中藥生產(chǎn)設(shè)備清洗的分析方法(微生物檢查)驗證方案

1、方案名稱：中藥生產(chǎn)設(shè)備清洗的分析方法(微生物檢查)驗證方案方案登記號：MVa-P0011-00*制藥有限公司驗證方案目錄1.驗證方案審批 . 32.驗證概述 . 43.驗證目的 . 44.驗證范圍 . 45.驗證日期 . 46.驗證組織及職責(zé)分工及資格確認(rèn) . 47.驗證用儀器及校正 . 58.殘留微生物檢查方法驗證準(zhǔn)備 . 59試樣準(zhǔn)備 . 610擦拭法清洗后設(shè)備殘留微生物限度檢查方法驗證 . 611 棉簽擦拭法取樣回收率試驗 . 912淋洗法清洗后設(shè)備殘留微生物限度檢查方法驗證 . 913 淋洗法取樣回收率試驗 . 1114 驗證過程偏差分析 . 1215 驗證結(jié)論與綜合評價 . 1216

2、.再驗證 . 131.驗證方案審批起草：審核：批準(zhǔn)：2.驗證概述我公司中藥提取車間、中藥制劑車間，生產(chǎn)設(shè)備共線生產(chǎn)多個品種。為保證最大限度降低藥品生產(chǎn)過程中污染及交叉污染等風(fēng)險，我公司根據(jù)GMP（2010年版）的要求，制定共線生產(chǎn)設(shè)備清洗驗證方案。根據(jù)設(shè)備的具體情況確定可操作的清洗方法（如淋洗法，擦拭法等），并根據(jù)不同的清洗方法，通過測定微生物限度和總有機(jī)碳確定殘留污染物的限度。設(shè)備清洗使用擦拭法進(jìn)行清洗驗證的，相應(yīng)的殘留微生物檢查，采使用棉簽擦拭法進(jìn)行采集檢查試樣，平皿法進(jìn)行細(xì)菌和霉菌的計數(shù)檢查；設(shè)備清洗使用淋洗法進(jìn)行清洗驗證的，相應(yīng)的殘留微生物檢查，采集淋洗液作為檢查試樣，薄膜過濾法進(jìn)行細(xì)

3、菌和霉菌的計數(shù)檢查。在3035培養(yǎng)72小時，細(xì)菌和霉菌合并計數(shù)。 3.驗證目的通過方法驗證，確保該方法能夠準(zhǔn)確可靠的檢測出共線生產(chǎn)設(shè)備清洗后的殘留污染物符合預(yù)期的限度標(biāo)準(zhǔn)。 4.驗證范圍本方案適用于中藥提取車間、中藥制劑車間等共線生產(chǎn)相關(guān)設(shè)備清洗后，采集樣品的微生物限度檢測方法的方法驗證。 5.驗證日期6.驗證組織及職責(zé)分工及資格確認(rèn)的工作能力，并經(jīng)過質(zhì)量管理部負(fù)責(zé)人簽字認(rèn)可后方可進(jìn)行驗證工作。 7.驗證用儀器及校正 7.1驗證用儀器驗證工作開始前應(yīng)準(zhǔn)備好驗證所需的儀器儀表，這些儀器儀表必須經(jīng)過校驗并且在有效期內(nèi)，否則不能用于驗證工作。8. 殘留微生物檢查方法驗證準(zhǔn)備 8.18.3菌液制備：9

4、試樣準(zhǔn)備9.1擦拭法清洗試樣準(zhǔn)備設(shè)備清洗結(jié)束，用在無菌注射用水中浸過的無菌棉簽擦拭25cm2的表面，剪下棉簽頭部，置裝有5ml 0.9%無菌氯化鈉溶液的20ml具塞試管中，振搖3分鐘，作為微生物限度檢查供試液。9.2淋洗法清洗試樣準(zhǔn)備設(shè)備清洗結(jié)束，用最后的淋洗水，作為微生物限度檢查供試液。10擦拭法清洗后設(shè)備殘留微生物限度檢查方法驗證驗證分為四組，并進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗，分別計算供試品組和對照組試驗的菌回收率。在三次獨(dú)立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率均應(yīng)不低于70%，若試驗組的菌回收率均不低于70%，照該計數(shù)法測定；若任一次試驗中試驗組的菌數(shù)回收率低于70%，則應(yīng)建立新的方法，消除供試

5、液的抑菌活性，并重新驗證。10.1試驗組：取供試液1ml，加菌50100cfu，分別注入平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備2個平皿，按平皿法測定其菌數(shù)。 10.2菌液組：測定所加的試驗菌數(shù)。10.3供試品對照組：取規(guī)定量供試液，按平皿法測定供試品本底菌數(shù)。 10.4稀釋劑對照組：考察供試液制備過程對微生物的影響程度，用相應(yīng)的稀釋液替代供試液，加菌50100cfu，按試驗組的供試液制備方法和菌落計數(shù)方法測定其菌數(shù)。10.5試驗組的菌回收率（%）=10.6稀釋劑對照組的菌回收率（%）=小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人：日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人： 日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人： 日期：小結(jié)

6、：檢查人： 復(fù)核人： 日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人： 日期：10.8結(jié)論：判定平皿計數(shù)法檢查擦拭法清洗設(shè)備殘留微生物限度的方法適合性檢查人： 復(fù)核人： 日期：11 棉簽擦拭法取樣回收率試驗取表面光滑的不銹鋼平板一塊，劃出25cm2的區(qū)域。取1ml含菌數(shù)為50100cfu的枯草芽孢桿菌菌懸液，均勻涂敷在劃出的25cm2區(qū)域，晾干，用在無菌注射用水中浸過的無菌棉簽擦拭該區(qū)域，剪下棉簽頭部，置裝有5ml pH7.0的無菌氯化鈉蛋白胨溶液的20ml具塞試管中，振搖3分鐘，得擦拭法取樣回收率樣品溶液。重復(fù)配制6份取樣回收率樣品溶液，分別進(jìn)行平皿法計數(shù)培養(yǎng)。計算回收率，平均回收率應(yīng)大于70% 。結(jié)論：檢查

7、人： 復(fù)核人： 日期：12淋洗法清洗后設(shè)備殘留微生物限度檢查方法驗證驗證分為四組，并進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗，分別計算供試品組和對照組試驗的菌回收率。在三次獨(dú)立的平行試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率均應(yīng)不低于70%，若試驗組的菌回收率均不低于70%，照該計數(shù)法測定；若任一次試驗中試驗組的菌數(shù)回收率低于70%，則應(yīng)建立新的方法，消除供試液的抑菌活性，并重新驗證。 12.1試驗組：取供試液10ml用薄膜濾過，沖洗稀釋液100ml，同時加入50 100cfu試驗菌，濾過，取出濾膜，菌面朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，按薄膜過濾法測定其細(xì)菌數(shù)。每株試驗菌平行制備2個平皿，按薄膜過濾法測定其菌數(shù)。 12.2菌

8、液組：測定所加的試驗菌數(shù)。12.3供試品對照組：取規(guī)定量供試液，測定供試品本底菌數(shù)。 12.4稀釋劑對照組：考察供試液制備過程對微生物的影響程度，用相應(yīng)的稀釋液替代供試液，加菌50100cfu，按試驗組的供試液制備方法和菌落計數(shù)方法測定其菌數(shù)。12.5試驗組的菌回收率（%）=12.6稀釋劑對照組的菌回收率（%）=小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人：日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人：日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人： 日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人： 日期：小結(jié)：檢查人： 復(fù)核人： 日期：12.8結(jié)論：判定平皿計數(shù)法檢查淋洗法清洗設(shè)備殘留微生物限度的方法適合性檢查人： 復(fù)核人： 日期： 13 淋洗法取樣回收率試驗取表

9、面光滑的不銹鋼平板一塊，劃出25cm2的區(qū)域。取1ml含菌數(shù)為50100cfu的枯草芽孢桿菌菌懸液，均勻涂敷在劃出的25cm2區(qū)域，晾干，用無菌注射用水淋洗該區(qū)域，接受淋洗液100ml，得淋洗法取樣回收率樣品溶液。重復(fù)配制6份取樣回收率樣品溶液，分別進(jìn)行薄膜過濾法計數(shù)培養(yǎng)。計算回收率，平均回收率應(yīng)大于70% 。結(jié)論：檢查人： 復(fù)核人： 日期： 14 驗證過程偏差分析清洗驗證工作結(jié)束后，由驗證組長對驗證的結(jié)果和可能出現(xiàn)的偏差進(jìn)行分析和總結(jié)，得出具體結(jié)論。如果存在偏差應(yīng)提出解決方案，報驗證小組領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)后進(jìn)行整改，并重新進(jìn)行驗證。驗證過程是否存在偏差：是 否 。 偏差描述及評價：評價人： 日期： 15 驗證結(jié)論與綜合評價整個驗證工作結(jié)束后，驗證小組負(fù)責(zé)收集各項驗證結(jié)果及記錄，根據(jù)驗證試驗結(jié)果起草驗證報告，擬定修改方案，報質(zhì)