大孔吸附樹脂純化甘草黃酮類化合物的研究_圖文

1、安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，。（）：責(zé)任編輯侯美靈責(zé)任校對李巖大孔吸附樹脂純化甘草黃酮類化合物的研究易運(yùn)紅，吳功慶，曾富蘭，劉意（廣東藥學(xué)院中山校區(qū)，廣東中山）摘要【目的探討大孔吸附樹脂對甘草（）黃酮的純化奈件。方法采用種大孔吸附樹脂、和吸附甘草黃酮類化舍物，并考察了樣品濃度。洗脫劑乙醇濃度，洗脫劑乙醇體積等影響吸附性能的因素。結(jié)果型大孔吸附樹脂對甘草黃酮類化舍物有較大的吸附率和洗脫率，其用于純化甘草黃酮的最佳上樣濃度是，洗脫劑為體積分?jǐn)?shù)為的乙醇。純化后的黃酮粉黃酮含量，精制率。結(jié)論樹脂對黃酮類化合物有較好的吸附純化作用。可為甘草黃酮的純化提供參考依據(jù)。關(guān)鍵詞甘草（）；黃酮類化合物；大孔吸附樹脂中圖分類號(hào)文

2、獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼文章編號(hào)（）咖（，），】一，】沮啪：；）為豆科（甘草（主要試劑。蘆丁對照品（批號(hào)：），由中國藥品生物制品檢定所提供；型大孔吸附樹脂，由上海潤捷化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)；型大孔吸附樹脂、型大孔吸附樹脂和型大孔吸附樹脂，由滄州寶恩吸附材料科技有限公司生產(chǎn)；型大孔樹脂，由上海）甘草屬（）植物甘草（）、脹果甘草（）和光果甘草（）的干燥根和根莖。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為甘草有益氣補(bǔ)中、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥等功效呤】。另外，日本東北大學(xué)愛滋病研究所不久前發(fā)現(xiàn)甘草源聚生物科技有限公司生產(chǎn)；其余試劑均為市售分析純。主要儀器。型數(shù)控超聲波清洗器，由昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)；臺(tái)式連續(xù)投料粉碎機(jī)，由酸及

3、甘草甜素對愛滋病攜帶者具有預(yù)防發(fā)病作用，甘草又可增加機(jī)體免疫力，抑制病毒的增殖和擴(kuò)散，且無副作用。黃酮類化合物是其有效成分之一，很多藥理作用與黃酮成分有關(guān)。甘草的黃酮含量較高，據(jù)研究，甘草的現(xiàn)已分離得到多種黃酮類混合物、余種三萜皂苷類化合物及多糖成分?！?。甘草黃酮在食品工業(yè)中是理想的天然抗氧劑、防腐劑、具有良好的生物活性¨“。大孔吸附樹脂是一類不含交換基團(tuán)且有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附樹脂，具有良好的大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)和較大的比表面積?？梢酝ㄟ^物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機(jī)物，是世紀(jì)年代發(fā)展起來的新型有機(jī)高聚物吸附劑，已在環(huán)溫嶺林大機(jī)械有限公司生產(chǎn)；型紫外可見光分光光度計(jì)，由上海天美科學(xué)儀器

4、有限公司生產(chǎn)。方法甘草黃酮類化合物的提取。樣品脫脂。稱取一定量的過目篩的甘草粉末，用石油醚脫脂，再將粉末置于通風(fēng)廚中揮干溶劑。超聲提取甘草黃酮類化合物。精密稱取甘草粉末，按料液比：分次加入體積分?jǐn)?shù)為的乙醇，在下超聲提取次，提取時(shí)間分別為、和。合并提取液，置于保、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用【卜”。筆者通過研究大孔吸附樹脂對甘草黃酮類化合物的吸附及解吸附作用，為甘草黃酮的純化提供參考依據(jù)。材料與方法材料圓底燒瓶，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮成漿狀，再于烘箱中烘至恒重，得甘草粗黃酮粉。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密稱取蘆丁對照品，置于容量瓶中，加適量體積分?jǐn)?shù)為乙醇超聲溶解。放冷，定容，搖勻，即得蘆丁對照品液。精密

5、吸取以研究對象。甘草（上對照品液，至容量瓶中，分蒸餾水至，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的亞硝酸鈉搖勻，放置；加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的硝酸鋁，搖勻，放置；加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為氫氧化鈉，加水至刻度，搖勻，放置，以“”作為空），購于中智大藥房，產(chǎn)地為內(nèi)蒙古，經(jīng)廣東藥學(xué)院生藥教研室鑒定為豆科植物甘草（的根。）作者簡介易運(yùn)紅（一），女，廣東韶關(guān)人，實(shí)驗(yàn)師，碩士，從事中藥提取分離與分析研究。：。收稿日期白，紫外一可見分光光度法測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度（）為橫坐標(biāo)，繪制吸光度一濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。以“”為空白，用以上的“”標(biāo)準(zhǔn)對照品溶液進(jìn)行波卷期，易運(yùn)紅等大孔吸附樹脂純化甘草黃酮類化合物的研究長掃描，在波長范圍內(nèi)，得最大吸收波長為

6、洗脫條件的選擇。分別在處測定不同濃度下的吸光度值，上樣濃度。稱取一定量處理過的樹脂并以濃度為縱坐標(biāo)、吸光度值為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得蘆份，份，濕法上柱。精密量取一定體積的粗黃酮液分丁濃度與吸光度菇關(guān)系曲線的回歸方程式：別制成濃度是、和的黃酮供試液。砰。各上柱，在速率下吸附后，收集所有吸附后黃酮含量的測定。粗黃酮粉、精制黃酮粉、吸附前溶溶液于容量瓶中，顯色，測定其值，計(jì)算吸附后溶液液、吸附余液和洗脫液等樣品中的黃酮含量都是參照標(biāo)準(zhǔn)曲的黃酮濃度、吸附量及吸附率。線制作相同的方法測出吸光度，再由標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程算出洗脫劑乙醇濃度。室溫下，吸附相同量黃酮的黃酮含量。樹脂分別用體積分?jǐn)?shù)為，和大孔吸附樹脂

7、的預(yù)處理。稱取適量的樹脂，用體積的乙醇溶液進(jìn)行洗脫。分?jǐn)?shù)為的乙醇浸泡，充分膨脹后，除去上浮的樹脂洗脫劑乙醇用量。室溫下，吸附相同量黃酮的碎片和雜物，用濕法裝柱，繼續(xù)用體積分?jǐn)?shù)為的乙醇以樹脂分別用、和體積分?jǐn)?shù)為的乙醇適當(dāng)流速通過柱子，洗至水滴不渾濁（乙醇：水約為：），再溶液進(jìn)行解吸。用蒸餾水洗至無醇味；用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的浸泡，型大孔吸附樹脂對甘草黃酮的純化。用甘草再用蒸餾水洗至中性；然后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為的浸泡提取得到的粗黃酮粉配制黃酮濃度為的溶液，以，再用蒸餾水水洗至中性，抽濾至不滴水滴，備用。的速度上樣，再用的體積分?jǐn)?shù)為的乙醇大孔吸附樹脂的靜態(tài)吸附。取一定量預(yù)處理好的大洗脫，收集洗脫液定容，取測定黃酮

8、含量，并將其余溶孔吸附樹脂于具塞錐形瓶中，加入含有一定濃度黃酮的樣品液濃縮成漿狀，再于烘干得精制黃酮粉。液，蓋上塞子，于磁力攪拌器上攪拌，充分吸附后過濾，測定結(jié)果與分析濾液中黃酮濃度，計(jì)算室溫下不同大孔吸附樹脂對甘草黃酮大孔吸附樹脂的靜態(tài)吸附按照“”進(jìn)行操作，結(jié)的吸附量和吸附率。過濾后的樹脂再各加入一定濃度的乙果見表。由表可知，除一對甘草總黃醌的靜態(tài)吸附醇，浸泡攪拌一定時(shí)間后過濾，測定濾液中黃酮的濃度，計(jì)算室量較小外，其他種樹脂的吸附量均在（樹脂）左溫下不同大孔吸附樹脂的解吸率。計(jì)算公式如下：。（樹右，均可以用于甘草黃酮的吸附純化工藝。在靜態(tài)洗脫試驗(yàn)脂）（一）×；（）（）；（）中，型

9、樹脂吸附的黃酮容易洗脫，其解吸率為，（）×；其中為吸附量；為初始濃度；為平及的解吸率較高均在以上，而衡濃度；為加入樣品液體積；為樹脂質(zhì)量；層為吸附率；和一的解吸率較低。型樹脂表現(xiàn)出最佳的綜合為解吸率；。為洗脫液濃度；為洗脫液體積。性能，因而選用型樹脂純化甘草總黃酮。表種大孔樹脂靜態(tài)吸附一解吸試驗(yàn)結(jié)果山瞄岬咒面璐樹脂種類初始濃度，平衡濃度吸附量吸附率洗脫量噦解吸率型墜塑竺竺墮壁趔塑嬰堡旦！旦墜塑：璺璺巳竺盟垡塑璺翌竺墮望塑一洗脫條件的選擇薹墨三上樣濃度的考察。按照“”操作，結(jié)果見圖。盤由圖可知，一的吸附量隨著上樣濃度的增加而增加，量但濃度在一之間，吸附量增加不多；隨著上樣萋液濃度的增加

10、，吸附率增大，吸附率在上樣液濃度為腳璽時(shí)達(dá)到最大值，在上樣液濃度為影時(shí)吸附率窨反而比上樣液濃度為低。綜合考慮吸附量和吸附率，濃度太大和太小都不好，故選擇上樣液濃度為濃度跚暉為型樹脂的最佳上樣濃度。圖上樣液濃度對吸附量和吸附率的影響缸鋤咖咖刪蚰蛐砌鯽蜩蛐洗脫劑乙醇濃度的考察。按照“”操作，結(jié)果刪捌蛐蹦見圖。由圖可知，體積分?jǐn)?shù)為、和的乙醇洗脫效果都比較好，但是體積分?jǐn)?shù)為的乙醇的洗脫效果最好，可能是甘草的黃酮類化合物在體積分?jǐn)?shù)為的安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)生乙醇中的溶解度比較好?！啊辈僮鳎么贮S酮粉黃酮含量，精制黃酮粉黃酮含量為，精制率。結(jié)論言型大孔吸附樹脂對甘草黃酮類化合物有較大的吸附率和洗脫率，其用于純化甘草

11、黃酮的最佳上樣濃度是宙，洗脫劑為體積分?jǐn)?shù)為的乙醇。純化后特的黃酮粉黃酮含量為，精制率為。型鬟大孔吸附樹脂對甘草黃酮有較好的純化效果。參考文獻(xiàn)乙醇濃度國家藥典委員會(huì)中國藥典：部北京：化學(xué)工業(yè)出版社，：姚新生天然藥物化學(xué)版北京：人民衛(wèi)生出版社，：一圖洗脫劑乙醇濃度對洗脫率的影響，婀，一，（）：董，（，：，），（）：薹慕棒娟甘草化學(xué)成分的研究進(jìn)展【包頭醫(yī)學(xué)，（）：賈世山甘草地上部分的活性成分和資料利用中草藥，耋（）：季字彬，姜薇，范玉玲，等甘草黃酮的研究進(jìn)展中草藥，羹（）：劉曉風(fēng)，相炎紆，張百剛等甘草黃酮的提取丁藝研究安徽農(nóng)業(yè)，（）：謝松梅崔輝斐甘前駿的研究進(jìn)展食品與藥品，（）：洗脫液體積口王亞紅，

12、李戰(zhàn)英甘草酸的提取和精致法研究概況天津化工，（）：圖洗脫劑乙醇用量對洗脫率的影響工巧娥，沈金汕，十文佳。等甘草中甘草酸的微波萃取中草藥，（）：張繼，姚健，丁蘭，等甘草的利用研究草原與草坪，（）：洗脫劑乙醇用量的考察。按照“”操作，結(jié)果一羅艷玲，歐件益大孔榭脂在食品活性成分分離中的應(yīng)用食品與見圖。由圖可知，隨著洗脫劑體積分?jǐn)?shù)為的乙醇用機(jī)械，（）：一量的增加，洗脫率增加，洗脫劑從增加到，洗脫率增朱桂琴，引嘻龍，安國民大孔吸附樹脂在有機(jī)廢水處理中的麻用和研究進(jìn)展河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)皈，（）：加不多，故選擇洗脫劑用量為。蔡寅。張芳，顧覺奮大孔吸附樹脂在微生物制約分離純化應(yīng)用上的型大孔吸附樹脂對甘

13、草黃酮的純化按照最新進(jìn)展離產(chǎn)交換與吸附，（）：。卜卜一一”一卜卜卜卜（上接第頁）李靈芝，李海乎微量元素鋅對苦蕎種子萌發(fā)及生理特性的影響周小理宋鑫莉周一鳴，等苦蕎萌發(fā)期抗氧化活性變化規(guī)律的研究西南大學(xué)學(xué)報(bào)，【】【】；，（）：一食品上、，（）：一劉柏玲，張凱，聶恒林，等錒對蕎麥種子萌發(fā)及幼苗生長的影響劉忠松植物雄性不育機(jī)理的研究及應(yīng)用北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，東農(nóng)業(yè)科學(xué)，（）：李海平，李靈芝硫酸錳浸種對苦養(yǎng)種子活力及芽菜產(chǎn)量與品質(zhì)的影。，響兩北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，（）：鏟船批，（）：劉金福，李曉雁，孟蕊苦蕎發(fā)芽過程中促進(jìn)黃酮合成的因素初探食品工業(yè)科技，（）：，。李海平。李靈芝，任彩義，等溫度、光照對苫蕎種子萌發(fā)

14、、幼苗產(chǎn)量及品質(zhì)的影西南師范大學(xué)學(xué)報(bào)，（）：，：，）】，（）：（）：一嬲李曉雁，甄閏英，張瑞清，等真菌誘導(dǎo)對苦養(yǎng)萌發(fā)過程中黃酮合成、印一的影響大津衣學(xué)院學(xué)報(bào)，（）：，】，：，刪，（）：（）（弭），（），（）：，），（）：，研，王安虎，熊梅，瓦姚珍，等苫養(yǎng)菜的營養(yǎng)與療效作用分析中國食鶴踟物與營養(yǎng)，（）：一鎬），】成少寧萌發(fā)蕎麥抗氧愀及抗菌效果研究上海：上海師范大：姍一（，【，（）：周，避，成少寧周一鳥，等苦蕎芽中黃酮類化臺(tái)物的抑菌作用研究學(xué)。食品工業(yè)，（）： 大孔吸附樹脂純化甘草黃酮類化合物的研究作者：作者單位：刊名：英文刊名：年，卷(期：易運(yùn)紅， 吳功慶， 曾富蘭， 劉意廣東藥學(xué)院中山校區(qū),廣

15、東中山,528458安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES2011,39(14參考文獻(xiàn)(15條1. 蔡寅;張芳;顧覺奮 大孔吸附樹脂在微生物制約分離純化應(yīng)用上的最新進(jìn)展 2008(052. 朱桂琴;孫喜龍;安國民 大孔吸附樹脂在有機(jī)廢水處理中的應(yīng)用和研究進(jìn)展 2006(063. 羅艷玲;歐仕益 大孔樹脂在食品活性成分分離中的應(yīng)用 2005(054. 張繼;姚健;丁蘭 甘草的利用研究 2000(025. 王巧娥;沈金汕;于文佳 甘草中甘草酸的微波萃取 2003(056. 王亞紅;李戰(zhàn)英 甘草酸的提取和精致法研究慨況 2003(067. 謝松梅;崔輝斐 甘草酸的研究進(jìn)展 2006(088. 劉曉風(fēng);相炎紅;張百剛 甘草黃酮的提取工藝研究 2009(069. 季宇彬;姜薇;范玉玲 甘草黃酮的研究進(jìn)展 2004(0910. 賈世山 甘草地上部分的活性成分和資料利用 1994(0211. 慕桂娟 甘草化學(xué)成分的研究進(jìn)展