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文檔簡介
1、1234u一、顯微鑒別的概述u二、常用中藥材的顯微鑒別特征u三、顯微鏡的結(jié)構(gòu)與使用簡介u四、中藥顯微制片操作u五、中藥材及中成藥顯微鑒別實例5顯微鑒別利用顯微鏡觀察藥材的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀及其后 含物的特征,用以鑒定藥材真?zhèn)蔚囊环N方法。特點 經(jīng)濟、簡便,快速、直觀,取樣量少,專屬性強歷史 上世紀(jì)5050年代,中國科學(xué)院院士、中國生藥學(xué)研究的創(chuàng)始人徐國鈞先生開始開展中藥材及中成藥顯微鑒別研究,先后完成石斛夜光丸、六味地黃丸等100100多種中成藥的顯微鑒別,打破了“丸散膏丹,神仙難辨”傳統(tǒng)認(rèn)識,為后人留下了寶貴的顯微鑒別經(jīng)驗和資料。應(yīng)用 中國藥典從19771977年版一部開始,在中藥材和中藥成方
2、制劑 鑒別 項下收錄了顯微鑒別內(nèi)容,此后歷版藥典不斷充實并予以完善。678910u定義:u特點:經(jīng)濟、簡便,快速、直觀,取樣量少,專屬性強11u植物細(xì)胞 u細(xì)胞后含物12u細(xì)胞:是構(gòu)成植物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動的基本單位。u特點: 形狀多樣: 隨植物種類及在植物體內(nèi)存在 部位和行使機能不同而異。 大小懸殊: 一般細(xì)胞直徑在10m10m 100m100m 之間,小的直徑只有0.1m0.1m,長的 如苘麻的纖維細(xì)胞可長達200mm200mm。13u薄壁細(xì)胞:組成植物體的基本組織,為活細(xì)胞,含多種內(nèi)含物。顯微鏡下細(xì)胞壁薄。14u木栓細(xì)胞: 存在于木本植物的樹皮或根皮,細(xì)胞壁內(nèi)滲入了脂肪性的木栓質(zhì),隔絕
3、外界的水和空氣,排列緊密,對植物內(nèi)部組織起保護作用,為死細(xì)胞。15草酸鈣方晶石細(xì)胞長方形或類多角形木栓細(xì)胞棕黃色,多角形。乳管含無色油滴狀顆粒淀粉粒甚多,單粒類圓形或長圓形16u石細(xì)胞 為細(xì)胞壁強烈木質(zhì)化的厚壁細(xì)胞,在植物體內(nèi)存在廣泛,分布:根、莖、葉、果實、種子。果皮、種皮中較多,形成堅硬的保護組織。如椰子、核桃堅硬的內(nèi)果皮。特點:單個散生或群生;形狀多樣;壁極厚,木化、栓化、角化細(xì)胞腔??;形成分枝紋孔道。171819202122u花粉粒 細(xì)胞功能 為植物生殖細(xì)胞,存在于 花類藥材的雄蕊上。 形態(tài)特征 外壁多具雕紋和萌發(fā)孔,是花 類藥材的主要鑒別特征。2324u纖維:多存在于植物的木質(zhì)部和韌
4、皮部,起支撐作用。顯微鏡下為兩端尖斜的長形細(xì)胞,具有全面增厚的次生壁,壁上有少數(shù)紋孔。u有的纖維束周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶,形成晶纖維。如雞血藤、黃柏252627u微黃色u梭形u孔溝明顯u兩頭尖或斜尖28u導(dǎo)管:主要存在于植物的木質(zhì)部中,起輸送水分和無機鹽的作用,鏡下呈長管狀或筒狀,細(xì)胞壁不全面不均勻增厚,根據(jù)增厚情況,分為環(huán)紋、螺紋、梯紋、網(wǎng)紋及孔紋導(dǎo)管。29環(huán)紋環(huán)紋網(wǎng)紋網(wǎng)紋梯紋梯紋螺紋螺紋孔紋孔紋3031u后含物的概念:細(xì)胞在代謝過程中產(chǎn)生的營養(yǎng)物質(zhì)、廢物和儲藏物質(zhì)統(tǒng)稱為細(xì)胞后含物。u貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)主要為淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪油,另有多糖團塊及菊糖等。u代謝廢物主要為晶體,有草酸鈣結(jié)晶和碳酸鈣
5、結(jié)晶以及砂晶。32u淀粉粒:葡萄糖分子聚合而成的長鏈碳水化合物,在細(xì)胞中以顆粒狀態(tài)存在,稱為淀粉粒。所有的薄壁細(xì)胞中幾乎都有淀粉粒的存在,尤以根、根莖及種子中為多。多數(shù)淀粉粒表面都有層紋和臍點,不同植物淀粉粒大小、層紋、臍點各有特征,可以作為藥材的鑒定依據(jù)之一。 u單粒: 只有一個臍點和圍繞臍點的許多輪紋。 如山藥、川貝母等。單粒淀粉多見u復(fù)粒: 由若干分粒組成,有兩個以上的臍點,每 個臍點各有輪紋圍繞。333435晶體是植物細(xì)胞的代謝廢物,常見的有兩種類型:草酸鈣結(jié)晶和碳酸鈣結(jié)晶(桑葉)。草酸鈣結(jié)晶:為無色半透明或稍呈暗灰色的晶體,一般一種植物只能見到一種形狀,少數(shù)有兩種或多種(如曼陀羅葉)
6、,在同一植物中晶體的分布以及形態(tài)特征較穩(wěn)定,是植物顯微鑒別的主要特征之一36 簇晶:由許多八面體、三棱形單晶體聚集而成, 如:大黃、人參、白芍等。 單晶 通常呈正方形、長方形、斜方形等,包括方 晶、砂晶、棱晶等。例如:葛根、甘草等。 針晶 晶體呈兩端尖銳的針狀,在細(xì)胞中多成束存 在,稱針晶束,一般存在于單子葉植物的粘 液細(xì)胞中,在雙子葉植物中較少見。 如:半夏、山藥、巴戟天、茜草等。37大黃簇晶38 香加皮的方晶 甘草的方晶39 半夏的針晶束 白及的針晶束4041是由脂肪酸和甘油結(jié)合而成的脂。常溫下呈固體或半固體的稱為脂,如柯柯豆脂;呈液體的稱為油,如芝麻油、大豆油。脂肪油常呈小滴狀分散于細(xì)胞
7、質(zhì)中。檢驗:遇蘇丹試液顯橘紅色或紅色?;ㄉ尤~細(xì)胞花生子葉細(xì)胞4243u菊糖是由果糖分子聚合而成的,主要存在于菊科、桔??频炔糠种参锔谋”诩?xì)胞中(如木香、白術(shù)、桔梗、黨參)u菊糖能溶于水,在細(xì)胞中呈溶解狀態(tài)存在,不溶于乙醇,乙醇處理后,可成球形、半球形或扇狀結(jié)晶析出,久置不溶化。 u水合氯醛裝片(不加熱),可見呈扇形或不規(guī)則的菊糖團塊,表面現(xiàn)放射狀線紋,久置漸溶化。44桔梗-木香4546 黏液為雜多糖,是植物正常的生理產(chǎn)物,多存在于種子、果實、根及根莖等的黏液細(xì)胞中(如白及、山藥)。4748 大多以子實體或菌核的形式入藥,無淀粉粒和高等植物的顯微特征。觀察時應(yīng)注意菌絲的形狀、有無分枝、顏色、
8、孢子的形態(tài);結(jié)晶的有無及形態(tài)。495051 顯微鏡主要是由機械部分與光學(xué)部分組成,雖然新型顯微鏡不斷面市,但其原理及各部分的構(gòu)造均大同小異。 機械部分 光學(xué)部分5253u制片時蓋玻片上不得有試液殘留,避免污染物鏡 及載物臺,損傷鏡頭。u變換物鏡時,切記先低倍、后高倍,先粗調(diào)、后 微調(diào)。由低到高逐級變換。u使用高倍物鏡時,只能用細(xì)螺旋調(diào)節(jié)焦距,禁止 用粗螺旋調(diào)節(jié);也不得裝卸載玻片。u使用完畢,應(yīng)將最小物鏡與通光孔相對,關(guān)閉光 源,罩好,收置起來。u顯微鏡的光學(xué)部分,只能用特殊的擦鏡頭紙擦拭54顯微鑒別中,常利用某些物質(zhì)具有雙折射性的特點,采用偏光檢測。淀粉粒在偏光顯微鏡下呈現(xiàn)黑十字現(xiàn)象;草酸鈣結(jié)
9、晶類型多樣,在偏光顯微鏡下呈不同的多彩顏色;礦物類多具有偏光特性。其他如石細(xì)胞、纖維、導(dǎo)管等也呈現(xiàn)出不同的偏光特性??勺鳛樗幉蔫b別的補充。55山藥淀粉粒山藥淀粉粒浙貝母淀粉粒浙貝母淀粉粒馬鈴薯淀粉粒馬鈴薯淀粉粒5657u1 1、藥材粉末制片 主要用于粉末狀藥材及含藥材粉末的成方制劑的觀察。u藥材粉末制備 取干燥藥材,研磨或銼成細(xì)粉(通常應(yīng)過8080目以上藥篩)。u制備粉末時需注意取樣的代表性。例如:根類藥材要切取根頭、根中段及根尾等部位,并全部磨粉,過篩,混勻,不得丟棄渣頭。u需觀察淀粉粒時,一般干燥溫度不能超過6060,避免淀粉粒糊化,有礙觀察。581 1)透化時加熱溫度不能過高,以防水合氯
10、醛試液沸騰太過,使組織內(nèi)帶入氣泡;加熱時應(yīng)將載玻片不斷移動,以免受熱不勻而炸裂。2 2)如需觀察菊糖等多糖物質(zhì),加水合氯醛試液不要加熱。59 是日常檢驗中最為常用、簡便的切片方法。 切片前的藥材預(yù)處理: 1 1、質(zhì)地軟硬適中的樣品可直接進行切片。 2 2、質(zhì)地堅硬的藥材,需先軟化后再切片,最方便 常用的方法為水浸泡。 3 3、過于柔軟的樣品,可將其浸入70%70%95%95%乙醇 中,約2020分鐘后可變硬些,再切片;或用硬物 包裹后切片。60 苦杏仁石細(xì)胞特征苦杏仁石細(xì)胞特征 橙黃色橙黃色貝殼形貝殼形壁較厚壁較厚較寬一邊紋孔明顯較寬一邊紋孔明顯61 苦杏仁 檢驗過程中個別廠家樣品顯微鏡下找不
11、到苦杏仁石細(xì)胞,懷疑未投料,采用HPLCHPLC法進行驗證,未檢測到苦杏仁苷,證明確實未投料。 還有廠家的樣品也找不到苦杏仁的石細(xì)胞,溝通時廠家堅稱確實投料了,經(jīng)HPLCHPLC法驗證,能夠檢出苦杏仁苷后經(jīng)了解,廠方使用的是沸水燀后脫皮苦杏仁。62 紫菀 下皮細(xì)胞長方形,垂周壁波狀彎曲, 有的含紫色色素。63紫菀: 檢驗時有個廠家樣品中找不到紫菀的顯微 特征,采用TLCTLC法驗證也沒有紫菀的特征斑 點,之后讓廠方提供了投料藥材,經(jīng)鑒定 其投料藥材不是紫菀正品。64 西紅花西紅花摻偽西紅花摻偽西紅花65西紅花西紅花造假西紅花造假西紅花66西紅花西紅花造假西紅花造假西紅花67表皮細(xì)胞表皮細(xì)胞環(huán)紋及螺紋導(dǎo)管環(huán)紋及螺紋導(dǎo)管68無定型物無定型物植物纖維植物纖維普通卷紙顯微特征普通卷紙顯微特征69合格品合格品不合格品不合格品
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