人α-珠蛋白基因表達(dá)調(diào)控研究進(jìn)展

1、人-珠蛋白基因表達(dá)調(diào)控研究進(jìn)展    關(guān)鍵詞： -類(lèi)珠蛋白基因 HS-40 基因表達(dá)調(diào)控  摘要 人-類(lèi)珠蛋白基因簇位于6號(hào)染色體的短臂近端粒區(qū)，由4個(gè)功能基因和3個(gè)假基因組成，其中，-珠蛋白基因在胚胎期表達(dá)，2、1和珠蛋白基因在胎兒和成人期表達(dá)。-類(lèi)珠蛋白基因的主要調(diào)控序列位于-珠蛋白基因上游40kb的位置，稱(chēng)為HS-40，另外還存在其它的HS位點(diǎn)。在HS-40和各種珠蛋白基因啟動(dòng)子上有多種紅系和通用反式作用因子的結(jié)合位點(diǎn)，它們間的協(xié)同作用保證了-類(lèi)珠蛋白基因表達(dá)的組織和時(shí)序特異性。對(duì)于-類(lèi)珠蛋白基因表

2、達(dá)調(diào)控的研究主要采用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法。 血紅素結(jié)合蛋白是一類(lèi)廣泛存在的蛋白質(zhì)，從細(xì)菌、真菌、軟體動(dòng)物到植物和脊椎動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)都有分布，功能也各不相同，但是它們都來(lái)自共同的始祖基因。血紅蛋白在體內(nèi)承擔(dān)著運(yùn)輸氧氣和CO2的生理功能，每個(gè)紅細(xì)胞約含2.8億個(gè)血紅蛋白分子，是紅細(xì)胞中的主要蛋白質(zhì)。人從胚胎、胎兒、新生兒到成年整個(gè)發(fā)育過(guò)程中，共有HbGower I (22)、HbGower  (22)、HbPortland(22)、HbF(22)、HbA2（22）和HbA（22）六種血紅蛋白出現(xiàn)，其類(lèi)和類(lèi)由兩種不同的珠蛋白多肽鏈和血紅素分子構(gòu)成，其中-類(lèi)珠

3、蛋白基因包括、2、1和，-類(lèi)珠蛋白包括、和。-類(lèi)珠蛋白與-珠蛋白的同源性為50%，空間結(jié)構(gòu)相似，大約在5億年前由共同的始祖基因進(jìn)化而來(lái)。 人的-類(lèi)珠蛋白肽鏈共有4種，基因與基因在大約4億年前開(kāi)始分離，基因與基因的分離發(fā)生在2.6億年前。其多肽鏈均由141個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成，在胚胎第一天，主要是多肽鏈（42%）和2多肽鏈（24%）的表達(dá)，從第五周起珠蛋白基因的表達(dá)開(kāi)始關(guān)閉，而代之以2和1珠蛋白基因的表達(dá)，與類(lèi)珠蛋白基因相比，類(lèi)珠蛋白基因只有一次開(kāi)關(guān)（switch），其表達(dá)調(diào)控機(jī)制可能較為簡(jiǎn)單，在研究基因表達(dá)的時(shí)序上是一個(gè)更好的模型。而且，-地中海貧血的發(fā)病率在我國(guó)也較高，在廣西高達(dá)14.9%，廣東

4、為4.11%，因此，研究類(lèi)珠蛋白的基因表達(dá)調(diào)控，對(duì)于了解-地中海貧血的發(fā)病機(jī)理和選擇有效的治療方法，都有重要的意義。 1 類(lèi)珠蛋白基因簇的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 人的類(lèi)珠蛋白基因簇位于16號(hào)染色體短臂靠近端粒的位置，長(zhǎng)度約為26kb，與端粒的距離為170kb-340kb，具有多態(tài)性1。小鼠的類(lèi)珠蛋白基因簇位于11號(hào)染色體近著絲粒的位置。整個(gè)類(lèi)珠蛋白基因簇在進(jìn)化上是非常保守的，共有7個(gè)基因組成，包括4個(gè)可編碼基因和3個(gè)假基因：端粒-1-2-2-1-1-著絲粒。另外，在人的第22號(hào)染色體上還發(fā)現(xiàn)了一個(gè)珠蛋白基因的拷貝。與-珠蛋白基因簇相比，類(lèi)珠蛋白基因簇的基因密度較高，G+C含量較高（54%），Alu

5、序列的密度也很高（占整個(gè)序列的26%），另外還含有一些數(shù)目可變的串聯(lián)重復(fù)序列（VNTRs）和CpG島。 由于人類(lèi)珠蛋白基因簇位于16號(hào)染色體近端粒區(qū)，在DNA復(fù)制起始的早期即開(kāi)始復(fù)制，所以在各種細(xì)胞中染色體結(jié)構(gòu)始終處于開(kāi)放狀態(tài)，CpG島也保持未甲基化，但是其表達(dá)卻是紅系特異的。小鼠-珠蛋白基因簇位于其11號(hào)染色體近著線粒位置，在染色體位置和結(jié)構(gòu)上與人存在較大差異，只在紅系細(xì)胞中呈現(xiàn)開(kāi)放狀態(tài)，沒(méi)有CpG島。小鼠-珠蛋白基因簇附近存在許多與端DNA同源的序列，說(shuō)明小鼠-珠蛋白基因簇可能是從小鼠染色體的端粒紅色轉(zhuǎn)位到現(xiàn)在所處的位點(diǎn)2。 在-類(lèi)珠蛋白基因簇和端粒間存在4個(gè)看家基因（housekeepi

6、ng gene）和一個(gè)IL-9受體的假基因，在人16號(hào)染色體上的位置依次是：端粒-IL-9-未命名-Dist1-MPG-Pros1-，MPG編碼一種DNA修復(fù)酶：3-甲基腺嘌呤DNA糖苷酶，轉(zhuǎn)錄方向與類(lèi)珠蛋白基因簇的轉(zhuǎn)錄方向一致，而Dist1和Prox1的轉(zhuǎn)錄方向與類(lèi)珠蛋白基因簇的方向相反，分別位于珠蛋白基因上游-89/-91kb和-14kb的位置，因此又分別被稱(chēng)為-89/-91基因和-14基因。3種基因的表達(dá)都不是紅系特異的，人的MPG和Prox1基因的在3-端有重疊，小鼠沒(méi)有重疊3。珠蛋白基因特異的增強(qiáng)子序列HS-40就位于Prox1基因的第5內(nèi)含子中。 2 調(diào)控類(lèi)珠蛋

7、白基因表達(dá)的上游順式反應(yīng)元件和反式作用因子 人類(lèi)珠蛋白基因簇上游40kb的一個(gè)DNase I高敏位點(diǎn)（HS-40）是已知最重要的類(lèi)珠蛋白上游表達(dá)調(diào)控序列，雖然在基因上游也存在其它的DNase I高敏位點(diǎn)，如HS-33、HS-10、HS-8和HS-44，類(lèi)似于-LCR5個(gè)DNase I高敏位點(diǎn)排列方式，但都沒(méi)有HS-40對(duì)類(lèi)珠蛋白基因的增強(qiáng)子活性，最新的研究發(fā)現(xiàn)，HS-40對(duì)-珠蛋白基因的表達(dá)還有負(fù)的作用，因此早期-LCR的定義是不確切的，現(xiàn)在一般叫做-主動(dòng)控制元件（positive control element）或-位點(diǎn)調(diào)控元件（locus&

8、#160;regulatory element）5。 HS-40序列長(zhǎng)約300bp，在這希區(qū)域內(nèi)集中了多種組織特異和廣泛存在的反式作用因子的結(jié)合位點(diǎn)。在10bp、100bp、270bp和290bp處存在4個(gè)紅系特異的GATA盒，在120bp和150bp處有兩個(gè)NF-E2/AP1的結(jié)合位點(diǎn)（GCTGAG/CT-CA），以及3個(gè)CACCC盒和一個(gè)AG盒。在第二個(gè)GATA盒和第一個(gè)NF-E2/AP1結(jié)合位點(diǎn)中間有一個(gè)YY1結(jié)合位點(diǎn)，另外，與第一個(gè)CACCC盒重疊的一段GGGCGG序列6。HS-40增強(qiáng)子的缺失對(duì)MPG基因的表達(dá)沒(méi)有影響，只引起類(lèi)珠蛋白表達(dá)的降低，造成嚴(yán)重的-地中海貧血。但是

9、珠蛋白所呈較低水平的組成性表達(dá)，這與人-珠蛋白所處的染色體位置有關(guān)，因?yàn)轭?lèi)珠蛋白基因簇靠近染色體的端粒，始終處于開(kāi)放狀態(tài)，允許較低水平轉(zhuǎn)錄合體的形成。 小鼠HS-40的同源序列位于-珠蛋白基因上游26kb，核心序列的長(zhǎng)度約為270bp，也位于鼠Prox基因的內(nèi)含子內(nèi)，有3個(gè)GATA盒、兩個(gè)NF-E2/AP1結(jié)合位點(diǎn)和一個(gè)YY1的結(jié)合位點(diǎn)，但是與人HS-40相比，缺少CACCC盒和3-端的一個(gè)GATA盒。在MEL中，HS-26不能促進(jìn)人-珠蛋白基因科長(zhǎng)的表達(dá)調(diào)控機(jī)制是不同的7。 NF-E2蛋白是一種重要的紅系反式作用因子，是由分子量分別為45kD(p45)和18kD（p18）的兩類(lèi)亞基構(gòu)成的異二

10、聚體，它們都是屬于AP-1基因超家族的含堿性亮氨酸拉鏈的蛋白，p45亞基只在各種造血細(xì)胞中有表達(dá)，而p18亞基幾乎在各種組織中均表達(dá)，其中人mafG的表達(dá)與珠蛋白的調(diào)控有關(guān)。缺失NF-E2基因的MEL細(xì)胞不能促進(jìn)類(lèi)和類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá)，但是NF-E2敲除的小鼠并未出現(xiàn)紅系發(fā)育和分化的異常，進(jìn)一步缺失NF-E2蛋白相關(guān)因子（Nrf-2）基因也未能引起紅細(xì)胞成熟的缺陷，而且NF-E2和Nrf-2間也不存在相互調(diào)控的現(xiàn)象，推測(cè)新近發(fā)現(xiàn)的這一家族的BACH-1和BACH-2基因可能起更重要的作用8。GATA-1和EKLF也是重要的紅系反式因子，它們?cè)贒NA分子上的結(jié)合基序分別是（A/T）GATA（A/

11、G）和CACCC9，在紅系細(xì)胞的分化和基因表達(dá)過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用，GATA位點(diǎn)的突變會(huì)使紅系的分化終止。GATA-1和EKLF都可以通過(guò)鋅指結(jié)構(gòu)與其它蛋白因子相互作用而形成核酸-蛋白復(fù)合物，GATA-1位點(diǎn)一般是成對(duì)出現(xiàn)。GATA-1發(fā)揮作用時(shí)需要輔助蛋白FOG（friedn of GATA-1）的存在，F(xiàn)OG的缺失也會(huì)造成紅系分化的終止10。 YY-1和X-BP蛋白在HS-40上也存在結(jié)合位點(diǎn)，它們雖然不是紅系特異的反式因子，但是對(duì)HS-40的增強(qiáng)子活性都有重要的作用。另外，在-珠蛋白基因簇的3-下游區(qū)域內(nèi)存在的GATA-1結(jié)合位點(diǎn)可能對(duì)-珠蛋白基因的表達(dá)也具有重要作用

12、，包含1基因在內(nèi)的2基因下游20kb的缺失也使2基因不能表達(dá)，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，雖然和2基因是完整的，HS-40也正常，但患者還是表達(dá)嚴(yán)重的-地中海貧血。這可能也與-珠蛋白基因簇的完整性有關(guān)11。 3 -類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá) -類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá)具有紅系組織特異性和不同發(fā)育階段的特異性，與-類(lèi)珠蛋白相比，只有一個(gè)開(kāi)關(guān)，即胚胎期基因向胎兒/成人期基因的轉(zhuǎn)換。位于基因簇的5-端的基因在卵黃囊期首先開(kāi)啟表達(dá)，同時(shí)3端的基因表達(dá)也開(kāi)啟，但是水平較低。它們與同時(shí)表達(dá)的胚胎期類(lèi)珠蛋白共同構(gòu)成兩種胚胎血紅蛋白。人基因的表達(dá)水平隨胚胎的發(fā)育逐步降低，至第五、六周造血功能從卵黃囊轉(zhuǎn)移到胎肝后，-基因的表達(dá)基本關(guān)

13、閉（小鼠的轉(zhuǎn)換發(fā)生在9-11d），而基因開(kāi)始活躍表達(dá)。這時(shí)基因也存在低水平的滲漏表達(dá)，在成人期仍可以檢測(cè)到基因的痕量表達(dá)?；蛴袃蓚€(gè)拷貝，編碼的氨基酸序列完全相同，但是在編碼區(qū)有兩個(gè)堿基的替代，第二內(nèi)含子上有7bp的缺失，3-非翻譯區(qū)也存在一定的差異。在成人外周血紅細(xì)胞中，2和1mRNA的比例是2.6:1，說(shuō)明它們的轉(zhuǎn)錄效率是有差異的，但是翻譯水平的差異無(wú)法確證，因?yàn)閮蓚€(gè)基因所編碼的多肽鏈?zhǔn)峭耆嗤?。事?shí)上兩個(gè)基因在發(fā)育過(guò)程中也存在一個(gè)轉(zhuǎn)換，在胚胎早期，2和1mRNA的比例接近1:1，2基因的表達(dá)逐漸占優(yōu)勢(shì)，到第810周達(dá)到2.6:1的比例11。在K562細(xì)胞中2和1 mRNA的比

14、例發(fā)生異常，只有8:29，經(jīng)氯高鐵血紅素誘導(dǎo)后比例有所增加，如果將K562細(xì)胞的16號(hào)染色體導(dǎo)入MEL細(xì)胞，則恢復(fù)正常比例。說(shuō)明存在調(diào)節(jié)2和1 mRNA比例的因子，但目前還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)12。 在人珠蛋白基因的啟動(dòng)子區(qū)TATAA盒的上游有一個(gè)-IRP結(jié)合位點(diǎn)、一個(gè)-CP-1和兩個(gè)SP-1結(jié)合位點(diǎn)，但是缺乏珠蛋白基因所特有的GATA序列和CACCC序列，這一點(diǎn)與小鼠及其它動(dòng)物的-珠蛋白基因存在顯著的不同，鼠-珠蛋白基因的啟動(dòng)子區(qū)有3個(gè)IRP/SP1結(jié)合位點(diǎn)，一個(gè)CP-1結(jié)合位點(diǎn)，一個(gè)CP-2結(jié)合位點(diǎn)，一個(gè)NF-5結(jié)合位點(diǎn)和一個(gè)GATA-1結(jié)合位點(diǎn)。所以在MEL細(xì)胞中，人-珠蛋白基因呈現(xiàn)組成性

15、表達(dá)，如果在要珠蛋白基因的啟動(dòng)子區(qū)加上GATA和CACCC序列，則-珠蛋白基因也與-珠蛋白基因相似，可被氯高鐵血紅素（hemin）誘導(dǎo)表達(dá)13，提示人-珠蛋白基因和-珠蛋白基因在表達(dá)調(diào)控上的差異與GATA-1和EKLF因子的關(guān)系非常密切。 在基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中，-珠蛋白基因只能在紅系細(xì)胞中表達(dá)，如果要使-珠蛋白基因能夠在異源細(xì)胞中表達(dá)，必須在-珠蛋白基因的前面加上病素的啟動(dòng)子序列，而-珠蛋白基因不需病毒的啟動(dòng)子序列就可以實(shí)現(xiàn)在紅系和非紅系細(xì)胞中的組成性表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，這種特性與-珠蛋白基因起始密碼子后259bp范圍內(nèi)的DNA序列有關(guān)，這段序列通過(guò)與-珠蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)相互作用而使-珠蛋白基因在各種

16、被轉(zhuǎn)染細(xì)胞中持續(xù)高水平地表達(dá)，而對(duì)-珠蛋白基因的啟動(dòng)子及SV40啟動(dòng)子沒(méi)有作用。這段序列在K562細(xì)胞中包含一個(gè)紅系特異的DNase I高敏位點(diǎn)，其它細(xì)胞中則不存在，說(shuō)明-珠蛋白基因可能在各種細(xì)胞中都處于開(kāi)放狀態(tài)，而染色體水平上的負(fù)性調(diào)控對(duì)-珠蛋白基因的表達(dá)起著重要作用14。 基因位于-珠蛋白基因簇的3-末端，在成人紅細(xì)胞中可以檢測(cè)到mRNA的存在，但-珠蛋白的功能尚不清楚，因?yàn)榛蚯贸男∈笤诟鞣矫娴谋硇投际钦５??；虻谋磉_(dá)與基因的表達(dá)基本是平行的，mRNA的出現(xiàn)與mRNA出現(xiàn)的時(shí)相相同，表達(dá)量一直穩(wěn)定在珠蛋白表達(dá)量的1/50左右，表明基因是一種胎兒/成人期的-類(lèi)珠蛋白15。 -

17、珠蛋白基因簇內(nèi)的假基因均不能被轉(zhuǎn)錄，1基因結(jié)構(gòu)中存在一系列的轉(zhuǎn)錄控制突變，2基因則缺乏整個(gè)啟動(dòng)子區(qū)。1基因與基因相比，除內(nèi)含子的一些變化外，只有6個(gè)堿基的差異，其中在第六密碼子上有一個(gè)CAGTAG的無(wú)義突變。該位點(diǎn)的回復(fù)突變也不能使1基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。而位于第22號(hào)染色體上的2基因卻可以被轉(zhuǎn)錄、加工，但目前未檢測(cè)到它的翻譯產(chǎn)物。 -類(lèi)珠蛋白基因表達(dá)的時(shí)序性受各自3、5-旁側(cè)區(qū)、啟動(dòng)子區(qū)和部分基因內(nèi)部結(jié)構(gòu)的控制?；?-端300bp的區(qū)域內(nèi)存在一個(gè)CP-2結(jié)合位點(diǎn)，兩個(gè)GATA盒，3個(gè)CACCC盒，一個(gè)ZF-1結(jié)合位點(diǎn)和一個(gè)ZF-2結(jié)合位點(diǎn)，另外還有CCAATA盒和TATA盒。Pondel等的研究表

18、明只包含CCAATA盒和TATA盒的67bp長(zhǎng)的近起始密碼子區(qū)和HS-40的存在，即具有調(diào)控-基因及與之相連的報(bào)告基因在胚胎期表達(dá)的作用16，NF-E3結(jié)合在所有人/鼠胚胎型珠蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)的TGACCA序列上，與CCAATA盒重疊，所以NF-E3可能對(duì)-珠蛋白基因的表達(dá)有重要的作用。而Zhang等的研究則證明，HS-40需要通過(guò)和-啟動(dòng)子上游的兩個(gè)GATA位點(diǎn)的相互作用才具有活性，不在Pondel等所指的67bp范圍之內(nèi)17；Stephen等采用-LCR作為上游增強(qiáng)子調(diào)控-基因的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，啟動(dòng)子區(qū)、-基因的編碼序列和3-非翻譯區(qū)對(duì)-基因的定時(shí)關(guān)閉都有作用并相互疊加18。雖然這些研究存在一定

19、的相互矛盾，但是也存在共同的特征，都需要紅系特異的上游增強(qiáng)子，并且存在增強(qiáng)子和啟動(dòng)子區(qū)的相互作用。HS-40和-類(lèi)基因啟動(dòng)子區(qū)與各種反式各自形成獨(dú)立的核酸蛋白復(fù)合物，然后通過(guò)它們之間的相互作用促進(jìn)-類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá)。-珠蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)的CACCC盒的結(jié)合蛋白不同于已知的CACCC結(jié)合蛋白，如SP-1，EKLF等，目前這種蛋白正在鑒定中19。 mRNA的穩(wěn)定性對(duì)-基因表達(dá)的有效關(guān)閉也起著重要作用。在-類(lèi)珠蛋白mRNA3-非翻譯區(qū)內(nèi)有一段16個(gè)堿基的嘧啶富含區(qū)，和mRNA的差異只是一個(gè)與CG的突變，就使-mRNA與PABP及其它mRNA結(jié)合蛋白的結(jié)合能力降低了一個(gè)數(shù)量級(jí)，因此組裝形成mRNP的

20、能力較弱，而且它的poly(A)也較短，所以mRNA容易降解。Stephen據(jù)此提出了一個(gè)-基因關(guān)閉的模型，認(rèn)為轉(zhuǎn)錄后加工在mRNA的清除和關(guān)閉過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。 4 -類(lèi)珠蛋白基因表達(dá)調(diào)控研究的模型 在細(xì)胞水平上研究-類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá)調(diào)控一般采用人紅白血病細(xì)胞K562、HEL細(xì)胞和鼠紅白血病細(xì)胞MEL細(xì)胞作為研究對(duì)象，K562細(xì)胞在紅系發(fā)育的過(guò)程中屬于胎兒期的紅細(xì)胞，表達(dá)胎兒期的-珠蛋白、部分珠蛋白和-珠蛋白，而HEL和MEL細(xì)胞則是處于成熟期的紅細(xì)胞，表達(dá)成人期的珠蛋白基因。采用HS-40或-類(lèi)基因的啟動(dòng)子調(diào)控的報(bào)告基因，如Lac-Z、CAT或熒光素蛋白均可以在K562、HE

21、L和MEL細(xì)胞中表達(dá)，人類(lèi)珠蛋白基因也可以在MEL細(xì)胞中獲得表達(dá)，但是與-珠蛋白基因不同的是，-珠蛋白基因呈現(xiàn)組成性表達(dá)，而不需氯高鐵血紅素（hemin）的誘導(dǎo)。 由于細(xì)胞水平的研究不能體現(xiàn)-珠蛋白基因表達(dá)的時(shí)序性，要在時(shí)間和空間上對(duì)珠蛋白基因及其調(diào)控因素進(jìn)行研究，轉(zhuǎn)基因鼠則是更好的模型。采用HS-40或-LCR作為上游增強(qiáng)子研究單個(gè)-類(lèi)珠蛋白基因或報(bào)告基因表達(dá)的模型由于片段較短，可以使用逆轉(zhuǎn)錄病毒形體或真核表達(dá)質(zhì)粒，在轉(zhuǎn)基因鼠體內(nèi)，-珠蛋白基因或連接在啟動(dòng)子后的報(bào)告基因只在鼠胚胎期卵黃囊中表達(dá)，第10d左右關(guān)閉，-LCR調(diào)控的2-和1-珠蛋白基因在胚胎早期表達(dá)量相同，在第11d也出現(xiàn)表達(dá)量的

22、轉(zhuǎn)換并呈現(xiàn)正常的比例。但是HS-40在轉(zhuǎn)基因鼠體內(nèi)并不能使下游的-珠蛋白基因表現(xiàn)拷貝數(shù)依賴(lài)發(fā)育階段的穩(wěn)定表達(dá)，表明HS-40與-LCR是不同的。如果制備包含完整-珠蛋白基因簇的轉(zhuǎn)基因鼠，則必須采用粘粒、PAC或YAC作為載體的人基因組DNA，Wood等通過(guò)篩選人粘?；蚪MDNA文庫(kù)，得到兩段重疊的包含人-珠蛋白基因簇的DNA片段，通過(guò)連接得到70kb的DNA片段，雖然-珠蛋白基因表達(dá)量可以達(dá)到鼠內(nèi)源性-珠蛋白基因的66%，但是與短片段相似，仍然是非拷貝數(shù)依賴(lài)的，并且隨著發(fā)育的進(jìn)程，表達(dá)量降低1.59.0倍。而采用PAC載體克隆的150kb的人-珠蛋白基因簇在轉(zhuǎn)基因鼠體內(nèi)表達(dá)的組織特異性、時(shí)序性

23、等都呈現(xiàn)基本正常的表達(dá)調(diào)控，表達(dá)穩(wěn)定，表達(dá)量有些甚至可以超過(guò)內(nèi)源鼠-珠蛋白基因表達(dá)的水平，但是都不能與鼠內(nèi)源性-珠蛋白基因表達(dá)水平相當(dāng)20，這可能與物種的差異有關(guān)。 有-珠蛋白基因整合的轉(zhuǎn)基因鼠并不是都表達(dá)-珠蛋白，與整合位點(diǎn)有關(guān)，不表達(dá)的-珠蛋白基因的小鼠紅系細(xì)胞染色體上不能形成紅系特異的DNase I高敏位點(diǎn)，整合位點(diǎn)靠近著絲粒區(qū)或異染色質(zhì)區(qū)，而插入位點(diǎn)染色體的甲基化狀態(tài)沒(méi)有變化。 5 結(jié)語(yǔ) 珠蛋白基因表達(dá)調(diào)控的組織特異性、發(fā)育時(shí)序性以及與-類(lèi)珠蛋白基因簇間表達(dá)的平衡，為研究基因表達(dá)調(diào)控的機(jī)理提供了一種良好的模型，現(xiàn)在的研究主要希望從順式元件、反式因子、染色體結(jié)構(gòu)等方面

24、闡明-珠蛋白基因表達(dá)調(diào)控的模式，但是還沒(méi)有提出一種令人信服的模型，從目前所取得的結(jié)果看，-類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá)調(diào)控也是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，可能有多種不同的機(jī)制在起作用從而對(duì)其表達(dá)的組織特異性、時(shí)序性和平衡進(jìn)行調(diào)控，要精確了解-類(lèi)珠蛋白基因的表達(dá)調(diào)控模式，應(yīng)該進(jìn)一步選取基因結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單動(dòng)物模型進(jìn)行研究，如河豚魚(yú)、斑馬魚(yú)，其-類(lèi)珠蛋白基因結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單，而且-珠蛋白基因簇和-珠蛋白基因簇尚未分離，存在于同一染色體上，這對(duì)于研究?jī)煞N珠蛋白基因表達(dá)的平衡具有重要的意義。百事通 參考文獻(xiàn) 1 Higgs DR et al.Blood,1989;73:1081 2

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