核酸的提取及其組分的鑒定講座

1、2021/8/121煩惱有何懼怕，既然躲不掉，就調(diào)好心態(tài)與它共存。心向陽光，何懼風(fēng)霜。茫茫人海你我相遇就是緣分，歡迎下載！核酸的提取及其組分的鑒定核酸的提取及其組分的鑒定目的目的1.1.熟悉苯酚法提取動物組織中核酸的原理和操作方法；熟悉苯酚法提取動物組織中核酸的原理和操作方法；2.2.了解核酸的組成，掌握核酸組分的鑒定方法。了解核酸的組成，掌握核酸組分的鑒定方法。 原理原理蒸餾水研磨：破壞肝細(xì)胞蒸餾水研磨：破壞肝細(xì)胞水飽和苯酚：使蛋白質(zhì)變性，與水分層，核酸位于水相水飽和苯酚：使蛋白質(zhì)變性，與水分層，核酸位于水相 乙醇：沉淀核酸。乙醇：沉淀核酸。原理原理 核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮堿基

2、化核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮堿基化合物，根據(jù)這三種物質(zhì)的性質(zhì)特點(diǎn)可用不同的方法加合物，根據(jù)這三種物質(zhì)的性質(zhì)特點(diǎn)可用不同的方法加以鑒定：以鑒定：1磷酸磷酸：可與鉬酸試劑作用產(chǎn)生黃色的磷鉬酸銨沉淀。：可與鉬酸試劑作用產(chǎn)生黃色的磷鉬酸銨沉淀。PO43-+12MoO32-+3NH4+ +24H+=（NH4）3 PO412MoO36H2O+6H2O2嘌呤嘌呤：嘌呤堿可與硝酸銀作用生成白色的絮狀嘌呤：嘌呤堿可與硝酸銀作用生成白色的絮狀嘌呤銀沉淀。銀沉淀。3核糖核糖：與濃硫酸共熱得到糠醛，后者與：與濃硫酸共熱得到糠醛，后者與3，5-二羥二羥甲苯縮合而成綠色化合物。甲苯縮合而成綠色化合物。步驟 1核

3、酸的提?。汉怂岬奶崛。?取兔肝取兔肝1克，剪碎置于研缽中，加克，剪碎置于研缽中，加2ml蒸餾水研勻，再蒸餾水研勻，再加加2ml蒸餾水混勻。蒸餾水混勻。 取取15100mm短試管短試管1支，滴加勻漿液支，滴加勻漿液40滴（約滴（約2ml）。）。 向試管中加入向試管中加入90苯酚溶液苯酚溶液2ml，充分振搖，充分振搖5min（注意（注意手法，防止溶液濺出），手法，防止溶液濺出），3000rpm離心離心5min。 用滴管小心吸取上層水相至另一試管中（貼壁吸取，用滴管小心吸取上層水相至另一試管中（貼壁吸取，為避免吸到下層液，可留一些上層液在原試管內(nèi)）。為避免吸到下層液，可留一些上層液在原試管內(nèi)）。 加

4、入加入3 ml 95%乙醇，充分搖勻，直至絮狀沉淀析出。乙醇，充分搖勻，直至絮狀沉淀析出。 3000rpm離心離心5min，棄去液體，沉淀部分即為核酸。，棄去液體，沉淀部分即為核酸。 2核酸的水解：核酸的水解： 向核酸沉淀中加向核酸沉淀中加2ml蒸餾水，震蕩搖勻使沉淀溶蒸餾水，震蕩搖勻使沉淀溶解。加入解。加入10硫酸硫酸2ml，搖勻，于，搖勻，于沸水浴中加熱沸水浴中加熱7分鐘分鐘，冷卻后備用。冷卻后備用。 3核酸的鑒定：核酸的鑒定：磷酸的鑒定：磷酸的鑒定：測定管測定管對照管對照管核酸水解液核酸水解液1010- -5%5%硫酸硫酸- -1010 鉬酸試劑鉬酸試劑 10 1010 10 搖勻搖勻,

5、 ,沸水浴沸水浴5min5min試劑（滴）試劑（滴）管別管別嘌呤的鑒定：嘌呤的鑒定：測定管測定管對照管對照管核酸水解液核酸水解液2020- -5%5%硫酸硫酸- -20205 5AgNOAgNO3 310101010濃氨水濃氨水5 55 5 不可震搖！靜置數(shù)分鐘，觀察結(jié)果。不可震搖！靜置數(shù)分鐘，觀察結(jié)果。試劑（滴）試劑（滴）管別管別測定管測定管對照管對照管核酸水解液核酸水解液5 5- -5%5%硫酸硫酸- -5 5 3 3，5-5-二羥甲苯二羥甲苯 5 55 5 搖勻，沸水浴搖勻，沸水浴10min10min試劑（滴）試劑（滴）管別管別核糖的鑒定：核糖的鑒定：注意注意u苯酚、鉬酸試劑及苯酚、鉬酸

6、試劑及3，5-二羥甲苯等均有強(qiáng)烈的腐蝕二羥甲苯等均有強(qiáng)烈的腐蝕性，操作時(shí)務(wù)必小心！若接觸到苯酚，立即用性，操作時(shí)務(wù)必小心！若接觸到苯酚，立即用95酒精清洗。酒精清洗。u實(shí)驗(yàn)中用到的第一支試管（含苯酚），不要清洗，實(shí)驗(yàn)中用到的第一支試管（含苯酚），不要清洗，請直接放在走廊的紅色小桶內(nèi)。請直接放在走廊的紅色小桶內(nèi)。u提取核酸時(shí)，應(yīng)選用短粗試管（提取核酸時(shí)，應(yīng)選用短粗試管（15100mm）；鑒）；鑒定時(shí)則可以選用長試管（定時(shí)則可以選用長試管（15150mm）。）。92021/8/12n9、 人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2022-1-192022-1-19Wednesday, January

7、19, 2022n10、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。2022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022 10:11:50 PMn11、人總是珍惜為得到。2022-1-192022-1-192022-1-19Jan-2219-Jan-22n12、人亂于心，不寬余請。2022-1-192022-1-192022-1-19Wednesday, January 19, 2022n13、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來懲罰自己。2022-1-192022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022n14、抱最大的希望，作最大的努力。2022年1月19日星期三2022-1-

8、192022-1-192022-1-19n15、一個(gè)人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。2022年1月2022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022n16、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2022-1-192022-1-19January 19, 2022n17、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。2022-1-192022-1-192022-1-192022-1-19謝謝大家謝謝大家102021/8/12n9、 人的價(jià)值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2022-1-192022-1-19Wednesday, January 19, 2022n10、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。

9、2022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022 10:11:50 PMn11、人總是珍惜為得到。2022-1-192022-1-192022-1-19Jan-2219-Jan-22n12、人亂于心，不寬余請。2022-1-192022-1-192022-1-19Wednesday, January 19, 2022n13、生氣是拿別人做錯(cuò)的事來懲罰自己。2022-1-192022-1-192022-1-192022-1-191/19/2022n14、抱最大的希望，作最大的努力。2022年1月19日星期三2022-1-192022-1-192022-1-19n15、一個(gè)人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。2022年1月2022