實(shí)驗(yàn)室色譜柱管理規(guī)程

1、xxxx生物醫(yī)藥有限公司實(shí)驗(yàn)室色譜柱管理規(guī)程起草人年 月日審核人年 月日批準(zhǔn)人年 月日共頁生效日期年 月日1目的 為了規(guī)范實(shí)驗(yàn)室內(nèi)色譜柱的使用。確保操作人員能正確規(guī)范地使用色譜柱，以 保證色譜柱的使用壽命，制定本規(guī)程。2范圍 本規(guī)程適用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有分析用色譜柱的管理。3職責(zé)QC人員對本規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)。4程序色譜柱的采購4.1.1 分析人員視實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的欲檢驗(yàn)樣品情況及現(xiàn)有的色譜柱使用情況，提出色譜柱的采購申請，報相關(guān)負(fù)責(zé)人審核后交采購人員采購。4.1.2 分析人員提交申請時應(yīng)仔細(xì)說明欲采購色譜柱的型號、規(guī)格和數(shù)量及購買期限。 色譜柱的使用4.2.1 對新購進(jìn)的色譜柱，應(yīng)檢查色譜柱的外表面、封口

2、情況，隨柱色譜圖、柱效、分離度、拖尾因子測定，說明書等，不符合要求的應(yīng)退貨，符合要求的應(yīng)在 SOP-QC020-01-R1”色譜柱登記表”上進(jìn)行登記，注明領(lǐng)用日期和開始使用日期，并且進(jìn) 行統(tǒng)一的編號。4.2.2色譜柱編號規(guī)則QC- L 12 XX XX表示色譜柱的流水號表示購入的月份4表示購入的年份*表示液相色譜柱,表示分析部門4.2.3 液相色譜柱4.2.3.1 液相色譜柱的使用前注意事項色譜柱的儲存液若無特殊說明，均為有機(jī)溶劑，反相柱常用甲醇、乙腈或者高比例 的甲醇/ 乙腈-水溶液，正相柱常用脫水處理后的純正己烷。使用前，一定要注意色譜柱 的儲存液與待分析樣品的流動相之間是否互溶。在反相色

3、譜中，如果流動相中緩沖鹽的 濃度較高（ L）,必須先用低濃度的甲醇/乙腈-水溶液（1020%沖洗1020min,否 則緩沖鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出，從而使色譜柱堵塞，無法恢復(fù)。4.2.3.2 液相色譜柱使用方向裝色譜柱時應(yīng)使流動相流路的方向與色譜柱標(biāo)簽上箭頭所示方向一致。 除另有規(guī)定 外,不宜反向使用,否則會導(dǎo)致色譜柱柱效明顯降低,無法恢復(fù)。4.2.3.3 液相色譜柱的評價 （必要時自己做,沒其它要求時以出廠報告為準(zhǔn) ）流動相：反相柱（C18 一般用甲醇：水=85: 15 （V/V）或乙腈：水=60: 40 （V/V）. 樣品物質(zhì)：可用預(yù)訂用途的供試品代替。除另有規(guī)定外,色譜柱的理論板數(shù)

4、應(yīng)不小于1500、分離度應(yīng)不小于、重復(fù)進(jìn)樣間的RSD不超過%流動相流動相中所使用的各種有機(jī)溶劑應(yīng)盡可能使用色譜純,水應(yīng)為純化水或注射用水 , 如 果流動相含鹽，還應(yīng)將配制好的流動相經(jīng)ym或卩m的濾膜過濾。另外，裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)的在線過濾器等裝置應(yīng)清潔,否則將影響色譜柱壽命。以硅膠為基質(zhì)的各 種鍵合相對酸和堿都很敏感，一般 pH使用范圍為，應(yīng)參閱色譜柱使用說明書使用。色譜柱使用后，應(yīng)填寫SOP_QC020-0-R2 “色譜柱的使用日志”。使用日志的內(nèi)容應(yīng)包括 以下方面的內(nèi)容：色譜柱的名稱、型號、規(guī)格、編號色譜柱的使用日期、用途色譜柱的清潔 /老化過程、系統(tǒng)適用性評價數(shù)據(jù)封柱的溶液等色譜柱

5、使用時，必須對分析樣品進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。原則上一個品種專用一支色譜 柱。且必須在色譜柱上標(biāo)注專用于哪個產(chǎn)品的標(biāo)識色譜柱的維護(hù)和保養(yǎng)4.3.1 液相反相色譜柱用后長時間不使用時的保存 如使用緩沖液或含鹽溶液作為流動相，每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)用低濃度的甲醇/ 乙腈-水溶液（1020%沖洗30分鐘，使色譜柱內(nèi)的鹽完全溶解洗脫出，再用較高濃度的甲 醇/ 乙腈-水溶液（ 50%）沖洗 10 分鐘，最后用高濃度的甲醇 /乙腈-水溶液（ 8090%）沖 洗 30 分鐘，使色譜柱中的強(qiáng)吸附物質(zhì)沖洗出來。注：常用內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱的柱內(nèi)死體積為（150mm長）和（250mm長）4.3.2 色譜柱的長期保存反

6、相柱，可以儲存于甲醇或乙腈中，并將色譜柱兩端的堵頭堵上，以免干枯，室溫 保存。4.3.3 液相色譜柱的維修色譜柱使用一段時間后，會發(fā)生柱壓上升、柱效降低的現(xiàn)象。這主要是柱床上端或 過濾片處積累了污染物，可通過再生予以消除。如果色譜柱性能突然變壞，可采取以下 方法處理： （ 1 ）如果柱壓突然增大，可將色譜柱出、入口端顛倒過來，用1020倍柱體積的流動相低速沖洗。如果柱壓仍然很高，可能是柱入口處的過濾片堵塞，需要更換新 濾片；（ 2）如果峰形變壞（如出現(xiàn)肩峰或雙峰） ，表明柱入口柱床可能有塌陷，可用同型 號填料和流動相配成勻漿，將塌陷處填平。注：經(jīng)維修后的色譜柱使用之前，必須做系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，符

7、合規(guī)定后方能繼續(xù)使用。色譜柱的再生4.4.1 液相色譜柱的再生反相柱首先用蒸餾水沖洗，再分別用 2030 倍柱體積的甲醇：水 =10： 90（V/V）， 乙腈，異丙醇作為流動相沖洗色譜柱，完成后再以相反順序沖洗，最后用流動相平衡。4.4.2 液相色譜柱在使用過程中易出現(xiàn)的問題和解決方法4.4.2.1 液相色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染；將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力，或者卸下色譜柱頭，將其放在10的稀硝酸內(nèi)超聲清洗 10分鐘，后再用純水超聲 10分鐘，重新裝入色譜柱。液相色譜柱頭的填料被樣品污染；解決方法：如確定色譜柱頭的填料被污染，將柱頭螺絲卸下，挖出柱內(nèi)前段被污 染的填料，用相同的柱填料

8、重新填入，仔細(xì)修復(fù)后，重新安裝上柱頭螺絲。色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機(jī)溶劑， 形成結(jié)晶析出； 解決方法： 如確定是鹽結(jié)晶，用 10%的甲醇/ 水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解 .4.424 流動相pH值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。解決方法：如果因 pH值使 用不當(dāng)，很難恢復(fù) 。色譜柱的報廢4.5.1 已判定為報廢的色譜柱，應(yīng)在色譜柱上貼上報廢的標(biāo)簽，并在“色譜柱登記表” 上注明報廢原因及報廢時間。4.5.2 已報廢的色譜柱應(yīng)與正常使用的色譜柱分開存放，以防色譜柱的非預(yù)期使用。 任何色譜柱的老化、清潔、維修、再生以及報廢的操作，都應(yīng)在使用日志上予以記錄。5 記錄記錄一 色譜柱登記表 SOP-QC020-01-R1記錄二 色譜柱使用日志SOP-QC020-01-R26 歷史版本號 01，修訂日期 2014年 10月