中草藥中鐵元素與總黃酮含量測定與藥效關系分析

1、中草藥中鐵元素與總黃酮含量測定與藥效關系分析              作者：韓麗琴 董順福 劉建華 【摘要】  目的通過對治療呼吸系統(tǒng)疾病中草藥中微量元素鐵和總黃酮的含量測定，分析微量元素鐵與總黃酮含量的相關性，以及清除自由基的構效關系。方法選取8種臨床上常用的治療呼吸系統(tǒng)疾病的中草藥，用原子吸收分光光度計測定其微量元素鐵的含量。采用醇提法提取藥物中總黃酮，用紫外分光光度法測定藥物中總黃酮的含量。結果治療呼吸系統(tǒng)疾病中草藥中含有豐富的微量元素鐵和黃酮類化

2、合物。結論中藥柴胡、金銀花、魚腥草、紫草中鐵元素的含量較高，這幾種藥物中總黃酮的含量也較高，總黃酮和鐵含量有一定的相關性。中藥中的黃酮類化合物和鐵可結合成金屬配合物，二者協(xié)同可以發(fā)揮抗氧化功能，清除體內自由基。測定結果為進一步探討草藥抗衰老、清除自由基的機理提供有用的數據。 【關鍵詞】  中藥 鐵 總黃酮Abstract：ObjectiveTo determine the contents of Fe and flavonoid in Chinese herbal Medicines, analyze the relationship between trace element Fe

3、 and the total flavonoid content, and study the scarenging effect on the free radicals. Methods8 kinds of Chinese herbal medicines commonly used to treat respiratory system diseases in clinic were selected. The atomic absorption spectrometry was used to determine the content of trace elements Fe. Al

4、cohol was used to extract the flavone in Scutellaria baicalensis Georgi,the content of flavone was determined with UV spectrometry. ResultsThe results showed that metal elements and flavone were rich in Chinese herbal medicines. ConclusionThere is certain relationship between flavonoid and the conte

5、nt of  Fe.Trace element Fe and flavonoids can combine to metals matches to develop the anti- oxidizes the function, the clearance free radicals inside the body. It provided a useful data for the further study  mechanism of the herb medicine in anti- decrepitude and the clearance free radic

6、als.Key words：Chinese herbal medicine;   Fe;   Total flavonoid    中藥中含有蛋白質、氨基酸類、脂類、糖類,有機酸、酚類、苷、單寧、揮發(fā)油以及微量元素和維生素等多種成分。通過對中藥藥理活性物質的深入探討，人們越來越認識到，微量元素與人體的健康和疾病有著重要的關系。中藥中的黃酮類化合物和金屬元素可結合成金屬配合物，二者協(xié)同可以發(fā)揮抗氧化功能。為了探討中藥中微量元素與總黃酮的關系，作者選用了常用的治療呼吸系統(tǒng)疾病的8種中草藥，并選擇了與之有關的有效成分總黃酮和微量元

7、素Fe，用原子吸收分光光度法測定其Fe元素的含量，并采用醇提法提取藥物中總黃酮，用紫外分光光度法測定藥物中總黃酮的含量，對這些微量元素與總黃酮的含量以及中藥療效的相關性進行了初步討論，為進一步研究有關微量元素的存在形態(tài)、藥理機制等提供參考。1  材料與方法1.1   材料魚腥草、甘草、五味子、何首烏、紫草、石菖蒲、半夏、葛根，均為市售，經鑒定均為正品。1.2  儀器與試劑HG-9600型原子吸收分光光度計（沈陽分析儀器廠），附80586微機和FAAS軟件。FA1104N型全自動分析天平。儀器工作條件：燈電流4.0 mA；波長279.5 nm； 狹縫0.2

8、 nm；負高壓400-V；空氣流量5.0 L?min-1 ；乙炔氣流量1.0 L?min-1。Fe標準儲備液均為國家二級標準溶液，濃度為500 mg/L（中國環(huán)境監(jiān)測總站）；使用液為20 mg/L，優(yōu)級純HNO3，HClO4均為優(yōu)級純，實驗用水為高純水。蘆丁標準品（F 20050930，國藥集團化學試劑有限公司）。1.3  樣品處理將樣品烘干研碎，充分混勻，烘干至恒重，準確稱取1.000 0 g，每種樣品平行取3份，置于25 ml錐形瓶中，加濃HNO3 10 ml，封口過夜；次日分別加入濃HNO3 10 ml，HClO4 5 ml，于電熱板上緩慢加熱，當剩下1ml左右時再加濃HNO3

9、 20 ml，HClO4 5 ml，繼續(xù)消化，至溶液呈無色透明近干為止。用3%硝酸稀釋溶解，轉移至25 ml容量瓶中，定容至刻度，混勻待測。1.4  含量測定選擇儀器最佳工作條件，分別測定樣品液中Fe的含量。標準系列為：Fe  0.00，0.10，0.20，0.40，0.80，1.60 mg/L，在本工作范圍內，元素線性關系良好，回歸方程C12.042A0.004，相關系數r0.996。1.5  乙醇提取藥物中總黃酮準確稱取中草藥10.0 g于索氏提取器中，120 ml乙醚回流4 h，至無色，換成70%乙醇提取10 h，過濾，減壓濃縮至20 ml左右，等體積石油醚

10、萃取3次，用30%乙醇定容至100 ml。1.6  標準曲線繪制準確稱取干燥至恒重的蘆丁標準品0.076 0 g，用30%乙醇溶解后，轉入250 ml容量瓶中，30%乙醇定容，搖勻備用。此溶液濃度為0.304 0 mg/ml。準確移取上述蘆丁溶液0.00，0.04，0.80，1.20，1.60和2.00 ml于25 ml錐形瓶中，加30%乙醇至12.5 ml，加入0.8 ml 5%NaNO2溶液，放置5 min，加0.8 ml 5% Al（NO3）3溶液，放置6 min，加5 ml 4%NaOH溶液，30%乙醇稀釋至刻線，放置10 min，于510 nm處測定吸收度，平行測定3次，取

11、平均值，繪制標準曲線?；貧w方程：A=9.232C+0.001，相關系數：r=0.999。1.7  總黃酮的紫外分光光度法測定準確量取提取液0.50 ml于25 ml錐形瓶中，加30%乙醇至12.5 ml，加入0.8 ml 5%NaNO2溶液，放置5 min，加0.8 ml 5% Al（NO3）3溶液，放置6 min，加5 ml 4%NaOH溶液，30%乙醇稀釋至刻線，放置10 min，于510 nm處測定吸收度A，平行測定3次，取平均值。 2  元素含量測定結果    藥物中Fe及總黃酮含量的測定結果見表1。表1  中藥中Fe及總黃酮

12、含量測定結果(略)    測定結果顯示，治療呼吸系統(tǒng)疾病中草藥中含有豐富的微量元素Fe，何首烏、五味子中Fe的含量較高，含量最高的是何首烏，F(xiàn)e含量最低的是葛根；總黃酮含量較高的有紫草，甘草。不同藥物中所含的總黃酮和Fe元素含量具有一定的差異，這與產地的土質和氣候等因素有關。藥材由于生長環(huán)境不同，產地不同，會影響到化學成分的含量，從而影響到藥效。五味子、紫草中Fe元素的含量較高，這幾種藥物中總黃酮的含量也較高。3  討論    微量元素指“生物體所需要，不可缺少的且存在量極少的元素，約占人體總重量0.05%以下”，目前發(fā)現(xiàn)五

13、十余種。隨著微量元素在醫(yī)藥學中的出現(xiàn)，元素醫(yī)學的引入，“中藥與微量元素”已形成一門邊緣學科，是當前生命科學研究領域的課題之一1。    鐵是人體必需的微量元素，分布于人體內的器官與組織中， Fe元素對生物體內的免疫系統(tǒng)起著重要的調節(jié)作用，成人日需鐵量為39 mg。治療呼吸系統(tǒng)疾病中藥的清熱解暑作用與其中較高的總黃酮和Fe含量有一定的相關性。Fe可能是與清熱作用關系密切的元素。黃酮類成分具有改變毛細血管的脆性、降脂、抗血栓、抗氧化、降糖、止咳、祛痰、抗菌等多種生理活性，是已知的強有力的抗氧化劑和抑制菌物質。    黃酮類屬于多酚羥基化合

14、物，因此在相鄰的羥基或羰基上的氧原子可以作為配位原子同金屬離子配合形成五元或六元的螯合物。兩個相鄰的酚羥基能以氧負離子的形式與金屬離子形成穩(wěn)定的五元環(huán)螯合物，鄰苯三酚結構中的第3個酚羥基雖然沒有參與配合，但可以促進另外兩個酚羥基的離解，從而促進配合物的形成與穩(wěn)定。黃酮類化合物可配伍誘導氧化的過渡金屬離子，如與Fe等金屬離子配伍，F(xiàn)e離子含有空軌道，可接納配體提供的電子對，從而形成配合物，使含這些離子的金屬酶活性受到抑制，這是黃酮化合物多酚類結構抗氧化活性的原因之一。    黃酮對金屬離子的鰲合作用是其抗油脂氧化的反應機理。黃酮具有清除人和動物體內自由基的作用。黃酮清除自由基的作用可能是通過自身供氫氧化實現(xiàn)的。鄰位羥基的存在可使一個羥基供氫氧化形成，并與鄰位的羥基形成分子氫鍵，使氧化后的物質更穩(wěn)定，從而中斷自由基引起的鏈反應。    Shahidi等2 認為黃酮的自由基清除活性與其所含的酚羥基數量和結構密切相關，與其形成穩(wěn)定自由基有關。中藥中的黃酮類化合物和微量元素均具有其重要的作用，但并不是獨立發(fā)揮其藥效作用，微量元素與黃酮可結合成金屬配合物，二者協(xié)