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1、(時(shí)間:90分鐘,滿分:100分)一、選擇題(本題共20小題,每小題2.5分,滿分50分)1自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()A碳源 B氮源C無機(jī)鹽 D生長因子解析:選A。自養(yǎng)微生物能夠利用二氧化碳和水生成有機(jī)物,不利用現(xiàn)成的含碳有機(jī)物;而異氧型微生物只能利用現(xiàn)成的含碳有機(jī)物,所以它們的主要區(qū)別是碳源不同。2酵母菌培養(yǎng)液常含有一定濃度的葡萄糖,但當(dāng)葡萄糖濃度過高時(shí),反而抑制微生物的生長,原因是()A碳源供應(yīng)太充足B葡萄糖不是酵母菌的原料C改變了酵母菌培養(yǎng)液的pHD細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離解析:選D。當(dāng)培養(yǎng)基中葡萄糖的濃度升高時(shí),會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液的滲透壓升高,從而導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離。3下
2、列關(guān)于細(xì)菌的敘述,錯(cuò)誤的是()A硝化細(xì)菌能以NH3作為氮源和能源物質(zhì)B某些細(xì)菌可以利用光能固定CO2合成有機(jī)物C生長因子是某些細(xì)菌生長過程中需要額外補(bǔ)充的營養(yǎng)物質(zhì)D含伊紅和美藍(lán)試劑的培養(yǎng)基不能用來鑒別牛奶中的大腸桿菌解析:選D。某些細(xì)菌如藍(lán)細(xì)菌(藍(lán)藻)、光合細(xì)菌以及紅螺菌都能進(jìn)行光合作用。生長因子是指微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物,主要包括維生素、氨基酸和堿基等。而微生物的營養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和生長因子,它們都是從外界獲得補(bǔ)充的。常用的伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌,如果有大腸桿菌,則菌落呈黑色。4關(guān)于滅菌和消毒的下列說法不正確的是()A滅菌
3、是指殺死環(huán)境中的所有微生物,包括芽孢和孢子B滅菌和消毒實(shí)質(zhì)上是相同的C接種環(huán)用灼燒法滅菌D常用的滅菌方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法解析:選B。滅菌與消毒是兩個(gè)概念。滅菌是指殺滅一定環(huán)境中的所有微生物,包括芽孢和孢子。根據(jù)不同的材料選用不同的滅菌方法,如接種環(huán)用火焰燒灼法,培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法等。消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),使用的是較為溫和的物理或化學(xué)方法。5培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是()化學(xué)消毒灼燒滅菌干熱滅菌紫外線滅菌高壓蒸汽滅菌巴氏消毒法A BC D解析:選A。培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法;培養(yǎng)皿
4、能耐高溫,用干熱滅菌法;接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底滅菌的效果;實(shí)驗(yàn)操作者的雙手可用化學(xué)試劑進(jìn)行消毒,如用酒精擦拭雙手;空氣可用紫外線消毒;為不破壞其營養(yǎng)成分,牛奶可采用巴氏消毒法。6牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入瓊脂這一理想的凝固劑,下列關(guān)于瓊脂的說法不正確的是()A不被所培養(yǎng)的微生物分解利用,對所培養(yǎng)的微生物無毒害作用B在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C瓊脂凝固點(diǎn)低,利于微生物的生長D瓊脂在滅菌過程中不會(huì)被破壞,透明度好,凝固力強(qiáng)解析:選C。本題考查瓊脂在培養(yǎng)基中的作用。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑如瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基,它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一,固體培養(yǎng)基中可形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)胞
5、繁殖而來的子細(xì)胞群體,即菌落,用于微生物的分離、計(jì)數(shù)和菌種鑒定等。瓊脂作為一種理想的凝固劑,是其性質(zhì)決定的,瓊脂不會(huì)被微生物利用且對微生物無毒害作用,在滅菌過程中不會(huì)被破壞,透明度好,凝固力強(qiáng)。瓊脂在98 以上可溶解于水,在45 以下凝固,所以在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)。7下表表示在不同培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長繁殖情況(E、F、G、H、I、J、K、M為培養(yǎng)基的成分,“”表示生長,“”表示不生長)。請分析細(xì)菌不能合成下列哪種物質(zhì)()培養(yǎng)基成分A、B CA、B、CI、MA、B、C H、KA、B、CM、JA、B、CI、KA、B、C H、JA、B、CK、M生長狀態(tài)A.H BICK DM解析:選C。從
6、能進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的三組培養(yǎng)基中看出,它們共同含有K,且其他不能進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)的都不含K,故所培養(yǎng)的細(xì)菌不能合成K。8測定土壤中不同微生物的數(shù)量,要選用不同倍數(shù)的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng),請選出培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)所用的稀釋倍數(shù)()10102103104105106A BC D解析:選D。土壤中細(xì)菌的數(shù)量非常多,一般選取的稀釋倍數(shù)比較高。9通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上,大部分微生物無法生長;在培養(yǎng)基中加入青霉素,可以抑制細(xì)菌和放線菌;在培養(yǎng)基中加入10的酚,可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分別分離出()A大腸桿菌 B霉菌C放線菌 D圓褐固氮菌
7、解析:選A。固氮細(xì)菌的生長不需要從培養(yǎng)基中獲得氮源,可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長,因此可分離出圓褐固氮菌;在加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細(xì)菌和放線菌,可分離出霉菌;在加入10的酚的培養(yǎng)基中,因該培養(yǎng)基能抑制細(xì)菌和霉菌的生長,所以可分離出放線菌。利用上述三種培養(yǎng)基無法分離出大腸桿菌。10在101、102、103倍稀釋液中的平均菌落數(shù)為2760、295和46,則菌落總數(shù)(個(gè)/mL)為()A2.76×105 B2.95×105C4.6×105 D3.775×105解析:選D。本題考查菌落計(jì)數(shù)法測定微生物的數(shù)目的方法。注意是計(jì)算不同稀釋度的平均菌落數(shù)。首先選擇
8、平均菌落數(shù)在30300之間的,當(dāng)只有一個(gè)稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí),則以該平均菌落數(shù)除以涂布平板時(shí)所用稀釋液體積(0.1 mL),再乘以稀釋倍數(shù)作為該樣品的細(xì)菌總數(shù);若有兩個(gè)稀釋倍數(shù)的平均菌落數(shù)均在30300之間,則按兩者菌落總數(shù)之比值來決定,若比值小于2應(yīng)采取兩者的平均數(shù),若大于2,則取其中較小的菌落總數(shù)。本題295、46在30300之間,46×103與295×102比值為1.6,應(yīng)取二者的平均數(shù)進(jìn)行計(jì)算。11用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)某土壤樣品中活菌的數(shù)目。在某稀釋濃度下某同學(xué)做了若干個(gè)平板并統(tǒng)計(jì)每個(gè)平板的菌落數(shù),最接近樣品中菌體數(shù)真實(shí)值的是()A菌落數(shù)量最多的平板B
9、菌落數(shù)量最少的平板C菌落數(shù)量適中的平板D若干個(gè)平板菌落數(shù)量的平均值答案:C12在一個(gè)“淀粉瓊脂”培養(yǎng)基的5個(gè)圓點(diǎn)位置,分別用不同方法處理,將此實(shí)驗(yàn)裝置放在37 恒溫箱中,保溫處理24 h后,將碘液滴在培養(yǎng)基的5個(gè)圓點(diǎn)上,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄于下表:淀粉圓點(diǎn)實(shí)驗(yàn)處理方法碘液處理后的顏色反應(yīng)新鮮唾液與鹽酸混合藍(lán)黑色經(jīng)過煮沸的新鮮唾液藍(lán)黑色接種面包霉棕黃色只有新鮮的唾液?只有一定濃度的蔗糖溶液?請指出和所發(fā)生的顏色反應(yīng),以及接種的面包霉的分泌物分別是()A棕黃色、棕黃色、淀粉酶B藍(lán)黑色、棕黃色、麥芽糖酶C棕黃色、藍(lán)黑色、淀粉酶D棕黃色、藍(lán)黑色、麥芽糖酶解析:選C。唾液中含唾液淀粉酶,在適宜條件下可將淀粉分
10、解。唾液淀粉酶的最適pH為中性,最適溫度為37 ,故新鮮唾液與鹽酸混合或煮沸后,唾液淀粉酶將失去活性,不能分解淀粉,淀粉遇碘呈藍(lán)黑色。實(shí)驗(yàn)裝置中,中含唾液淀粉酶且有活性,可將淀粉分解,加碘液,呈棕黃色,中加碘液后呈棕黃色,故面包霉能分泌淀粉酶。中加一定濃度的蔗糖溶液,不影響淀粉與碘液反應(yīng),呈藍(lán)黑色。13下列操作不屬于微生物的分離步驟的是()A稀釋 B劃線或涂布C接斜面 D培養(yǎng)解析:選C。土壤中微生物分離的步驟是:土壤取樣樣本稀釋微生物培養(yǎng)和觀察等,其中微生物分離過程主要在于接種階段,通過平板劃線法或者稀釋涂布平板法,使得微生物充分稀釋和分離,從而使得平板上生長的一個(gè)菌落來源于單個(gè)的細(xì)菌,這樣就
11、達(dá)到了從土壤中分離微生物的目的。接斜面是在試管中擴(kuò)大細(xì)菌數(shù)量或者短時(shí)間保存菌種的方法,不屬于分離細(xì)菌的過程。14下列關(guān)于纖維素的敘述中,不正確的是()A纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物B纖維素能被土壤中某些微生物分解利用,是因?yàn)檫@些微生物能產(chǎn)生纖維素酶C植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素D自然界中的各種生物均能把纖維素分解成葡萄糖,從而作為生物體的能量來源答案:D15下列關(guān)于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是()A纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種組分B纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖解析:選D。纖維素酶是一種可以把纖維素分
12、解為葡萄糖的酶,它是一種復(fù)合酶,至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種組分,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。所以D項(xiàng)錯(cuò)。16用剛果紅染色時(shí),加入剛果紅應(yīng)在()(1)制備培養(yǎng)基時(shí)(2)梯度稀釋時(shí)(3)倒平板時(shí)(4)涂布時(shí)(5)長出菌落時(shí)A(1)(3) B(2)(5)C(3)(5) D(4)(5)解析:選C。剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣,我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。所以加入剛果紅的方法有兩種,一是在菌落長出來后,二是在倒平板時(shí),都可以達(dá)
13、到鑒別和分離菌落的目的。17生活在反芻動(dòng)物胃內(nèi)的纖維素分解菌,其新陳代謝類型為()A自養(yǎng)需氧型 B異養(yǎng)厭氧型C異養(yǎng)需氧型 D自養(yǎng)厭氧型解析:選B。本題考查的是微生物的代謝類型,因?yàn)榕5奈钢惺侨毖醯沫h(huán)境,因此能夠在此生存的微生物應(yīng)該是厭氧的,而這些微生物能夠利用牛胃中的有機(jī)養(yǎng)料纖維素作為其營養(yǎng)物質(zhì),所以屬于異養(yǎng)生物。18兩種剛果紅染色法的結(jié)果是()A均會(huì)出現(xiàn)透明圈B均不會(huì)出現(xiàn)透明圈C方法一出現(xiàn),方法二不出現(xiàn)D方法一不出現(xiàn),方法二出現(xiàn)答案:A19配制的培養(yǎng)基成分是:纖維素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素,該培
14、養(yǎng)基能使下面哪種微生物大量繁殖()A酵母菌 B自生固氮菌C各種細(xì)菌 D纖維素分解菌解析:選D。該培養(yǎng)基的有機(jī)營養(yǎng)成分里面含碳的營養(yǎng)物質(zhì)是纖維素,不能分解利用纖維素的微生物不能在該培養(yǎng)基上生長,所以屬于選擇培養(yǎng)基。20在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是()A分解尿素的細(xì)菌 B硝化細(xì)菌C分解纖維素的細(xì)菌 D乳酸菌解析:選C。分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解,剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。二、非選擇題(本題共4小題,滿分50分)21(12分)下表為牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表,據(jù)此回答:成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1 g0.5 g1
15、00 mL(1)蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是_。(2)要用此材料配制觀察細(xì)菌菌落狀況的培養(yǎng)基,還需添加的成分是_。(3)表中各成分含量確定的原則是_。(4)培養(yǎng)基配制好后,分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是_。(5)從配制培養(yǎng)基到培養(yǎng)完成,所采用的預(yù)防雜菌感染的方法是_。(6)在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面,其目的是_。解析:蛋白胨屬于天然有機(jī)物,不僅為異養(yǎng)型生物提供碳源、氮源,還能提供生長因子。答案:(1)提供碳源、氮源、生長因子(2)瓊脂(或凝固劑)(3)所培養(yǎng)的微生物對各營養(yǎng)成分的需要量(4)調(diào)pH(5)高壓蒸汽滅菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉球擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種(6)擴(kuò)大接種面積22(12分)自然界中的
16、微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時(shí)一般要將它們分離提純,然后進(jìn)行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn),請回答有關(guān)問題。步驟:制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。用稀釋涂布平板法接種樣品。適宜溫度下培養(yǎng)。結(jié)果分析:(1)測定的大腸桿菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果,正確可信的是_。A一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是23B兩個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是22和26,取平均值24C三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、5和52,取平均值26D四個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、30、24和25,取平均值25(2)一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)
17、基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4,那么每毫升樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.2 mL)_。(3)用這種方法測定密度,實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量_,因?yàn)開。(4)某同學(xué)在測定大腸桿菌的密度時(shí)發(fā)現(xiàn),在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落,能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了?為什么?解析:(1)計(jì)數(shù)微生物時(shí)可選取多個(gè)菌落數(shù)相差不大的平板計(jì)數(shù)并求其平均值。(2)23.4÷0.2×1061.17×108(個(gè))。(3)因?yàn)榫淇赡苡?個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起生長而成,所以實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多。答案:(1)D(2)1.17×108(3)多當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)
18、胞連在一起時(shí),平板上觀察的是一個(gè)菌落(4)不能。因?yàn)殡s菌可能來自培養(yǎng)基或來自培養(yǎng)過程。23(12分)某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察及計(jì)數(shù)。請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和_。除此之外。培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。(2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠,還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后,觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落,這說明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般說來,菌落總數(shù)越多,湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。(5)如果要檢測水中是否含有大腸桿菌,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入_。解析:(1)蛋白胨可提供氮源、碳源、維生素,而淀粉可提供碳源,除此之外,微生物的生長還需要無機(jī)鹽和水。(2)對培養(yǎng)基的滅菌,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)常用高壓蒸汽滅菌法。(3)在實(shí)驗(yàn)的過程中,除實(shí)驗(yàn)變量以外其他各變量均應(yīng)適宜且相同,以利于更好地達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?4)不同的菌落具有各自的菌落特征(如形狀、顏色、大小、隆起程度等)。(5)培養(yǎng)基中加入某種試劑,以鑒別某種微生物是否存在,稱為鑒別培養(yǎng)基。大腸桿菌用伊紅美藍(lán)鑒別。答案:(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機(jī)鹽水(后兩空順序
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