細(xì)菌革蘭氏染色ppt課件

1、 細(xì)菌普通染色 和革蘭氏染色 目的要求目的要求a. 掌握細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備方法和普通掌握細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備方法和普通染色的步驟和關(guān)鍵點(diǎn)染色的步驟和關(guān)鍵點(diǎn)b. 掌握革蘭氏染色法的步驟和關(guān)鍵點(diǎn)掌握革蘭氏染色法的步驟和關(guān)鍵點(diǎn)c. 識(shí)別細(xì)菌的革蘭氏染色結(jié)果并畫圖識(shí)別細(xì)菌的革蘭氏染色結(jié)果并畫圖d. 學(xué)習(xí)無菌操作技術(shù)學(xué)習(xí)無菌操作技術(shù) 資料器具資料器具 顯微鏡，擦鏡紙，紗布顯微鏡，擦鏡紙，紗布 革蘭氏染液革蘭氏染液 香柏油香柏油,自來水自來水,95%酒精酒精; 載玻片載玻片,插鏡紙插鏡紙,接種環(huán)接種環(huán),鑷子鑷子,酒精燈酒精燈; 金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌,枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌,未知菌未知菌12小時(shí)的液

2、體培育液小時(shí)的液體培育液 大腸桿菌和酵母菌平板大腸桿菌和酵母菌平板實(shí)驗(yàn)步驟n1.涂片n左手持菌液試管,右手持接種環(huán)在火焰中灼燒,冷卻后從試管中去菌液一滴,在干凈載玻片上做一涂膜;n從固體斜面或平板上取菌時(shí),用無菌接種環(huán)取少量菌體,涂抹均勻于玻片上預(yù)先滴有的一滴自來水中; 實(shí)驗(yàn)步驟n2.枯燥n在空氣中自然枯燥或在火焰快速經(jīng)過枯燥(與熱固定同步進(jìn)展).n3.熱固定n用鑷子夾住涂片一端,在火焰上延續(xù)經(jīng)過幾次;以載玻片在手背上試覺得不燙為宜.實(shí)驗(yàn)步驟n4.染色n在固定的標(biāo)本上加結(jié)晶紫染液1-2滴,染色1min,悄然滴加水洗; 吸干, 加半滴水, 蓋上蓋玻片, 滴上半滴鏡油油鏡檢。(到此實(shí)際上即為細(xì)菌普

3、通染色)n揭去蓋玻片,吸干水, 滴加1-2滴革氏碘液媒染1min, 悄然水洗,吸干。實(shí)驗(yàn)步驟n滴加95%乙醇溶液(或30%丙酮乙醇脫色),悄然搖動(dòng)玻片至液滴無色,不要過分脫色(約30秒),立刻悄然滴加水洗;吸干。n滴加蕃紅染液復(fù)染3min,悄然滴加水洗;n吸干載玻片反面及標(biāo)本周圍水漬,滴上半滴水，蓋上蓋玻片,油鏡鏡檢;實(shí)驗(yàn)步驟n5.鏡檢n留意標(biāo)本中細(xì)菌的外形,大小,陳列,和顏色.n革蘭氏陽性菌為紫色;n革蘭氏陰性菌為紅色;金黃色葡萄球菌(24hrs)染色結(jié)果金黃色葡萄球菌(48hrs)染色結(jié)果金黃色葡萄球菌(72hrs)染色結(jié)果大腸桿菌(24hrs)染色結(jié)果討論n記錄并描畫革蘭氏染色結(jié)果, 注不測(cè)形,陳列和顏色, 看看與實(shí)踐上能否一樣;如不同,分析緣由;n分析影響革蘭氏染色結(jié)果的要素;n酵母菌能進(jìn)展染色嗎?結(jié)果如何?為什么?本卷須知n干凈的載玻片, 適宜取菌量, 菌齡, 熱固定,每一步水洗要徹底而且吸干,和酒精脫色程度是實(shí)驗(yàn)勝利的關(guān)鍵n制止把染液倒入水池中,回收到廢液桶中實(shí)驗(yàn)三終了，預(yù)備實(shí)驗(yàn)四n肉湯蛋白胨培育基的配制按實(shí)驗(yàn)指點(diǎn)61頁配方瓊脂為2。400ml/組置500ml三角燒瓶中用封口膜封好瓶口，用記號(hào)筆在瓶上標(biāo)明培育基稱號(hào)、組號(hào)如周次座次，132、配制時(shí)間，高壓滅菌。n包平皿10個(gè)/包/組、試管4支/包/組、1ml槍頭2個(gè)/包/組、5