實(shí)驗(yàn) 血藥法測(cè)定撲熱息痛片的生物利用度[1]

1、實(shí)驗(yàn)二 血藥法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片的生物利用度一、實(shí) 驗(yàn) 目 的：1 掌握血藥法測(cè)定固體口服制劑生物利用度的原理及方法。2 掌握藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的求算。3 熟悉生物利用度在藥物評(píng)價(jià)中的意義。4 了解血清生物樣品的處理方法。二 、儀 器：1儀器： 具塞離心管10ml 3支;20ml 16支;刻度吸管1ml 1支;5ml 3支;10ml 1支;滴管23支；玻璃漏斗34cm直徑8個(gè);5ml塑料離心管8支;紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)其他：濾紙、試管架、刀片、塑料夾、酒精棉球、脫脂棉、注射器、注射針頭、兔盒等物件。2試藥：0.12N氫氧化鋇溶液：取分析純氫氧化鋇19克，加新鮮煮沸放冷的蒸餾水溶解并稀釋至1000 ml，

2、靜置過(guò)夜，過(guò)濾即得。2%硫酸鋅溶液：取分析純硫酸鋅20克，加蒸餾水溶解并稀釋至1000ml即得。三 、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1 家兔空白血的采集：取體重3kg左右家兔一只，心臟取血約30ml，于10ml具塞離心管中，37水浴中保溫1小時(shí)，以5000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速離心10 min，取空白血清供標(biāo)準(zhǔn)曲線制備用。2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備： 精密稱(chēng)取撲熱息痛對(duì)照品50mg，置100ml容量瓶中，以蒸餾水溶解，并添加至刻度搖勻，精密吸取10ml于50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻即成100g/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別吸取表1中“標(biāo)準(zhǔn)液取量”于20ml具塞試管中，分別加定量蒸餾水使成10ml，然后各加上述血清1mlmlml

3、，混勻，即現(xiàn)出明顯乳狀渾濁，用雙層濾紙過(guò)濾，去初濾液，收集續(xù)濾液于1015ml干燥具塞試管中，以1號(hào)管溶液作空白對(duì)照，于245nm處測(cè)定吸收度(A)，結(jié)果記錄于表1。3家兔體內(nèi)血藥濃度的測(cè)定：血樣品的采集：取體重3kg的健康家兔一只，實(shí)驗(yàn)前二天下午禁食，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日晨耳靜脈取血4ml，作為空白，然后即口服給予撲熱息痛片，劑量為500mg/只，在給藥后0.25、.50、1、2、3、4、5小時(shí)耳靜脈采血4ml，供測(cè)定血藥濃度用，喂藥4小時(shí)后可以喂食，采血時(shí)間于表2。血藥濃度測(cè)定：將采取的血樣按前空白的處理方法處理后，精密吸取血清1 ml，加蒸餾水10ml，余下按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備中“ml”起進(jìn)行操作，測(cè)得值

4、記于表2。表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果管 號(hào)12345678標(biāo)準(zhǔn)液取量 (ml)0血藥濃度C (g/ml)04080120160200240280H2O (ml)10吸收度A表2 血藥濃度測(cè)定結(jié)果兔重： 給藥量： 給藥時(shí)間：編 號(hào)01234567采血時(shí)間時(shí)間t (h)空白12345A值血藥濃度C (g/ml)lgC四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)處理：1標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸分析及繪制：以表1中吸收度A對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線中血藥濃度C直線回歸，求得直線回歸方程A = a + bC，并計(jì)算相關(guān)系數(shù)r 。以A為縱坐標(biāo)，C為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)得樣品A值，代入回歸方程，計(jì)算出C值2藥時(shí)曲線的繪制：表2中的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以濃度C對(duì)時(shí)間t作圖，即得藥物濃度經(jīng)時(shí)變化曲線。3 消除速率常數(shù)k的求算：文獻(xiàn)載撲熱息痛的體內(nèi)過(guò)程系一室模型，血管外給藥一室模型動(dòng)力學(xué)方程的解為： 其中 假設(shè)kak，當(dāng)t充分大時(shí)，式中首先趨向于零，而可忽略，故式可改寫(xiě)為： 式兩端取對(duì)數(shù)： 用藥時(shí)曲線中尾部近似于直線上的3點(diǎn)，即尾部數(shù)據(jù)，代入式作直線回歸，求出系數(shù)：a = b = 則：k = b A = Lg-1 a4 半衰期t1/2的計(jì)算：t1/2 k5 藥時(shí)曲線下面積AUC0的計(jì)算：將表2中時(shí)間t和濃度C代入下式即可求出AUC06撲熱息痛片相對(duì)生物利用度計(jì)算：若已知撲熱息痛片某一標(biāo)準(zhǔn)制劑(如半合成脂肪酸脂)的AUC0=1093(ghml-1)，則