試驗(yàn)五發(fā)芽測(cè)定

1、實(shí)驗(yàn)五 發(fā)芽測(cè)定5.1 發(fā)芽測(cè)定的意義發(fā)芽能力是播種材料最重要的品質(zhì)， 發(fā)芽測(cè)定就是人為創(chuàng)造最理想的環(huán)境條件， 使種批潛在的發(fā)芽能力能夠充分表現(xiàn)出來(lái)。 最終目的是了解該種批適于播種的程度， 并比較不同種批的使用價(jià)值。為了使測(cè)定結(jié)果能夠相互比較， 并能在隨機(jī)變異的范圍內(nèi)具有重現(xiàn)性， 發(fā)芽測(cè)定必須根據(jù)統(tǒng)一規(guī)定，在標(biāo)準(zhǔn)化的條件下進(jìn)行。5.2 發(fā)芽測(cè)定條件發(fā)芽測(cè)定必須在最適宜供試種子萌芽的條件下進(jìn)行。種子發(fā)芽的必須條件是水分、溫度、氧氣、有些樹(shù)種需要光照。5.2.1水分通氣水分是種子發(fā)芽的首要條件。發(fā)芽的P21頁(yè)開(kāi)啟發(fā)芽皿即能滿(mǎn)足發(fā)芽所需的氧氣。5.2.2溫度 目前對(duì)發(fā)芽測(cè)定，規(guī)定的溫度在致分為兩類(lèi)，

2、 一類(lèi)是恒溫， 另一類(lèi)是變溫。 多數(shù)林木種子發(fā) 芽的測(cè)定使用的是恒溫。 例如25C或30C。有 些樹(shù)種則規(guī)定采用變溫。例如2030C的變溫， 以模擬晝夜交替的溫度變化，有利于種子發(fā) 芽，采用變溫時(shí)， 每晝夜有 16小時(shí)給予較低溫 度， 8小時(shí)給予較高的溫度。5.3發(fā)芽測(cè)定的方法5.3.1測(cè)定樣品的提取發(fā)芽測(cè)定所需樣品應(yīng)從凈度測(cè)定后的純凈種子中提取， 即使送檢單位不要求測(cè)定凈度， 發(fā)芽測(cè)定樣品也應(yīng)從純凈種子中提取。首先用四分法將種子分成四份， 從每份中隨機(jī) 提取25粒組成 100粒。共取四個(gè) 100粒，即為四 個(gè)重復(fù)。種粒大的可以 50粒或 25粒為一次重 復(fù)。樣品數(shù)量有限或設(shè)備條件不足時(shí)， 也

3、可以 采用三次重復(fù)， 但應(yīng)在檢驗(yàn)證中注明， 特小粒 種子用重復(fù)發(fā)芽法。 0.10.25克為一次重復(fù)。5.3.2測(cè)定樣品的預(yù)處理發(fā)芽測(cè)定前種子是否需要預(yù)處理， 用什么方法處理，這取決于被測(cè)定種子的基本特性， 同時(shí)也受種子質(zhì)量情況的制約。具有休眠習(xí)性的種子， 發(fā)芽測(cè)定之前根據(jù)休眠 的原因，采取適當(dāng)?shù)拇哐刻幚?，解除休眠?一 般樹(shù)種可以采取浸種處理加速發(fā)芽。例如： 杉 木、馬尾松、黑松、赤松、云南松、油松、水 杉、落葉松、云杉、黃連木、胡枝子等，用始 溫為45C水浸種24小時(shí)，皂角用100C浸種所 用的水最好更換幾次。刺槐種子用80 C始溫浸 種 24小時(shí)，中間換水 23次。浸種要注意水溫與浸種時(shí)間

4、。 種子在水中浸泡 太久，反而對(duì)芽不利。5.3.3 置床置床就是將經(jīng)過(guò)預(yù)處理的種子安放于發(fā)芽基質(zhì)上。視樹(shù)種而不同， 常用的發(fā)芽基質(zhì)有濾紙和細(xì)沙。目前除常用的培養(yǎng)皿，尚有培養(yǎng)盒，平板發(fā)芽器等。每個(gè)培養(yǎng)皿整齊地安放 100粒（種粒大時(shí)可為 50粒乃至 25粒）種子。 種粒之間保持的距離大 約相當(dāng)于種粒本身的 14倍，以減少霉菌蔓延 感染，避免發(fā)芽的幼根相互纏繞。發(fā)芽種粒的排放應(yīng)有一定規(guī)律， 如下圖， 以便 計(jì)算并減少錯(cuò)誤， 將樣品登記表的號(hào)數(shù)， 重復(fù) 號(hào)、姓名和日期用鉛筆， 簡(jiǎn)地填寫(xiě)一張小標(biāo)簽， 分別貼在培養(yǎng)皿不易磨損的地方， 例如底盤(pán)的 外緣，以免引起差錯(cuò)。5.4發(fā)芽測(cè)定的管理和觀察載5.4.1

5、管理a. 經(jīng)常檢查發(fā)芽環(huán)境的溫度，儀器的溫度同預(yù)定的溫度相差不能超過(guò)土 1Cob. 保持發(fā)芽床的水分。水分不足時(shí)應(yīng)及時(shí)加 水，但水分也不能過(guò)多， 用指尖輕壓發(fā)芽床 （指 紙床）， 如指尖周?chē)霈F(xiàn)水膜，或者種粒四周出現(xiàn)水膜。都表示水分過(guò)多。c. 通氣種子發(fā)芽需要足夠的氧氣，并會(huì)釋放 出大量的二氧化碳。 有蓋的培養(yǎng)皿的缺點(diǎn)之一 就是通氣不良，應(yīng)當(dāng)經(jīng)常揭開(kāi)蓋子充分換氣。d. 將感染了霉菌的種子取出（不要使它們觸 及健康的種粒）， 用清水沖洗數(shù)次， 直到水無(wú) 混濁再放回原發(fā)芽床。 發(fā)霉嚴(yán)重時(shí)整個(gè)濾紙和 座墊，甚至整個(gè)培養(yǎng)皿都要更換。 這些情況在發(fā)芽記錄表（附表 5.1 ）中應(yīng)有所記述。圖5.1 100

6、粒種子在發(fā)芽床上的排放圖例5.4.2觀察記載發(fā)芽測(cè)定情況要定期觀察記載（見(jiàn)附表 5.1）。為了更好地掌握發(fā)芽測(cè)定的全過(guò)程， 最好每天作一次觀察記載。 至少在規(guī)定的統(tǒng)計(jì)發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率的那一天，必須有記載。5.4.3 發(fā)芽測(cè)定的持續(xù)時(shí)間 發(fā)芽測(cè)定的持續(xù)天數(shù)見(jiàn)天 5.1。表中所列天數(shù) 以置床之日起零起算。 且不包括種子預(yù)處理的 時(shí)間，如果確認(rèn)某樣品已達(dá)到最高發(fā)芽率， 也 可在規(guī)定的時(shí)間以前結(jié)束測(cè)定。 如到規(guī)定的結(jié) 束時(shí)間仍有較多的種粒萌發(fā)， 也可酌情延長(zhǎng)測(cè) 定時(shí)間。發(fā)芽測(cè)定所用實(shí)際天數(shù)應(yīng)在檢驗(yàn)報(bào)告 中填明。記載項(xiàng)目：按發(fā)芽床的編號(hào)依次記載以下各點(diǎn)（見(jiàn)附表 5.1）。表 5.1 常用樹(shù)種發(fā)芽測(cè)定的主要

7、技術(shù)規(guī)定（摘要）樹(shù)種 溫度（C） 發(fā)芽勢(shì)終止天數(shù) 發(fā)芽率終止天數(shù) 備注柏木 25 2 35 晝夜光照 8小時(shí)福建柏 25 12 28側(cè)柏 25 9 20濕地松 2030 11 28思茅松、黑松、云南松 25 10 21馬尾松、杉木 25 10 20金錢(qián)松 25 16 25柳杉 25 14 25水杉 25 9 16木麻黃 30 8 15 重量法芽法， 每晝夜光照 8小時(shí)烏柏 2030 10 30 除去蠟層，每晝夜光照 8 小時(shí)杜仲 23 7 12 在胚根一端將外皮輕劃一刀，室溫水浸 24小時(shí)香椿 25 8 12 室溫水浸種 24小時(shí)陽(yáng)思樹(shù) 25 7 21100C水浸種2分種桑樹(shù) 30 8 15

8、重量發(fā)芽法，每晝夜光照 8小時(shí)檸檬桉 25 5 11 重量發(fā)芽法隆緣桉 25 5 9 重量發(fā)芽法蘭桉 2030 5 14 重量發(fā)芽法： 每晝夜光照 8小時(shí)刺槐 2030 5 10 始溫80C水浸24小時(shí)剩余 硬粒再用始溫80C浸24小時(shí)每晝夜光照8小時(shí)楊屬 2030 3 6 重量發(fā)芽法木荷 25 7 30 正常發(fā)芽粒：生出正常胚根，且其長(zhǎng)度大于該 種粒一半的稱(chēng)為正常發(fā)芽粒， 對(duì)、柳、桉等細(xì) 粒種子，胚根的長(zhǎng)度應(yīng)不少于該種粒的長(zhǎng)度。竹類(lèi)種子正常發(fā)芽粒的幼根應(yīng)至少同該種粒等長(zhǎng)且幼芽的長(zhǎng)度超過(guò)該種粒長(zhǎng)度的二分之一。苦楝、柚木等復(fù)粒種子，其中只要有一粒 種子正常發(fā)芽即可作為正常發(fā)芽數(shù)。符合定義 的正常

9、發(fā)芽粒用小鑷子取出。異狀發(fā)芽粒：指胚根短而生長(zhǎng)遲滯；胚根呈負(fù) 向地性；胚根萌發(fā)異常纖弱； 胚根腐壞；胚根 發(fā)自珠孔以外的部位；種殼曝裂或脫落；胚根 拳曲；子葉先出；竹類(lèi)種子有根無(wú)芽、有芽無(wú) 根或根短而生長(zhǎng)遲滯。有時(shí)需將難于判斷的發(fā) 芽粒特別提出另外培養(yǎng)，以便確定是否為異狀 發(fā)芽。腐爛粒：內(nèi)含物腐敗成膠狀的無(wú)生命種子稱(chēng)腐 爛粒，應(yīng)及時(shí)提出并在表格中記述， 但不能把 感染霉菌的種子混同為腐爛粒。未發(fā)芽粒：每次剔除發(fā)芽粒，異狀發(fā)芽粒和腐 爛粒之后將余下的未發(fā)芽粒重新排放整齊，并點(diǎn)數(shù)，以便及時(shí)核查，避免差錯(cuò)。5.4.4到達(dá)發(fā)芽試驗(yàn)終止日期后， 分組用切開(kāi)法 對(duì)尚未發(fā)芽的種粒進(jìn)行補(bǔ)充鑒定， 分別歸成以

10、下幾類(lèi)記入附表。a. 新鮮健康粒；b. 腐爛粒；c. 空粒；d .澀粒（多見(jiàn)天杉木、柳杉）。5.5計(jì)算發(fā)芽結(jié)果 發(fā)芽測(cè)定結(jié)束， 并對(duì)尚未發(fā)芽的種子用切開(kāi)法 作了鑒定以后，進(jìn)行以下各項(xiàng)計(jì)算記入附表。 5.5.1發(fā)芽率（實(shí)驗(yàn)室發(fā)芽率、技術(shù)發(fā)芽率）式中： n 在規(guī)定條件下，規(guī)定期內(nèi)的正常 發(fā)芽粒數(shù)；N 供試種子數(shù)。發(fā)芽率計(jì)算到小數(shù)點(diǎn)后一位，以下四舍五入。表 5-2 發(fā)芽百分率的最大容許差距，用以決定是否要重做測(cè)定，只考慮隨機(jī)取樣的變異平均發(fā)芽百分率 最大容許差距99 2 598 3 697 4 896 5 9956 1093-947-81091-929-101189-9011-121287-8813

11、-141384-8615-171481-8318-201578-8021-231673-7724-281767-7229-341856-6635-451951-5546-5020發(fā)芽率按組計(jì)算，然后計(jì)算四組的算術(shù)平均值。平均值不帶小數(shù)，組間的允許誤差表 5.2如果沒(méi)有超過(guò)容許誤差， 測(cè)定結(jié)果可以認(rèn)為是正確的，即以各組的平均百分?jǐn)?shù)作為本次測(cè)定結(jié)果。如果超過(guò)容許的誤差范圍， 則認(rèn)為測(cè)定結(jié)果不 正確，需進(jìn)行第二次測(cè)定。 第二次測(cè)定 （也以 與上次同時(shí)做） 的結(jié)果和第一次測(cè)定結(jié)果之差 附合規(guī)定時(shí)， 則用兩次測(cè)定的平均數(shù)作為發(fā)芽 率，填入檢驗(yàn)證。 檢查的方法是規(guī)定計(jì)算兩次 的平均數(shù)，并在表 5.3中查出

12、最大容許差距， 如？次的結(jié)果相差不超過(guò)表 5.3所規(guī)定的容許 差距，則測(cè)定是符合的。 如超過(guò)容許誤差， 則 應(yīng)再測(cè)定。表 5.3 判斷兩次測(cè)定是否符合的容許差距只 考慮隨機(jī)取樣的變異 平均發(fā)芽百分率 最大容許差距 98-99 2-3 2 95-97 4-6 3 91-94 7-10 4 85-90 11-16 5 77-84 17-24 6 60-76 25-41 7 51-59 42-50 8 5.5.2發(fā)芽勢(shì) 在規(guī)定時(shí)間（見(jiàn)表 5.1，一般是發(fā)芽達(dá)到高峰 以前）內(nèi)正常發(fā)芽的種子的種子數(shù)占供試種子 數(shù)百分比，稱(chēng)為發(fā)芽勢(shì)。發(fā)芽勢(shì)也是分組計(jì)算， 然后求四組之間的平均值。發(fā)芽勢(shì)計(jì)算到小數(shù)點(diǎn)后一位， 計(jì)算時(shí)容許的誤差為計(jì)算發(fā)芽率時(shí)所容許的 1.5倍。5.5.3絕對(duì)發(fā)芽率供試種子中飲滿(mǎn)種子的發(fā)芽率稱(chēng)為絕對(duì)發(fā)芽式中： n 正常發(fā)芽粒數(shù)；N 供試種子數(shù)a 供試種子的空粒種子數(shù)和澀粒數(shù)。5.5.4平均發(fā)芽時(shí)間平均發(fā)芽時(shí)間是指供試種子發(fā)芽所需的平均天數(shù)。平均發(fā)芽時(shí)間的計(jì)算如下：式中： D 種子置床以后的天數(shù)，以置床之日