藥物的酶聯(lián)法檢測(cè)三環(huán)類抗抑郁試劑盒

1、藥物的酶聯(lián)法檢測(cè)三環(huán)類抗抑郁試劑盒（本試劑盒對(duì)氯丙嗪有很好的交叉反應(yīng)活性）一、簡(jiǎn)介：三環(huán)類的藥物有幾十種，但經(jīng)常使用的藥方類藥物也就有十多種左右。本公司的產(chǎn)品對(duì)經(jīng)常使用三環(huán)類藥物具有極高的靈敏度和專一性，已被廣泛應(yīng)用于人體血液、人體組織萃取液以及動(dòng)物尿液中的三環(huán)類藥物的檢測(cè)。二、測(cè)試原理：本檢測(cè)試劑盒系采用先進(jìn)的競(jìng)爭(zhēng)免疫法，將相應(yīng)的毒品抗體包被到96孔的酶聯(lián)板的反應(yīng)井中。另用酶標(biāo)記的特異性抗原與藥物分子本身競(jìng)爭(zhēng)性地與反應(yīng)井中的包被抗體反應(yīng)，在檢測(cè)時(shí)，如樣品中不含三環(huán)類化合物或其代謝物，酶標(biāo)記的抗原就與反應(yīng)井中的特異抗體相結(jié)合，加入酶底物后，產(chǎn)生較高的吸光度。如樣品中存在三環(huán)類化合物或其代謝物，

2、那么毒品分子與酶標(biāo)記的特異抗原就會(huì)競(jìng)爭(zhēng)性地與酶標(biāo)板反應(yīng)井的抗體結(jié)合。毒品濃度越高，就越能阻止酶標(biāo)記的抗原與反應(yīng)井的抗體相結(jié)合，加入酶底物后，產(chǎn)生的吸光度就越低，所以，吸光度與樣品中毒品的濃度恰好成反比。該試劑盒操作簡(jiǎn)便。只需將血液稀釋10倍后就可以直接使用。當(dāng)使用尿樣時(shí)，雖然可以直接使用，但仍應(yīng)稀釋10倍以上或100倍，因?yàn)槟驑又械臐舛纫话惚妊褐械臐舛雀?0倍以上，極可能超出本試劑盒的工作曲線范圍。該試劑盒具有極度的靈敏度，檢測(cè)極限為2ng/ml。三、試劑盒所包含的試劑：1、 96孔酶聯(lián)板；2、 酶聯(lián)結(jié)合物；3、 陽性參考標(biāo)準(zhǔn)品；4、 陰性參考標(biāo)準(zhǔn)品；5、 酶反應(yīng)底物（TMB）；6、 反應(yīng)終

3、止液（1N鹽酸）。四、試劑盒儲(chǔ)存：1、 不可冷凍反應(yīng)試劑，保存在2-4即可。酶標(biāo)板可單獨(dú)保存在室溫下。2、 不可將不同生產(chǎn)批號(hào)試劑盒中的試劑混合使用；3、所有的試劑需避光保存，尤其在操作反應(yīng)過程中，應(yīng)將加入酶底物的反應(yīng)板放入黑暗中。五、試劑準(zhǔn)備：1、在做實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)將在2-4保存的試劑升溫至室溫（20-25），才可使用。在冬天室溫低于0以下，需用30的溫水加熱試劑并使其溫度達(dá)到20-25方可使用；2、具有粘性的樣品一定要用磷酸鹽（pH7.0）稀釋后才能使用；3、 檢查裝有微孔板的袋子是否有破損；4、不使用過期的試劑盒。六、詳細(xì)操作步驟：1、 將所有待測(cè)的血液樣品、尿樣或組織萃取液用磷酸鹽緩沖液（

4、pH：7.0）稀釋（1：10）；2、 配制10倍濃度標(biāo)準(zhǔn)品（0ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml），在測(cè)試前再稀釋10倍，并立即使用；3、 加10微升的再稀釋的標(biāo)準(zhǔn)樣品到反應(yīng)井中；4、 加10微升已稀釋的待測(cè)樣品到反應(yīng)井中；5、 加100微升的酶聯(lián)物到反應(yīng)井中，輕微擊拍酶聯(lián)板的邊緣，使其混合均勻；6、 放在室溫下60分鐘（黑暗中為好）；7、 用350ul的蒸餾水洗6次；8、 拍干酶聯(lián)板；9、 加100ul的酶底物；10、 室溫和黑暗中放置30分鐘；11、 加100ul的反應(yīng)終止液。12、 讀數(shù)。七、注意事項(xiàng)：1、本試劑僅供體外診斷使用；2、人體液可能含有傳染病，

5、需帶防護(hù)手套；3、不可加NaN3到標(biāo)準(zhǔn)品中作為防腐劑，因?yàn)闀?huì)抑制酶反應(yīng)活性；4、 不可使用含NaN3的外來陰性或陽性標(biāo)準(zhǔn)品；5、 不可將未用完的酶底物倒回原來的瓶中；6、 小心使用反應(yīng)終止液，因其有腐蝕性。注意：加樣準(zhǔn)確是保證得到好結(jié)果的關(guān)鍵。典型三環(huán)代謝物（Nortriptyline）ng/ml吸光值02550100交叉反應(yīng)如下表：TABLE2Cross-reactivities related drugsCompoundApprox. ng/mlequivalent to 50 ng of NortripylineCorss-reactivitiesNortriptyline50100%A

6、mitriptyline25200%Desipramine25200%Imipramine25200%Triimipramine10050%Clomipramine12540%Norclomipramine25020%Doxepin32515%Nordoxepin32515%Protriptyline20025%Chlorpromazine2040%八、以下化合物均對(duì)檢測(cè)盒無干擾反應(yīng)：Aliquots of a human urine matrix were spiked with the following compounds at a concentration of 10,000 ng/

7、ml. None of these compounds gave values in the assay that were equal to or greater than the assay sensitivity level (2 ng/ml).Acetaminophen, Acetylsalicylic acid, Alprazolam, Amphetamine, Aminopyrine, Ampicillin, Ascorbic acid, Atropine, Benzoylecgonine, Bromazepam, Caffeine, Cocaine, Carbamazepine,

8、 Codeine, Cholordiazepoxide, Chloroquine, Chloropromazine, Clorazepate Carbromal, Dextromethorphan, Dextropropoxyphene, 5,5-Diphenylhydantoin, 10-11-Dihydro-carbamazepine, Ethosuximide, Estriol, Estrone, Estradiol, Ethotoin, Flurazepam, Glutethimide, Halazepam Ibuprofen, Lorazepam, Lidocaine, LSD, Medazepam, Methadone, Methadone-primary metabolite, Methaqualone, Methamphetamine Mephenytoin, “-Methyl-“-propylsuccinimide, Methyl PEMA, Methsuximide, 4-Methylprimidone, Morphine, Meperidine, Niacinamide, Nitrazepam, Nordiazepam, Norethindrone, N-Normethsux