生物分離與純化技術

1、生生 物物 分分 離離 與與 純純 化化 技技 術術主講：魏秋紅主講：魏秋紅 電話：電話箱：郵箱：參考書參考書n生物分離與純化技術生物分離與純化技術 科學出版社科學出版社 辛秀蘭編辛秀蘭編n生物工業(yè)下游技術生物工業(yè)下游技術 中國輕工出版社中國輕工出版社 毛忠貴編毛忠貴編n生化分離工程生化分離工程 化學工業(yè)出版社化學工業(yè)出版社 嚴?？祰老？?編著編著n生物分離原理與技術生物分離原理與技術 化學工業(yè)出版社化學工業(yè)出版社 歐陽平歐陽平凱凱 編著編著n生物分離工程生物分離工程 化學工業(yè)出版社化學工業(yè)出版社 孫彥編孫彥編 第一篇第一篇 技術理論篇技術理論篇o 第一章第一章 緒論

2、緒論o第二章第二章 預處理技術預處理技術o第三章第三章 固相析出分離技術固相析出分離技術o第四章第四章 色譜分離技術色譜分離技術o第五章第五章 過濾與膜分離技術過濾與膜分離技術o第六章第六章 萃取技術萃取技術o第七章第七章 濃縮干燥技術濃縮干燥技術n第三節(jié)第三節(jié) 生物分離純化技術的發(fā)展生物分離純化技術的發(fā)展 第一章第一章 緒緒 論論n 第一節(jié)第一節(jié) 生化分離純化的概念和原理生化分離純化的概念和原理n 第二節(jié)第二節(jié) 分離純化策略分離純化策略 指從發(fā)酵液、動植物細胞培養(yǎng)液、指從發(fā)酵液、動植物細胞培養(yǎng)液、酶反應液或動植物組織細胞與體液酶反應液或動植物組織細胞與體液等中分離、純化生物產(chǎn)品的過程。等中分

3、離、純化生物產(chǎn)品的過程。第一節(jié)第一節(jié) 生物分離純化生物分離純化 的概念與原理的概念與原理生物分離純化概念：生物分離純化概念：（8）動物器官或組織制）動物器官或組織制劑劑一、生物物質(zhì)及來源一、生物物質(zhì)及來源1.生物物質(zhì)生物物質(zhì)：（1）氨基酸及其衍生物類）氨基酸及其衍生物類（2）活性多肽類）活性多肽類（3）蛋白質(zhì)類）蛋白質(zhì)類（4） 酶類酶類（5）核酸及其降解物類）核酸及其降解物類（6）糖類）糖類（7） 脂質(zhì)類脂質(zhì)類（9）小動物制）小動物制劑劑（10）菌體制劑）菌體制劑一、生物物質(zhì)及來源一、生物物質(zhì)及來源2.生物物質(zhì)來源生物物質(zhì)來源：（1）動物器官與組織）動物器官與組織（2）植物器官與組織）植物器官

4、與組織（3）微生物及其代謝產(chǎn)物）微生物及其代謝產(chǎn)物（4） 細胞培養(yǎng)產(chǎn)物細胞培養(yǎng)產(chǎn)物（5）血液、分泌物及其代謝物）血液、分泌物及其代謝物下游下游：生物產(chǎn)品的回收：生物產(chǎn)品的回收生物分離與純生物分離與純化技術，化技術，主要包括離心技術、細胞破主要包括離心技術、細胞破碎技術、萃取技術、固相析出技術、碎技術、萃取技術、固相析出技術、色譜技術和膜分離技術等。色譜技術和膜分離技術等。 二、分離純化技術二、分離純化技術生物技術生物技術上游：上游：基因工程、細胞工程、酶工程、基因工程、細胞工程、酶工程、 發(fā)酵工程及組織工程、發(fā)酵工程及組織工程、 三、分離純化基本原理三、分離純化基本原理生物材料生物材料生物材料

5、生物材料上游加工上游加工非均相混合物非均相混合物均相混合物均相混合物分離純化的本質(zhì)：分離純化的本質(zhì)：有效識別有效識別混合物中不同組分間物理、化學混合物中不同組分間物理、化學和生物學性質(zhì)的差別和生物學性質(zhì)的差別，利用能夠識別這些，利用能夠識別這些差別的分離介質(zhì)或擴大這些差別的分離設差別的分離介質(zhì)或擴大這些差別的分離設備來實現(xiàn)組分間的分離或目標產(chǎn)物的純化。備來實現(xiàn)組分間的分離或目標產(chǎn)物的純化。選擇依據(jù)選擇依據(jù)1.物理性質(zhì)物理性質(zhì)o (1)分子形狀、大小分子形狀、大小 包括密度、幾包括密度、幾何尺寸和形狀。何尺寸和形狀。o (2)溶解度、揮發(fā)性溶解度、揮發(fā)性 包括密度、幾包括密度、幾何尺寸和形狀。何

6、尺寸和形狀。o (3)分子極性即電荷性質(zhì)分子極性即電荷性質(zhì) 包括溶質(zhì)包括溶質(zhì)得電荷特性、電荷分布、等電點等。得電荷特性、電荷分布、等電點等。o (4)流動性流動性 包括黏度、在特定溶液包括黏度、在特定溶液中的擴散系數(shù)等。中的擴散系數(shù)等。2.化學性質(zhì)化學性質(zhì)o (1)分子間的相互作用分子間的相互作用 包括分子間包括分子間的范德華力、氫鍵、離子間的靜電引的范德華力、氫鍵、離子間的靜電引力及疏水作用大小等。力及疏水作用大小等。o (2)分子識別分子識別 即通過目的產(chǎn)物與某即通過目的產(chǎn)物與某些分離純化介質(zhì)上的活性中心、基團些分離純化介質(zhì)上的活性中心、基團進行的專一性結合。進行的專一性結合。o (3)化

7、學反應化學反應 pH6.3 加酸加酸 pH2.4谷氨酸鋅離子谷氨酸鋅離子 谷氨酸鋅沉淀谷氨酸鋅沉淀 溶液溶液 谷氨酸結晶谷氨酸結晶3.生物學性質(zhì)生物學性質(zhì)o 主要特征是生物大分子之間的分子識主要特征是生物大分子之間的分子識別和特異性結合。別和特異性結合。表表1-1 1-1 生物分離純化基本原理生物分離純化基本原理原理原理分離純化技術分離純化技術產(chǎn)物舉例產(chǎn)物舉例分子大分子大小、形小、形狀狀離心離心超濾超濾微濾微濾透析透析電滲析電滲析凝膠色譜凝膠色譜菌體、細胞碎片、蛋白質(zhì)菌體、細胞碎片、蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)、多醣、抗生素蛋白質(zhì)、多醣、抗生素菌體、細胞菌體、細胞尿素、鹽、蛋白質(zhì)尿素、鹽、蛋白質(zhì)氨基酸、有機酸

8、、鹽、水氨基酸、有機酸、鹽、水鹽、分子大小不同的蛋白質(zhì)鹽、分子大小不同的蛋白質(zhì)溶解度、溶解度、揮發(fā)性揮發(fā)性萃取萃取鹽析鹽析結晶結晶蒸餾蒸餾等電點沉淀等電點沉淀有機溶劑沉淀有機溶劑沉淀氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)、香料氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)、香料蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)乙醇、香精乙醇、香精蛋白質(zhì)、氨基酸蛋白質(zhì)、氨基酸蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸表表1-1 1-1 生物分離純化基本原理生物分離純化基本原理原理原理分離純化技術分離純化技術產(chǎn)物舉例產(chǎn)物舉例帶電帶電性性電泳電泳離子交換色譜離子交換色譜等電點沉淀等電點沉淀蛋白質(zhì)、核酸、氨基

9、酸蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)、核酸氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、氨基酸蛋白質(zhì)、氨基酸化學化學性質(zhì)性質(zhì)電滲析電滲析 離子交換色譜離子交換色譜 親和色譜親和色譜氨基酸、有機酸、鹽、水氨基酸、有機酸、鹽、水氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)、核酸氨基酸、有機酸、抗生素、蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸生物生物功能功能特性特性親和色譜親和色譜疏水色譜疏水色譜蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸蛋白質(zhì)、核酸 第二節(jié)第二節(jié) 分離純化策略分離純化策略n1.環(huán)境復雜、分離純化困難環(huán)境復雜、分離純化困難一、生物分離純化技術的特點一、生物分離純化技術的特點n2.含量低、工藝復

10、雜含量低、工藝復雜n3.穩(wěn)定性差、操縱要求嚴格穩(wěn)定性差、操縱要求嚴格n4.目標產(chǎn)物最終的質(zhì)量要求很高目標產(chǎn)物最終的質(zhì)量要求很高n5.終極產(chǎn)品純度的均一性與化學分離上終極產(chǎn)品純度的均一性與化學分離上純度的概念并不完全相同純度的概念并不完全相同二、二、 分離純化方法選擇的原則分離純化方法選擇的原則n1) 技術路線、工藝流程盡量簡單化；技術路線、工藝流程盡量簡單化；n2) 盡可能采用低成本的材料與設備；盡可能采用低成本的材料與設備；n3) 將完整工藝流程劃分為不同的工序；將完整工藝流程劃分為不同的工序；n4) 注意時效性；注意時效性；n5) 采用成熟技術和可靠設備；采用成熟技術和可靠設備；n6) 準

11、備好書面標準操作程序等技術文件；準備好書面標準操作程序等技術文件；n7) 檢測純化過程中產(chǎn)物產(chǎn)量和活性檢測純化過程中產(chǎn)物產(chǎn)量和活性三、分離純化的原材料選擇與成品保存三、分離純化的原材料選擇與成品保存o 1.原材料的選擇原材料的選擇(1)來源來源(2)與目標產(chǎn)物含量相關的因素與目標產(chǎn)物含量相關的因素合適的生物品種合適的生物品種 合適的組織器官合適的組織器官生物材料的種屬特異性生物材料的種屬特異性合適的生長發(fā)育階段合適的生長發(fā)育階段合適的生理狀態(tài)合適的生理狀態(tài)三、分離純化的原材料選擇與成品保存三、分離純化的原材料選擇與成品保存o2.天然生物材料的采后處理天然生物材料的采后處理天然生物材料需要處理的

12、原因天然生物材料需要處理的原因細胞自溶導致目標產(chǎn)物失活或降解；細胞自溶導致目標產(chǎn)物失活或降解； 易受微生物污染導致目標產(chǎn)物失活或降解。易受微生物污染導致目標產(chǎn)物失活或降解。易受光照易受光照 、氧氣等的作用導致其分子結構改變。、氧氣等的作用導致其分子結構改變。一般植物材料需進行適當?shù)母稍锖笤俦４嬉话阒参锊牧闲柽M行適當?shù)母稍锖笤俦４鎰游锊牧闲杞?jīng)清洗后速凍、有機溶劑脫水動物材料需經(jīng)清洗后速凍、有機溶劑脫水或制成丙酮粉在低溫下保存或制成丙酮粉在低溫下保存三、分離純化的原材料選擇與成品保存三、分離純化的原材料選擇與成品保存o3.成品的保存成品的保存(1)影響生物產(chǎn)品保存的主要因素影響生物產(chǎn)品保存的主要因

13、素空氣空氣 溫度溫度水分水分 光線光線pH保存期保存期避空氣避空氣低溫低溫避光避光緩沖液緩沖液三、分離純化的原材料選擇與成品保存三、分離純化的原材料選擇與成品保存3.成品的保存成品的保存(2)蛋白質(zhì)和酶制品的保存方法蛋白質(zhì)和酶制品的保存方法低溫下保存低溫下保存 制成干粉或結晶保存制成干粉或結晶保存保存時添加保護劑保存時添加保護劑 a.惰性的生化或有機化合物惰性的生化或有機化合物b.中性鹽中性鹽c.巰基試劑巰基試劑-205 ， -70最好。最好。MgSO4 、 NaCl 、(NH4)2SO4等等糖類、脂肪酸、牛血清白蛋白、氨基酸、多元醇等糖類、脂肪酸、牛血清白蛋白、氨基酸、多元醇等半胱氨酸或巰基

14、乙醇半胱氨酸或巰基乙醇四、分離純化的準備工作四、分離純化的準備工作o1.軟件材料的準備軟件材料的準備(1)生產(chǎn)文件的準備生產(chǎn)文件的準備(2)生產(chǎn)人員的培訓生產(chǎn)人員的培訓o2.硬件材料的準備硬件材料的準備(1)生產(chǎn)設施、儀器設備與器皿等生產(chǎn)設施、儀器設備與器皿等(2)工藝處理液的準備工藝處理液的準備* * 五、分離純化的基本步驟五、分離純化的基本步驟發(fā)酵液的預處理發(fā)酵液的預處理初步純化初步純化(分離提取分離提取)高度純化（精制）高度純化（精制）成品加工成品加工固液分離固液分離生物分離與純化的一般工藝過程生物分離與純化的一般工藝過程 發(fā)酵液發(fā)酵液預處理預處理細胞分離細胞分離細胞破碎細胞破碎細胞碎片

15、分離細胞碎片分離初步純化初步純化胞胞外外產(chǎn)產(chǎn)物物高度純化高度純化成品加工成品加工發(fā)酵液的發(fā)酵液的預處理與預處理與固液分離固液分離生物分離與純化的一般工藝過程生物分離與純化的一般工藝過程六、分離純化技術的綜合運用與工藝放大六、分離純化技術的綜合運用與工藝放大一種合格產(chǎn)品要運用多種分離設備和技術進一種合格產(chǎn)品要運用多種分離設備和技術進行純化，原因為：行純化，原因為：在每個工序中根據(jù)現(xiàn)有設備條件和目標產(chǎn)在每個工序中根據(jù)現(xiàn)有設備條件和目標產(chǎn)物的性質(zhì)、規(guī)格、用途不同可采用多種分離物的性質(zhì)、規(guī)格、用途不同可采用多種分離純化手段；純化手段； 每種分離純化操作本身各項影響加工效每種分離純化操作本身各項影響加工

16、效果的因素都直接影響分離純化的效果和成本；果的因素都直接影響分離純化的效果和成本；各工序間具有復雜的相互影響作用。各工序間具有復雜的相互影響作用。 必須保證上一工序工藝處理條件和產(chǎn)物的必須保證上一工序工藝處理條件和產(chǎn)物的質(zhì)量適于下一工序的加工需要質(zhì)量適于下一工序的加工需要 六、分離純化技術的綜合運用與工藝放大六、分離純化技術的綜合運用與工藝放大1.建立在制品、半制品成品上的檢測方法建立在制品、半制品成品上的檢測方法是工藝優(yōu)化的前提是工藝優(yōu)化的前提在線檢測在線檢測 、數(shù)據(jù)檢測和放行檢測、數(shù)據(jù)檢測和放行檢測 經(jīng)濟性考慮經(jīng)濟性考慮收率和純度之間的平衡收率和純度之間的平衡 結合對產(chǎn)物質(zhì)量的要求、加工成

17、本、技術上結合對產(chǎn)物質(zhì)量的要求、加工成本、技術上的可行性和可靠性、價值以及市場需求等找的可行性和可靠性、價值以及市場需求等找出產(chǎn)物純度、生物活性和產(chǎn)量間的平衡點出產(chǎn)物純度、生物活性和產(chǎn)量間的平衡點 2.明確優(yōu)化工藝的評判標準，處理好收率、明確優(yōu)化工藝的評判標準，處理好收率、純度、經(jīng)濟性之間的平衡純度、經(jīng)濟性之間的平衡六、分離純化技術的綜合運用與工藝放大六、分離純化技術的綜合運用與工藝放大 經(jīng)濟性考慮經(jīng)濟性考慮收率和純度之間的平衡收率和純度之間的平衡 2.明確優(yōu)化工藝的評判標準，處理好收率、明確優(yōu)化工藝的評判標準，處理好收率、純度、經(jīng)濟性之間的平衡純度、經(jīng)濟性之間的平衡應將處理體積大、加工成本低

18、的工序盡量應將處理體積大、加工成本低的工序盡量前置，而價格昂貴、精制工序易放在工藝前置，而價格昂貴、精制工序易放在工藝流程的后段。隨產(chǎn)物純度的提高，對工藝流程的后段。隨產(chǎn)物純度的提高，對工藝流程下游加工所用的設備、試劑的要求亦流程下游加工所用的設備、試劑的要求亦提高。提高。七、分離純化的中試放大七、分離純化的中試放大1.中試放大具備的條件中試放大具備的條件2.中試放大中力求解決及注意的問題中試放大中力求解決及注意的問題3.中試放大的方法中試放大的方法4.中試放大的關鍵環(huán)節(jié)中試放大的關鍵環(huán)節(jié)1.中試放大具備的條件中試放大具備的條件確定并系統(tǒng)鑒定了生物材料的資源確定并系統(tǒng)鑒定了生物材料的資源 目標

19、產(chǎn)物的收率穩(wěn)定即重復性好，質(zhì)量可靠目標產(chǎn)物的收率穩(wěn)定即重復性好，質(zhì)量可靠工藝路線和操作條件已經(jīng)確定，并且已經(jīng)建工藝路線和操作條件已經(jīng)確定，并且已經(jīng)建立了原料、半制品、產(chǎn)品的的分析檢測方法立了原料、半制品、產(chǎn)品的的分析檢測方法 已經(jīng)進行過物料平衡預算，并且建立了已經(jīng)進行過物料平衡預算，并且建立了“三三廢廢”的處理和監(jiān)測方法的處理和監(jiān)測方法確立了中試規(guī)模及所需原材料的規(guī)格和數(shù)量確立了中試規(guī)模及所需原材料的規(guī)格和數(shù)量建立了教完善的安全生產(chǎn)預警措施和方法建立了教完善的安全生產(chǎn)預警措施和方法(1)進一步確定生產(chǎn)中所需原輔料的規(guī)格和來源進一步確定生產(chǎn)中所需原輔料的規(guī)格和來源中試應采用容易獲得成本較低的原輔

20、材料中試應采用容易獲得成本較低的原輔材料許可范圍和最適工藝條件許可范圍和最適工藝條件2.中試放大中力求解決及注意的問題中試放大中力求解決及注意的問題(2)進一步確定生產(chǎn)設備的選型與設備材料的質(zhì)量進一步確定生產(chǎn)設備的選型與設備材料的質(zhì)量(3)進一步確定分離純化操作的條件限度進一步確定分離純化操作的條件限度(4)研究和建立原輔材料、中間體及產(chǎn)品質(zhì)量的研究和建立原輔材料、中間體及產(chǎn)品質(zhì)量的分析方法和手段分析方法和手段經(jīng)驗放大法經(jīng)驗放大法3.中試放大的方法中試放大的方法相似放大法相似放大法數(shù)學模型放大法數(shù)學模型放大法步步為營法步步為營法一竿子插到底法一竿子插到底法中試放大中試放大的程序的程序4.中試放

21、大的關鍵環(huán)節(jié)中試放大的關鍵環(huán)節(jié)工藝路線及各工序操作步驟工藝路線及各工序操作步驟 設備材質(zhì)與型號的選擇設備材質(zhì)與型號的選擇原輔材料、中間體的質(zhì)量標準原輔材料、中間體的質(zhì)量標準 操作條件操作條件物料衡算物料衡算安全生產(chǎn)與安全生產(chǎn)與“三廢三廢”防治防治原輔材料、中間體及產(chǎn)品的理化和生物學測定原輔材料、中間體及產(chǎn)品的理化和生物學測定消耗定額、原料成本、操作工時與生產(chǎn)周期消耗定額、原料成本、操作工時與生產(chǎn)周期等的計算等的計算1.驗證的概念驗證的概念2.藥品生產(chǎn)驗證的主要內(nèi)容藥品生產(chǎn)驗證的主要內(nèi)容3.生產(chǎn)工藝驗證生產(chǎn)工藝驗證八、生物藥品生產(chǎn)工藝的驗證八、生物藥品生產(chǎn)工藝的驗證1.驗證的概念驗證的概念證明任

22、何程序、生產(chǎn)過程、設備、物料、證明任何程序、生產(chǎn)過程、設備、物料、活動或系統(tǒng)確實能達到預期結果的有文件活動或系統(tǒng)確實能達到預期結果的有文件明的一系列活動。明的一系列活動。設備與廠房和公用設施驗證設備與廠房和公用設施驗證 工藝驗證工藝驗證分析方法驗證分析方法驗證計算機驗證計算機驗證清潔驗證清潔驗證2.藥品生產(chǎn)驗證的主要內(nèi)容藥品生產(chǎn)驗證的主要內(nèi)容(1)生產(chǎn)工藝驗證的目的生產(chǎn)工藝驗證的目的3.生產(chǎn)工藝的驗證生產(chǎn)工藝的驗證(2)工藝驗證的主要形式工藝驗證的主要形式(3)工藝驗證的一般要求工藝驗證的一般要求(4)工藝驗證的主要內(nèi)容工藝驗證的主要內(nèi)容(5)驗證文件驗證文件(1) 生產(chǎn)工藝驗證的目的生產(chǎn)工藝

23、驗證的目的證明各單元操作的證明各單元操作的工藝條件以及操作工藝條件以及操作是否是否能能適合該產(chǎn)品的常規(guī)生產(chǎn)適合該產(chǎn)品的常規(guī)生產(chǎn)，并證明在，并證明在使用使用規(guī)定的規(guī)定的原輔材料及設備的原輔材料及設備的條件條件下，能始終下，能始終生產(chǎn)出符合生產(chǎn)出符合預定質(zhì)量標準要求的產(chǎn)品預定質(zhì)量標準要求的產(chǎn)品，且，且具有良好的具有良好的重現(xiàn)性和可靠性重現(xiàn)性和可靠性。 (2) 工藝驗證的主要形式工藝驗證的主要形式工藝定型工藝定型前驗證前驗證是指一項工藝、一個系統(tǒng)、是指一項工藝、一個系統(tǒng)、一臺設備或一種材料正式投入使用前按照設定一臺設備或一種材料正式投入使用前按照設定方案進行的驗證。方案進行的驗證?；仡櫺则炞C回顧性驗

24、證是指以歷史數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析為是指以歷史數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析為基礎的旨在證實生產(chǎn)工藝條件適用性的驗證?；A的旨在證實生產(chǎn)工藝條件適用性的驗證。 同步驗證同步驗證是指生產(chǎn)中某項工藝運行時進行是指生產(chǎn)中某項工藝運行時進行的實時驗證，以從工藝實際運行過程中獲得的實時驗證，以從工藝實際運行過程中獲得數(shù)據(jù)，從而確保某項工藝達到預定要求的活動。數(shù)據(jù)，從而確保某項工藝達到預定要求的活動。(3) 工藝驗證的一般要求工藝驗證的一般要求只有在所使用的設備或設施已完成安裝確只有在所使用的設備或設施已完成安裝確定、運行確定、性能確定、具備了適當?shù)漠a(chǎn)品定、運行確定、性能確定、具備了適當?shù)漠a(chǎn)品質(zhì)量標準且檢驗方法已經(jīng)過驗證的基礎上

25、實施。質(zhì)量標準且檢驗方法已經(jīng)過驗證的基礎上實施。 一般要求至少做三批連續(xù)的成功批號。一般要求至少做三批連續(xù)的成功批號。新產(chǎn)品的工藝驗證新產(chǎn)品的工藝驗證回顧性驗證的要求是收集近期生產(chǎn)的至少回顧性驗證的要求是收集近期生產(chǎn)的至少1030批的數(shù)據(jù)進行分析評估批的數(shù)據(jù)進行分析評估在下列條件下，需對工藝進行再驗證在下列條件下，需對工藝進行再驗證開放批工藝驗證開放批工藝驗證 a.工藝工藝發(fā)生改變，生產(chǎn)使用的發(fā)生改變，生產(chǎn)使用的設備設備作了調(diào)整、作了調(diào)整、更換或大修。更換或大修。 b.生產(chǎn)生產(chǎn)場所場所發(fā)生改變。發(fā)生改變。c.在產(chǎn)品的趨勢分析中發(fā)現(xiàn)嚴重的在產(chǎn)品的趨勢分析中發(fā)現(xiàn)嚴重的超常現(xiàn)象超?，F(xiàn)象或可能對藥品的

26、安全、性狀、純度、雜質(zhì)、或可能對藥品的安全、性狀、純度、雜質(zhì)、含量等有影響。含量等有影響。d.生產(chǎn)了一定生產(chǎn)了一定周期周期后，一般周期件再驗證最多后，一般周期件再驗證最多不超過不超過3年。年。在下列條件下，需對工藝進行再驗證在下列條件下，需對工藝進行再驗證(4) 工藝驗證的主要內(nèi)容工藝驗證的主要內(nèi)容關鍵工藝步驟的驗證關鍵工藝步驟的驗證 關鍵工藝參數(shù)的驗證關鍵工藝參數(shù)的驗證工藝一致性驗證工藝一致性驗證物料配料比、物料濃度、操作溫度、物料配料比、物料濃度、操作溫度、pH、壓、壓力力 、時間等。、時間等。有相變的步驟；改變溫度或有相變的步驟；改變溫度或pH的步驟；多種的步驟；多種原料的混合及引起表面

27、積、顆粒度、堆積密度原料的混合及引起表面積、顆粒度、堆積密度或均勻性變化的步驟?；蚓鶆蛐宰兓牟襟E。 參數(shù)劃分可考慮：質(zhì)量因素、安全因素、環(huán)保參數(shù)劃分可考慮：質(zhì)量因素、安全因素、環(huán)保因素、經(jīng)濟因素。因素、經(jīng)濟因素。a.為取得為取得試生產(chǎn)文號試生產(chǎn)文號目的，應提供目的，應提供三批生產(chǎn)工三批生產(chǎn)工藝一致性的數(shù)據(jù)藝一致性的數(shù)據(jù)，且三批制品質(zhì)量合格。，且三批制品質(zhì)量合格。 b.為達到為達到試生產(chǎn)文號試生產(chǎn)文號轉(zhuǎn)為轉(zhuǎn)為正式生產(chǎn)文號正式生產(chǎn)文號的目的的目的，應提供，應提供兩年試生產(chǎn)期間兩年試生產(chǎn)期間所用的工藝加工所用的工藝加工多批多批產(chǎn)品產(chǎn)品的的有關工藝參數(shù)有關工藝參數(shù)和制品和制品質(zhì)量一致性資料質(zhì)量一致性

28、資料。c.從從工藝控制的觀點工藝控制的觀點出發(fā)有必要確定在正常生出發(fā)有必要確定在正常生產(chǎn)條件下產(chǎn)條件下工藝參數(shù)和制品質(zhì)量指標的變化范圍工藝參數(shù)和制品質(zhì)量指標的變化范圍。工藝一致性驗證工藝一致性驗證 通常有三種情況：通常有三種情況：(5) 驗證文件驗證文件工藝驗證方案工藝驗證方案 工藝驗證報告工藝驗證報告驗證目的和依據(jù)、工藝描述、關鍵工藝參數(shù)、驗證目的和依據(jù)、工藝描述、關鍵工藝參數(shù)、驗證計劃、取樣計劃、可接受標準、附加研驗證計劃、取樣計劃、可接受標準、附加研究培訓等。究培訓等。 驗證目的和依據(jù)、工藝描述、關鍵工藝參數(shù)、驗證目的和依據(jù)、工藝描述、關鍵工藝參數(shù)、驗證批號、驗證結果、偏差、附加研究、培

29、驗證批號、驗證結果、偏差、附加研究、培訓結論、驗證批生產(chǎn)記錄和所有中間體與成訓結論、驗證批生產(chǎn)記錄和所有中間體與成品的檢驗報告。品的檢驗報告。 第三節(jié)第三節(jié) 生物分離純化技術的發(fā)展生物分離純化技術的發(fā)展一、生物分離純化技術的發(fā)展歷史一、生物分離純化技術的發(fā)展歷史二、生物分離純化技術的發(fā)展趨勢二、生物分離純化技術的發(fā)展趨勢 主要指主要指19世紀世紀60年代到年代到20世紀世紀40年代年代青霉素等抗青霉素等抗生素出現(xiàn)之前的生物技術產(chǎn)業(yè)。生素出現(xiàn)之前的生物技術產(chǎn)業(yè)。這一時期特點是這一時期特點是產(chǎn)產(chǎn)品大多屬于嫌氣發(fā)酵過程的產(chǎn)物（如酒精、丙酮、品大多屬于嫌氣發(fā)酵過程的產(chǎn)物（如酒精、丙酮、丁酮等），其產(chǎn)品相對簡單，基本上是無活性的小丁酮等），其產(chǎn)品相對簡單，基本上是無活性的小分子，主要采用壓濾、蒸餾、精餾等設備，規(guī)模多分子，主要采用壓濾、蒸餾、精餾等設備，規(guī)模多為手工作坊式的。為手工作坊式的。一、生物分離純化技術的發(fā)展歷史一、生物分離純化技術的發(fā)展歷史1.古代釀造業(yè)古代釀造業(yè)包括釀酒、制醬包括釀酒、制醬(油油)、醋、酸奶和干酪等，都是家、醋、