高考生物（蘇教版）一輪復(fù)習(xí)x3-2克隆技術(shù)及生物技術(shù)的倫理問題課件

1、第第2 2講克隆技術(shù)及生物技術(shù)的倫理問題講克隆技術(shù)及生物技術(shù)的倫理問題2015備考備考最新考綱最新考綱1植植物的組織培養(yǎng)物的組織培養(yǎng)()。2.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆克隆()。3.細(xì)胞融合與單克隆抗體細(xì)胞融合與單克隆抗體()。4.生物技生物技術(shù)中的倫理問題術(shù)中的倫理問題()。1細(xì)胞工程細(xì)胞工程(1)操操作水平：作水平： 。(2)目的：按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的目的：按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的 或獲或獲得得 。考點(diǎn)考點(diǎn)1植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程(5年年8考考)(2013課標(biāo)課標(biāo)卷、天津卷、江蘇卷、重慶卷、課標(biāo)卷卷、天津卷、江蘇卷、重慶卷、課標(biāo)卷)細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平細(xì)胞水

2、平或細(xì)胞器水平遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)品細(xì)胞產(chǎn)品2植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性(1)概概念：具有某種生物全部念：具有某種生物全部 的任何一個(gè)細(xì)的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成胞，都具有發(fā)育成 的潛能。的潛能。(2)原因：細(xì)胞內(nèi)含有本物種的原因：細(xì)胞內(nèi)含有本物種的 。(3)全能性表達(dá)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于全能性表達(dá)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于 狀狀態(tài)，提供一定的態(tài)，提供一定的 和其他適宜外界條件。和其他適宜外界條件。遺傳信息遺傳信息完整生物體完整生物體全部遺傳信息全部遺傳信息離體離體營養(yǎng)、激素營養(yǎng)、激素3植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)原原理：植物細(xì)胞具有理：植物細(xì)胞具有 。(2)

3、過程：過程：全能性全能性4植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)觀觀察植物體細(xì)胞雜交技術(shù)圖示，完善相關(guān)問題察植物體細(xì)胞雜交技術(shù)圖示，完善相關(guān)問題(1)過程為去除過程為去除 獲得具有活力的原生質(zhì)體，常用獲得具有活力的原生質(zhì)體，常用方法是酶解法，所用到的酶是方法是酶解法，所用到的酶是 。(2)過程是原生質(zhì)體的融合，人工誘導(dǎo)的物理法包括過程是原生質(zhì)體的融合，人工誘導(dǎo)的物理法包括離心、離心、振動(dòng)、電激振動(dòng)、電激等；化學(xué)法一般用等；化學(xué)法一般用 (PEG)作誘導(dǎo)劑。作誘導(dǎo)劑。(3)過程是原生質(zhì)體融合后再生出過程是原生質(zhì)體融合后再生出 ，這是原生質(zhì)體，這是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。融合成功的標(biāo)志。(4)植物體

4、細(xì)胞雜交的意義：植物體細(xì)胞雜交的意義： 。細(xì)胞壁細(xì)胞壁纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶聚乙二醇聚乙二醇細(xì)胞壁細(xì)胞壁克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙優(yōu)良品種的遺傳特性優(yōu)良品種的遺傳特性 分生區(qū)分生區(qū) 工廠化生產(chǎn)工廠化生產(chǎn) 愈傷組織愈傷組織 思維激活思維激活判判斷正誤斷正誤(1)植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性能性()。(2)愈傷組織是外植體脫分化和再分化后形成的愈傷組織是外植體脫分化和再分化后形成的()。(3)幼嫩的組織脫分化較為容易，如莖尖、根尖、形成層細(xì)幼嫩的組織脫分化較為容易，如莖尖、根尖、形成層細(xì)胞易

5、脫分化，而植物的莖、葉和成熟的組織則較難胞易脫分化，而植物的莖、葉和成熟的組織則較難()。(4)對(duì)外植體和接種用的每種器械都要徹底滅菌對(duì)外植體和接種用的每種器械都要徹底滅菌()。(5)脫分化形成愈傷組織的過程不需要光，再分化過程需要光，脫分化形成愈傷組織的過程不需要光，再分化過程需要光，因?yàn)橛鷤M織利用有機(jī)營養(yǎng)成分，而試管苗需要進(jìn)行光合作因?yàn)橛鷤M織利用有機(jī)營養(yǎng)成分，而試管苗需要進(jìn)行光合作用以自養(yǎng)用以自養(yǎng)()。(6)植物組織培養(yǎng)中不同培養(yǎng)階段培養(yǎng)基含有的激素不同，因植物組織培養(yǎng)中不同培養(yǎng)階段培養(yǎng)基含有的激素不同，因?yàn)榕囵B(yǎng)的目的不同為培養(yǎng)的目的不同(生根或生芽生根或生芽)()。答案答案(1)(2

6、)(3)(4)(5)(6)思考感悟思考感悟植物組織培養(yǎng)的整個(gè)操作過程中，如何實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境？植物組織培養(yǎng)的整個(gè)操作過程中，如何實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境？提示提示通過培養(yǎng)基的滅菌通過培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌)、外植體的消毒、外植體的消毒(酒精、氯化汞酒精、氯化汞)、接種的無菌操作、接種的無菌操作(酒精、酒精燈灼燒酒精、酒精燈灼燒)、無、無菌箱中的培養(yǎng)、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間等操菌箱中的培養(yǎng)、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間等操作實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境。作實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境。1(2013重慶理綜，重慶理綜，5)某某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為花卉，其

7、技術(shù)路線為“取材取材消毒消毒愈傷組織培養(yǎng)愈傷組織培養(yǎng)出芽出芽生根生根移栽移栽”。下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是。下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是()。A消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害細(xì)胞的傷害B在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞加倍的細(xì)胞C出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)解析解析

8、本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。在愈傷組織本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。在愈傷組織中，因植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁，阻礙了細(xì)胞融合，所以此時(shí)加中，因植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁，阻礙了細(xì)胞融合，所以此時(shí)加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，不能獲得染色體加倍的細(xì)胞；消毒的入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，不能獲得染色體加倍的細(xì)胞；消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害；愈傷組織出芽是細(xì)胞分化的結(jié)果，而細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是害；愈傷組織出芽是細(xì)胞分化的結(jié)果，而細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、基因的選擇性表達(dá)；生長素和細(xì)胞分裂素是啟

9、動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，生根時(shí)，培養(yǎng)基通常含有脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，生根時(shí)，培養(yǎng)基通常含有萘乙酸等生長素調(diào)節(jié)劑。萘乙酸等生長素調(diào)節(jié)劑。答案答案B題后歸納題后歸納植物激素在組織培養(yǎng)中的作用植物激素在組織培養(yǎng)中的作用在在配制好的配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素其中生培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 (1)按照不同的

10、順序使用這兩類激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)按照不同的順序使用這兩類激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。果。使用順序使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素裂素有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化分化先使用細(xì)胞分裂素，后使用生先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素長素細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用同時(shí)使用分化頻率提高分化頻率提高(2)當(dāng)同時(shí)使用這兩類激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞當(dāng)同時(shí)使用這兩類激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。的發(fā)育方向。生長素與細(xì)胞分生長素與細(xì)胞分裂素的用量比值裂素的用量比值植物細(xì)胞的發(fā)育方向植物細(xì)胞的發(fā)育方向比值

11、高比值高有利于根的分化、抑制芽的形成有利于根的分化、抑制芽的形成比值低比值低有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成比值適中比值適中促進(jìn)愈傷組織的形成促進(jìn)愈傷組織的形成2(2013天津卷，天津卷，9)花花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以

12、獲得抗黑腐病雜種植株。流的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。程如下圖。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)據(jù)圖回答下列問題：據(jù)圖回答下列問題：(1)過程所需的酶是過程所需的酶是_。(2)過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的過程后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的_存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是的滲透壓，其作用是_。原生質(zhì)體經(jīng)過。原生質(zhì)體經(jīng)過_再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。再生

13、，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和_植株的根尖，通過植株的根尖，通過_、_、染色和制、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。和數(shù)目。(5)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行進(jìn)行PCR擴(kuò)擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株14進(jìn)行進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果

14、。擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株據(jù)圖判斷，再生植株14中一定是雜種植株的有中一定是雜種植株的有_。(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行對(duì)雜種植株進(jìn)行_接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。的雜種植株。解析解析(1)過程是利用纖維素酶和果膠酶去除幼葉細(xì)胞和根過程是利用纖維素酶和果膠酶去除幼葉細(xì)胞和根細(xì)胞的細(xì)胞壁，制備相應(yīng)原生質(zhì)體；細(xì)胞的細(xì)胞壁，制備相應(yīng)原生質(zhì)體；(2)過程在過程在PEG的作用的作用下兩個(gè)原生質(zhì)體融合在一起，形成雜種細(xì)胞，來自幼葉的原下兩個(gè)原生質(zhì)體融合在一起，形成雜種細(xì)胞，來自幼葉的原生質(zhì)體中有葉綠體存在，可以作為顯微鏡下初步篩選雜種細(xì)生質(zhì)體中有葉綠體存在，可以作為顯

15、微鏡下初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志；胞的標(biāo)志；(3)原生質(zhì)體及剛形成的雜種細(xì)胞因?yàn)闆]有了細(xì)胞原生質(zhì)體及剛形成的雜種細(xì)胞因?yàn)闆]有了細(xì)胞壁的束縛作用，必須浸泡在適宜濃度且無毒害作用的等滲溶壁的束縛作用，必須浸泡在適宜濃度且無毒害作用的等滲溶液中，以保持原生質(zhì)體的完整性，原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁的再液中，以保持原生質(zhì)體的完整性，原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁的再生后，才能進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。生后，才能進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。 (4)若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的分生組織雙親植株的分生組織(如根尖如根尖)，通過解離、漂洗、染色和制，通

16、過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片，再在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和片等過程制成裝片，再在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。數(shù)目。(5)識(shí)圖可判斷再生植株識(shí)圖可判斷再生植株14中中一定是雜種植株的有一定是雜種植株的有1、2、4；(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行黑腐病菌對(duì)雜種植株進(jìn)行黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。答案答案(1)纖纖維素酶和果膠酶維素酶和果膠酶(2)葉綠體葉綠體(3)保持原生質(zhì)體保持原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁完整性細(xì)胞壁(4)雙親雙親(或花椰菜和黑芥或花椰菜和黑芥)解離漂洗解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌黑腐病菌題后歸納題后歸納

17、植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的比較植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的比較名稱名稱植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交原理原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性性和細(xì)胞的全能性過程過程選材選材選取根尖、莖尖、形成選取根尖、莖尖、形成層部位最容易誘導(dǎo)層部位最容易誘導(dǎo)脫分化脫分化不同的植物細(xì)胞不同的植物細(xì)胞技術(shù)技術(shù)操作操作脫分化、再分化等脫分化、再分化等除脫分化、再分化外，還要除脫分化、再分化外，還要用酶解法去除細(xì)胞壁，用用酶解法去除細(xì)胞壁，用一定的方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合一定的方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合關(guān)系關(guān)系植物組織培養(yǎng)是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)，植物體細(xì)胞植

18、物組織培養(yǎng)是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)，植物體細(xì)胞雜交所用的技術(shù)更復(fù)雜雜交所用的技術(shù)更復(fù)雜1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過過程：程：考點(diǎn)考點(diǎn)2動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程(5年年9考考)(2013安徽卷、浙江卷、重慶卷、海南卷安徽卷、浙江卷、重慶卷、海南卷)2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無無菌、無毒：對(duì)培養(yǎng)液和所用培養(yǎng)用具菌、無毒：對(duì)培養(yǎng)液和所用培養(yǎng)用具 處理，處理，添加添加 ；定期；定期 以清除代謝產(chǎn)物。以清除代謝產(chǎn)物。(2)營養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元營養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素之外通常還需加入素之外通常還需加入 等天然成分。等天然成分。(3)適宜的溫

19、度和適宜的溫度和pH：溫度為：溫度為 (哺乳動(dòng)物哺乳動(dòng)物)，pH為為 。(4)氣體環(huán)境氣體環(huán)境95%空氣空氣5%CO2(維持維持 )無菌無菌抗生素抗生素更換培養(yǎng)液更換培養(yǎng)液血清血漿血清血漿36.50.57.27.4培養(yǎng)液的培養(yǎng)液的pH3動(dòng)物體細(xì)胞核移植及克隆技術(shù)引發(fā)的倫理問題動(dòng)物體細(xì)胞核移植及克隆技術(shù)引發(fā)的倫理問題(1)原原理：理：(2)核移植過程核移植過程(以高產(chǎn)奶牛克隆為例以高產(chǎn)奶?？寺槔?動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性(3)克隆人的類型及其倫理問題克隆人的類型及其倫理問題類型類型項(xiàng)目項(xiàng)目治療性克隆治療性克隆生殖性克隆生殖性克隆區(qū)別區(qū)別目的目的用于用于 ，產(chǎn)，產(chǎn)生新個(gè)體生新個(gè)體

20、水平水平 水平水平 水平水平聯(lián)系聯(lián)系都屬無性繁殖；產(chǎn)生新個(gè)體、新組織，遺傳信都屬無性繁殖；產(chǎn)生新個(gè)體、新組織，遺傳信息相同息相同治療人類疾病治療人類疾病細(xì)胞細(xì)胞生育生育個(gè)體個(gè)體中國中國政府政府的態(tài)度的態(tài)度中國政府的觀點(diǎn)：不贊成，不允許，不支持，中國政府的觀點(diǎn)：不贊成，不允許，不支持，不接受任何不接受任何 的實(shí)驗(yàn)，不反的實(shí)驗(yàn)，不反對(duì)對(duì)生殖性克隆人生殖性克隆人治療性克隆治療性克隆4.單克隆抗體制備單克隆抗體制備(1)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理：誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理： 。(2)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法：物理法誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法：物理法離心、振動(dòng)、電激離心、振動(dòng)、電激等；化學(xué)法等；化學(xué)法聚乙二醇；生物

21、法聚乙二醇；生物法 。(3)單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性滅活病毒滅活病毒(4)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)： 、靈敏度高，可大量制備。、靈敏度高，可大量制備。(5)單克隆抗體的應(yīng)用：作為單克隆抗體的應(yīng)用：作為 ；用于治療疾??；用于治療疾病和和 。特異性強(qiáng)特異性強(qiáng)診斷試劑診斷試劑運(yùn)載藥物運(yùn)載藥物5.比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植與動(dòng)物細(xì)胞融合比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植與動(dòng)物細(xì)胞融合比較比較動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)核移植核移植動(dòng)物細(xì)動(dòng)物細(xì)胞融合胞融合原理原理細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞核的全能性核的全能性細(xì)胞膜細(xì)胞膜的流動(dòng)性的流動(dòng)性過程過程結(jié)果

22、結(jié)果相同分化程度相同分化程度的細(xì)胞群的細(xì)胞群與供體基本相同與供體基本相同的個(gè)體的個(gè)體雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞關(guān)鍵關(guān)鍵環(huán)節(jié)環(huán)節(jié)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖(分分裂裂)、細(xì)胞癌變、細(xì)胞癌變核融合、細(xì)胞核融合、細(xì)胞分化分化人工誘導(dǎo)人工誘導(dǎo)細(xì)胞膜融合細(xì)胞膜融合應(yīng)用應(yīng)用生產(chǎn)生物制品生產(chǎn)生物制品基因工程基因工程檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì)加速良種繁育加速良種繁育保護(hù)瀕危物種保護(hù)瀕危物種生產(chǎn)醫(yī)用蛋白生產(chǎn)醫(yī)用蛋白提供克隆器官、提供克隆器官、組織等組織等獲得雜種細(xì)獲得雜種細(xì)胞，制備細(xì)胞，制備細(xì)胞產(chǎn)物如單胞產(chǎn)物如單克隆抗體克隆抗體思維激活思維激活判判斷正誤斷正誤(1)植物組織培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)基，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常用固植物組織培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)

23、基，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常用固體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基()。(2)具有包含物種完整基因組的細(xì)胞核的活細(xì)胞是生物克具有包含物種完整基因組的細(xì)胞核的活細(xì)胞是生物克隆的重要條件之一隆的重要條件之一()。(3)一般血清中的抗體是一群識(shí)別不同抗原部位的抗體混一般血清中的抗體是一群識(shí)別不同抗原部位的抗體混合物，單抗則識(shí)別抗原分子的特殊部位，具專一性合物，單抗則識(shí)別抗原分子的特殊部位，具專一性()。 (4)細(xì)胞克隆的基本要求是：必須保證分離出來的細(xì)胞是一細(xì)胞克隆的基本要求是：必須保證分離出來的細(xì)胞是一個(gè)而不是多個(gè)個(gè)而不是多個(gè)()。(5)在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離，在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從

24、瓶壁上脫離，制成懸浮液制成懸浮液()。(6)二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的()。(7)核移植過程中供體理論上是提供細(xì)胞核，但操作過程中可核移植過程中供體理論上是提供細(xì)胞核，但操作過程中可以把整個(gè)體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中去以把整個(gè)體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中去()。答案答案(1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)思考與填空思考與填空仔仔細(xì)閱讀圖示及相關(guān)內(nèi)容辨析并細(xì)閱讀圖示及相關(guān)內(nèi)容辨析并填充其含義填充其含義從從A、B到到C的過程可以表示不同的的過程可以表示不同的含義含義(如圖所示如圖所示)：若若A、B為動(dòng)物細(xì)胞，則該過程表示為動(dòng)物細(xì)胞，則該過程表示細(xì)胞

25、融合細(xì)胞融合；若若B為精子，為精子，A為卵細(xì)胞，則該過程表示為卵細(xì)胞，則該過程表示受精受精；若若A為除去細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，為除去細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，B為細(xì)胞核，則該過程表為細(xì)胞核，則該過程表示示核移植核移植。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 解析解析取小鼠皮膚組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒；取小鼠皮膚組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒；通過胰蛋白酶消化皮膚組織可獲得皮膚細(xì)胞；丙過程為最初通過胰蛋白酶消化皮膚組織可獲得皮膚細(xì)胞；丙過程為最初的傳代培養(yǎng)，得到的細(xì)胞大多具有正常二倍體核型；來源于的傳代培養(yǎng)，得到的細(xì)胞大多具有正常二倍體核型；來源于多個(gè)細(xì)胞的非克隆培養(yǎng)所得到的細(xì)胞系具有異質(zhì)性，該實(shí)驗(yàn)

26、多個(gè)細(xì)胞的非克隆培養(yǎng)所得到的細(xì)胞系具有異質(zhì)性，該實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞屬于非克隆培養(yǎng)，丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)小鼠皮膚細(xì)胞屬于非克隆培養(yǎng)，丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性。性。答案答案C題后歸納題后歸納(1)動(dòng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因：幼齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖養(yǎng)的原因：幼齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖能力很強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。能力很強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶：第一次是在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶：第一次是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；第二次是將貼壁細(xì)胞從瓶將剪碎的組織分散成單

27、個(gè)細(xì)胞；第二次是將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。壁上分離下來，目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制細(xì)胞貼壁和接觸抑制懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培

28、養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。前的細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長、繁殖一定時(shí)間后，由于傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長、繁殖一定時(shí)間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭，影響細(xì)胞的生長，空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭，影響細(xì)胞的生長，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。代培養(yǎng)。2(2013海南卷，海南卷，31)單單純皰疹病毒純皰疹病毒型型(HSV1)可引起水可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV1的單克隆的單克隆抗體可快速檢測抗體可快速檢測HSV1?；卮鹣铝袉?/p>

29、題：回答下列問題：單克隆抗體的制備過程及選擇培養(yǎng)基的制備單克隆抗體的制備過程及選擇培養(yǎng)基的制備(1)在制備抗在制備抗HSV1的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的一種純化的HSV1蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠血清中抗_的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了_反應(yīng)，再從小鼠的反應(yīng)，再從小鼠的_中獲取中獲取B淋巴細(xì)胞。將該淋巴細(xì)胞。將該B淋巴淋巴細(xì)胞與小鼠的細(xì)胞與小鼠的_細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終細(xì)胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞

30、，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是_。(2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的注射到小鼠的_中使其增殖，再從中使其增殖，再從_中中提取、純化獲得。提取、純化獲得。(3)通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種通過上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV1蛋白，其原因是該抗體具有蛋白，其原因是該抗體具有_和和_等特性。等特性。解析解析(1)制備單克隆抗體時(shí)，需要先給小鼠注射特定抗原制備單克隆抗體時(shí)，需要先給小鼠注射特定抗原(HSV1蛋白蛋白)，當(dāng)小鼠血清中抗，當(dāng)小鼠血清中抗HSV1蛋白的抗體檢測呈蛋白的抗體檢測呈陽性時(shí)，就

31、可從小鼠脾臟中獲取陽性時(shí)，就可從小鼠脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將淋巴細(xì)胞，將B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)，最終獲得既能與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)，最終獲得既能無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞。無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(2)單克隆抗體的單克隆抗體的獲取有兩條途徑，一是從體外細(xì)胞培養(yǎng)液中提純獲得，二是獲取有兩條途徑，一是從體外細(xì)胞培養(yǎng)液中提純獲得，二是將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，再從腹水中提將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，再從腹水中提取、純化獲得。取、純化獲得。(3)單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、純單克隆抗體具有特異性強(qiáng)

32、、靈敏度高、純度高等特點(diǎn)。度高等特點(diǎn)。答案答案(1)HSV1蛋蛋白體液免疫脾臟白體液免疫脾臟(其他合理答案也可其他合理答案也可)骨髓瘤無限增殖且產(chǎn)生專一抗體骨髓瘤無限增殖且產(chǎn)生專一抗體(其他合理答案也可其他合理答案也可)(2)腹腔腹水腹腔腹水(3)純度高特異性強(qiáng)純度高特異性強(qiáng)(其他合理答案也可其他合理答案也可)題后歸納題后歸納(1)血血清抗體與單克隆抗體清抗體與單克隆抗體名稱名稱產(chǎn)生產(chǎn)生特點(diǎn)特點(diǎn)血清抗體血清抗體由漿細(xì)由漿細(xì)胞分泌胞分泌一般從血清中分離，一般從血清中分離，產(chǎn)量產(chǎn)量低、純度低、特異低、純度低、特異性差性差單克隆抗體單克隆抗體由雜交瘤由雜交瘤細(xì)胞分泌細(xì)胞分泌特異性強(qiáng)，靈敏特異性強(qiáng)，靈

33、敏度高，能大量制備度高，能大量制備(2)比較制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞比較制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞細(xì)胞細(xì)胞特點(diǎn)特點(diǎn)漿細(xì)胞漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞即能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下即能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖無限增殖(3)單克隆抗體制備過程中兩次篩選的比較單克隆抗體制備過程中兩次篩選的比較項(xiàng)目項(xiàng)目第一次篩選第一次篩選第二次篩選第二次篩選篩選篩選原因原因誘導(dǎo)融合后得到多種雜交誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞，另外還有未

34、融合的細(xì)胞細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞生其他抗體的細(xì)胞篩選篩選方法方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、細(xì)胞、“瘤瘤瘤瘤”細(xì)胞細(xì)胞)都會(huì)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞(“B瘤瘤”細(xì)胞細(xì)胞)才能生才能生長長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群抗體的細(xì)胞群篩選篩選目的目的得到雜交瘤細(xì)胞得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤得到能分泌所需抗體的