玉米抗壞血酸含量測(cè)定

1、 一、目的 學(xué)習(xí)維生素C的生理功能和性質(zhì)，掌握用2，6-二氯酚靛酚法測(cè)定維生素C的原理和方法。二、原理 維生素 C是一種水溶性維生素，是人類(lèi)營(yíng)養(yǎng)中最重要的維生素之一，人體缺乏維生素 C時(shí)會(huì)出現(xiàn)壞血病，因此它又被稱(chēng)為抗壞血酸。此外維生素 C還具有預(yù)防和治療感冒以及抑制致癌物質(zhì)產(chǎn)生的作用。 不同栽培條件、不同成熟度和不同的加工貯藏方法，都可以影響水果、蔬菜的抗壞血酸含量。測(cè)定抗壞血酸含量是了解果蔬品質(zhì)高低及其加工工藝成效的重要指標(biāo)。 維生素 C在金屬銅和抗壞血酸氧化酶存在下極易氧化，因此，在用銅制品做食品時(shí)，維生素 C易丟失。此外在堿性溶液中，維生素 C也易被破壞，而在酸性溶液中比較穩(wěn)定。利用它具

2、有的還原性質(zhì)可測(cè)定其含量。還原型抗壞血酸能被染料2，6-二氯酚靛酚氧化為脫氫型，該染料在堿性溶液中呈藍(lán)色，在酸性溶液中呈紅色，被還原后變?yōu)闊o(wú)色。因此用 2，6-二氯酚靛酚滴定含有維生素 C的酸性溶液時(shí)，維生素C尚未全部被氧化時(shí)，則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色，當(dāng)溶液中的抗壞血酸全部被氧化成脫氫抗壞血酸時(shí)，滴入的2，6-二氯酚靛酚立即使溶液呈現(xiàn)淡紅色。用這種染料滴定抗壞血酸至溶液呈淡紅色為滴定終點(diǎn)，根據(jù)染料消耗量即可計(jì)算出樣品中還原型抗壞血酸的含量。三、儀器、試劑和材料 1儀器天平微量滴定管容量瓶刻度吸管錐形瓶2試劑 （1）l草酸溶液：草酸1g溶于 100ml蒸餾水中（2）2草酸溶液：草酸2g

3、溶于100ml蒸餾水中 （3）抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1 mgml）：精確稱(chēng)取10mg純抗壞血酸（應(yīng)為潔白色，如變?yōu)辄S色則不能用）用1草酸溶液溶解并定容至100ml。此溶液應(yīng)貯存于棕色瓶中，最好臨用前配制。 （4）005 2, 6-二氯酚靛酚溶液：稱(chēng)取 500mg 2, 6-二氯酚靛酚溶于300ml含104mg碳酸氫鈉（A.R）的熱水中，冷卻后用蒸餾水稀釋至1000ml，濾去不溶物，貯存于棕色瓶中，4冷藏可穩(wěn)定一周，臨用前以標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸標(biāo)定。3材料玉米四、操作步驟1提取抗壞血酸 取玉米粒50g，加入 50ml 2草酸溶液，用研缽研成勻漿。過(guò)濾取得濾液，濾餅可用少量2的草酸洗幾次，合并濾液，記錄濾

4、液體積。22, 6-二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定 準(zhǔn)確吸取4.0 ml抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)液（含抗壞血酸）于100ml錐形瓶中，加16ml 1草酸溶液，用2, 6-二氯酚靛酚滴定至淡紅色（15秒內(nèi)不褪色即為終點(diǎn)）。記錄所用染料溶液的體積，計(jì)算出lml染料溶液所能氧化抗壞血酸的量。3樣品滴定 準(zhǔn)確吸取樣品提取液兩份，各20ml，分別放入兩個(gè)100ml錐形瓶中，滴定方法同 2中的操作，另取 20ml 1草酸作空白對(duì)照滴定。 五、結(jié)果處理 取兩份樣品滴定所耗用染料體積的平均值，代入下式計(jì)算100g樣品中還原型抗壞血酸的含量：杭?jí)难岷浚╩g100g樣品）（V1V2）V M100/V3W式中，V1為滴定樣品所耗用的

5、染料的平均毫升數(shù)；V2為滴定空白對(duì)照所耗用的染料的平均毫升數(shù)； V為樣品提取液的總體積；V3為滴定時(shí)所取的樣品提取液的毫升數(shù)； M為lml染料所能氧化抗壞血酸的量（mg）(可由操作2計(jì)算得到）； w為待測(cè)樣品的重量（g）。 六、注意事項(xiàng) （1）用本法測(cè)定抗壞血酸含量雖簡(jiǎn)便易行，但有下述缺點(diǎn)：第一，本法只能測(cè)定還原型抗壞血酸，不能測(cè)出具有同樣生理功能的氧化型抗壞血酸和結(jié)合型抗壞血酸。第二，樣品中的色素經(jīng)常干擾對(duì)終點(diǎn)的判斷，雖可預(yù)先用白陶土脫色，或加入 23 ml二氯乙烷，以二氯乙烷層變紅為終點(diǎn)，但實(shí)際上仍難免產(chǎn)生誤差。 （2）用2草酸制備提取液，可有效地抑制抗壞血酸氧化酶，以免抗壞血酸變?yōu)檠趸投鵁o(wú)法滴定，而1的草酸無(wú)此作用。 （3）如樣品中有較多亞鐵離子（Fe2+）時(shí)，也可使染料還原而影響測(cè)定，這時(shí)應(yīng)改用8乙酸代替草酸制備樣品提取液，此時(shí)Fe2+不會(huì)很快與染料起作用。 （4）如樣品漿狀物泡沫過(guò)多，可加幾滴辛醇或丁醇消泡。 （5）市售的2, 6-二氯酚靛酚質(zhì)量不一，以標(biāo)定04mg抗壞血酸消耗2ml左右的染料為宜，可根據(jù)標(biāo)定結(jié)果調(diào)整染料溶液濃度。 （6）樣品提取制備和滴定過(guò)程中，要避免陽(yáng)光照射和與銅、鐵器具接觸，以免破壞抗壞血酸。 （7）滴定過(guò)程宜迅速，一般不超過(guò)2min。樣品滴定消耗染料14ml為宜，如超出此范圍，應(yīng)