標準解讀
GB/T 36848-2018《鱷梨日斑類病毒檢疫鑒定方法》是一項國家標準,旨在為檢測和鑒定鱷梨日斑類病毒提供科學、準確的方法。該標準詳細規(guī)定了從樣本采集到實驗操作的一系列流程和技術要求,適用于植物檢疫機構及相關部門對鱷梨及其繁殖材料中是否感染有鱷梨日斑類病毒進行檢測。
標準首先明確了適用范圍,即針對的是鱷梨(Persea americana Mill.)以及與之相關的植物材料中的鱷梨日斑類病毒(Avocado sunblotch viroid, ASBVd)。隨后,介紹了所需的主要儀器設備如RT-PCR儀等,并列出了用于提取RNA、反轉錄成cDNA以及后續(xù)擴增所需的試劑清單。
在采樣部分,標準指定了如何正確選擇代表性樣品以確保檢測結果的有效性和可靠性;同時,也給出了保存條件及運輸過程中應注意的事項,保證樣本質量不受影響。接下來是詳細的實驗步驟說明,包括總RNA的提取、cDNA合成、特異性引物設計原則以及實時熒光定量PCR反應體系建立等內容。通過這些步驟可以獲得目標片段的擴增產物,從而實現對鱷梨日斑類病毒的存在與否做出判斷。
此外,還特別強調了實驗過程中的質量控制措施,比如設置陽性對照和陰性對照來驗證整個檢測系統(tǒng)的靈敏度與特異性。最后,標準還提供了結果分析指南,幫助使用者根據實驗數據作出準確結論。
此標準為我國鱷梨產業(yè)健康發(fā)展提供了技術支持,在防止外來有害生物入侵方面發(fā)揮著重要作用。
如需獲取更多詳盡信息,請直接參考下方經官方授權發(fā)布的權威標準文檔。
....
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- 現行
- 正在執(zhí)行有效
- 2018-09-17 頒布
- 2019-04-01 實施
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文檔簡介
ICS6502001
B16..
中華人民共和國國家標準
GB/T36848—2018
鱷梨日斑類病毒檢疫鑒定方法
DetectionandidentificationofAvocadosunblotchviroid
2018-09-17發(fā)布2019-04-01實施
國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布
中國國家標準化管理委員會
中華人民共和國
國家標準
鱷梨日斑類病毒檢疫鑒定方法
GB/T36848—2018
*
中國標準出版社出版發(fā)行
北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號
2(100029)
北京市西城區(qū)三里河北街號
16(100045)
網址
:
服務熱線
:400-168-0010
年月第一版
20189
*
書號
:155066·1-61332
版權專有侵權必究
GB/T36848—2018
前言
本標準按照給出的規(guī)則起草
GB/T1.1—2009。
本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口
(SAC/TC271)。
本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國深圳出入境檢驗檢疫局中華人民共
:、、
和國山東出入境檢驗檢疫局
。
本標準主要起草人張永江鄭耘張京萱辛言言向均盧小雨
:、、、、、。
Ⅰ
GB/T36848—2018
鱷梨日斑類病毒檢疫鑒定方法
1范圍
本標準規(guī)定了鱷梨日斑類病毒逆轉錄聚合酶鏈式反應和往復雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳
(RT-PCR)
的檢疫鑒定方法
。
本標準適用于可能攜帶鱷梨日斑類病毒的植物及其果實的檢疫鑒定
。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法
GB/T6682
3基本信息
中文名鱷梨日斑類病毒
:
學名Avocadosunblotchviroid
:
縮寫
:ASBVd
分類地位鱷梨日斑類病毒科Avsunviroidae鱷梨日斑類病毒屬Avsunviroid
:()()。
鱷梨日斑類病毒的其他信息參見附錄
A。
4方法原理
根據在寄主植物上的癥狀進行初步判定根據其自然狀態(tài)和變性后的不同結構分子
ASBVd;RNA
在聚丙烯酰胺凝膠電泳中遷移率的差異進行往復雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳
(Return-Polyacrylamide
檢測根據基因組特征進行檢測通過電泳條帶大小進行結果
GelElectrophoresis,R);RT-PCR,
判定
。
5儀器設備及設施用具及試劑
、
51儀器設備及設施
.
天平感量高速冷凍離心機計儀電泳儀電泳槽凝膠成像系統(tǒng)隔離檢疫溫
(0.001g)、、pH、PCR、、、、
室恒溫水浴低溫冰箱等
、、。
微量移液器研缽離心管花盆
(2μL、10μL、20μL、100μL、200μL、1000μL)、、(1.5mL、2.0mL)、、
消毒土等
。
52RT-PCR檢測試劑
.
除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純實驗用水應符合
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