大腸癌病人血清層粘連蛋白、Ⅳ型膠原含量測定及其臨床意義

1、    大腸癌病人血清層粘連蛋白、型膠原含量 測定及其臨床意義        摘要：目的探討大腸癌病人血清層粘連蛋白，型膠原含量與病情的關系。方法應用放射免疫技術測定了大腸癌患者血清層粘連蛋白(LN)及型膠原(Col )含量。結(jié)果大腸癌患者血清LN、Col含量明顯高于對照組，相差非常顯著(P<0.01)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清LN及Col含量明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，兩者相差顯著(P<0.05)；血清LN含量中，DukesC期組高于DukesB期組，兩者相差顯著

2、(P<0.05)；血清Col含量由DukesB期至D期有逐漸升高趨勢，且Dukes D期組顯著高于DukesB期組，兩者相差顯著(P<0.05)。結(jié)論提示血清LN、Col含量變化與大腸癌細胞的浸潤、轉(zhuǎn)移等生物學行為密切相關。對判斷其病情及預后可能具有一定的參考價值。關鍵詞：大腸癌；層粘連蛋白；型膠原；放射免疫測定；血清 Clinical Significance Of Measuring The Serum Laminin And CollagenType in Patients With Colorectal CancerCHEN Teng,ZHAO Rong-hua,SHI J

3、in-hua,et alDepartment of General Surgery,Changzheng Hospital,Second Military Medical University,Shanghai200003The contents of Laminin (LN) and Collagen type (Col) in serum were measured by radioimmunoassay in patients with colorectal cancer.It was showed that the content of LN and Col in cancer gro

4、up was significantly higher than those in control group (P<0.01)，the content of LN and Col in group with lymph node metastases was higher than those in group without lymph node metastases (P<0.05).The content of LN in Dukes C group was hight than that in Dukes B group (P<0.05).There was a t

5、endency that the content of serum Col increased with the advance of the Dukes clasification and content of serum Col in DukesD group was higher than that in Dukes B group.This implies that the contents of the serum LN and Col is closely related to the tumor invasion and metastases,and the assay of t

6、he LN and Col in serum may be useful to the diagnosis of colorectal cancer.Key words:Colorectal cancer;Laminin;Collagen type ;Ria;Serum層粘連蛋白(Laminin,LN)及型膠原(Collagen type ,Col)是細胞外基質(zhì)中基底膜的主要成分?；啄橐贿B續(xù)的無細胞結(jié)構，是腫瘤細胞浸潤、轉(zhuǎn)移的自然屏障。近年來研究表明，腫瘤組織中LN、Col的分布異常，且與腫瘤細胞的生物學特性有關1。但對腫瘤患者血清LN、Col的含量變化及其與腫瘤生物學行為的關系研究較少。

7、本文測定了25例大腸癌患者血清LN及Col含量變化，并對其意義進行探討。1材料和方法1.1病例選擇收集大腸癌病例25例，年齡25至80歲，平均63歲，男性15例，女性10例。全部經(jīng)手術及病理證實。其中結(jié)腸癌15例，直腸癌10例。DukesB期8例，C期8例，D期9例。組織學類型，腺癌18例，管狀腺癌3例，粘液腺癌4例。1.2對照組的設定選擇同期非腫瘤患者25例，其中腹股溝疝15例，大隱靜脈曲張8例，肛瘺2例。年齡23至76歲，平均54歲，男性19例、女性6例。均經(jīng)臨床檢查排除有已知影響血清LN、Col水平的情況，如肝硬化、肝炎等。1.3血清標本收集患者于清晨抽取周圍靜脈血2ml，于2h內(nèi)離心，

8、3000g/ml,5min，吸取上清液，置于20°C保存待測定。1.4LN、Col的放射免疫測定測定藥盒由海軍醫(yī)學研究所生物技術中心提供。濃度單位為ng/ml。1.5統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(±s)表示。采用配對、非配對t檢驗及方差分析。2結(jié)果2.1腫瘤組及對照組血清LN、Col含量腫瘤組及對照組血清LN、Col含量見表1。結(jié)果顯示，腫瘤組血清LN及Col含量明顯高于對照組，相差非常顯著(P<0.01)。表1腫瘤組及對照組血清LN及Col含量(±s,ng/ml)組別例數(shù)LNCol腫瘤2588.521±4.854*64.481±

9、;7.004*對照2571.312±6.72845.317±10.961*與對照組比較P<0.012.2腫瘤組血清LN、col含量與腫瘤生物學行為的關系血清LN、Col含量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關系見表2。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清LN及Col含量明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，兩者相差顯著(P<0.05)表2血清LN、Col含量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關系(±s,ng/ml)組別例數(shù)LNCol淋巴結(jié)(-)881.647±3.40660.147±4.326淋巴結(jié)(+)1790.375±3.711*67.065±6.663*與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組比較P&l

10、t;0.05血清LN、Col含量與大腸癌Dukes分期關系見表3。血清LN含量中，DukesC期組高于DukesB期組，兩者相差顯著(P<0.05)；DukesD期組亦高于B期組，但兩者相差不顯著(P>0.05)。血清Col由DukesB期至D期逐漸升高，且DukesD期組高于B期組，兩者相差顯著(P<0.05)。表3血清LN、Col含量與Dukes分期關系(±s,ng/ml)Dukes分期例數(shù)LNColB881.647±3.40660.147±4.326C892.618±5.339*62.455±8.684D988.523&

11、#177;3.97268.252±6.413*與DukesB期組比較P<0.053討論LN及Col均為細胞間質(zhì)中基底膜的主要成分，在組織胚胎發(fā)生、細胞分化和支持組織結(jié)構方面均起著重要作用。近年來研究表明，腫瘤細胞對基底膜的粘附、降解及破壞是浸潤及轉(zhuǎn)移的重要環(huán)節(jié)2，3。因而，作為基底膜重要組成部分的LN、Col與腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移的關系，更引起人們的高度重視。我們應用放射免疫測定方法，觀察了25例大腸癌病人血清LN、Col含量及其與腫瘤生物學行為的關系，結(jié)果表示，大腸癌病人血清LN、Col含量顯著高于對照組，且與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期有關，說明血清LN、Col含量的變化與大

12、腸癌的病理機制密切相關。腫瘤病人血清LN、Col水平升高的確切機制尚未完全闡明4，5。免疫組織化學研究顯示，胃癌組織中LN、Col于基底膜部位分布減少、缺失，型膠原酶活性增強，且與腫瘤細胞的浸潤深度及分化程度有關6，7。因而認為血清LN、Col含量的增加與腫瘤細胞對基底膜的降解及破壞有關。本研究結(jié)果顯示，大腸癌患者中，血清LN、Col含量在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、DukesC期組血清LN含量高于DukesB期組；血清Col含量亦隨著病期的進展、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移呈上升趨勢，且DukesD期組顯著高于DukesB期組，提示血清LN、Col含量變化與大腸癌細胞的浸潤、轉(zhuǎn)移等生物學行為密切相

13、關。因此，我們認為觀察大腸癌病人血清LN、Col含量及其變化，對判斷其病情及預后可能具有一定的參考價值。作者單位：陳騰、趙榮華、施靖華、孫延平(200003上海，第二軍醫(yī)大學長征醫(yī)院普外科)陳金國(海軍醫(yī)學研究所生物技術中心)參考文獻：1Hewitt RE,Powe DG,Morrell K,et al.Laminin and Collagen subunit distribution in normal and neoplastic tissues of colorectum and breast.Br J Cancer,1997,75(2):2212OrreM,RogersPA.Reduc

14、edvascularbasement-membraneimmunostaining in mucinous tumors of the ovary.Int J Cancer,1998,79(2):1393Enam SA,Rosenblum ML,Edvardsen K,Role of extracellular matrix in tumor invasion:migration of glioma cells along fibronectin-positive mesenchymal cell processes.Neurosurgery,1998,42(3):5994Ambiru S,Miyazaki M,Nakagawa K,et al.Increased serum type collagen 7-S levels in patients with hepatic etastasis.Am J Gastroenterology,1995,90(5):7835Khan A,Krishna M,Baker SP,et al.Cathepsin B expression and its correlation with tumorassociated laminin and tumor progression in gastric cancer.Arch Pat