人參四國藥典比較

1、人參的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)比較（Chp 2010、USP34、 Ph.Eur7.0、 JP16 ）l 來源：Chp:本品為五加科植物人參 Panax ginseng C.A.Mey. 的干燥根和根莖。多于秋季采挖，洗凈經(jīng)曬干或烘干。栽培的俗稱“園參”；播種在山林野生狀態(tài)下自然生長的稱“林下山參”，習(xí)稱“籽?！?。USP：五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey的干燥根。Ph.Eur:五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey的干燥根。JP:五加科植物人參Panax ginseng C.A.Mey的干燥根。l 性狀：Chp:主根呈紡錘形或圓柱形，長315cm，直徑12cm。表面灰

2、黃色，上部或全體有疏淺斷續(xù)的粗橫紋及明顯的縱軸，下部有支根23條，并著生多數(shù)細長的須根，須根上常有不明顯的細小疣狀突出。根莖（蘆頭）長14cm，直徑0.31.5cm,多拘攣而彎曲，具不定根（艼）和稀疏的凹窩狀莖痕（蘆碗）。質(zhì)較硬，斷面淡黃白色，顯粉性，形成層環(huán)棕黃色，皮部有黃棕色的點狀樹脂道及放射狀裂隙。香氣特異，味微苦、甘?；蛑鞲嗯c根莖等長或較短，呈圓柱形、菱角形或人字形，長16cm。表面灰黃色，具縱皺紋，上部或中下部有環(huán)紋。支根多為23條，須根少而細長，清晰不亂，有較明顯的疣狀突起。根莖細長，少數(shù)粗短，中上部具稀疏或密集而深陷的莖痕。不定根較細，多下垂。USP：根呈梭形或圓柱形，伴有獨特

3、的芳香氣味，具分枝。通常110cm，有時可長達20cm。直徑可達2.5cm，冠部有一個或多個莖痕。表面淡黃色到金色，底部有根疤或細枝。下方具粗糙紋理。破碎的表面象牙白色，根莖有分泌管環(huán)。Ph.Eur：主根紡錘形或圓柱形，有時有分枝，可長達20cm，直徑約2.5cm。表面灰黃色，有莖痕，橫切面有橘紅色樹脂道及放射狀裂痕，支根多數(shù)。JP：本品細長呈圓柱形或紡錘形，通常有25根側(cè)根為分枝 長520cm,主根直徑0.53cm。表面呈淡黃褐色或淡灰褐色，斷面淡黃褐色，香氣特異，味先甘，后苦。l 鑒別Chp:(1)本品橫切面：木栓層為數(shù)列細胞。栓內(nèi)層窄。韌皮部外側(cè)有裂隙，內(nèi)側(cè)薄壁細胞排列較緊密，有樹脂道散

4、在，內(nèi)含黃色分泌物。形成層成環(huán)。木質(zhì)部射線寬廣，導(dǎo)管單個散在或數(shù)個相聚，斷續(xù)排列成放射狀，導(dǎo)管旁偶有非木化的纖維。薄壁細胞含草酸鈣簇晶。粉末淡黃白色。樹脂道碎片易見，含黃色塊狀分泌物。草酸鈣簇晶直徑2068m，棱角銳尖。木栓細胞表面觀類方形或多角形，壁細波狀彎曲。網(wǎng)紋導(dǎo)管和梯紋導(dǎo)管直徑1056m。淀粉粒甚多，單粒類球形、半圓形或不規(guī)則多角形，直徑420m，臍點點狀或裂縫狀；復(fù)粒由26分粒組成。(2)取本品粉末1g，加三氯甲烷40ml，加熱回流1小時，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加水0.5ml攪拌濕潤，加水飽和正丁醇10ml，超聲處理30分鐘，吸取上清液加3倍量氨試液，搖勻，放置分層，取上層液

5、蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參皂苷Rb1，對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rf對照品及人參皂苷Rg1對照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄B)試驗，吸取上述三種溶液各12l，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15：40：22：10)10以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10硫酸乙醇溶液，在105：加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)位置上，分別顯相同顏色的斑點或熒光斑

6、點。USP:(1)根的橫切面：木栓層為多層薄壁細胞。次生韌皮部的顯著特點是有空腔，豐富的淀粉粒貯藏在薄壁細胞中，少量篩管分子和分泌細胞。木質(zhì)部特點是含豐富的淀粉粒，具導(dǎo)管和管胞及草酸鈣結(jié)晶。（2）A：TLC法。對照，熊果苷和七葉素；溶劑，甲醇；濃度5mg/mL供試液：取人參粉末1.0g,加甲醇-水（7:3）混合溶液10.0mL回流提取，稀釋至10.0mL，即得。硅膠G板，展開劑正丁醇-水-醋酸乙酯（10:5:2:5),上層。顯色，對甲氧基苯甲醇-冰醋酸溶液105110加熱10min。檢視上端三分之一位置處為熊果苷的棕色帶，下端三分之一位置處為七葉素的灰色帶。在兩個對照色帶之間，供試品溶液中可見

7、紫灰色的人參Rg1色帶在上端，而深深Re在中間，紫灰色的人參Rb1色帶盒灰色的七葉素具相同的Rf值。在人參皂苷Rb1和人參皂苷Re色帶之間，另有微弱的色帶。在接近原點位置處有一條棕色的人參皂苷Rc色帶，其他可見色帶在下面的三分之一范圍內(nèi)。B：供試液中人參皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rc和Rd在薄層圖譜中峰的滯留時間和標(biāo)準(zhǔn)液相近時，可以比較人參皂苷Rb1和Rg1含量。人參皂苷Rb2的峰面積與人參皂苷Rb1峰面積的比值不小于0.4。Ph.Eur：（1）顯微鑒別法。大量的薄壁細胞，樹脂道，淡黃棕色的樹脂，非木質(zhì)化管胞，部分木質(zhì)化螺旋狀或網(wǎng)狀管道，草酸鈣簇晶，大量淀粉粒，單粒或23個復(fù)合粒，直徑1

8、10m。(2)TLC法。對照品七葉素和熊果苷。供試液取1.0g，加70甲醇10mL回流15min，放冷，濾過，濾液即得。硅膠G板；展開劑醋酸乙酯-水-正丁醇（25:50:100），上層。檢視，茴香醛試劑液，加熱。結(jié)果，在對照品的色譜圖中，上面三分之一位置處有一條熊果苷的棕色帶，在下面 三分之一位置處有一條七葉素的灰色帶。在供試液的色譜圖中，在兩條對照色帶之間略低于熊果苷的棕色帶有兩條灰紫色的色帶，上面一條是人參皂苷Rg1，下面的一條是人參皂苷Re。另外一條和七葉素位置相同的紫灰色帶是人參皂苷Rb1。在人參皂苷Rb1和人參皂苷Re色帶之間，另有微弱的色帶。在接近原點位置處有一條棕色的人參皂苷Rc

9、色帶，其他可見色帶在下面的三分之一范圍內(nèi)。JP：（1）本品很切面滴加碘試液，顯暗青色。(2)TLC法。對照品人參皂苷Rg1。供試液：取2.0g，加水10ml以及1-丁醇10ml，振搖15min，用離心機分離，取上清液作為樣品溶液。另外，用1mL的甲醇溶解1mg人參皂苷Rg1作為薄層色譜的標(biāo)準(zhǔn)液。量取5L樣品液和2L標(biāo)準(zhǔn)液用來在硅膠板上點樣。展開劑：醋酸乙酯-甲醇-水（14:5:4），展距為10cm，晾干薄層板。將香草醇硫酸乙醇TS均勻得噴灑在薄層板上，105加熱10min：在樣品的幾個點中有一個點和標(biāo)準(zhǔn)品的點有一樣的顏色和比移值。l 檢查Chp:(1)水分不得過12.0 (2)總灰分不得過5.

10、0USP：（1）微生物限度總菌數(shù)不得超過104/g，霉菌及酵母菌總數(shù)不得超過100/g。不得檢出沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌。（2） 干燥失重取1.0g，105干燥1h，失重不得超過12.0%（3） 雜質(zhì)不得超過2.0%（4） 總灰分不得超過8.0%（5） 酸不溶灰分不得超過1.0%（6） 醇融提取物不得低于14%（7） 農(nóng)藥殘渣應(yīng)符合規(guī)定（8） 重金屬20g/gPh.Eur：（1）西洋參含量測定項下的供試品溶液液相色譜圖中有人參皂苷Rf色譜峰，如果是夕陽少年，則沒有該色譜峰。（2） 干燥失重取1.000g粉末在105干燥，失重不得超過10.0%（3） 總灰分不得超過7.0%（4） 酸不

11、溶灰分不得超過1.0%JP：（1）重金屬15ppm以下（2） 砷鹽2ppm以下（3） 異物不得超過2.0%（4） 總BHC及DDT均不得超過0.2ppm（5） 干燥失重不得超過4.2%（6） 浸出物稀乙醇浸出物14.0%以上l 含量測定Chp：照高效液相色譜法測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅酸為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為203nm。理論板數(shù)按人參皂苷Rg1，峰計算應(yīng)不低于6000。 時間（分鐘） 流動相A（%） 流動相B（%） 035 19813555 192981715570 2971701002940 7160對照品溶液

12、的制備精密稱取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Re對照品及人參皂苷Rb1對照品，加甲醇制成每1m1各含0.2mg的混合溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取本品粉末(過四號篩)約1g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加熱回流3小時，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，連同濾紙筒移入100ml錐形瓶中，精密加水飽和正丁醇50ml，密塞，放置過夜，超聲處理(功率250W，頻率50kHz)30分鐘，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液25ml，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液10l與供試品溶液1020l，注入液相色譜

13、儀，測定，即得。本品按干燥品計算，含人參皂苷Rg1(C42H72014)和人參皂苷Re(C48H82018)的總量不得少于0.30，人參皂苷Rb1，(C54H92023)不得少于0.20。USP:對照品溶液的制備精確稱取一定量人參提取物粉末，約含人參皂苷Rg1 2mg,溶解于10.0mL混合水-酒精（6:4）溶液中。供試品溶液的制備將100g人參研成粉末，精確稱取1.0g到一個100mL圓底燒瓶中，連接上回流冷凝器。加入50mL混合水-酒精（6:4）溶液和少量沸石，熱水浴回流1h，冷卻，過濾。用20mL混合水-酒精（6:4）溶液清洗燒瓶和剩余殘渣，再次過濾。兩次濾液合并，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在50下蒸

14、發(fā)至干。用10.0mL混合水-酒精（6:4）溶解剩余物。測定分別注射等量（約10L）對照品溶液和供試品溶液進色譜儀，記錄色譜圖，并測量重要峰的面積。用下列公式計算出人參中皂苷Rb1和Rg1含量的百分比。1000(C/W)(rU / rS)式中C為對照品溶液中人參皂苷Rb1或Rg1的濃度，單位mg/mL;W為制備供試品溶液時人參的質(zhì)量，單位mg;ru和rs分別是供試液和對照液中人參皂苷Rb1或Rg1峰值。Ph.Eur:高效液相色譜法測定人參皂苷Rg1和Rb1含量，氨基硅烷鍵合硅膠柱。流動相A乙腈；B水 時間（min） 流動相A（V/V） 流動相B（V/V） 0 - 8 80 20 8 - 40

15、80 60 20 4040 - 45 60 40 40 60 45 - 47 40 0 60 10047 - 52 0 10052 - 55 0 80 100 20 流速1mL/min;檢測波長203nm；對照品液，人參皂苷Rb10.3mg/mL，人參皂苷Rg10.3mg/mL和人參皂苷Rf 0.3mg/mL。供試液，取粉末1.00g，250mL圓底燒瓶中，50%甲醇70mL回流1h，放冷，離心，收集上層液，殘渣再提取一次，合并上層溶液，減壓蒸干（溫度低于60）。殘渣用20mL(20mL乙腈和80mL水混合) 溶液溶解，然后取2.0mL用上述混合溶液稀釋至10.0mL。用標(biāo)稱孔徑0.45m的膜

16、濾器過濾。測定法，對照品溶液20L，供試品溶液 20L，注入液相色譜儀，測定。JP：（1）人參皂苷Rg1精確稱量1.0g人參粉末，放入帶玻璃塞的離心管中，加30mL稀釋甲醇（3 in 5),振搖15min，離心，分離上清液。用15mL稀釋甲醇（3 in 5）重復(fù)上述操作。合并上層液，加稀釋甲醇（3 in 5)定容至50mL。用移液管移取10mL，加入稀氫氧化鈉試液3mL，靜置30min，加0.1mol/mL的鹽酸試液3mL，并定容至20mL,即得樣品溶液。另外，精確稱取10mg人參皂苷Rg1 RS，用稀甲醇（3 in 5）溶解，并定容至100mL，作為對照品溶液。樣品溶液和對照品溶液分別精確量

17、取10L，注入色譜儀，確定Rg1的峰面積AT和AS。人參皂苷Rg1(C42H72O14)的含量（mg）= MS x AT/ASMS：無水人參皂苷Rg1 RS的質(zhì)量（mg）操作條件：檢波器，紫外分光光度計，波長203nm；柱溫，30，恒溫；流動相：水-乙腈（4:1）混合溶液；流速，調(diào)整至人參皂苷Rg1滯留時間約25min 。（2） 人參皂苷Rb1用（1）中的樣品溶液。另外，精確稱量10mg人參皂苷Rb1 RS，用稀甲醇（3 in 5）溶解，并定容至100mL，作為對照品溶液。對照品溶液分別精確量取10L，注入色譜儀，確定Rb1的峰面積AT和AS。 人參皂苷Rb（C54H92O23）（mg）= MS x AT/ASMS：無水人參皂苷Rb1 RS的質(zhì)量（mg）操作條件：檢波器，紫外分光光度計，波長203nm；柱溫，30，恒溫；流動相：水-乙腈（7:3）混合溶液；流速，調(diào)整至人參皂苷Rb1滯留時間約為20min。l 評述四國藥典收載人參的植物基源相同， 除日本藥局方外，均有顯微鑒別項。薄層鑒別中，中國藥典是用人參皂苷Rg1，Rb1，Re和人參對照藥材；美國藥典和歐洲藥典方法相同，采用