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文檔簡介
1、高中生物 第一部分實驗二 微生物的培養(yǎng)和利用同步練習2(浙科版選修1)同步練習1. 某小組同學為了從土壤中分離出以尿素為氮源的微生物而進行了實驗。請回答與此實驗相關的問題: (1)土壤中的一些微生物體內含有 酶 能通過降解尿素作為其生長的氮源,可用 作為指示劑檢測該酶所催化的反應。(2)配制培養(yǎng)基是,以 作為凝固劑。對培養(yǎng)基進行滅菌時,由于加入了葡萄糖,滅菌壓強為 ,時間為 ,而對于唯一氮源尿素應采取 進行滅菌。 (3)將土樣用 稀釋到10-4,10-5兩個濃度,用 分離法將每個濃度的土樣個0.1mL分別接種到培養(yǎng)基中。2. 某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難以理解的有機化合物A。研究人員
2、用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基,成功地篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題。 污水池中污泥樣品 初選 候選菌 接種 重復 多 次 , 直 至 獲 得 振蕩培養(yǎng)若干天后,測定各瓶中化合物A的含量 目 的 選擇 菌 接種 接種 接種 固體培養(yǎng)基 (1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選 這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的 實驗需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌”的代謝類型是 。(3)培養(yǎng)若干天后,應選擇培養(yǎng)瓶中的化合物A含量 的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)瓶中連續(xù)培養(yǎng),使“目的菌”的數(shù)量 。(4)轉入固體培養(yǎng)
3、基時,常采用 ,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)若研究“目的菌”的生長規(guī)律,將單個菌落進行液體培養(yǎng),可采用 的方法進行計數(shù),以時間為橫坐標,以 為縱坐標,繪制生長曲線。(6)實驗結束后,使用過的培養(yǎng)基應該進行 處理后,才能倒掉。3.下面是有關“大腸桿菌的培養(yǎng)與分離”實驗的相關問題,請回答:(1)大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌。本實驗的內容是用 培養(yǎng)基(通用的細菌培養(yǎng)基)擴大培養(yǎng)大腸桿菌。培養(yǎng)后再在固體平面培養(yǎng)基上進行 隨后培養(yǎng)基上便會形成一個個單獨的 。(2)我們在利用微生物時,常常要求所利用的微生物不被其他微生物污染。因此,在培養(yǎng)微生物時必須進行 。在操作過程中,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行
4、 (填“消毒”或“滅菌”);操作者的雙手需要進行清洗和 (填“消毒”或“滅菌”);空氣中的細菌可以用紫外線殺滅。(3)培養(yǎng)大腸桿菌時,其正確方法步驟是 ( )A滅菌、培養(yǎng)基的配制、擱置斜面、劃線分離、培養(yǎng)B培養(yǎng)基的配制、滅菌、擱置斜面、劃線分離、培養(yǎng)C劃線分離、滅菌、培養(yǎng)基的配制、擱置斜面、培養(yǎng)D培養(yǎng)基的配制、劃線分離、滅菌、擱置斜面、培養(yǎng)(4)在培養(yǎng)大腸桿菌時,能夠判斷培養(yǎng)基滅菌是否成功的方法是(5)在微生物培養(yǎng)實驗完成后,使用過的培養(yǎng)基和培養(yǎng)物必須經(jīng)過 處理后才能丟掉。4.要獲得能夠分泌脲酶的細菌的菌種,某生物興趣小組的同學設計了以下培養(yǎng)和篩選的途徑:(1)獲得菌種:要獲得較多的能夠分泌脲
5、酶的細菌,可從含有機質豐富特別是有動物糞便的土壤中選取土樣,原因是 ;同時最好取525cm處的淺層土樣,說明這類細菌的代謝類型應該為 葡萄糖:0.05g 。(2)將土樣加入無菌水中配制成懸液,并配制如右圖所示 NaCl:0.24g培養(yǎng)基,其中尿素在培養(yǎng)基中必須是作為保證微生物生長的唯一 K2HPO4:0.24g 。向培養(yǎng)基中添加尿素的方法是 瓊脂糖:1.0g 從物理性質看,該培養(yǎng)基屬于 酚紅:0.5g 。 水:30mL 尿素:20mL(含2g脲) (3)利用酚紅指示劑可檢測出一個中的細菌是否能分泌脲酶,原理是脲酶能使 ,結果是菌落周圍培養(yǎng)基呈黃色。因為添加了特定指示劑,該培養(yǎng)基應該屬于 培養(yǎng)基
6、。(4)為獲取能分泌脲酶的單菌落,必須將土壤樣液進行稀釋,并取少量稀釋土壤液以 方法接種于培養(yǎng)基上,培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時必須倒置,原因是 。(5)等菌落形成后,選取相應菌落中的細菌作為菌種,并擴增。5.白僵菌高孢粉是國家林業(yè)局推廣的高效生物殺蟲劑之一,應用于多種林木和農作物害蟲的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、氣孔或消化道上,遇適宜條件開始萌發(fā),生出芽管。同時產生脂肪酶、蛋白酶、幾丁質酶等溶解昆蟲的表皮,通過芽管入侵蟲體,在蟲體內生長繁殖,消耗寄主體內養(yǎng)分,產生各種毒素,形成大量菌絲和孢子,布滿蟲體全身。請回答下面的問題:(1)從自然菌樣中篩選較理想生產用菌種的一般步驟是:采集菌樣 富集培養(yǎng)
7、 性能測定。白僵菌的菌樣應從 中采集。 (2)分離白僵菌菌種的培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。在配制白僵菌培養(yǎng)基時常加入蔗糖、硫酸銨、硝酸鉀等成分,蔗糖屬于 營養(yǎng)物質。(3)白僵菌純培養(yǎng)常用的接種方法是 和 。(4)分離和培養(yǎng)過程中,為了 ,培養(yǎng)基和接種工具都要進行 處理,利用高溫可以使微生物的 、 等物質發(fā)生變性。6.有些細菌可分解原油, 而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?;卮饐栴}: 在篩選過程中,應將土壤樣品稀釋液接種于以 _ 為唯一碳源的固體培養(yǎng) 基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于_ 培養(yǎng)基。 純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即 _ 和
8、_ 。 為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力 _ 。通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和 _ 。無菌技術要求試驗操作應在酒精燈 。11 年山東卷)34.(8 分)(生物生物技術實驗) 7.研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質)均有抑菌作用,兩者的提取及應用如 圖所示。柚皮 糊狀液體 柚皮精油 抑菌試驗 乳酸菌A 培養(yǎng)液 乳酸菌素(1)柚皮易焦糊,宜采用_法提取柚皮精油,該過程得到的糊狀液體可通過 _除去其中的固體雜質。 (2)篩選乳酸菌 A 時可選用平板劃線法或_接種。對新配制的培養(yǎng)基滅菌時 所用的設備是_。實驗前需對
9、超凈工作臺進行_處理。 (3)培養(yǎng)基鎮(zhèn)南關的尿素可為乳酸菌 A 生長提供_。電泳法純化乳酸菌素時,若分離帶電荷相同的蛋白質,則其分子量越大,電泳速度_。 (4)抑菌實驗時,在長滿致病菌的平板上,會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈??赏ㄟ^測定透明圈的_來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。 8.菊花組織培養(yǎng)的大致過程如下圖所示。請回答下列問題: 菊花植株體 A 未開花的幼嫩枝條 B 遇上組織 D C 試管幼苗(1)外植體的消毒:選擇生長旺盛的枝條的嫩枝,沖洗干凈。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分數(shù)為70%的 中浸泡10min,再放入5%的次氯酸鈉溶液中浸泡 ,然后用另一5%的次氯酸鈉溶液浸
10、泡 ,最后在超凈臺上用無菌水清洗,將莖的切斷培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中。(2)菊花組織培養(yǎng)過程中,啟動細胞分裂、B (填名稱)、C 的關鍵激素是 。通過B過程產生的愈傷組織細胞與枝條韌皮部細胞形態(tài)結構 (填“相同”、“不同”),其根本原因是 。(3)該實驗操作成功的關鍵是無菌技術,所以要對外植體、超凈工作臺等消毒,對培養(yǎng)基或培養(yǎng)器具等 ,實驗操作過程都要在 旁進行。9.酶是生物體內各種化學反應的催化劑,具有高度的專一性和高效性。-淀粉酶在淀粉糖漿、低聚糖、啤酒、烘培食品、面制品等的生產方面具有十分廣闊的市場前景?;卮鹣铝邢嚓P問題:(1)為提高酶的利用率以及產品純度,一般需要對酶進行固定化處理,即將酶用
11、物理或化學方法固定在 介質上,具體方法有吸附法、共價偶聯(lián)法、 、法和交聯(lián)法。-淀粉酶通常是利用 進行固定的,介質一般為 。(2)利用-淀粉酶固定化柱進行淀粉水解實驗時,應注意控制反應液的 ,以保證反應充分。對流出的液體用 檢測,為了便觀察到的顏色變化明顯,可采用 后再觀察的方法。若呈現(xiàn) 色,說明淀粉被水解成糊精。(3)利用-淀粉酶固化柱進行淀粉水解實驗時,實驗前用10倍體積的蒸餾水洗滌反應柱,洗滌的目的是 。實驗后用10倍體積的蒸餾水洗滌反應柱,洗滌的目的是 。10.回答有關“泡菜的腌制和亞硝酸的測定”方面的問題:(1)泡菜腌制過程中起主要作用的微生物是假絲酵母和 。腌制的原理是在 條件下,微
12、生物利用菜中的 類物質和其他營養(yǎng)物質進行發(fā)酵,產生有機酸和醇類物質。(2)制作泡菜的鹽水需煮沸并冷卻后方可使用,煮沸的目的是 ,冷卻后使用的目的是 。(3)我國衛(wèi)生標準規(guī)定,亞硝酸鹽殘留量在醬腌菜中不得超過20mg.kg-1。因此,必須對腌制的泡菜進行亞硝酸鹽含量的測定。測定的原理是:亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生 反應,產生的物質再與N-1-萘胺基乙二胺偶聯(lián),形成 色產物,可用光電比色法定量。(4)通過測定,可以發(fā)現(xiàn)在泡菜腌制過程中,亞硝酸鹽的含量變化情況是 。實踐證明,在泡菜腌制過程中控制好腌制的時間、 用量和 ,能減少亞硝酸鹽的含量。11.回答下列關于洗衣粉的問題:(1)洗衣粉中的表面活性劑
13、有 和 兩種類型。一般表面活性劑中含有疏水基團和 ,在洗滌過程中起 和通透作用,使脂肪類物質進入水中。(2)洗衣粉中所加的酶一般都是 ,除了添加蛋白酶外,還可添加淀粉酶 半纖維素酶、果膠酶、 等。(3)為了防止 的異味,在加酶洗滌劑中必定會添加 ;加酶洗衣粉除了具有表面活性劑的作用外,還有各種 作用,更有利于去除污漬。1.答案: 脲 酚紅 瓊脂糖 500g/cm2 30min G6玻璃砂漏斗 無菌水 涂布2.答案 目的菌 選擇 化合物A 異養(yǎng)需氧型 減少 增加 劃線 定期取樣 細菌數(shù)目的對數(shù) 滅菌3.答案 LB液體 劃線分離 菌落 無菌操作 滅菌 消毒 B 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適
14、宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生 滅菌4.答案 土壤中含有尿素,有利于該類細菌生長 異養(yǎng)需氧型 氮源 其他成分滅菌冷卻后,在無菌條件下用玻璃砂芯漏斗過濾加尿素的溶液 固體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中尿素分解為NH3,使周圍的PH 升高 紫 鑒定 涂布 防止冷凝后的水珠從皿蓋上落入培養(yǎng)基,造成污染5.純種分離 感病昆蟲尸體 選擇 C源 劃線分離 涂布分離 防止雜菌污染 滅菌 蛋白質 DNA6.【答案】原油 選擇 平板劃線法 稀釋涂布平板法 強。干熱滅菌法 高壓蒸汽滅菌法 火焰 附近進行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。 7.答案(1)壓榨 過濾(2)稀釋涂布平板法(或稀釋混合平板法) 高壓蒸汽滅菌鍋 消毒(3)氮源 越慢(4)直徑(或大小)8.答案 乙醇 5min
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