移液槍的操作

1、在進(jìn)行分析測(cè)試方面的研究時(shí)，一般采用移液槍（pipette）量取少量或微量的液體。對(duì)于移液槍的正確使用方法及其一些細(xì)節(jié)操作，是很多人都會(huì)忽略的?，F(xiàn)在分幾個(gè)方面詳細(xì)敘述。量程的調(diào)節(jié) 在調(diào)節(jié)量程時(shí)，如果要從大體積調(diào)為小體積，則按照正常的調(diào)節(jié)方法，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可；但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí)，則可先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過(guò)量程的刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證量取的最高精確度。在該過(guò)程中，千萬(wàn)不要將按鈕旋出量程，否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液槍。槍頭（吸液嘴）的裝配 在將槍頭（pipette tips）套上移液槍時(shí)，很多人會(huì)使勁地在槍頭盒子上敲幾下，這時(shí)錯(cuò)誤的做法，因?yàn)檫@樣會(huì)導(dǎo)致移液槍的

2、內(nèi)部配件（如彈簧）因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散，甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合。如果是多道（如8道或12道）移液槍，則可以將移液槍的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)槍頭，然后傾斜地插入，往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過(guò)O型環(huán)，并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。 移液的方法 移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下23毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí)）。這時(shí)可以采取兩種移液方法。一是前進(jìn)移液法。用大拇指將

3、按鈕按下至第一停點(diǎn)，然后慢慢松開(kāi)按鈕回原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。最后松開(kāi)按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體的時(shí)候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點(diǎn)，慢慢松開(kāi)按鈕至原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(diǎn)（千萬(wàn)別再往下按），取下有殘留液體的槍頭，棄之。移液器的正確放置使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來(lái)。當(dāng)移液器槍頭里有液體時(shí)，切勿將移液器水平放置或倒置，以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。維

4、護(hù)保養(yǎng)時(shí)的注意事項(xiàng) 如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧。 最好定期清洗移液槍，可以用肥皂水或60 的異丙醇，再用蒸餾水清洗，自然晾干。 高溫消毒之前，要確保移液器能適應(yīng)高溫。 校準(zhǔn)是可以在20-25度環(huán)境中，通過(guò)重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來(lái)進(jìn)行。 使用時(shí)要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時(shí)吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。 如果漏液，原因大致有一下幾方面：1、槍頭是否匹配；2、彈簧活塞是否正常；3、如果是易揮發(fā)的液體（許多有機(jī)溶劑都如此），則可能是飽和蒸汽壓的問(wèn)題?？梢韵任艓状我后w，然后再移液?？烧{(diào)式自動(dòng)取液器的操作方法:用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的

5、旋鈕，使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字，在取液器下端插上一個(gè)塑料吸頭，并旋緊以保證氣密，然后四指并攏握住取液器上部，用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕，向下按到第一停點(diǎn)，將取液器的吸頭插入待取的溶液中，緩慢松開(kāi)按鈕，吸上液體，并停留12秒鐘(粘性大的溶液可加長(zhǎng)停留時(shí)間)，將吸頭沿器壁滑出容器，用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體，排液時(shí)吸頭接觸傾斜的器壁，先將按鈕按到第一停點(diǎn)，停留一秒鐘(粘性大的液體要加長(zhǎng)停留時(shí)間)，再按壓到第二停點(diǎn)，吹出吸頭尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸頭，可按下除吸頭推桿，將吸頭推入廢物缸 移液器使用注意事項(xiàng)(1)吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開(kāi)拇指，絕不允許突然松開(kāi)，以防將溶

6、液吸入過(guò)快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。(2)為獲得較高的精度，吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因?yàn)槲⊙宓鞍踪|(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層”液膜”，造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。(3)濃度和粘度大的液體，會(huì)產(chǎn)生誤差，為消除其誤差的補(bǔ)償量，可由試驗(yàn)確定，補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來(lái)進(jìn)行設(shè)定。(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計(jì)算的方法，來(lái)校正取液器，1mL 蒸餾水20時(shí)重0.9982g.(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來(lái)上緊的方法是非常不可取的，長(zhǎng)期操作會(huì)使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。(6)移液器未裝吸頭時(shí)，切莫移液。 所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程，

7、否則會(huì)卡住機(jī)械裝置，損壞了移液器。 數(shù)字清清楚楚在顯示窗中， 旋轉(zhuǎn)到所需量程 (7)在設(shè)置量程時(shí)，請(qǐng)注意(8)移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體（如濃酸、濃堿、有機(jī)物等）。(9)嚴(yán)禁使用移液器吹打混勻液體。(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響準(zhǔn)確度。同時(shí)，如果需要移取量程范圍以外較大量的液體，請(qǐng)使用移液管進(jìn)行操作移液器的種類和使用 準(zhǔn)確的分析方法對(duì)于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是極為重要的，在各種生物化學(xué)分析技術(shù)中，首先要熟練掌握的就是準(zhǔn)確的移液技術(shù)。為此要用到各種形式的移液管，其中有一些是學(xué)生們?cè)诨瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)中未用過(guò)而在生化實(shí)驗(yàn)中是常用的。1 滴管使用方便，可用于半定量移液，其移液量為1

8、mL5mL，常用2mL，可換不同大小的滴頭。滴管有長(zhǎng)、短兩種，新出的一種帶刻度和緩沖泡的滴管，可以比普通滴管更準(zhǔn)確地移液，并防止液體吸入滴頭。2 移液管(吸管)吸管使用前應(yīng)洗至內(nèi)壁不掛水珠，1mL 以上的吸管用吸管專用刷刷洗，0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗滌劑浸泡，必要時(shí)可以用超聲清洗器清洗。由于鉻酸洗液致癌，應(yīng)盡量避免使用。若有大量成批的吸管洗后沖洗，可使用沖洗桶，將吸管尖端向上置于桶內(nèi)，用自來(lái)水多次沖洗后再用蒸餾水或無(wú)離子水沖洗。吸管分為兩種，一種是無(wú)分度的，稱為大肚吸管，精確度較高，其相對(duì)誤差A(yù) 級(jí)為0.70.8，B 級(jí)為1.50.16，液體自標(biāo)線流至口端(留有殘液)，

9、A 級(jí)等待15s，B 級(jí)等待3s。另一種吸管為分度吸管，管身為一粗細(xì)均勻的玻璃管，上面均勻刻有表示容積的分度線，其準(zhǔn)確度低于胖肚吸管，相對(duì)誤差A(yù) 級(jí)為0.80.2，B 級(jí)為1.60.4，A 級(jí)、B 級(jí)在吸管身上有A、B 字樣，有”快”字則為快流式，有”吹”字則為吹出式，無(wú)”吹”字的吸管不可將管尖的殘留液吹出。吸、放溶液前要用吸水紙擦拭管尖。3 微量進(jìn)樣器微量進(jìn)樣器常用作氣相和液相色譜儀的進(jìn)樣器，在生化實(shí)驗(yàn)中主要是用作電泳實(shí)驗(yàn)的加樣器，通常可分為無(wú)存液和有存液兩種。(1)10L 以下的極微量液體進(jìn)樣。無(wú)存液微量進(jìn)樣器：進(jìn)樣器的不銹鋼芯子直接通到針尖端處，不會(huì)出現(xiàn)存液。(2)10L100L 有存液

10、微量進(jìn)樣器：不銹鋼的針尖管部分是空管，進(jìn)樣器的柱塞不能到達(dá)，因而管內(nèi)會(huì)存有空氣或液體，其使用注意事項(xiàng)是：不可吸取濃堿溶液，以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件；因?yàn)橛写嬉?，所以吸液時(shí)要來(lái)回多拉幾次，將針尖管內(nèi)的氣泡全部排盡；針尖管內(nèi)孔極小，使用后尤其是吸取過(guò)蛋白質(zhì)溶液后，必須立即清洗針尖管，防止堵塞。若遇針尖管堵塞，不可用火燒，只能用0.1mm 的不銹鋼絲耐心串通；進(jìn)樣器未潤(rùn)濕時(shí)不可來(lái)回干拉芯子，以免磨損而漏氣；若進(jìn)樣器內(nèi)發(fā)黑，有不銹鋼氧化物，可用芯子蘸少量肥皂水，來(lái)回拉幾次即可除之。4 自動(dòng)取液器這種取液器在生化實(shí)驗(yàn)中大量地使用，它們主要用于多次重復(fù)的快速定量移液，可以只用一只手操作，十分方便。移液的準(zhǔn)

11、確度(即容量誤差)為(0.51.5)，移液的精密度(即重復(fù)性誤差)更小些，為0.5。取液器可分為二種：一種是固定容量的，常用的有100 L 等多種規(guī)格。每種取液器都有其專用的聚丙烯塑料吸頭，吸頭通常是一次性使用，當(dāng)然也可以超聲清洗后重復(fù)使用，而且此種吸頭還可以進(jìn)行120高壓滅菌；另一種是可調(diào)容量的取液器，常用的有200L、 500L 和1000L 等幾種。可調(diào)式自動(dòng)取液器的操作方法是用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕，使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字，在取液器下端插上一個(gè)塑料吸頭，并旋緊以保證氣密，然后四指并攏握住取液器上部，用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕，向下按到第一停點(diǎn)，將取液器的吸頭插入待取的溶液中，緩慢松開(kāi)按鈕，吸上液體，并停留12秒鐘(粘性大的溶液可加長(zhǎng)停留時(shí)間)，將吸頭沿器壁滑出容器，用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體，排液時(shí)吸頭接觸傾斜的器壁，先將按鈕按到第一停點(diǎn)，停留一秒鐘(粘性大的液體要加長(zhǎng)停留時(shí)間)，再按壓到第二停點(diǎn)，吹出吸頭尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸頭，可按下除吸頭推桿，將吸頭推入廢物缸。自動(dòng)取液器的使用注意事項(xiàng)是：吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開(kāi)拇指，絕不允許突然松開(kāi)，以防將溶液吸入過(guò)快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏