DB23∕T 3025-2021 唐棣組培快繁技術(shù)規(guī)程VIP

1、ICS 65.020.01CCS B 05DB 23黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)DB23/T 30252021唐棣組培快繁技術(shù)規(guī)程2021- 12 - 16 發(fā)布2022- 01 - 15 實(shí)施黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā) 布DB23/T 30252021前言本文件按照GB/T 1.12020標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。 本文件由黑龍江省林業(yè)和草原局提出。本文件起草單位：中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所農(nóng)業(yè)技術(shù)中心、哈爾濱集智農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司、黑龍江省森林草原防火預(yù)警監(jiān)測中心、黑龍江省林業(yè)科學(xué)研

2、究院、黑龍江省森林植物園、大 興安嶺林下經(jīng)濟(jì)科技開發(fā)有限公司。本文件主要起草人：趙恒田、臧丹丹、趙容健、宋維瑄、曲虹、劉淑華、馮雪婷、王寧、李金霞、 周玉遷、馬德順。庫七七 標(biāo)準(zhǔn)下載唐棣組培快繁技術(shù)規(guī)程1 范圍本文件規(guī)定了唐棣（Amelanchier sinica Xingye）組培快繁的術(shù)語和定義、組織培養(yǎng)環(huán)境、培養(yǎng)基配制、外植體制備、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗、移栽及生產(chǎn)檔案。本文件適用于唐棣組培快繁。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件， 僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的

3、修改單）適用于本文件。LY/T 1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程3 術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4 組織培養(yǎng)環(huán)境組織培養(yǎng)環(huán)境應(yīng)符合 LY/T 1882 的規(guī)定。5 培養(yǎng)基配制5.1 培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配方如下：a) 初代培養(yǎng)基：MS1.0 mg/L IBA1.5 mg/L 6-BA30 g/L 蔗糖固化劑，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制pH 5.6pH 5.8；b) 繼代芽分化增殖培養(yǎng)基：MS1.0 mg/L IBA2.5 mg/L 6-BA2.0 mg/L GA330 g/L 蔗糖固化劑，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制 pH 5.6pH 5.8；c) 生根培養(yǎng)基：MS0.1 mg/L NAA0.2g/L 活

4、性炭+30 g/L 蔗糖固化劑，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制 pH 5.6pH 5.8；5.2 培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基配制后10 h內(nèi)完成滅菌，采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105 MPa、溫度121 條件下滅菌20 min30 min。5.3 培養(yǎng)基保存1培養(yǎng)基應(yīng)保存于潔凈環(huán)境中，注意避光和防塵。滅菌后的培養(yǎng)基在常溫條件可保存7 d，2 4 條件下可保存14 d。6 外植體制備6.1 外植體選擇選擇生長發(fā)育良好、無病蟲害、無機(jī)械損傷的植株作為采樣母株，剪取帶芽的莖段作為外植體，采 集時間以晴天上午為宜。6.2 外植體消毒將外植體流水沖洗1 h2 h。在超凈工作臺上用70%酒精浸泡消毒8 s15 s。倒去酒精后，

5、用無菌水沖洗外植體3 次4 次。用0.1% HgCl2浸泡5 min8 min。無菌水沖洗4 次6 次。用無菌濾紙吸干外植體表面的水分。7 誘導(dǎo)培養(yǎng)將消毒后的外植體剪成 1.5 cm2 cm 帶有 1 個2 個芽的莖段，將剪好的莖段芽尖朝上插入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，深度 0.5 cm，置于光下培養(yǎng) 20 d25 d，光照周期 10 h/d12 h/d、光照強(qiáng)度 1500 Lux2000 Lux，培養(yǎng)溫度 22 28 ，空氣相對濕度 70%80%。8 增殖培養(yǎng)分化的芽接入增殖培養(yǎng)基中，光照培養(yǎng) 30 d35 d，光照周期 10 h/d12 h/d、光照強(qiáng)度 3000 Lux5000 Lux，培養(yǎng)溫度 2

6、2 28 ，空氣相對濕度 70%80%。待形成芽叢，分割新長出的不定芽，可按需求重復(fù)繼代。9 生根培養(yǎng)選取培養(yǎng)瓶中長度 1.5 cm3 cm 生長健壯的芽接種至生根培養(yǎng)基中，光照培養(yǎng) 60 d90 d，光照周期 10 h/d12 h/d、光照強(qiáng)度 3000 Lux5000 Lux，培養(yǎng)溫度 22 28 ，空氣相對濕度 70% 80%。10 煉苗10.1 煉瓶苗組培苗高度3 cm4 cm，基部長出3條、長2 cm3 cm的新根時，進(jìn)行煉苗。10.2 封瓶煉苗將培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到日光溫室中，散射光封口煉苗3 d7 d，溫度控制在20 25 。10.3 開瓶煉苗將培養(yǎng)瓶蓋旋松透氣，1 d 后揭去瓶蓋，煉苗 2 d4 d。11 移栽11.1 移栽準(zhǔn)備2將黑壤土、草碳土和細(xì)河沙過細(xì)篩，以 2：1：1 的體積比混勻后，裝入規(guī)格為 35 cm×50 cm×7 cm 的育苗盤中。澆透水。將苗盤浸入 0.5 g/L 的多菌靈溶液中消毒。11.2 移栽取出組培苗，用清水洗凈基部培養(yǎng)基，在散射光下移栽至育苗盤中。11.3 移栽后管理移栽初期，保持空氣濕度80%，適時澆水，保持基質(zhì)濕潤，