植物全氮磷鉀的測定1-

1、植物氮、磷、鉀全量分析植物中氮、磷、鉀測定包括待測液制備和氮、磷、鉀定量2大步驟。1植物全氮、磷、鉀含量測定待測液制備(H2SO4+H2O2消煮法1.1適用范圍:本方法不包括硝態(tài)氮的植物全氮測定,適合于含硝態(tài)氮低的植物樣品的測定。植物中的氮、磷大多數(shù)以有機態(tài)存在,鉀以離子態(tài)存在。樣品經(jīng)濃H2SO4和氧化劑H2O2消煮,有機物被氧化分解,有機氮和磷轉(zhuǎn)化成銨鹽和磷酸鹽,鉀也全部釋出。消煮液經(jīng)定容后,可用于氮、磷、鉀等元素的定量。采用H2O2為加速消煮的氧化劑,不僅操作手續(xù)簡單快速,對氮、磷、鉀的定量沒有于擾,而且具有能滿足一般生產(chǎn)和科研工作所要求的準確度。但要注意遵照操作規(guī)程的要求操作,防止有機氮

2、被氧化成N2氣或氮的氧化物而損失。1.3.1硫酸(化學鈍,比重1.84;+1.3.2 30%H2O2 (分析純。1.5 操作步驟稱取植物樣品(0.5mm0.3 g 0.5g(稱準至0.0002g裝入100mL開氏瓶或消煮管的底部,加濃H2SO4 5mL,搖勻,放置過夜。第二天在電爐或消煮爐上先小火加熱,待H2SO4發(fā)白煙后再升高溫度,當溶液呈均勻的棕黑色時取下。稍冷后加10滴H2O2,再加熱至微沸,消煮約710min,稍冷后重復加H2O2,再消煮。如此重復數(shù)次,每次添加的H2O2應(yīng)逐次減少,消煮至溶液呈無色或清亮后,再加熱約10min,除去剩余的H2O2。取下冷卻。用水將消煮液無損地轉(zhuǎn)移入10

3、0mL容量瓶中,冷卻至室溫后定容(V1。用無磷鉀的干濾紙過濾,或放置澄清后吸取清液測定氮、磷、鉀。每批消煮的同時,進行空白試驗,以校正試劑和方法的誤差。1.6.1所用的H2O2應(yīng)不含氮和磷。H2O2在保存中可能自動分解,加熱和光照能促使其分解,故應(yīng)保存于陰涼處。在H2O2中加入少量H2SO4酸化,可防止H2O2分解。1.6.2 稱樣量決定于NPK含量,健狀莖葉稱0.5g,種子0.3g,老熟莖叫可稱1g,若新鮮莖葉樣,可按干樣的5倍稱樣。稱樣量大時,可適當增加濃H2SO4用量。1.6.3 加H2O2時應(yīng)直接滴入瓶底液中,如滴在瓶頸內(nèi)壁上,將不起氧化作用,若遺留下來還會影響磷的顯色。2 植物全氮測

4、定半微量蒸餾法2.1 適用范圍:適合于各種植物樣品消煮液中氮的定量。2.2 方法原理:植物樣品經(jīng)開氏消煮、定容后,吸取部分消煮液堿化,使銨鹽轉(zhuǎn)變成氨,經(jīng)蒸餾,用H3BO3吸收,硼酸中吸收的氨可直接用標準酸滴定,以甲基紅溴甲酚綠混合指示劑指示終點。2.3.1 NaOH溶液:400g/L。2.3.2 H3BO3指示劑溶液:20g L/。2.3.3酸標準溶液(c(HCI或1/2 H2SO4:0.01mol/L。標定見HG/T 2843.2.4.1蒸餾裝置或半自動蒸餾儀。2.5蒸餾: 檢查蒸餾裝置是否漏氣和管道是否潔凈后,打開蒸餾儀開關(guān),空蒸30分鐘。準確吸取定容后的消煮液5.0010.00mL(V2

5、,含NH4-N約1mg,注入半微量蒸餾器的消化管內(nèi)。另取150mL三角瓶,內(nèi)加5mL 2%H3BO3,指示劑溶液,放在冷凝管下端,管口置于H3BO3液面以上34cm處,然后向蒸餾器內(nèi)慢慢加入約3mL 400g/LNaOH溶液,通入蒸氣蒸餾(注意開放冷凝水,勿使餾出液的溫度超過40'C。待餾出液體積約達5060mL時,停止蒸餾,用少量已調(diào)節(jié)至P H4.5的水沖洗冷凝管末端。用酸標準溶液滴定餾出液至由藍綠色突變?yōu)樽霞t色(終點的顏色應(yīng)和空白測定的滴定終點相同。與此同時進行空白測定的蒸餾、滴定,以校正試劑和滴定誤差。全(N,%=c (HClX (VV0X0.014XDXl00/m;式中:c (

6、HCl酸標準溶液的濃度,mol/L;V滴定試樣所用的酸標準液體積,mL;V0滴定空白所用的酸標準液,mL:0.014N的摩爾質(zhì)量,kg/mol;m稱樣量,g:D分取倍數(shù)(即消煮液定容體積V1/吸取測定的體積V2。3 植物全磷的測定(釩鉬黃吸光光度法3.1適用范圍:適合于含磷量較高的植物樣品的測定(如籽粒樣品。3.2方法原理:植物樣品經(jīng)濃H2SO4消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。待測液中的正磷酸與偏釩酸和鉬酸能生成黃色的三元雜多酸,其吸光度與磷濃度成正比,可在波長400 490nm處用吸光光度法測定。磷濃度較高時選用較長的波長,較低時選用較短波長。此法的優(yōu)點是操作簡便,可在室溫下顯色,黃色穩(wěn)定。

7、在HNO3、HCIO4,和H2SO4等介質(zhì)中都適用,對酸度和顯色劑濃度的要求也不十分嚴格,干擾物少。在可見光范圍內(nèi)靈敏度較低,適測范圍廣(約為120mg/L P,故廣泛應(yīng)用于含磷較高而且變幅較大的植物和肥料樣品中磷的測定。3.3.1釩鉬酸銨溶液:25.0g鉬酸銨(NH46Mo7O2.4H2O,分析純?nèi)苡?00mL水中,必要時可適當加熱,但溫度不得超過60。另將1.25g偏釩酸銨(NH4VO3,分析純?nèi)苡?00mL沸水中,冷卻后加入250mL濃HNO3(分析純。將鉬酸銨溶液緩緩注入釩酸銨溶液中,不斷攪勻,最后加水稀釋至1L,貯于棕色瓶中。3.3.2 NaOH溶液(c=6 mol/L:24g Na

8、OH溶于水,稀釋至100mL。3.3.3二硝基酚指示劑(p=2 g/L:0.2 g 2,6-二硝基酚或2.4-二硝基酚溶于100 mL水中。3.3.4磷標準溶液(P=50mg/L:0.2195g (干燥的KH2PO4(分析純?nèi)苡谒?加入5mL 濃HNO3,于1 L容量瓶中定容。3.4.1分光光度計。準確吸取定容、過濾或澄清后的消煮液520mL(V2:,含P 0.050,75mg放入50 mL 容量瓶中,加2滴二硝基酚指示劑,滴加6mol/L NaOH中和至剛呈黃色,加入10.00 mL 釩鉬酸銨試劑,用水定容(V3。15min后,用1cm光徑的比色槽在波長440nm處進行測定,以空白溶液(空白

9、試驗消煮液按上述步驟顯色,調(diào)節(jié)儀器零點。校準曲線或直線回歸方程:準確吸取50mg/L P標準液0,1,2.5,7.5,10,15mL分別放入50mL容量瓶中,按上述步驟顯色,即得0,1.0,2.5,5.0,7.5,10,15mg/L P的標準系列溶液,與待測液一起進行測定,讀取吸光度。然后繪制校準曲線或求直線回歸方程。全(p,%= P X V X (V3/V2X10-4/m;式中:P從校準曲線或回歸方程求得的顯色液中磷的質(zhì)量濃度,mg/L: V消煮液定容體積,mL;V2吸取測定的消煮液體積,mL;,V3顯色液體積,mL:m稱樣量,g:10-4將mg/L濃度單位換算為百分含量的換算因數(shù)。3.7.

10、1顯色液中P=15mg/L時,測定波長用420nm;520mg/L,用490nm。待測液中Fe3+濃度高應(yīng)選用450nm,以清除Fe3+干擾。校準曲線也應(yīng)用同樣波長測定繪制。3.7.2一般室溫下,溫度對顯色影響不大,但室溫太低(如<15時,需顯色30min。穩(wěn)定時間可達24 h。3.7.3如試液為HCI、HClO4介質(zhì),顯色劑應(yīng)用HCl配制;試液為H2SO4介質(zhì),顯色劑也用H2SO4配制。顯色液酸的適宜濃度范圍為0.21.6mol/L,最好是0.51.0 mol/L。酸度高顯色慢且不完全,甚至不顯色:低于0.2moI/L易產(chǎn)生沉淀物,干擾測定。鉬酸鹽在顯色液中的終濃度適宜范圍為1.6X1

11、0-310-2mol/L,釩酸鹽為8X10-5一2.2X10-3mol/L。3.7.4此法干擾離子少。主要干擾離子是鐵,當顯色液中Fe3+濃度超過0.1%時,它的黃色有干擾,可用扣除空白消除。4植物全磷的測定(鉬銻抗吸光光度法4.1適用范圍:適合于含磷量較低的植物樣品的測定(如莖稈樣品等。4.2方法提要:植物樣品經(jīng)濃H2SO4消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。在一定酸度下,待測液中的正磷酸與鉬酸銨和酒石酸銻鉀生成一種三元雜多酸,后者在室溫下能迅速被抗壞血酸還原為藍色絡(luò)臺物,可用吸光光度法測定。4.3.1 6 mol/L NaOH溶液4.3.2 0.2%二硝基酚指示劑4.3.3 2 mol/L (

12、1/2 H2SO4硫酸溶液:5.6mL濃H2SO4,加水至100mL。4.3.4 鉬銻貯存液:濃H2SO4(分析純126mL緩慢地注入約400mL水中,攪拌,冷卻。10.0g 鉬酸銨(分析純?nèi)芙庥诩s60的300mL水中,冷卻。然后將H2SO4溶液緩緩倒入鉬酸銨溶液中,再加入100mL 0.5%酒石酸銻鉀(KSbOC4O6·1/2H2O,分析純?nèi)芤?最后用水稀釋至1L,避光貯存。此貯存液含鉬酸銨為l%,酸濃度為c(1/2 H2SO4=4.5mol/L。4.3.5鉬銻抗顯色劑:1.50g抗壞血酸(C6H8O6,左旋,旋光度+21一+22,分析純?nèi)苡?00mL 鉬銻貯存液中。此液須隨配隨用

13、,有效期一天,冰箱中存放,可用35天。4.3.6磷標準工作液(P=5mg/L:吸取100rng/L P標準貯存液稀釋20倍,即為5mg/L P 標準工作溶液,此溶液不宜久存。4.4主要儀器設(shè)備:同上。吸取定容過濾或澄清后的消煮液2.005.00mL(V2,含P 530ug于50 mL容量瓶中,用水稀釋至約30mL,加l-2滴二硝基酚指示劑,滴加6mol/L NaOH溶液中和至剛呈黃色,再加入1滴2mol/L(1/2 H2SO4溶液,使溶液的黃色剛剛褪去,然后加入鉬銻抗顯色劑5.00mL,搖勻,用水定容(V3。在室溫高于15的條件下放置30min后,用lcm光徑比色槽在波長700nm處測定吸光度

14、,以空白溶液為參比調(diào)節(jié)儀器零點。校準曲線或直線回歸方程:準確吸取(P =5 mg/L標準工作溶液0,1,2,4,6,8 mL,分別放入50 mL容量瓶中,加水至30 mL,同上步驟顯色并定容,即得0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8mg/L P標準系列溶液,與待測液同時測定,讀取吸光度。然后繪制校準曲線或直線回歸方程。4.6結(jié)果計算:同上。4.7注意事項:根據(jù)分光光度計性能,可選用650-890nm波長處測定,880890nm處靈敏度高。5 植物全鉀的測定一火焰光度法5.1 適用范圍:適合于植物樣品消煮液中鉀含量的測定。5.2 方法提要:植物樣品經(jīng)消煮或浸提,并經(jīng)稀釋后,待測液中的K可用

15、火焰光度法測定。5.3 試劑5.3.1 K標準溶液(K=100mg/L:0.1907g KCI(分析純,在105110C干燥2 h溶于水,于1 L容量瓶中定容,存于塑料瓶中。5.4.1火焰光度計。6 分析步驟:吸取定容后的消煮液5.0010.00mL(V2:放入50mL容量瓶中,用水定容(V3。直接在火焰光度計上測定,讀取檢流計讀數(shù)。校準曲線或直線回歸方程:準確吸取100mg/L K標準溶液0,1,2.5,5,10,20mL,分別放入50mL容量瓶中,加入定容后的空白消煮液5或10mL(使標準溶液中的離子成分和待測液相近,加水定容。即得0,2,5,10,20,40mg/L K的標準系列溶液。以濃度最高的標準溶液定火焰光度計檢流計的滿度(一般只定到90,然后從稀到濃