實時熒光PCR在男性性病尿道炎及男性尿道炎后綜合征的應(yīng)用評價

1、實時熒光PCR在男性性病尿道炎及男性尿道炎后綜合征的應(yīng)用評價    【摘要】  目的 探討實時熒光PCR技術(shù)檢測男性性病尿道炎及男性尿道炎后綜合征(MPUS)患者的病原體的臨床價值。方法 用實時熒光PCR法對718例男性性病尿道炎及MPUS患者尿道分泌物或前列腺液同時作淋球菌(NG)、沙眼衣原體(Ct)、解脲支原體(UU)檢測。結(jié)果 52.2%的淋病患者并發(fā)Ct、UU感染。非淋菌性尿道炎(NGU)患者Ct、UU陽性率68.2%，Ct陽性率31.1%、UU陽性率42.6%，5.4%患者Ct、UU合并感染。MPUS患者NG、Ct、UU陽性率僅為10

2、.2%。結(jié)論 實時熒光PCR技術(shù)靈敏度高，特異性強，對男性性病尿道炎及MPUS的診斷和治療具有重要的指導(dǎo)意義。 【關(guān)鍵詞】  男性性病尿道炎;男性尿道炎后綜合征;病原體;實時熒光PCR Abstract: Objective To discuss the clinical effectiveness of real-time PCR in detecting the pathogens of males sexually transmitted urethritis and males post-urethritis syndrome (MPUS). Methods Real-tim

3、e PCR was used to detect the pathogens including Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydia trachomatis (Ct) and Ureaplasma urealyticum (UU) in the urinary secretions or succus prostaticus from 718 male patients with sexually transmitted urethritis and/or post-urethritis sydrome. Results The prevalence o

4、f Ct and UU was 52.2% in the gonorrhoea patients and was 68.2% in the patients with nongonococcal urethritis (NGU). The positive rate was 31.1% for Ct and 42.6% for UU in NGU and the co-infection rate of Ct and UU was 5.4%, while the total prevalence of Ct, NG and UU was only 10.2% in the MPUS patie

5、nts. Conclusion The technique of real-time PCR has very high sensitivity and specificity. It serves as significant guidance in the diagnosis and treatment of males sexually transmitted urethritis and MPUS. Key words: males sexually transmitted urethritis; males post-urethritis syndrome; pathogen; re

6、al-time PCR 已換 男性性病尿道炎是常見的性傳播疾病之一，其實驗室診斷依據(jù)為檢測患者尿道分泌物或前列腺液中的病原體，包括淋球菌(NG)、沙眼衣原體(Ct)、解脲支原體(UU)。目前，檢測病原體方法很多，實時熒光PCR技術(shù)是比較敏感的方法。為評價實時熒光PCR技術(shù)在男性性病尿道炎及男性尿道炎后綜合征(males post-urethritis sydrome，MPUS)診治中的價值，我們對718例男性性病尿道炎及MPUS患者尿道分泌物或前列腺液同時檢測NG、Ct、UU并進(jìn)行分析。結(jié)果報道如下。    1 資料和方法 1.1 一般資料 718例男性

7、性病尿道炎及MPUS患者均來自我院皮膚科門診，其中男性性病尿道炎238例，MPUS 480例。718例患者均有不潔性交史，年齡1862歲，平均38歲。男性性病尿道炎均為未經(jīng)治療的初診患者，表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿道癢痛不適，有黃色分泌物或少量稀薄微濁分泌物或無分泌物。MPUS患者均經(jīng)外院診治過或過度治療過而始終有尿頻、尿急、尿痛等不適癥狀，病程312個月，外院實驗室檢查NG、Ct、UU均陰性(非實時熒光PCR法)。 1.2 樣本采集 有尿道分泌物的患者取樣：用無菌棉拭子粘取尿道口分泌物洗于裝有1 ml生理鹽水的塑料離心管中待檢。無分泌物的患者取樣：向尿道口方向輕輕按摩尿道1 min，用無菌棉拭子插

8、入尿道2 cm 處粘取尿道按摩液洗于裝有1 ml生理鹽水的塑料離心管中，然后作前列腺按摩，取1滴前列腺液滴于按摩液離心管中待檢。 1.3 試劑 沙眼衣原體和淋球菌核酸擴增(PCR)熒光雙檢試劑盒、解脲支原體核酸擴增(PCR)熒光檢測試劑盒由深圳匹基生物工程有限公司提供。 1.4 實驗操作 按試劑盒說明書步驟進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)操作。本研究采用的熒光PCR儀為美國ABI公司生產(chǎn)的ABI 7300基因擴增儀。 1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 各病原體陽性率顯著性差異用2檢驗, P<0.05認(rèn)為差異有顯著性。 2 結(jié) 果 男性性病尿道炎根據(jù)檢測結(jié)果有無淋球菌而分為淋病和非淋菌性尿道炎(NGU)。各病原體在淋病、NGU

9、、MPUS中的檢測結(jié)果見表1。結(jié)果顯示：52.2%(47/90)的淋病患者并發(fā)Ct、UU感染,合計陽性率100%(90/90);NGU患者Ct陽性率31.1%(46/148)、UU陽性率42.6%(63/148)，Ct、UU合并陽性率5.4%(8/148),合計陽性率68.2%(101/148);MPUS患者NG陽性率4.4%(21/480)、Ct陽性率2.1%(10/480)、UU陽性率5.4%(26/480),合計陽性率10.2%(49/480)。淋病與NGU患者3種病原體陽性率明顯高于MPUS患者(P<0.01)，3組病例UU陽性率要高于Ct陽性率，但差異無顯著性(P>0.0

10、5)。表1 淋病、NGU、MPUS患者 3種病原體檢測結(jié)果3 討 論 男性性病尿道炎通常根據(jù)是否有淋球菌存在分為淋菌性尿道炎和NGU1。MPUS是指淋病或NGU，經(jīng)過多種抗菌藥物治療后已無尿道炎的臨床及實驗室客觀依據(jù)，但患者仍訴諸多癥狀和不適的癥候群2。 淋病、NGU實驗室診斷依據(jù)為檢測患者泌尿生殖道病原體，包括NG、Ct、UU。判斷是否治愈不能僅看臨床癥狀，有時經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)治療后癥狀雖然消失，但仍可有少量病原體存在。尤其是近年來抗菌藥物的大量使用使我國性傳播疾病患者的耐藥情況較國外嚴(yán)重，這就要求對患者作微生物學(xué)隨訪3。另外有相當(dāng)部分淋病、NGU患者經(jīng)治療后遷延為MPUS患者，MPUS病因復(fù)雜，病

11、程長，且反復(fù)，臨床上大多以前列腺炎或復(fù)發(fā)性尿道炎給予大劑量的抗菌藥物治療，但效果多不佳4。故精確的病原學(xué)實驗室檢測對淋病、NGU、MPUS的診治和解決患者心理恐懼有極為重要的意義。目前，檢測NG、Ct、UU的方法很多，不同實驗室因人員和設(shè)備等因素而選用的方法多種多樣，故各地報道的病原體流行病學(xué)結(jié)果相差很大。應(yīng)選擇一個實用且更能反映臨床真實情況的實驗方法。培養(yǎng)法仍然是金標(biāo)準(zhǔn)，但耗時長，敏感性低，不適合臨床廣泛開展5。實時熒光PCR法是近幾年來發(fā)展較快的方法之一，因該方法操作簡單，檢測速度快，判斷結(jié)果自動化等優(yōu)點而倍受實驗室技術(shù)人員的青睞。我們應(yīng)用實時熒光PCR法對患者進(jìn)行檢測，結(jié)果表明52.2%

12、淋病患者合并Ct、UU感染，NGU患者Ct、UU 陽性率68.2%，而MPUS患者3種病原體陽性率僅為10.21%。表明實時熒光PCR法靈敏度高、特異性強。且筆者認(rèn)為單憑某個實驗室的單次檢測結(jié)果診斷MPUS有些不妥，有部分尿道炎慢性遷延患者可能尚有病原體耐藥菌株存在。同時對于男性性病尿道炎及MPUS患者進(jìn)行實時熒光PCR法檢測NG、Ct、UU有標(biāo)本用量小的優(yōu)點，一次取樣即可作3種病原體檢測。綜上所述，實時熒光PCR法對男性性病尿道炎及MPUS的診斷和治療具有重要的指導(dǎo)意義。    【參考文獻(xiàn)】  1 吳志華.現(xiàn)代皮膚性病學(xué)M.廣州：廣東人民出版社，2002:337-338.2 趙天恩,劉清英. 男性尿道炎后綜合征的研究進(jìn)展J. 中國皮膚性病學(xué)雜