果蠅和搖蚊幼蟲唾液腺細(xì)胞巨大染色體的觀察

1、 讓更多的孩子得到更好的教育果蠅和搖蚊幼蟲唾液腺細(xì)胞巨大染色體的觀察目的 觀察果蠅和搖蚊幼蟲唾液腺細(xì)胞巨大染色體的形態(tài)特征。實(shí)驗(yàn)前的思考 染色體的數(shù)量和形態(tài)特征跟生物體的性狀遺傳有著密切的關(guān)系，而染色體的形態(tài)特征又不易觀察，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)果蠅幼蟲的唾液腺細(xì)胞染色體特別大，比果蠅的其他體細(xì)胞染色體要長(zhǎng)100200倍，體積大上千倍，搖蚊幼蟲的唾腺細(xì)胞的染色體，也比一般細(xì)胞大100倍以上。在一般光學(xué)顯微鏡下就能清楚地看到，這些都是觀察染色體理想的材料。材料器具 果蠅三齡幼蟲；解剖針，鑷子，載玻片，蓋玻片，解剖鏡或有支架的放大鏡，吸水紙；0.75%氯化鈉溶液，乙酸洋紅或乙酸地衣紅染液，1N鹽酸，0.4%氯

2、化鈉溶液。方法一 觀察果蠅唾液腺細(xì)胞巨大染色體步驟1.取唾液腺 取一塊潔凈的載玻片，在載玻片中央滴一小滴0.75%氯化鈉溶液（相當(dāng)于果蠅的生理鹽水）。用解剖針挑起一條肥胖的充分發(fā)育的果蠅三齡幼蟲，放入載玻片上溶液中，生理鹽水不宜多，以減少幼蟲活動(dòng)。把載玻片放在解剖鏡或放大鏡下，左手用鑷子夾住幼蟲體1/2處，右手持一解剖針，壓住頭部（外形似一個(gè)黑色小點(diǎn)），輕輕地向前拉，當(dāng)拉出頭部時(shí)，腺體隨同內(nèi)臟一起拉出。如果頭部拉斷，腺體沒拉出，可以用解剖針從鑷子附近的腹部緩緩地向頭端擠壓，這樣也可以壓出唾液腺。拉出后借助解剖鏡或放大鏡放大唾液腺，細(xì)心分離，理出雙叉形囊狀腺體。如用放大鏡看不清，可放在低倍顯微鏡

3、下觀察區(qū)別，光線調(diào)弱一些，小心剔除腺體周圍乳白色的脂肪組織和身體的殘余部分，在載玻片中央僅留下具有唾液腺的部分（見圖）。在材料上滴加一滴0.4%氯化鈉溶液，低滲處理2分鐘，使唾液腺細(xì)胞膨脹。2.染色 小心吸去材料周圍的溶液，先滴2滴1N鹽酸在唾液腺上，水解2分鐘（不能超過3分鐘）。然后用清水輕輕滴洗。滴洗方法是：滴入清水，用吸水紙從材料旁邊吸水（絕對(duì)不能碰到實(shí)驗(yàn)材料，否則材料就被紙吸附而丟失）。這樣反復(fù)幾次，洗去鹽酸。用吸水紙吸干周圍的水分，再在材料上滴2滴乙酸洋紅染液，染色10分鐘。如果氣溫過低，可把載玻片放在酒精燈上來回移動(dòng)加溫（不可煮沸），以加速染色。3.壓片 在染好色的材料上，蓋上蓋玻

4、片，再覆以二三層吸水紙，用手掌用力壓一下，使細(xì)胞中染色體散開，壓片時(shí)注意不能移動(dòng)蓋玻片，必要時(shí)再壓一次。4.觀察 先用低倍顯微鏡觀察，找到染色體分散的細(xì)胞（參考右圖），再用高倍鏡觀察。分析和討論 實(shí)驗(yàn)結(jié)果能觀察到有數(shù)個(gè)染色體分散的細(xì)胞。1.可以看到每個(gè)唾液腺細(xì)胞都有數(shù)條形似飄帶的染色體，且在每條染色體上有粗細(xì)不等的橫紋，或叫做帶，一般認(rèn)為橫紋是基因所在的位置。2.果蠅易采集和培養(yǎng)，染色體數(shù)目少（僅4對(duì)），體形大，（唾液腺染色體更大）。果蠅的染色體中，其中有一對(duì)是性染色體（x染色體是棒狀，y染色體是鉤狀），另3對(duì)是常染色體，分別定為、（見圖）。3.果蠅唾液腺細(xì)胞染色體特別大，是因?yàn)橥僖合偌?xì)胞中染

5、色體都處于同源染色體配對(duì)的階段，同時(shí)唾液腺細(xì)胞沒有分裂能力，所以染色體既大又集中。一般情況下，染色體只有在細(xì)胞分裂的中期才能較清楚地觀察到。（吳天眷）方法二 搖蚊幼蟲唾液腺細(xì)胞巨大染色體觀察材料器具 搖蚊三齡幼蟲；放大鏡，解剖針，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，鑷子，吸水紙；生理鹽水（0.65%氯化鈉溶液），改良?jí)A性品紅染液。步驟1.改良?jí)A性品紅染液的配制 取0.3克堿性品紅溶于10毫升70%乙醇中。把它倒入90毫升5%苯酚溶液中。再在它里面加入冰乙酸和甲醛各10毫升，成為原液。取原液20毫升加入45%冰乙酸80毫升，再加入1克山梨醇，搖勻溶解后即成染液。2.采集 南方各地區(qū)每年35月和911月（北方

6、稍遲些）都可在池塘、池沼地、住宅區(qū)的小溝積水中，水浮蓮和西洋菜根上采集到幼蟲。幼蟲呈紅色，俗稱“血蟲”，體長(zhǎng)612毫米，體節(jié)1113節(jié)。3.裝片的制作（1）選取一條較大的三齡幼蟲放在載玻片中央的生理鹽水（0.65%氯化鈉溶液）中。（2）兩手各持一支解剖針，左手的解剖針平按在蟲體前端大約在體長(zhǎng)1/3處（不讓它移動(dòng)），右手的解剖針按在頭部，輕輕向前拉動(dòng)，就可把頭拉開，唾液腺也隨之拉出（如果唾液腺拉斷或未能拉出，可以用解剖針在蟲體前部1/3處輕輕向前擠壓出來）。兩個(gè)唾液腺是橢圓形環(huán)狀，淺黃色，如果放在低倍鏡（5×10或5×5）下檢查，發(fā)現(xiàn)每個(gè)唾液腺的細(xì)胞數(shù)目清晰可數(shù)，一般由182

7、0個(gè)細(xì)胞組成，唾液腺是由單層細(xì)胞構(gòu)成的環(huán)狀體，每個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核也可清楚見到。每個(gè)唾液腺都有一條唾液腺管連著。（3）把帶有唾液腺的載玻片從低倍鏡取下，在放大鏡下操作，用吸水紙小心去掉載玻片上的雜物和過多的水分，但千萬不要接觸到腺體，以免丟失。加12滴改良?jí)A性品紅染色液染色1520分鐘。操作的全過程都以上述的生理鹽水保持唾液腺濕潤(rùn)，特別是染色時(shí)更要注意。染色后由于受染液的影響，每個(gè)腺體細(xì)胞分離，核染成較深色。（4）染色后加上蓋玻片，用吸水紙吸去旁邊溢出的染液，在蓋玻片上蓋上2層比蓋玻片略大的吸水紙，用拇指在吸水紙的中央垂直輕壓，注意千萬不要移動(dòng)蓋玻片，以免把染色體推散，影響觀察效果，要求把唾液腺細(xì)胞核壓破，染色體伸展而不破碎為好。3.觀察（1）先在低倍鏡下觀察，可以看到在淡紫紅色的細(xì)胞質(zhì)中有一些深紫紅色的花狀帶形染色體，并可以看到粗細(xì)明暗相間的橫紋。找到一個(gè)染色體清晰的細(xì)胞，移到視野的中央。（2）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換上高倍鏡頭觀察，適當(dāng)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，就可以清晰地看到巨大染色體上顯示出許多深色的橫帶。一般認(rèn)為這些橫帶就