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文檔簡介

1、分子生物學實驗室安全及常用儀器介紹說明內容介紹 分子生物學實驗安全常識分子生物學實驗安全常識1.1 分子生物學實驗室的基本要求1.2 實驗室電、氣、水、火1.3 化學試劑的安全使用1.4 微生物的危害及處理1.5 放射性物質的安全使用1.6 紫外線輻射的危害及防護1.7 廢棄物的處理1. 分子生物學功能實驗室使用注意事項分子生物學功能實驗室使用注意事項分子生物學實驗安全常識v1.1 分子生物學實驗室的基本要求分子生物學實驗室的基本要求遵守公共平臺管理辦法遵守公共平臺通行證管理辦法遵守公共平臺安全管理制度遵守公共平臺有償使用管理辦法遵守公共平臺檢查制度及違規(guī)處罰條例分子生物學實驗安全常識v1.2

2、 實驗室電、氣、水、火實驗室電、氣、水、火 連線:儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護套線,不可使用普通的塑連線:儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護套線,不可使用普通的塑料絞線。料絞線。 線可用普通的塑料絞線。嚴禁私拉亂扯。線可用普通的塑料絞線。嚴禁私拉亂扯。接地:儀器應有良好的接地,提高儀器的穩(wěn)定性及安全系數(shù)。接地:儀器應有良好的接地,提高儀器的穩(wěn)定性及安全系數(shù)。 維修:儀器出現(xiàn)故障時,應切斷電源,立即向實驗室負責人報告。維修儀維修:儀器出現(xiàn)故障時,應切斷電源,立即向實驗室負責人報告。維修儀器時必須切斷電源,方可拆機修理。器時必須切斷電源,方可拆機修理。墻電:不得私自對墻電進行維修、改造,

3、該工作由實驗室負責人進行計劃,墻電:不得私自對墻電進行維修、改造,該工作由實驗室負責人進行計劃,由相關專業(yè)人員進行維修、改造。由相關專業(yè)人員進行維修、改造。檢查:如遇線路老化或損壞應及時地更換。檢查:如遇線路老化或損壞應及時地更換。觸電:斷電或絕緣脫離觸電:斷電或絕緣脫離 急救急救電燈:進入實驗室,有需要時打開電源開關、排氣扇;離開實驗室時若無電燈:進入實驗室,有需要時打開電源開關、排氣扇;離開實驗室時若無人請關閉電燈及排氣扇。人請關閉電燈及排氣扇??照{:進入實驗室,有需要時可打開空調,溫度不得低于空調:進入實驗室,有需要時可打開空調,溫度不得低于27;每天下班;每天下班時實驗室負責人將關閉空

4、調。若在非上班時間內打開空調,離開時請關閉!時實驗室負責人將關閉空調。若在非上班時間內打開空調,離開時請關閉!電!電!危危險險節(jié)節(jié)約約分子生物學實驗安全常識v1.2 實驗室電、氣、水、火實驗室電、氣、水、火氣!氣!搬運:搬運或轉動鋼瓶時,不得用手執(zhí)著開關閥移動。搬運:搬運或轉動鋼瓶時,不得用手執(zhí)著開關閥移動。使用:按氣瓶的類別選用減壓器,安裝時螺扣應擰緊,并檢漏。使用:按氣瓶的類別選用減壓器,安裝時螺扣應擰緊,并檢漏。 開啟鋼瓶:逆時針方向為開;先開總閥,后開減壓閥。開啟鋼瓶:逆時針方向為開;先開總閥,后開減壓閥。 關閉鋼瓶:順時針方向為關;先關總閥,后關減壓閥。關閉鋼瓶:順時針方向為關;先關

5、總閥,后關減壓閥。 氣嘴保護:用死扳手夾緊氣嘴后再開總閥。氣嘴保護:用死扳手夾緊氣嘴后再開總閥。安全:氣瓶內的氣體不可用盡。安全:氣瓶內的氣體不可用盡。 惰性氣體:應剩余以上壓力的氣體。惰性氣體:應剩余以上壓力的氣體。 可燃氣體:應剩余以上壓力的氣體??扇細怏w:應剩余以上壓力的氣體。 氫氫 氣:應剩余以上壓力的氣體。氣:應剩余以上壓力的氣體。存放:分類分處存放存放:分類分處存放 直立放置時要穩(wěn)妥;氣瓶要遠離熱源;避免曝曬和強烈振動;直立放置時要穩(wěn)妥;氣瓶要遠離熱源;避免曝曬和強烈振動; 一般實驗室內存放氣瓶量不得超過兩瓶。一般實驗室內存放氣瓶量不得超過兩瓶。 氫氣瓶和氧氣瓶不能同存一處。氫氣瓶

6、和氧氣瓶不能同存一處。分子生物學實驗安全常識v1.2 實驗室電、氣、水、火實驗室電、氣、水、火水!水!上上 水:水龍頭或水管漏水時,應及時向實驗室負責人報告,以便及時維水:水龍頭或水管漏水時,應及時向實驗室負責人報告,以便及時維修。修。下下 水:水池內不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質;清洗廢液缸時請水:水池內不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質;清洗廢液缸時請注意將其中的固體物質倒入到垃圾桶后才能沖洗,特別是注意將其中的固體物質倒入到垃圾桶后才能沖洗,特別是tip和和eppendorf管。下水道排水不暢時,應及時向實驗室負責人報告,以便及時疏通。管。下水道排水不暢時,應及時向實驗室負責人報告,

7、以便及時疏通。 冷卻水:輸水管必須使用橡膠管,不得使用乳膠管;上水管與水龍頭的冷卻水:輸水管必須使用橡膠管,不得使用乳膠管;上水管與水龍頭的連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊;下水連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊;下水管必須插入水池的下水管中。管必須插入水池的下水管中。純凈水:應按照純凈水:應按照“操作規(guī)程操作規(guī)程”進行操作;取水時應注意及時地關閉取水開進行操作;取水時應注意及時地關閉取水開關,防止溢流。關,防止溢流。分子生物學實驗安全常識v1.2 實驗室電、氣、水、火實驗室電、氣、水、火火火報警:報警:119(說明火源、火情、單位名稱、地理位

8、置,或明顯標志)(說明火源、火情、單位名稱、地理位置,或明顯標志) 措施:早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報告措施:早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報告 滅火:滅火: 學會使用滅火器(一拔、二握、三瞄、四掃)學會使用滅火器(一拔、二握、三瞄、四掃) 沉著、冷靜沉著、冷靜 易燃固體、易燃氣體、易燃液體和帶電物體著火時,可用易燃固體、易燃氣體、易燃液體和帶電物體著火時,可用 干粉滅火器滅火干粉滅火器滅火 ; 導線或電器著火時,應先斷電,再用導線或電器著火時,應先斷電,再用干粉干粉滅火器滅火。滅火器滅火。 切不可用泡沫滅火器,此滅火器導電。切不可用泡沫滅火器,此滅火器導電。 衣服著火時,應盡快地脫掉衣服,并用水滅火。或就地滾動

9、,衣服著火時,應盡快地脫掉衣服,并用水滅火?;蚓偷貪L動, 切忌外跑。切忌外跑。 防火:火災不能預期、不能杜絕、只能預防防火:火災不能預期、不能杜絕、只能預防 消除消除火災火災隱患(電、火、氣、試劑)隱患(電、火、氣、試劑) 備逃生四件寶(滅火器、繩、手電筒、防毒面具)備逃生四件寶(滅火器、繩、手電筒、防毒面具)分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全使用化學試劑的安全使用 標標 識:自配試劑應貼標簽,并注明化合物名稱、濃識:自配試劑應貼標簽,并注明化合物名稱、濃 度、配制日期,以及配制人姓名。度、配制日期,以及配制人姓名??傇瓌t:總原則:藥品狀態(tài)定口徑,瓶塞取決酸堿性;藥品狀態(tài)定口徑,瓶

10、塞取決酸堿性;受熱見光易分解,存放低溫棕色瓶;受熱見光易分解,存放低溫棕色瓶;特殊試劑特殊放,互不反應要記清。特殊試劑特殊放,互不反應要記清。分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全使用化學試劑的安全使用易燃易爆易燃易爆 化學試劑化學試劑:一般將閃點在25以下的化學試劑列入易燃化學試劑,它們多是極易揮發(fā)的液體,遇明火即可燃燒。有毒有毒 化學試劑化學試劑:以較小劑量進入人體而導致疾病或死亡的才被劃為有毒物質。腐蝕性腐蝕性 化學試劑化學試劑:化學試劑碰到皮膚、粘膜、眼、呼吸器官都有及時清洗,如各種酸和堿、溴、苯酚等。強氧化性強氧化性 化學試劑化學試劑:包括過氧化物和含有強氧化能力的含氧酸及其

11、鹽,如硝酸銨、高氯酸及其鹽、重鉻酸及其鹽等。放射性放射性 化學試劑化學試劑:同位素示蹤技術的發(fā)展,廣泛應用于生物化學與分子生物學。由于由于其特殊性,該種試劑不得帶入公共實驗室,在各自實驗室進行專項管理或者由學院進行其特殊性,該種試劑不得帶入公共實驗室,在各自實驗室進行專項管理或者由學院進行統(tǒng)一管理。統(tǒng)一管理。不相容不相容 化學試劑化學試劑:一些化學試劑在儲存和操作過程中不能與其他物質接觸,否則就發(fā)生爆炸,這些化學試劑稱為不相容化學試劑。如:疊氮化物通常用作溶液中的抗菌劑,由于輕微碰撞就可能造成疊氮化銅的爆炸,因此不能與銅接觸(如污水管及管道設施)。分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全

12、使用化學試劑的安全使用EB EB是一種強誘變劑(可能造成遺傳性危害),直接接觸有中是一種強誘變劑(可能造成遺傳性危害),直接接觸有中等毒性。等毒性。EB可以通過皮膚吸收,因此應當避免一切與EB的直接接觸。EB對皮膚,眼睛,口腔和上呼吸道系統(tǒng)有刺激性作用。應將EB安全密封,并密閉存放于干燥避光處。 提取組織和細胞RNA的一種重要試劑,在提取RNA時一定要在通風櫥進行。如皮膚接觸Trizol,請立即用大量去垢劑和水沖洗,廢液埋入地下。Trizol分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全使用化學試劑的安全使用 RNA酶的強抑制劑,一種潛在的致癌物質。操作時戴口罩,在通風櫥中進行。沾到手上立即沖

13、洗,廢液通過廢液道排泄。DEPC(Diethylprocarbonate)(二乙基焦碳酸酯二乙基焦碳酸酯) 常用于DNA和RNA提取,對皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有強烈的刺激作用和腐蝕性,易損害肝和腎。操作時戴手套在通風櫥里進行操作時戴手套在通風櫥里進行,廢液收集后埋入地下。CHCl3(Chloroform,氯仿),氯仿)Acrylamide(丙烯酰胺)(丙烯酰胺) DNA測序、SSR及蛋白質分離等技術中作電泳支持物,具神經毒性,聚合后毒性消失。操作時戴手套在通風櫥內進行,聚合后的聚丙烯酰胺凝膠沒有毒性,可隨普通垃圾一起扔掉,千萬不要倒入下水道.。分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全使

14、用化學試劑的安全使用DMSO(二甲亞砜)(二甲亞砜) 是一種既溶于水又溶于有機溶劑的非質子極性溶劑,常用作細胞的凍存液和配制AS。皮膚沾上之后用大量的水洗及1%5%稀氨水洗滌。 有毒,易損害眼睛。質粒提取時作裂解液破壞細胞膜和Southern雜交時的洗膜液中的去垢劑。戴合適的手套和安全護目鏡,不要吸入其粉末。十二烷基硫酸鈉十二烷基硫酸鈉(SDS)強神經毒性,防止誤吸,操作時快速,存放時密封。 TEMED分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全使用化學試劑的安全使用 很強的還原劑,散發(fā)難聞的氣味??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時,戴手套和護目鏡,在通風櫥中操作

15、。 DTT 二硫蘇糖醇二硫蘇糖醇 一種高強度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡,始終在化學通風櫥里使用。在接觸到的情況下,要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,已污染的工作服作為有害廢物處理。 PMSF 苯甲基磺酰氟苯甲基磺酰氟 引起嚴重的眼睛刺激和灼傷??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而受害。戴合適的手套和護目鏡。 Triton X-100分子生物學實驗安全常識v1.3 化學試劑的安全使用化學試劑的安全使用 對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸入可致命。操作時戴合適的手套、安全眼鏡和防護服。始終在通風櫥里操作

16、,操作完后徹底洗手。 過硫酸銨過硫酸銨 (NH4)2S2O8 毒性非常大。它阻斷細胞色素電子運送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標記清楚??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而損害健康。戴合適的手套和安全護目鏡,操作時要格外小心。疊氮鈉(疊氮鈉(NaN3) 染料咽下可致命或引起眼睛失明,通過吸入和皮膚吸收是有毒的。其可能的危險是不可逆的效應。戴合適的手套和安全護目鏡。在化學通風櫥里操作,不要吸入其粉末。 吉姆薩(吉姆薩(Giemsa)分子生物學實驗安全常識v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理生物安全生物安全重點任務:實驗室感染的控制、實驗室對周圍環(huán)境影響的控制以及實驗室和感染性實驗材料的管理控制。世界大

17、多國家都是以致病微生物的危害程度進行分類,形成不同的實驗室安全防護等級。我國一般以BSL-1 、BSL-2 、BSL-3 、BSL-4 表示實驗室的相應生物安全防護水平;以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4 表示動物實驗室的相應生物安全防護水平。 病原微生物實驗室生物安全管理條例中華人民共和國傳染病防治法中華人民共和國傳染病防治法實施辦法中華人民共和國國境衛(wèi)生檢疫法中華人民共和國進出境動植物檢疫法中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則實驗室生物安全通用要求動物病原微生物菌(毒)種保藏管理辦法高致病性動物病原微生物實驗室生物安全管理審批辦法 我國實驗

18、室生物安全法規(guī)分子生物學實驗安全常識v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理動物病原微生物分類名錄(動物病原微生物分類名錄(2005年農業(yè)部令第年農業(yè)部令第53 號)號) 第三類:第三類:多種動物共患病病原微生物多種動物共患病病原微生物:低致病性流感病毒、偽狂犬病病毒、破傷風梭菌、氣腫疽梭菌、結核分支桿菌、副結核分支桿菌、致病性大腸桿菌致病性大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌、致病性鏈球菌、李氏桿菌、產氣莢膜梭菌、嗜水氣單胞菌嗜水氣單胞菌、肉毒梭狀芽孢桿菌、腐敗梭菌和其他致病性梭菌、鸚鵡熱衣原體、放線菌、鉤端螺旋體。水生動物病病原微生物:水生動物病病原微生物:流行性造血器官壞死病毒、傳染性造血

19、器官壞死病毒、馬蘇大麻哈魚病毒、病毒性出血性敗血癥病毒、錦鯉皰疹病毒、斑點叉尾鮰病毒、病毒性腦病和視網(wǎng)膜病毒、傳染性胰臟壞死病毒、真鯛虹彩病毒、白鱘虹彩病毒、中腸腺壞死桿狀病毒、傳染性皮下和造血器官壞死病毒、核多角體桿狀病毒、蝦產卵死亡綜合癥病毒、鱉鰓腺炎病毒、Taura綜合癥病毒、對蝦白斑綜合癥病毒、黃頭病病毒、草魚出血病毒、鯉春病毒血癥病毒、鮑球形病毒、鮭魚傳染性貧血病毒。分子生物學實驗安全常識v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理 高致病性動物病原微生物高致病性動物病原微生物是指來源于動物的、動物病原微生物分類名錄中規(guī)定的第一類、第二類第一類、第二類病原微生物。 第三類病原微生物

20、是指能夠引起人類或者動物疾病,但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構成嚴重危害,傳播風險有限,實驗室感染后很少引起嚴重疾病,并且具備有效治療和預防措施的微生物。 v采用遺傳工程技術人為設計出更多帶有新型遺傳物質的生物帶有新型遺傳物質的生物,既涉及到有生命活性的載體自身對實驗室人員的生物安全,還存在大量投放于環(huán)境后的生物污染問題此類問題造成的影響更是深遠而不易覺察更是深遠而不易覺察。v 當考慮要構建或使用遺傳修飾生物時,對實驗室工作的危害度評估可能比從事遺傳當考慮要構建或使用遺傳修飾生物時,對實驗室工作的危害度評估可能比從事遺傳學正常生物(未修飾)工作的危害度評估更為重要,不能僅憑經驗或未經驗證的文

21、獻學正常生物(未修飾)工作的危害度評估更為重要,不能僅憑經驗或未經驗證的文獻來評估此類生物的潛在危害。來評估此類生物的潛在危害。 例如:例如:構建轉基因動物常用的逆轉錄病毒載體,重組將外源基因轉入體內的同時,伴隨有致病性增強的過程。 必須經過驗證明確所必需的生物安全級別驗證明確所必需的生物安全級別,并對供體生物的特性、將要轉移的核酸序列的性質、受體生物的特性以及環(huán)境特性做一綜合評估,才能確定遺傳修飾生物體所要求的生物安全水平,并做到安全操作目標基因。v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理分子生物學實驗安全常識v重組核酸技術和生物安全重組核酸技術和生物安全v 生物表達系統(tǒng):生物表達系統(tǒng):

22、由符合一系列標準并可安全使用的載體和宿主細胞組成可安全使用的載體和宿主細胞組成。如果所要插入的外源基因序列不要求更高級別的生物安全水平,大部分常規(guī)遺傳工程實驗可以按BSL-1安全安全操作大腸桿菌工程菌。用于基因治療和有效轉移基因到組織培養(yǎng)細胞的病毒載體,大多是復制缺陷型的,但操作時應采用與構建這些載體時的親本病毒相同的生物安全水平。攜帶外源性遺傳信息的動物(轉基因動物)應當在靶基因編碼產物特性的防護水平下進行操作,定點缺失特性基因的動物(基因敲除動物)一般不表現(xiàn)特殊的生物危害。v 基因產物是否具有潛在的藥理學活性基因產物是否具有潛在的藥理學活性是必須考慮的一項重要因素。比如,克隆、表達編碼毒素

23、的基因就需要較高的生物安全水平,因為當采用病毒載體過量表達這些毒素蛋白時有可能產生難以預料的后果。v 危害度評估:危害度評估:一種動態(tài)過程,必須密切跟蹤該生物因子研究的最新進展,一旦獲得載體/宿主的新信息時,需要隨時將相關工作歸入更高或更低的生物安全水平。v1.4 微生物的危害及處理微生物的危害及處理分子生物學實驗安全常識v重組核酸技術和生物安全重組核酸技術和生物安全 放射性藥品使用后殘留和剩余部分被稱為放射性廢物。放射性廢物處理不當會造放射性藥品使用后殘留和剩余部分被稱為放射性廢物。放射性廢物處理不當會造成環(huán)境的放射性污染成環(huán)境的放射性污染,影響工作人員和周圍居民的健康。影響工作人員和周圍居

24、民的健康。 v固體廢物的處理固體廢物的處理 主要采用放置法,被放射性藥物污染的固體廢物應存在固定的指定地點并采用適主要采用放置法,被放射性藥物污染的固體廢物應存在固定的指定地點并采用適當?shù)钠帘挝锛右苑雷o當?shù)钠帘挝锛右苑雷o,待其自然衰變后待其自然衰變后,當作非放射性廢物處理即可。如為過期的發(fā)生當作非放射性廢物處理即可。如為過期的發(fā)生器吸附柱應標明日期并用塑料袋包裝后置于貯源室器吸附柱應標明日期并用塑料袋包裝后置于貯源室,待其自然衰變后再處理。待其自然衰變后再處理。 分子生物學實驗安全常識v1.5 放射性物質的安全使用放射性物質的安全使用 使用同位素,防護先行!使用同位素,防護先行!基本任務和目的

25、:按照輻射防護的三項基本原則,即輻射事業(yè)的正當化輻射事業(yè)的正當化、防護水平的最優(yōu)化和個人劑量的限額化防護水平的最優(yōu)化和個人劑量的限額化。 v液體廢物的處理液體廢物的處理 應根據(jù)放射性物質的最大容許濃度、化學性質、放射性強度、廢液的容積以及下水道的排水設應根據(jù)放射性物質的最大容許濃度、化學性質、放射性強度、廢液的容積以及下水道的排水設備等情況進行不同的處理。一般采用放置法備等情況進行不同的處理。一般采用放置法,半衰期短的也可用稀釋法達到容許排放水平。放射性半衰期短的也可用稀釋法達到容許排放水平。放射性強度低的廢水也可直接排入下水道強度低的廢水也可直接排入下水道,但其放射性濃度不得超過露天水源中限

26、制嘗試的但其放射性濃度不得超過露天水源中限制嘗試的100倍。不能倍。不能直接排入下水道的放射性廢液直接排入下水道的放射性廢液,可采用衰變池貯存十個半衰后排入下水道??刹捎盟プ兂刭A存十個半衰后排入下水道。注意:注意: 未經固化處理的放射性廢液和濃縮物以及尚未選定最終處置方案的固化體等放射性廢物,都未經固化處理的放射性廢液和濃縮物以及尚未選定最終處置方案的固化體等放射性廢物,都應在固定地點貯存在專用的容器中,貯存過程中注意安全,不能使反射性廢物泄漏。不同的比活度應在固定地點貯存在專用的容器中,貯存過程中注意安全,不能使反射性廢物泄漏。不同的比活度的廢物要求使用不同的貯罐。的廢物要求使用不同的貯罐。

27、v放射性廢物的轉運:放射性廢物的轉運: 放射性廢物轉運的關鍵是廢物的包裝容器,事先要做好安全檢驗,對容器的強度、屏蔽防護、放射性廢物轉運的關鍵是廢物的包裝容器,事先要做好安全檢驗,對容器的強度、屏蔽防護、密封系統(tǒng)、包裝的標志等都有嚴格的規(guī)定。要求做到安全運輸,防止發(fā)生火災、容器顛覆及包裝破密封系統(tǒng)、包裝的標志等都有嚴格的規(guī)定。要求做到安全運輸,防止發(fā)生火災、容器顛覆及包裝破損而使放射性廢物泄漏,污染環(huán)境。損而使放射性廢物泄漏,污染環(huán)境。分子生物學實驗安全常識v1.5 放射性物質的安全使用放射性物質的安全使用分子生物學實驗安全常識 v1.6 紫外線輻射的危害和防護紫外線輻射的危害和防護 紫外輻射

28、是指波長范圍在100nm400nm的光輻射,一般把100nm280nm稱作UVC,把280nm315nm稱作UVB,把315nm400nm稱作UVA。其中我們觀察膠體觀察膠體用的最多的就是280nm315nm280nm315nm的紫外線的紫外線。 紫外線的有害效應主要是由于紫外線對脫氧核糖核酸(DNA)的作用造成的。最有害有害的效應是細胞致死,其它的效應則包括致突、致癌、干擾致突、致癌、干擾DNADNA、核糖核酸(、核糖核酸(RNARNA)和蛋白質的合成、細胞分裂的延遲、以及在通透性和能動性上的變化)和蛋白質的合成、細胞分裂的延遲、以及在通透性和能動性上的變化等。1.紫外光對眼睛的損傷紫外光對

29、眼睛的損傷 白內障白內障被認為過量紫外光輻射的主要原因,經紫外光照射后,射線大部分被角膜上皮細胞核蛋白吸收,導致細胞核膨脹,碎裂和細胞死亡,以至損傷眼角膜和晶狀體,導致渾濁??偟恼f來,紫外光輻射增加,人類的白內障患者增加。分子生物學實驗安全常識 v1.6 紫外線輻射的危害和防護紫外線輻射的危害和防護2、紫外光對人皮膚的損傷紫外光對人皮膚的損傷 紫外光的影響有積累作用,它的主要機理:蛋白質受紫外光照射后,形成光解產物,此外,其溶解度和粘度,對熱變性的敏感性及熒光等物理化學和光學性質均有顯著的改變。紫外光對皮膚的作用分為急性作用和慢性作用急性作用和慢性作用。急性作用表現(xiàn)為紅斑效應紅斑效應其癥狀為水

30、腫脫皮水腫脫皮,全身癥狀有寒戰(zhàn),發(fā)燒,惡心,罕見循環(huán)衰竭。慢性作用如致皮膚老化,色素沉著,加速老化,甚至引起腫瘤皮膚老化,色素沉著,加速老化,甚至引起腫瘤。輕者皮膚出現(xiàn)水腫性紅斑,重者會出現(xiàn)水皰或大皰,還可伴有休克,發(fā)熱,畏寒,惡心,心悸和頭昏等癥狀。3、紫外光對其他部位的損傷紫外光對其他部位的損傷 紫外光輻射對免疫系統(tǒng)的影響,免疫系統(tǒng)的一些成分存在于皮膚中,皮膚暴露在紫外光下,使得免疫系統(tǒng)受紫外光輻射,使其功能受到干擾。研究表明,紫外光輻射的免疫抑制作用可導致皮膚癌免疫抑制作用可導致皮膚癌,同時引起一些傳染病和其他一些疾病。分子生物學實驗安全常識v1.6 紫外線輻射的危害和防護紫外線輻射的危

31、害和防護 在實驗室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)。只能通過吸收有害波長的濾片或安全玻璃片才能觀察。在紫外光下操作時要戴合適的預防性手套。應佩戴具有紫外線防護功能的護目鏡和/或防護面罩,并遮蔽暴露的皮膚。 建議:使用熒光染料,切膠在使用熒光染料,切膠在Dark reader上操作。上操作。 Dark Reader 熒光透射儀(Transilluminators)的特點: 1.Dark Reader使用新的無毒DNA染料: SYBR Green, SYBR Gold等, 避免了Ethidium Bromide (EB) 染料對人體的

32、傷害。 2.Dark Reader使用可見光 (400-500 nm),沒有UV(紫外線),將其對人體的傷害降低 至零。同時,大大降低了對DNA樣本的損傷,克隆DNA的效率將成百倍的提高。 3.靈敏度高,遠遠高于UV檢測儀。 4.適用染料范圍廣;熒光素 (fluorescein), AttoPhos, GelStar, Vistra Green, SYPRO Orange, red-shifted GFP variants等都可使用。對于Rhodamines, Ethidium Bromide(EB)等激發(fā)光大于500 nm的染料亦可適用;可以廣泛用于DNA、RNA 以及蛋白質的檢測。 5.D

33、ark Reader同時提供琥珀色鏡片的觀察眼鏡(AG16),供切割凝膠時使用。 紫外照射消毒后由于空氣中臭氧富集,不宜立即開始工作,應在停止紫外照射30 min后開始工作,有條件的實驗室,可安裝無臭氧紫外燈。 超凈工作臺中進行紫外照射消毒超凈工作臺中進行紫外照射消毒后,也應用強風進行吹掃后再進行工作,以免臭氧危害身體健康。分子生物學實驗安全常識v1.7 廢棄物的處理廢棄物的處理含有含有EB的廢棄物!的廢棄物!廢液描述廢棄處理方法緩沖液濃度較低( 0.5mg/L)在排入下水道之前,緩沖液請先用過濾器或“茶包”處理。確定緩沖液中在紫外燈下無熒光方可下排。儲備溶液,氯化銫溶液濃度較高( 1-10m

34、g/mL)濃度之高,使得處理EB的過濾和吸收方法都無法適用。將這些儲液交由相關部門專業(yè)人員處理。處理用過的過濾器和“茶包”在(過濾/吸收過程)污染將已用的過濾器和茶包明確標記。用過的過濾器和茶包交由相關部門處理。凝膠濃度低( 3-5mg/L)先將凝膠晾干,裝入指定的袋子中做好標記后,再交由相關部門處理。污染的物件手套,清理灑落EB用過的材料,以及實驗室中污染的物品破碎的玻璃和銳器必須放入堅固的容器,其他材料可擺放整齊后裝入袋中做好標記,交由相關部門處理。晶體及粉末含有較純或濃縮過的EB交由相關部門處理。分子生物學實驗安全常識v1.7 廢棄物的處理廢棄物的處理Sigma公司:公司:Ethidiu

35、m bromide/SYBR green replacement cartridges5 replacement cartridges for decontamination of solutions containing Ethidium bromide or SYBR Green; binding capacity for above mentioned fluorescent stains: 50 mg price: 約700RMBQbiogene 公司:EtBr GreenBag Disposal The EtBr GreenBag Kit allows rapid and trouble-free concentration of ethidium bromide from large volumes of solutions into a small tea bag which is then conveniently disposed along

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