淺論急性冠脈綜合征血清MMP-2MMP-9及hs-CRP水平的檢測(cè)及其臨床意義

1、淺論急性冠脈綜合征血清MMP-2，MMP-9及hs-CRP水平的檢測(cè)及其臨床意義                作者：胡開宇，蔡雪黎，張懷勤，計(jì)光，王忠永【摘要】  目的 ：觀察急性冠脈綜合征患者外周靜脈血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平并評(píng)價(jià)其臨床意義。方法 ：選取急性冠脈綜合征患者53例為ACS組，其中急性心肌梗死（AMI）28例，不穩(wěn)定型心絞痛（UA）25例。用酶聯(lián)免疫

2、吸附法（ELISA）檢測(cè)血清MMP-2，MMP-9水平，用免疫散射比濁法檢測(cè)血清hs-CRP。另選穩(wěn)定型心絞痛組（SA）28例、正常對(duì)照組30例作為對(duì)照。結(jié)果 ：ACS組血清MMP-2，MMP-9，hs-CRP的水平高于SA組（P 0.05）及對(duì)照組（P 0.01）。AMI組血清MMP-2，MMP-9，hs-CRP的水平顯著高于UA組（P 0.05）。ACS組患者血清MMP-9與hs-CRP水平呈正相關(guān)，MMP-2與hs-CRP無(wú)明顯相關(guān)性。AMI組患者血清hs-CRP與cTnI水平呈正相關(guān)（r =0.401，P 0.05）。結(jié)論 ：MMP-2，MMP-9在ACS中的高表達(dá)與急性冠脈綜合征的發(fā)

3、生有關(guān)，可作為預(yù)測(cè)動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定或破裂的血清學(xué)指標(biāo)，其水平有利于冠心病患者的危險(xiǎn)分層。聯(lián)合檢測(cè)血清MMP-2，MMP-9與hs-CRP可能成為一種有效的判斷斑塊穩(wěn)定性、預(yù)測(cè)急性心血管事件發(fā)生的臨床指標(biāo)。 【關(guān)鍵詞】  冠脈綜合征 基質(zhì)金屬蛋白酶-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 超敏C反應(yīng)蛋白急性冠脈綜合征（ACS）是以不穩(wěn)定型心絞痛（UA）及急性心肌梗死（AMI）為臨床表現(xiàn)的嚴(yán)重冠心病類型。近年研究表明炎癥在ACS發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。C反應(yīng)蛋白（CRP）是一項(xiàng)反映機(jī)體炎癥過(guò)程最具有標(biāo)志性的因子，被認(rèn)為在ACS的發(fā)病及預(yù)后中起重要作用。基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）通過(guò)降解賦予斑塊完整性

4、的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）促使斑塊破裂，導(dǎo)致ACS發(fā)生。如何及時(shí)識(shí)別或檢出不穩(wěn)定斑塊已成為研究的熱點(diǎn)。本研究檢測(cè)了不同冠心病患者的血清MMP-2，MMP-9及超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平，探討上述指標(biāo)與ACS的關(guān)系。1  資料和方法1.1  一般資料  所有入選者均為2006年6月-2007年12月住院及門診患者。ACS組53例，男34例，女19例。其中AMI 組28例，男18例，女10例；UA組25例，男16例，女9例。穩(wěn)定型心絞痛（SA）組28例，男19例，女9例，年齡（63.2±9.8）歲。正常對(duì)照組30例，男20例，女10例，年齡（62.0&#

5、177;8.9）歲。所有入選者近3個(gè)月未服用過(guò)他汀類藥物。所有冠心病患者均行選擇性冠狀動(dòng)脈造影（CAG）檢查。ACS組排除入院前行經(jīng)靜脈溶栓或急診經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)（PCI）的患者。各實(shí)驗(yàn)組一般臨床資料見(jiàn)表1。AMI組所有病例均符合WHO的AMI診斷標(biāo)準(zhǔn)。UA組和SA組病例符合美國(guó)心臟學(xué)學(xué)會(huì)/美國(guó)心臟協(xié)會(huì)診斷標(biāo)準(zhǔn)。正常對(duì)照組為門診進(jìn)行健康體檢者，無(wú)心血管病史，經(jīng)體格檢查及實(shí)驗(yàn)室檢查、心電圖、胸片、心臟超聲檢查健康，與實(shí)驗(yàn)組性別、年齡、社會(huì)背景相匹配的人群，自愿參與研究。排除有下列情況之一者：肝纖維化，感染或腫瘤，近期重大外傷、手術(shù)，腦血管和周圍血管病，自身免疫性疾病，嚴(yán)重肝腎疾病，嚴(yán)重的全身其

6、他系統(tǒng)疾病，近期服用抗炎藥，心肌炎或心力衰竭。1.2  方法  采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清MMP-2、MMP-9，試劑盒購(gòu)自晶美生物工程有限公司，由美國(guó)R&D systems公司生產(chǎn)；酶標(biāo)儀為西班牙變色龍全自動(dòng)酶免儀Bio-Asia TRITURUS。用免疫散射比濁法檢測(cè)血清hs-CRP（美國(guó)Beckman公司IMMAGE蛋白分析系統(tǒng)），試劑盒采用美國(guó)Beckman公司配套試劑。AMI患者于發(fā)病24 h內(nèi)，UA、SA患者入院后即刻，正常對(duì)照組于清晨空腹抽血，采肘靜脈血5 mL，2 h內(nèi)離心（3 000 r/min，10 min）取得血清，分管置于-70

7、 °C冰箱中待用。嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟進(jìn)行MMP-2，MMP-9測(cè)定。1.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法  計(jì)數(shù)資料用x2檢驗(yàn)表示，多樣本均數(shù)比較用方差分析，兩樣本的均數(shù)比較用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)。各指標(biāo)的相關(guān)性分析采用Bivariate過(guò)程的Pearson等級(jí)相關(guān)法。2  結(jié)果2.1  3組患者M(jìn)MP-2，MMP-9，hs-CRP水平比較  見(jiàn)表2。2.2  ACS組亞組分析  見(jiàn)表3。2.3  相關(guān)性分析  ACS組患者血清MMP-2與hs-CRP水平無(wú)顯著相關(guān)（r =0.27，P =0.05），MMP

8、-9與hs-CRP水平呈正相關(guān)（r =0.601，P0.01）。AMI組患者血清肌鈣蛋白I（cTnI）水平為(9.01±11.47)ng/mL，MMP-2，MMP-9水平與cTnI無(wú)顯著相關(guān)（均P0.05），MMP-2，MMP-9與hs-CRP有顯著相關(guān)（r =0.379， P 0.05和r =0.606，P 0.01），hs-CRP水平與cTnI有顯著相關(guān)（r =0.401，P0.05）。3  討論ACS起病兇險(xiǎn)，往往使患者致死、致殘，故早期識(shí)別此類患者并做出處理有很大的臨床益處。但從本組資料也可看出ACS患者與SA在一般資料（高血壓、糖尿病、血脂）中差異無(wú)顯著性，一般資

9、料不能提供足夠的鑒別信息。現(xiàn)在已明確ACS的發(fā)生與斑塊的不穩(wěn)定相關(guān)，而MMPs是一種Zn離子依賴性的內(nèi)肽酶所組成的水解蛋白酶家庭，表達(dá)過(guò)量可引起ECM降解增加、纖維帽變薄，導(dǎo)致斑塊變得易損。MMP-2稱為明膠酶A，MMP-9稱為明膠酶B，它們?cè)趧?dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)ECM的降解中起主要作用。Fiotti等1通過(guò)對(duì)ACS和SA患者行PCI治療時(shí)利用遠(yuǎn)端保護(hù)裝置收集的斑塊組織中的明膠酶（MMP-2、MMP-9）進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示ACS患者中明膠酶含量明顯高于SA患者，說(shuō)明MMPs活性增高是斑塊不穩(wěn)定性的生化基礎(chǔ)。研究還發(fā)現(xiàn)在不穩(wěn)定斑塊，特別是易發(fā)生破裂的斑塊肩部區(qū)域，MMPs的含量較高，酶的活性明顯

10、增加，說(shuō)明纖維帽的崩解與MMPs活性增高有關(guān)。本研究顯示ACS外周血MMP-2，MMP-9的水平顯著高于SA組及對(duì)照組，表明外周血MMP-2，MMP-9升高是斑塊不穩(wěn)定的標(biāo)志，可作為ACS新的重要的血清標(biāo)志物。本研究ACS的亞組分析顯示：AMI患者與UA患者血MMP-2，MMP-9濃度差異有顯著性，此結(jié)果與Kai等報(bào)道AMI外周血水平較UA明顯升高相符。這可能與AMI斑塊破裂的程度較UA嚴(yán)重有關(guān)，并提示檢測(cè)MMP-2，MMP-9有利于冠心病患者的危險(xiǎn)分層。相關(guān)分析顯示AMI組患者血清cTnI與MMP-2，MMP-9水平無(wú)顯著相關(guān)（均P 0.05），與文獻(xiàn)報(bào)道相符，這說(shuō)明MMP-2，MMP-9水

11、平的變化與心肌壞死的嚴(yán)重程度無(wú)關(guān)，系非壞死的心肌釋放所致，與斑塊的不穩(wěn)定性有關(guān)，是反映ACS斑塊穩(wěn)定性的重要指標(biāo)。         C反應(yīng)蛋白是人體非特異性炎癥反應(yīng)最敏感的標(biāo)志物之一。研究表明CRP能加劇斑塊內(nèi)的炎癥活動(dòng)，并且通過(guò)誘導(dǎo)分泌MMPs，促進(jìn)ECM降解而造成斑塊脆性增加，因此，CRP水平與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的存在和嚴(yán)重程度有明顯相關(guān)性。本研究顯示ACS組hs-CRP的濃度顯著高于SA組及對(duì)照組，且AMI組血清hs-CRP濃度較UA患者顯著升高，其水平與cTnI水平顯著相關(guān)，與Mikael等文獻(xiàn)報(bào)道相符，提示

12、hs-CRP在促進(jìn)斑塊的破裂過(guò)程中起重要的作用；在排除其他原因引起CRP升高的情況下，CRP水平的升高意味著斑塊可能存在急性的炎癥反應(yīng)，有發(fā)生破裂的危險(xiǎn)，血清hs-CRP濃度的高低，與ACS病情的嚴(yán)重程度存在一定的相關(guān)性；本研究證實(shí)了炎癥反應(yīng)的程度與心肌損傷的程度存在相關(guān)性，表明hs-CRP水平可以反映心肌壞死的嚴(yán)重程度，可與cTnI一起預(yù)測(cè)心梗的嚴(yán)重程度及估計(jì)心梗的預(yù)后。因此，CRP在ACS的發(fā)生、發(fā)展以及判斷斑塊的穩(wěn)定性中具有重要預(yù)測(cè)意義。本實(shí)驗(yàn)顯示ACS患者M(jìn)MP-9與hs-CRP水平呈正相關(guān)，表明ACS斑塊病變的炎癥反應(yīng)與ECM降解、MMPs過(guò)度表達(dá)、斑塊穩(wěn)定與否有著必然聯(lián)系。MMP-

13、2與hs-CRP水平無(wú)顯著相關(guān)（r =0.27，P =0.05），與文獻(xiàn)報(bào)道兩者呈正相關(guān)不符，這可能與兩者合成部位、調(diào)節(jié)方式不同有關(guān)，同時(shí)也不排除MMP-2與CRP釋放曲線的不平行、出現(xiàn)峰值的時(shí)間不一致而造成兩者不相關(guān)。本研究測(cè)定的是單點(diǎn)時(shí)間的樣本含量，未進(jìn)行多時(shí)間點(diǎn)的樣本含量的追蹤觀察，尚待進(jìn)一步深入研究。【參考文獻(xiàn)】  1 Fiotti N,Altamura N,Orlando C,et al. Metalloproteinases-2,-9 and TIMP-1 expression in stable and unstable coronaryplaques undergoi

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