甲亢患者治療前后血清E-選擇素、sICAM-1水平的變化及意義

1、甲亢患者治療前后血清E-選擇素、sICAM-1水平的變化及意義他巴唑（MMI）與丙基硫氧嘧啶（PTU） 治療甲亢的比較和選擇【摘要】目的測定甲亢患者血清中可溶性細胞間粘附分子( sICAM-1)、可溶性E-選擇素(E-selectin)水平,探討 sICAM-1、E-選擇素與甲亢病情的關系。方法用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測22例甲亢患者治療前后 sICAM-1、 E-選擇素水平。結(jié)果甲亢患者治療前血清 sICAM-1、 E-選擇素水平明顯高于甲亢患者治療后血清中的水平(P<0.05)。結(jié)論sICAM-1及E-選擇素參與甲亢發(fā)病過程, sICAM-1及 E-選擇素可作為判斷病情嚴重性

2、的指標?！娟P鍵詞】甲亢; sICAM-1;E選擇素Patients with hyperthyroidism before and after treatment the changes and significance of serum E- selection, sICAM-1 level Abstract Objective Determination of sICAM -1 and soluble E- selectin (E- selectin) level in serum of patients with hyperthyroidism ，to investigate the (

3、sICAM -1) and E- selectin corrdation in serum of patients. Methods Detection of sICAM -1 and E- selectin levels in serum of 22 patients with hyperthyroidism before and after treatment with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). results sICAM -1 and E- selectin were significantly higher than pre-

4、treatment serum levels after treatment ( P<0.05) in serum. Conclusion sICAM -1 and soluble E- selectin involved in the pathogenesis , sICAM -1 and soluble E- selectin as criteria for judged the severity of hyperhtyrodism 【關鍵詞】 甲亢;細胞粘附分子;E選擇素keyword hyperthyroidism; sICAM -1; E selectin甲狀腺功能亢進癥（hy

5、perthyroidism，簡稱甲亢）是甲狀腺腺體本身功能亢進，合成和分泌甲狀腺激素增加所導致的甲狀腺毒癥。是一種伴甲狀腺激素增多的器官特異性自身免疫性疾病，由于甲狀腺激素過多，可以引起循環(huán)、消化、神經(jīng)等系統(tǒng)興奮性增高和代謝亢進等臨床表現(xiàn)，其病因和發(fā)病機制尚不完全清楚。本文通過檢測連云港市第二人民醫(yī)院甲亢初診和復診患者的E-選擇素、可溶性細胞間粘附分子-1的指標的水平，探討其在甲亢的發(fā)生、發(fā)展過程中的作用。1 資料與方法1.1一般資料 22例甲亢患者均來自于本院門診及住院病人，符合甲亢的診斷標準。其中男5例，女17例，年齡 15-56歲，平均(39.5±12.37)歲。1.2方法 患

6、者血清樣本均于清晨空腹采靜脈血4ml，3000r/min離心10min，取上層血清于-70低溫冰箱中保存待測。血清E-選擇素、可溶性細胞間粘附分子-1測定均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。試劑盒由深圳晶美生物技術(shù)公司提供。由美國GeneMay公司生產(chǎn)。嚴格按說明書操作。將標準品用稀釋液定比稀釋，混合均勻。將酶標板各孔依次編號，然后加入不同濃度標準品或標本 50 l 于相應反應孔內(nèi)，立刻加入生物素標記抗體工作液 50 l。用封板膠紙封住反應孔，輕輕震蕩均勻，37 孵箱孵育 60 min。甩去孔內(nèi)液體，每孔再加入洗滌液洗板 3 次，在每孔中加入 80 l 的親和鏈霉素-HRP，輕輕震蕩均勻，3

7、7 孵箱孵育 30 min。再洗板 3 次同上。每孔加入底物 A、B 各50 l，輕輕震蕩均勻，37 避光孵育 10 min。迅速加入 50 l 終止液，酶標儀 450 nm 處讀數(shù)，在 5 min 內(nèi)測定各孔吸光度值( OD 值) ，根據(jù)定比稀釋標準品的 OD 值繪制標準曲線，根據(jù)樣品 OD 值和標準曲線，算出標本中的含量。1.3統(tǒng)計學方法 檢測數(shù)據(jù)用X±s表示，應用SPSS13.0軟件進行t檢驗。2 結(jié)果 甲亢患者治療前后，血清E-選擇素、sICAM-1差異有顯著性,見下表。甲亢治療前后血清sICAM-1、Eselectin、白細胞變化hyperthyroidism before

8、 and after treatment, serum sICAM-1 Eselectin, white blood cell changes項目n治療前(ng/ml)治療后(ng/ml)sICAM-1E-selectin2222140.5±30.9100.38±50.58122.5±17.6*67.91±45.58*與治療前比較: P<0.053 討論 細胞間黏附分子-1( ICAM-1) 屬免疫球蛋白超家族黏附分子成員，體內(nèi)分布廣泛。ICAM-1能介導效應器官內(nèi)浸潤淋巴細胞和靶細胞之間的相互作用，導致淋巴細胞向效應部位聚集、定位、抗原呈遞、抗原

9、識別、淋巴細胞增殖和細胞毒等一系列反應。ICAM-1 廣泛表達于成纖維細胞、白細胞表面，正常內(nèi)皮細胞表達很少，是 T 淋巴細胞激活共刺激分子，在白細胞黏附和炎癥應答蔓延中起關鍵作用。sICAM-1 是 ICAM-1 經(jīng)蛋白水解后存在于體液中脫落部分，其反映局部黏附分子的表達和代謝狀況【1】。它能介導效應器官內(nèi)浸潤淋巴細胞和靶細胞之間的相互作用與疾病免疫活動存在相關性。E-選擇素是誘導性黏附分子,介導白細胞在炎癥和組織損傷區(qū)域的滾動,TNF-、IL-1或脂多糖均可刺激內(nèi)皮細胞合成E-選擇素。【2】其最主要的作用是介導內(nèi)皮細胞與中性粒細胞的黏附。靜息時，內(nèi)皮細胞上的E-選擇素含量甚微，當受到炎性因

10、子IL-l，TNF-a，內(nèi)毒素(LPS)等刺激后，則表達大大增加，于4 h左右達高峰，可維持24-48 h，然后從胞膜上脫落進人血液，成為可溶性E-選擇素在血漿中測出，并且在隨后的一周內(nèi)血漿水平達到穩(wěn)定【3】。檢測其水平可反映細胞膜上E-選擇素的表達狀況，并作為內(nèi)皮細胞受損的分子標志。以往對E-選擇素的研究一般集中在炎癥早期的粘附過程中的作用機制,發(fā)現(xiàn)選擇蛋白作為早期粘附分子參與炎癥反應, 當內(nèi)皮細胞受到細胞因子( 如 TNF-B, VLA- 4 等) 或內(nèi)毒素的刺激時迅速合成 E-選擇素并轉(zhuǎn)移到血管內(nèi)皮細胞表面【4】, 與其配體促發(fā)第一輪白細胞- 內(nèi)皮細胞反應, 而 ß2整合蛋白與

11、內(nèi)皮細胞 ICAM-1 相互作用引發(fā)第二輪白細胞-內(nèi)皮細胞反應, 前者是后者白細胞牢固附著和透過內(nèi)皮游走的先決條件。但E-選擇素是否也參與炎癥的后期病理改變還不清楚。Kaplanski 等【5】認為E-選擇素不僅參與了早期血管內(nèi)皮細胞的激活和白細胞的移行, 而且參與后期內(nèi)皮細胞形態(tài)變化, 并促進白細胞對周圍組織的作用。E- 選擇素來源于內(nèi)皮細胞，在靜止內(nèi)皮細胞上并無表達，只在內(nèi)毒素、IL-1 等因子刺激后才有表達。它們分別與各自的配體結(jié)合，使白細胞得以在內(nèi)皮細胞表面黏附、翻滾，并進而發(fā)生跨內(nèi)皮遷移和呼吸爆發(fā)，釋放氧自由基和溶酶體酶，引起內(nèi)皮細胞損傷和周圍組織的炎癥反應。 甲狀腺功能亢進癥為自身

12、免疫性疾病，在其發(fā)病機制中，淋巴細胞的活化、黏附、遷移等都與黏附分子密切相關。研究結(jié)果表明，治療前的甲亢患者血清 sICAM-1、E- 選擇素含量均見增高，并隨病情的好轉(zhuǎn)逐步下降。故血清 sICAM-1、E- 選擇素含量基本上可反映內(nèi)皮細胞與白細胞的激活狀態(tài)和患者病情程度。表明甲狀腺功能亢進癥與血清sICAM-1、E- 選擇素引起的炎性反應有關。血清 sICAM-1 與E-選擇素結(jié)合能夠較為全面的了解甲亢患者的免疫及細胞凋亡的狀態(tài)，對于監(jiān)測甲亢患者病程進展有較好的臨床意義，并為治療方案提供依據(jù)。參考文獻1褚俏梅,李方都.131I治療后Graves眼病血清TNF-、sTNFR和sICAM-1的相

13、關性研究J. 臨床眼科雜志, 2011,19(4) :316-319.Zhu Qiaomei, Li Fang.131I correlation of J. clinical department of Ophthalmology magazine Graves eye serum TNF- , sTNFR II and sICAM-1 after treatment, 2011,19 (4): 316-3192 付麗梅，孫青. E-選擇素的研究進展J.醫(yī)學綜述，2008,14（2）：185-187.3 Vestweber D，Blanks JEMechanisms that regulate the function of the selectins and their ligandsJPhysiol Rev，1999，79(1)：181-2134 Abbassi O, K ishimoto TK, McIntire LV, Anderson DC,Smith CW. E-select in support s neutrophil rolling in vitro under conditions of flow J . J Clin