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1、實驗十 凝膠成像儀觀察微生物菌落計數(shù)的演示實驗一、 實驗?zāi)康耐ㄟ^儀器演示使學(xué)生進一步理解課堂教學(xué)的內(nèi)容,并將其應(yīng)用于實踐。掌握儀器操作的一般步驟。二、 實驗內(nèi)容1 了解凝膠成像儀使用的目的和意義;2 掌握凝膠成像儀使用的基本方法。三、 實驗原理 凝膠成像分析系統(tǒng)(Gel Doc XR)為一實時的圖像采集系統(tǒng),采用高亮度的激發(fā)光源、25×26 cm大面積的UV(302 nm)透射成像區(qū)域、滑動式抽屜為放置凝膠或培養(yǎng)皿等提供了方便容易的進行分子量的判斷和濃度分析。凝膠成像分析系統(tǒng)(Gel Doc XR)可進行凝膠條帶分析、微孔板及克隆分析。分析結(jié)果包括:DNA/RNA蛋白質(zhì)的分子量、等電
2、點、遷移帶、差異顯示、RFLP分析、Fingerprinting分析、放射自顯影膠片成像、96孔板定量分析、平板菌落計數(shù)和雙色克隆計數(shù)等。四、 實驗條件 做好實驗前的準(zhǔn)備工作,在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)好不同稀釋度的菌落。五、 實驗步驟1. 儀器操作規(guī)程: 用酒精棉球?qū)岛兄械耐敢暺敛潦酶蓛?將凝膠置于屏上(培養(yǎng)皿菌落計數(shù)于白光屏) 調(diào)整CCD位置使凝膠置于視野合適位置后插上電源 打開電腦進入Labwork工作狀態(tài) 打開相應(yīng)的透射光源準(zhǔn)備掃描 進入攝像狀態(tài),調(diào)整光圈和焦距掃描 用JPG格式文件保存圖像 關(guān)閉光源,CCD電源和電腦 取出凝膠并用酒精棉球擦凈透視屏 蓋上防塵蓋 2. 使用完后請在記錄本上登記。 3. 凝膠成像系統(tǒng)電腦為圖像掃描分析專用,不得作其它用途,不得修改電腦設(shè)置。 六、 實驗結(jié)果討論七、 思考題凝膠成像系統(tǒng)的使用原理及注意事項是什
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