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文檔簡介
1、植物組培實驗室建設1、功能簡述11) 準備室 12) 滅菌室 13) 緩沖間 14) 無菌操作室 15) 培養(yǎng)室 22、設備及耗材清單21) 試驗設備清單 22) 常備試劑清單 5 MS 培養(yǎng)基必備試劑5 常備激素及輔助試劑5植物組培實驗室建設1、功能簡述植物組織培養(yǎng)實驗室一般應包括準備室、洗滌滅菌室、無菌操作室、培養(yǎng) 室、緩沖間,這也是組織培養(yǎng)實驗所必須具備的基本條件。要培養(yǎng)成大田苗還要有 相應的馴化室、溫室。1) 準備室用途:進行一切與實驗有關的準備工作。完成所使用的各種藥品的貯備、稱 量、溶解、器皿洗滌、晾置、培養(yǎng)基配制與分裝、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌、培養(yǎng) 材料的預處理等。設備:準備室應
2、具備實驗臺、藥品柜、水池、落水架、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平(0.1g、0.0001g分度各一臺)、高壓滅菌器、蒸餾水器(可省去)、酸度計(又稱pH 計 )、過濾滅菌器、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、三角瓶、試管、電磁爐、水浴鍋、漏斗、量筒、刻度移液管(為操作簡便起見可購買移液槍 1ml、 5ml 各一個代替)、玻璃棒、酒精燈、鑷子、試管架、瓊脂、紗布、棉塞、封口膜、大量元素、微量元素、蔗糖、有機物和植物激素的母液(詳細內容見附表)、NaOT鹽酸、濾紙、脫脂棉、橡皮筋、牛皮紙等。2) 滅菌室用途:完成各種器具的保存、培養(yǎng)基的滅菌等。設備:中央實驗臺、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、干燥滅菌器(
3、電烘箱)70%的酒精、2%的次氯酸鈉等。3) 緩沖間用途:是進入無菌室前的一個緩沖場地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進入無菌室和培養(yǎng)室。進入 無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。設備: 1-2 盞紫外燈、水槽、試驗臺、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖 鞋、口罩等。4) 無菌操作室用途:也叫接種室,主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉移、試管苗的繼代、原生質體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序,是植物離體培養(yǎng)研究或生產(chǎn)中最關鍵的一步。設備:紫外燈、空調、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種銀子、剪 刀、解剖刀、接種針
4、),實驗臺和擱架,還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、甲 醛和高鈕酸鉀等殺菌藥品。5)培養(yǎng)室用途:對接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進行控制條件下的培養(yǎng)的場 所。設備:安裝日光燈照明的培養(yǎng)架(控溫控光控濕)、搖床、自動控時器、紫 外燈、光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱、生化培養(yǎng)箱、除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調要求:約需10-20平方米左右,培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù) 目、及其他附屬設備而定,其設計以充分利用空間和節(jié)省能源為原則?;疽笫?能夠控制光照和溫度,并保持相對的無菌環(huán)境,因此,培養(yǎng)室應保持清潔和適度干 燥;為滿足植物培養(yǎng)材料生長對氣體的需要,還應安裝排風窗和換氣扇等培養(yǎng)室的 換氣
5、裝置;為節(jié)省能源和空間,應配置適宜的培養(yǎng)架,并安裝日光燈照明。表1、組培實驗室儀器配置表功能單元面積(平米)配置儀器準備室(兼 儲藏室功 能)50藥品柜、冰箱(柜)、水槽、操作臺、純水制水 器、酸度計、顯微鏡、天平、防塵柜、常用玻璃 儀器火菌室15高壓滅菌器、烘箱、緩沖室5紫外燈、鞋架、掛鉤、醫(yī)用白大褂接種室15紫外燈、內置空調、超凈工作臺、消毒器、酒精 燈、接種器械培養(yǎng)室50X2培加架(拄光、溫、濕)溫室大于300平方米噴灌設施和可移動苗床(可忽略)2、設備及耗材清單1)試驗設備清單表2、器材數(shù)量及參考價格品名規(guī)格數(shù)量單價總價實驗臺2mriX 4m1局壓火菌鍋100L1品名規(guī)格數(shù)量單價總價超
6、凈工作臺雙人垂直流2空調落水架防塵櫥1冰箱2天平0.01g、0.0001g2干熱消毒柜1凈水器酸度計過濾滅菌器電磁爐不銹鋼鍋1培養(yǎng)架控溫搖床1自動控時器10紫外燈10光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱2生化培養(yǎng)箱2加濕器2噴壺5溫濕度計2超聲波清洗器1解剖鏡1鞋帽架、柜子2工作服、拖鞋、口罩藥品柜2恒溫水浴鍋1脫脂棉1漏斗培養(yǎng)瓶及瓶蠱250ml1000二角瓶150ml50二角瓶250ml50二角瓶500ml10試管5ml50試管15ml50試管25ml50試管蓋200試管塞、試管架移液吸管1 ml6品名規(guī)格數(shù)量單價總價移液吸管2 ml6移液吸管5 ml6移液吸管10 ml12溫度計200度6試紙5.4-7
7、30玻璃棒9量筒2000 ml3量筒1000 ml3量筒500 ml3量筒100 ml6燒杯500 ml9燒杯250 ml6不銹鋼藥勺不同規(guī)格10容量瓶100 ml6容量瓶250 ml6容量瓶500 ml6容量瓶1000 ml12白口小瓶1000 ml21白口小瓶250 ml9洗耳球30勺子9漏斗9移液器1-100ul3移液器100-1000ul3移液器1000-5000ul3消毒器JZ-100-B立式6酒精燈1220cm12手術剪18cm12手術刀柄4#12手術刀片23#1215 cm30濾紙中速濾紙11cm3瓶蠱6cm帶透氣膜1000白大褂大中小5線手套50個橡膠手套9包2)常備試劑清單MS培養(yǎng)基必備試劑表3、MS培養(yǎng)基必備試劑大里兀系微量元素鐵鹽有機物其他KNO3H3BC3FeSO7H2O肌醇NH4NO3MnSO4 4H2ON%EDTA 2HO煙酸瓊脂MgSQ 7H2OZnSQ 7H2O鹽酸硫胺素KH2PO4Na2MoO4 2H2O鹽酸叱哆醇CaC
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