酸值0.5以下。玉米粉食用：無霉變蟲蛀，細度60目90以上。豆 油金黃色澄明液體，新鮮，酸值KOH 5mg/g2、提取部分名 稱規(guī) 格鹽 酸工業(yè)用：無色或微黃色液

4、體，含量30以上。液體燒堿工業(yè)用：無色或微紫色液體，含量40以上，NaCl含量低于5。氨 水工業(yè)用：無色透明液體，含量95以上?；钚蕴亢谏勰?，PH中性，灰份5，針用（767型）。脫色率90以上。732（1×7）離子交換樹脂工業(yè)用：強酸性陽離子交換樹脂，淡黃色或金黃色球狀顆粒，粒度1650目占90以上，水分5060，交換當(dāng)量大于4.5毫克當(dāng)量/克干樹脂。711（201×4）離子交換樹脂工業(yè)用：強堿性陰離子交換樹脂，淡黃色或金黃色球狀顆粒，粒度1650目占90以上，水分4050，交換當(dāng)量大于3.0毫克當(dāng)量/克干樹脂。717（201×7）離子交換樹脂工業(yè)用：強酸性陽離

5、子交換樹脂，淡黃色或金黃色球狀顆粒，粒度1650目占90以上，水分4060，交換當(dāng)量大于3.0毫克當(dāng)量/克干樹脂。氯化銨藥用：白色結(jié)晶，含量不低于99.5硫酸化學(xué)純：無色透明液體，含量95以上。三、生產(chǎn)方法及原理簡介硫酸慶大霉素的生產(chǎn)是以絳紅色小單孢菌（）2號作為慶大霉素生產(chǎn)用菌種，在蒸汽消毒的培養(yǎng)基中不斷擴大培養(yǎng)、發(fā)酵，通過菌種的次級代謝分泌出具有抑菌活性的慶大霉素。用離子交換樹脂提取出菌分泌的活性物質(zhì)，經(jīng)精制、轉(zhuǎn)鹽生產(chǎn)出硫酸慶大霉素原料藥。用以制成各種硫酸慶大霉素制劑，應(yīng)用于臨床治療。四、硫酸慶大霉素生產(chǎn)工藝流程圖及操作條件硫酸慶大霉素的生產(chǎn)過程主要包括以下四個部分：發(fā)酵生產(chǎn)、提取、精制、

6、無菌壓縮空氣、無菌噴霧干燥。1、 硫酸慶大霉素生產(chǎn)工藝流程圖：35 23hr 35 35 35 種子瓶 一級種子罐 二級種子罐 發(fā)酵罐 250rpm 38hr 22hr 96hr 酸化 6 hr放罐 732樹脂靜態(tài)吸附 過篩 飽和樹脂 漂洗 中和 漂去 酸洗 4.5氨水 無NH4+ 效價裝柱 解吸 濃縮 濃縮液 濃縮液雜質(zhì) 無鹽水洗 串711柱 15萬/ml 收率95 收率93H2SO4 活性炭 轉(zhuǎn)鹽液 脫色液 過濾 精濾 無菌噴粉PH=4.0-6.0 脫色 收率89 收率85 2、生產(chǎn)工藝過程：2.1菌種部分 接種 接種 35 23hr砂土管 種子斜面 種子瓶 生產(chǎn)用菌種 50rpm2.1.

7、1種子瓶配方（）：淀粉 1.0 碳酸鈣 0.3 硝酸鉀 0.05 玉米粉 1.5黃豆餅粉 1.5 氯化鈷 1r/ml 魚粉 葡萄糖 0.1蛋白胨 0.2 自來水配制，消前PH調(diào)至7.5 2.1.2種子瓶的制備按種子瓶配方配制好培養(yǎng)基，裝入500ml搖瓶中，裝量50ml，用1kg/cm2 飽和蒸汽 120滅菌30分鐘，冷卻備用。2.1.3接種子瓶 在超凈工作臺上，火焰保護下，用蒸汽消過毒的無菌接種鏟挖取斜面孢子0.5cm2于種子瓶中，放于搖床上，35±0.5培養(yǎng)40小時左右，涂片觀察菌絲形態(tài)，形態(tài)為大菊花團邊緣已經(jīng)散開，即可下瓶作為生產(chǎn)用種。2.2發(fā)酵部分：2.2.1種子罐及發(fā)酵罐配方

8、：罐 號名 稱一級種子罐二級種子罐發(fā)酵罐補料淀 粉1.01.04.54.5黃豆餅粉1.52.03.03.0蛋白胨0.20.40.4葡萄糖0.11.00.50.5魚 粉0.20.2玉米粉1.51.51.01.0硝酸鉀0.050.020.050.05碳酸鈣0.30.50.60.6氯化鈷1r/ml4r/ml6r/ml6r/ml硫酸銨0.050.05豆 油0.30.20.20.2消前PH7.57.57.57.5【注】補料配方同發(fā)酵罐。2.2.2一級種子罐（消后體積250L）空罐消毒：壓力 1.52.0kg/cm2 溫度 125130 保溫保壓 40分鐘實罐消毒：壓力 1.0 kg/cm2±0

9、.1kg/cm2 預(yù)熱時間30分鐘為宜 溫度 119122 保溫保壓 30分鐘分過濾器消毒：壓力 1.21.4kg/cm2 保溫、保壓30分鐘 按一級種子罐配方配好培養(yǎng)基，移入一級種子罐內(nèi)攪拌后，直接進蒸汽進行實罐消毒，消后體積250L，降溫至35后，在火焰的保護下，利用壓差法將種子接入一級種子罐內(nèi)，接種量56瓶，進行培養(yǎng)。 培養(yǎng)溫度：35 罐壓：0.4 kg/cm2 培養(yǎng)時間：38小時 通氣量：1：0.5 V/V/分以上 攪拌轉(zhuǎn)速：200220轉(zhuǎn)/分 移種標(biāo)準(zhǔn)：菌絲形態(tài)呈菊花團邊緣全部散開或呈網(wǎng)狀，無雜菌。2.2.3二級種子罐：（消后體積1.5T）空罐消毒、實罐消毒及分過濾器消毒均同一級種子

10、罐。移種管道消毒為23 kg/cm2 保壓2小時。按二級種子罐配方配好培養(yǎng)基，移入二級種子罐內(nèi)攪拌后，直接進蒸汽進行實罐消毒，消后體積1.5L，降溫至35后，通過移種管道將一級種子罐的成熟種子移入，進行培養(yǎng)。培養(yǎng)溫度：35 罐壓：0.3 kg/cm2 培養(yǎng)時間：22小時 通氣量：1：0.8 V/V/分以上 攪拌轉(zhuǎn)速：200220轉(zhuǎn)/分移種標(biāo)準(zhǔn)：菌絲形態(tài)呈網(wǎng)狀，量多無雜菌。2.2.4發(fā)酵罐：（消后體積10T）空罐消毒：壓力 1.52.0kg/cm2 溫度 125130 保溫、保壓 30分鐘實罐消毒：壓力 1.0 kg/cm2±0.1kg/cm2 預(yù)熱時間3045分鐘為宜 溫度 1191

11、22 保溫、保壓 30分鐘分過濾器消毒：壓力 1.21.4kg/cm2 保溫、保壓35分鐘移種管道消毒：23 kg/cm2 保壓2小時。 按發(fā)酵罐配方配好培養(yǎng)基，移入罐內(nèi)攪拌后，直接進蒸汽進行實罐消毒，消后體積10T，降溫至35后，通過移種管道接入二級種子罐內(nèi)的種子，進行發(fā)酵培養(yǎng)。 培養(yǎng)溫度：35 罐壓：24小時前0.2 kg/cm2，24小時后0.1 kg/cm2 通氣量：1：1.2 V/V/分以上 攪拌轉(zhuǎn)速：不少于170轉(zhuǎn)/分。發(fā)酵罐補料：（總補料量26T） 第一個補料很關(guān)鍵，必須在發(fā)酵液泡沫下去后（大約18小時）菌絲生長良好，無雜菌，可補3T。 第二個補料：2325小時 補料4T 第三個

12、補料：2830小時 補料5T 第四個補料：3540小時 補料5T 第五個補料：4145小時 補料6T 第六個補料：5255小時 補料6T或酌情補入。如果以上菌絲濃度偏高，第六個補料可考慮補稀方（即原方的1/2） 放罐標(biāo)準(zhǔn)： 發(fā)酵周期：96小時左右 發(fā)酵單位上升遲緩或不在上升 PH有回升趨勢2.3提取部分2.3.1酸化中和將放罐發(fā)酵液放入發(fā)酵罐，加鹽酸酸化至PH1.52.0，然后加工業(yè)用NaOH中和至PH6.46.8，酸化可使慶大霉素由菌絲中充分溶出，中和有利于732樹脂的吸附。2.3.2 732樹脂靜態(tài)吸附中和后的發(fā)酵液按6萬/ml樹脂的交換容量，投人銨型732樹脂攪拌吸附67小時，測廢液單位

13、在20/m1以下，過60目振蕩篩分離樹脂，樹脂抽入漂洗柱，反沖漂洗干凈。2.3.3飽和樹脂的洗滌，解吸及脫色：飽和樹脂裝人樹脂柱，先用自來水反沖洗至無懸浮物，然后用0.4N HCl正向沖洗，流速1/20V/分鐘（每分鐘流樹脂體積的1/20），約洗樹脂體積的2030倍量，洗至無Ca2+、Mg2+后（以NaOH檢查），再用無鹽水沖至無Cl。再通人4.5的氨水進行解吸，流速上1/100V/分鐘，至流出液PH 7.0時與711樹脂柱串聯(lián)，收集樹脂體積的8倍量，流出單位在 300/ml以下之后，910倍量作下次解吸氨水套用。2.3.4薄膜濃縮解吸流出液約半倍量后，開始濃縮，濃縮過程中蒸汽壓力。不超過0.

14、5kg/cm2，真空度在600mmHg以上，濃縮23遍后， 用萘氏試劑檢查濃縮液應(yīng)無NH4，濃度達到6Be(波美度)，化學(xué)效價15萬/ml左右，以備轉(zhuǎn)鹽、碳脫, 壓入炭脫罐。2.4 精制部分（轉(zhuǎn)鹽、炭脫、過濾） 加入的濃縮液進行攪拌，用12N的H2SO4調(diào)PH6.06.2，加濃縮液體積的7左右的活性炭進行脫色，溫度為6575，歷時6090分鐘，趁熱減壓過濾，脫色液透光度95以上，效價15萬/ml左右，經(jīng)PE管精濾器過濾，用于水針劑的制備或用于無菌噴霧干燥。2.5無菌噴粉部分:根據(jù)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，GMP的要求，對原料藥生產(chǎn)的精、烘、包工序必須采用潔凈技術(shù)設(shè)計，設(shè)立控制區(qū)（潔凈度級）、潔凈區(qū)

15、（潔凈度10000級），局部采用100級層流凈化。并按照GMP要求進行生產(chǎn)管理。在無菌噴霧干燥過程中，所有進入系統(tǒng)的物料、空氣、人員、設(shè)備等都必須按規(guī)定凈化、消毒，產(chǎn)品的收集也必須在100級層流保護下進行。無菌噴粉工藝流程精制好的硫酸慶大霉素濃縮液，按10萬/ml配制后，經(jīng)過濾除菌，用轉(zhuǎn)子流量計15L/小時送至噴霧干燥塔。霧化濃縮液的壓縮空氣經(jīng)冷卻，分離油水，過濾除去細菌和異物后送至噴霧干燥塔，壓力0.91.0 kg/cm2。干燥用熱空氣經(jīng)預(yù)過濾，加熱，中效過濾和高效過濾后得到凈化熱空氣進入噴霧干燥塔，進口溫度120130，出口溫度7080。干燥后，熱空氣和成品自噴霧干燥塔出口送至旋風(fēng)分離器，

16、經(jīng)分離得到硫酸慶大霉素?zé)o菌粉，在100級層流保護下用玻璃瓶收集，尾氣經(jīng)袋濾器過濾后排空。工藝流程中，自中效過濾器開始，整個系統(tǒng)在正壓下操作，以防止外界非凈化空氣侵入系統(tǒng)。2.6無菌壓縮空氣部分2.6.1原理簡介好氧微生物在培養(yǎng)過程中，需要大量的氧氣，以滿足微生物的生長、繁殖以及代謝的需要。這些氧氣通常是由空氣提供的。空氣主要是由氮氣、氧氣、二氧化碳、惰性氣體、水蒸氣以及懸浮在空氣中的塵埃等組成的混合物?？諝庵泻写罅康奈⑸?。見表表 空氣中常見的微生物種類及其大小微 生 物寬(m)長(m)產(chǎn)氣桿菌1.01.51.02.5蠟狀芽孢桿菌1.32.08.125.8普通變形桿菌0.51.01.03.0

17、地衣芽孢桿菌0.50.51.83.3巨大芽孢桿菌0.92.12.010.0覃狀芽孢桿菌0.61.61.613.6枯草芽孢桿菌0.51.11.64.8普通變性桿菌0.51.01.03.0金黃小球菌0.51.00.51.0酵 母 菌3.05.05.019.0病 毒0.00150.2250.00150.28霉?fàn)罘种U菌0.61.61.613.6空氣中的微生物是依附在塵埃上的，空氣中的塵埃數(shù)與細菌數(shù)的關(guān)系式如式11和圖y=0.003x-2.6 11空氣中的塵埃濃度與微生物數(shù)量的關(guān)系空氣過濾除菌就是對空氣進行預(yù)處理，去處油、水的干擾，維持一定的氣流速度，保持過濾器在比較高的效率下進行過濾，以截留空氣中所含微生物，取得無菌空氣。2.6.2空氣過濾除菌流程：這種兩級冷卻、加熱除菌流程，是一個比較完善的空氣除菌流程，可適應(yīng)各種氣候條件，能充分地分離油水，使空氣達到低的相對濕度下進入過濾器，以提高過濾效率。該流程的特點是兩次冷卻、兩次分離、適當(dāng)加熱。兩次冷卻、兩次分離油水的好處是能提高傳熱系數(shù)，節(jié)約冷卻用水，油水分離得比較完全。經(jīng)第一次卻器冷卻后，大部分的水、油都已結(jié)成較大的霧粒，且霧粒濃度較大，故適宜用旋風(fēng)分離器分離。第二冷卻器使空氣進一步冷卻后析出一