德國(guó)Zeiss激光共聚焦顯微鏡快速操作手冊(cè)

1、德國(guó) Zeiss 激光共聚焦顯微鏡 快速操作手冊(cè)德國(guó) Zeiss 激光掃描共聚焦顯微鏡 快速操作手冊(cè)制作 : 光學(xué)儀器 (上海)制 作:Zeiss光學(xué)儀器(上海)國(guó)際貿(mào)易有限公司 孫 凱2009年6月目錄：目錄:1系 統(tǒng)的組成系統(tǒng)組成及光路示意圖實(shí)物照片說(shuō)明實(shí)物照片說(shuō)明 2 系統(tǒng)的使用 2.1 開(kāi) 機(jī)順序 軟件的快速使用說(shuō)明 2.2 軟件的快速使用說(shuō)明 快速使用 顯微鏡的 2.3 顯 微鏡的觸摸屏控制 2.4 關(guān)機(jī)順序 3 系統(tǒng)的維護(hù) 1 系統(tǒng)的組成激光掃描共聚焦顯微 鏡系統(tǒng)主要由 : 電動(dòng)熒光顯微鏡、掃描檢測(cè)單元、激光器、電腦工作站及各相關(guān)附 件組成。激光掃描共聚焦顯微鏡系統(tǒng)主要由 : 電動(dòng)

2、熒光顯微鏡、掃描檢測(cè)單元、激 光器、電腦工作站及各相關(guān)附件組成。系統(tǒng)組成及光路示意圖 : 系統(tǒng)組成及光路示 意圖 : 組成及光路示意圖 電動(dòng)熒光顯微鏡 掃描檢測(cè)單元 激光器 電腦工作站實(shí)物 照片說(shuō)明：實(shí)物照片說(shuō)明：電動(dòng)熒光顯微鏡掃描檢測(cè)單元CO2培養(yǎng)系統(tǒng)控制器激 光器 電腦工作站 2 系統(tǒng)的使用 2.1 開(kāi)機(jī)順序 ) 打開(kāi)穩(wěn)壓電源 (綠色按鈕 )(1) 打開(kāi) 穩(wěn)壓電源 (綠色按鈕) 等待 2 分鐘(電壓穩(wěn)定)后，再開(kāi)其它開(kāi)關(guān) ) “ ”(2) 主開(kāi) 關(guān) MAIN SWITCH “ON” “ ”電腦系統(tǒng) SYSTEMS/PC“ON” “ ”掃描硬件系統(tǒng) COMPONENT“SON” )(3) 打

3、開(kāi) 電動(dòng)顯微鏡開(kāi)關(guān) 打開(kāi) 熒光燈開(kāi)關(guān) ( 注： 具有 5 檔 光強(qiáng)調(diào)節(jié)旋鈕)離子激光器主開(kāi)關(guān)”(4)Ar離子激光器主開(kāi)關(guān)“ON順時(shí)針旋轉(zhuǎn)鑰匙 至 “”預(yù)熱等待約 分鐘，預(yù)熱等待約 15 分鐘， ”將激光器 扳鈕 由 “ Standby ”扳至 ”狀態(tài)，“ Laser run ”狀態(tài)，即可正常使用 ) ，(5) 打開(kāi) 電腦 開(kāi)關(guān) ，進(jìn)入操作系統(tǒng)注 ： 鍵盤(pán)上也具有 電腦開(kāi)關(guān) 2.2 軟件的快速使用說(shuō)明 (1) 電 腦開(kāi)機(jī)進(jìn)入操作系統(tǒng)界面后，雙擊桌面共聚焦軟件 ZEN 圖標(biāo) (2) 進(jìn)入 ZEN 界面， 彈出對(duì)話(huà)框 ： ”“ Start System ”初始化整個(gè)系統(tǒng)，用于激光掃描取圖、 分析等。

4、“ Image Processing ”不啟動(dòng)共聚焦掃描硬件，用于已 ”存圖像數(shù) 據(jù)的處理、分析。 (3) 軟件界面： 功能界面切換 ： 掃描取圖( ) 圖像處理( 、圖像處 理 1 功能界面切換 : 掃描取圖 (Acquisition) 圖像處理 (Processing) 維護(hù)(Maintain)、維護(hù))維護(hù)(、)專(zhuān)業(yè)工程師使用)(注:Maintain 僅供Zeiss 專(zhuān)業(yè)工程師使用 ) 動(dòng)作按鈕; 工具組(多維掃描控制 ) 工具詳細(xì)界面 ; 狀態(tài)欄; 視 窗切換按鈕 ;2 動(dòng)作按鈕;3 工具組(多維掃描控制 ) 4 工具詳細(xì)界面 ;5 狀態(tài)欄;6 視窗切換按鈕 ; ; 圖像切換按鈕 ; 圖

5、像瀏覽/預(yù)掃描窗口 預(yù)掃描窗口 ; 文檔瀏覽/ 處理區(qū)域 處理區(qū)域;7 圖像切換按鈕 ;8 圖像瀏覽 預(yù)掃描窗口 ;9 文檔瀏覽 處理區(qū) 域;10 視窗中圖像處理模塊動(dòng)作按鈕動(dòng)作按鈕 :Single 掃描單張圖片、并在圖 像預(yù)覽窗口顯示。 Start 開(kāi)始掃描單張圖片或一個(gè)實(shí)驗(yàn)流程 (1 組圖片，如 XYZ XYT等)一一。Stop 暫停/結(jié)束掃描。 一一New 建立一個(gè)新圖像 掃描窗口 /文檔。 激光連接狀況檢查激光連接狀況檢查眼睛觀(guān)察 /相機(jī) 共聚焦 光路切換 ( 軟件界面右上角 ) 眼睛觀(guān)察 相機(jī)/共聚焦 LSM 光路切換 (ZEN 軟件界面 右上角) 相機(jī) :Ocular 通過(guò)觀(guān)察筒用

6、眼睛觀(guān)察。 (激光安全保護(hù)裝置自動(dòng)阻斷 激光、保護(hù)眼睛。 ) 光路切換至相機(jī)。 Camera 共聚焦掃描成像光 路。 LSM 顯微鏡設(shè)置 : 顯微鏡設(shè)置 : ” “Ocular ” ” “Light Path”點(diǎn)擊物鏡圖標(biāo)，選擇物鏡點(diǎn)擊物鏡圖標(biāo)，選擇物鏡樣品聚焦。 樣品聚焦。透射光控制 ( 透射光控制 (Transmitted Light Control) ) 反 射光光閘控制 ( 反射光光閘控制 (Reflected Light Shutter) ) 熒光激發(fā)塊選擇 ( 熒 光激發(fā)塊選擇 (Reflector) ) 共聚焦 LSM 掃描設(shè)置點(diǎn)擊“ 軟件界面右上角 ) 系統(tǒng) 切換至共聚焦掃描光

7、路 : 點(diǎn)擊“ LSM” ZEN 軟件界面右上角 ) 系統(tǒng)切換至共聚焦 掃描光路 : (” ，光路設(shè)置 : 光路設(shè)置 :Smart Setup 自動(dòng)預(yù)設(shè)光路、掃描方法，選取“熒光探針”“顏色”。應(yīng)用“ Apply ” (注:Fastest為最快速掃描，多條激光譜線(xiàn)同時(shí)掃描。 Best signal 為最佳信號(hào)掃描，多條激光譜 線(xiàn)順序掃描。 Best compromise 為兼顧速度與信號(hào)的折 ) 中式掃描。掃描圖像參數(shù) 設(shè)置: 掃描圖像參數(shù)設(shè)置 : 每個(gè)通道的精細(xì)調(diào)節(jié) : 每個(gè)通道的精細(xì)調(diào)節(jié) : 包括: 包括: ) 的調(diào)節(jié) ( 。該值越大，則信號(hào)越強(qiáng)，但共聚焦圖像效果會(huì)降低。原則上，(1)P

8、in hole 的調(diào)節(jié)(一般設(shè)為1AU。該值越大，則信號(hào)越強(qiáng)，但共聚焦圖像效果會(huì) 降低。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下， 越好)在保證圖像質(zhì)量的前提下，該值 越接近于 1AU 越好); ) 信號(hào)和噪音都增強(qiáng)， 的調(diào)節(jié)(增大則信號(hào)和噪音都增強(qiáng) 減小則信號(hào)和噪音均減小。原則上， (2)Master Gain 的調(diào)節(jié)(增大則信號(hào)和噪音都 增強(qiáng)，減小則信號(hào)和噪音均減小。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下， 值越小越 好)像質(zhì)量的前提下， Gain 值越小越好 ); ) 的調(diào)節(jié)(可扣除背景噪音，但標(biāo)本信號(hào) 也有一定程度的扣除。原則上， (3)Digital Offset的調(diào)節(jié)(可扣除背景噪音，但標(biāo)本信號(hào)也有

9、一定程度的扣除。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下， 越好)像質(zhì)量 的前提下， Digital Offset 值越接近于 0 越好); ) 的調(diào)節(jié)(增大則信號(hào)和噪音都 增強(qiáng)，減小則信號(hào)和噪音均減小。原則上， (4)Digital Gain的調(diào)節(jié)(增大則信號(hào)和噪音都增強(qiáng)，減小則信號(hào)和噪音均減小。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下， 越好)像質(zhì)量的前提下， Gain 值越接近于 1.01.2 越好); ) 另外，對(duì)于每個(gè)通道， 需要靈活調(diào)節(jié)激光的強(qiáng)度 (激光強(qiáng)度越高，則信號(hào)越強(qiáng)， (5) 另外，對(duì)于每個(gè)通道， 需要靈活調(diào)節(jié)激光的強(qiáng)度 (激光強(qiáng)度越高，則信號(hào)越強(qiáng)，但噪音也相應(yīng)增 同時(shí)標(biāo)本 更容易被漂白或淬滅

10、。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，激光強(qiáng)度越低越好。 強(qiáng)，同時(shí)標(biāo)本更容易被漂白或淬滅。原則上，在保證圖像質(zhì)量的前提下，激光強(qiáng)度 越低越好。 ) 選擇 可連續(xù)掃描、一邊預(yù)覽圖像效果、一邊精細(xì)調(diào)節(jié)各個(gè)通道的掃 描參數(shù)。 可連續(xù)掃描、一邊預(yù)覽圖像效果、一邊精細(xì)調(diào)節(jié)各個(gè)通道的掃描參數(shù)。 精細(xì)調(diào)節(jié)各個(gè)通道的掃描參數(shù)如果預(yù)覽圖像的效果可以，則先“如果預(yù)覽圖像的效 果可以，則先“ Stop” ”再點(diǎn)擊“，再點(diǎn)擊“ Single ” ”或“Start ” ”即 可完成圖像的掃描。即可完成圖像的掃描。圖像的保存 :圖像的保存 : 三種方法: 三種方法: )“ ”菜單下，“ ” (1) File ”菜單下， Sa

11、ve” 或者“ 或者“Save AS” ”。 ) (2) 點(diǎn)擊右下角按鈕 。 ) (3) 點(diǎn)擊工具欄按鈕 。 如圖所示 )(如圖所示 )另外，通過(guò)“ ”菜單下的“ ” 也可將圖像以其它格式輸出。另外， 通過(guò)“ File ”菜單下的“ Export ” 也可將圖像以其它格式輸出。 ，顯微鏡的觸 摸屏控制 2.3 顯微鏡的觸摸屏控制顯微鏡可由 TFT 液晶觸摸屏進(jìn)行控制 : 由觸摸 屏“ Home主頁(yè)”進(jìn)入“ Control/顯微鏡控制”界面，TFT觸摸屏控制 直觀(guān)、便 捷。直觀(guān)、便捷。觸摸屏常用控制界面 : 觸摸屏常用控制界面 : Objectives 物鏡 控制 TL 透射光光閘 RL 反射光

12、光閘熒光激發(fā)塊控制 Reflector 熒光激發(fā)塊控制 熒光觀(guān)察時(shí)， 熒光觀(guān)察時(shí)，需要選擇相應(yīng)的 熒光激發(fā)塊或者激發(fā)波長(zhǎng)、 ( 或者 激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)相 近的熒光激發(fā)塊 ) 近的熒光激發(fā)塊 ) Light path 光路設(shè)置 觸摸控制，可將光路切換至“ 觸摸控制，可將光路切換至“ Eyepiece ” 觀(guān)察筒，目鏡觀(guān)察筒目鏡觀(guān)察筒，或者將光路切換至左側(cè)共聚 焦光路“ ”，焦光 路“ Sideport L ”或者將光路切換至 前側(cè)“”相機(jī)。 前側(cè)“ Frontport ”相 機(jī)。關(guān)機(jī)順序 :2.4 關(guān)機(jī)順序 : ) 關(guān)閉軟件 :主菜單“ ”“ ”，。(1) 關(guān)閉軟件：主菜單“ File ” 一

13、一 “Exit ”退出共聚焦軟件ZEN。主電腦操作系統(tǒng)、) 關(guān)閉主電腦操作系統(tǒng) 顯示器電源。(2) 關(guān)閉主電腦操作系統(tǒng)、顯示器電源。 ) 熒光燈電源。(3) 關(guān)閉熒 光燈電源。 ) 電動(dòng)顯微鏡電源。 電動(dòng)顯微鏡電源 (4) 關(guān)閉電動(dòng)顯微鏡電源 。 ) 激光器:(5)關(guān)閉Ar激光器：扳鈕扳鈕”狀態(tài)；先將扳鈕從“Laserrun ”扳到 “Standby”狀態(tài)；鑰匙鑰匙逆時(shí)針從”狀態(tài)；再將鑰匙逆時(shí)針 從“一”旋轉(zhuǎn)到“ O'狀態(tài)；分鐘、激光器風(fēng)扇停止轉(zhuǎn)動(dòng) 風(fēng)扇停止轉(zhuǎn)動(dòng)后 切記 等待約8-10分鐘、激光器風(fēng)扇停止轉(zhuǎn)動(dòng)后(切記，)按到“按鈕按到”。 將主開(kāi)關(guān)按鈕按到“ OFF” )(6)“ ”

14、掃描硬件系統(tǒng) COMPONENT“SOFF”“ ”電腦系統(tǒng) SYSTEMS/PC“OFF”“ ” 主開(kāi)關(guān) MAIN SWITCH“OFF” ) 燈箱充分冷卻后，再放防塵罩。 燈箱(7) 等燈箱充分冷卻后，再放防塵罩。 系統(tǒng) 長(zhǎng)時(shí)間 ) 如果系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間 ( 個(gè)小時(shí))不使用，則關(guān)閉穩(wěn)壓電源。 (8) 如果系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間( 超過(guò) 5 個(gè)小時(shí) ) 不使用，則關(guān)閉穩(wěn)壓電源。 3 系統(tǒng)的維護(hù)主要注意事項(xiàng)如下 :(1) 打開(kāi)穩(wěn)壓電源時(shí)，應(yīng)等待 2 分鐘(電壓穩(wěn)定 )后，再開(kāi)其它開(kāi)關(guān)。 激光器的開(kāi)、關(guān) 流程(詳見(jiàn)“ 2.1 、 2.4 開(kāi)/關(guān)機(jī)順序”。 (2) 嚴(yán)格遵守激光器 激光器 ) 油鏡，或者 物鏡表面較臟，則需用擦鏡紙 (3) 如果使用過(guò)油鏡 油鏡 擦鏡紙擦干凈物鏡的前表 擦鏡紙 面(清潔液使用無(wú)水乙醇和無(wú)水乙醚的混合液，混合比例: 無(wú)水乙醇30、 。 無(wú)水乙醚 70) 熒光燈。避免頻繁開(kāi) /關(guān)熒光燈。 (4) 不使用熒光時(shí)，不打 開(kāi)熒光燈 熒光燈 防塵罩。 (5) 必須等燈箱充分冷卻后，再小心地蓋上防塵罩 防塵 罩 觸摸屏控制，使用觸摸屏?xí)r注意 :(6) 顯微鏡可由 TFT 觸摸屏 ? 手指保持清潔、 干燥狀態(tài)，并且為了保證他人使用安全，觸摸時(shí)嚴(yán)禁配 戴有可能接觸污染物或危