第3章 第2節(jié) 第1課時

1、第2節(jié)動物細(xì)胞工程第1課時動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與單克隆抗體技術(shù)目標(biāo)導(dǎo)讀1.結(jié)合教材P5355圖文 ,掌握哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)條件和流程。2.分析教材P55圖314 ,理解動物細(xì)胞融合技術(shù)。3.單克隆抗體的制備過程。重難點擊1.動物細(xì)胞培養(yǎng)條件和流程。2.單克隆抗體的制備過程。1970年 ,有兩位科學(xué)家做了人鼠細(xì)胞融合的實驗 ,以證明細(xì)胞膜的流動性。思考該如何實現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合 ,動物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株 ,動物細(xì)胞融合后能像電影上一樣形成雜種動物個體嗎？一、哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)1.動物細(xì)胞培養(yǎng)條件(1)培養(yǎng)基狀態(tài)和成分：液體培養(yǎng)基 ,成分主要包括葡萄糖、氨基酸、無機鹽

2、、維生素和動物血清等。特別提醒動物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時通常要添加動物血清的原因有兩點：一是補充合成培養(yǎng)基中缺乏的營養(yǎng)物質(zhì)；二是為動物細(xì)胞提供與內(nèi)環(huán)境相似的生活環(huán)境。(2)氣體環(huán)境：需要足夠的氧氣和一定的二氧化碳。二氧化碳具有調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH的作用。(3)溫度和pH：培養(yǎng)溫度要與動物體內(nèi)溫度保持一致；培養(yǎng)基的適宜pH為7.27.4。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)流程(1)取材：取動物的胚胎或幼齡動物的組織或器官剪碎 ,參加適量胰蛋白酶或膠原纖維酶使細(xì)胞分散。(2)原代培養(yǎng)：經(jīng)過濾、離心后將動物細(xì)胞接種到無菌的培養(yǎng)液中 ,在適宜的條件下進(jìn)行靜止或慢速轉(zhuǎn)動培養(yǎng) ,稱為原代培養(yǎng)。貼壁生長：懸液的細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的外表 ,開

3、始有絲分裂 ,其數(shù)目以指數(shù)增長的方式增多。接觸抑制：當(dāng)細(xì)胞鋪滿培養(yǎng)瓶的整個外表后 ,就形成致密的單層細(xì)胞層 ,此時細(xì)胞分裂停止 ,不再繼續(xù)生長。(3)傳代培養(yǎng)：貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理 ,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng) ,讓細(xì)胞增殖 ,即為傳代培養(yǎng)。細(xì)胞生長到10代左右時 ,出現(xiàn)生長停滯 ,大局部細(xì)胞衰老死亡。極少局部細(xì)胞可以傳到4050代 ,遺傳物質(zhì)沒有(填“有或“沒有)發(fā)生改變。有些細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變 ,可以無限制的傳代下去。結(jié)合動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程分析以下問題：1.為什么要取動物的胚胎或幼齡動物的組織或器官細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)？答案這類細(xì)胞具有較強的分裂能力 ,容易培養(yǎng)。2.

4、培養(yǎng)過程中兩次使用胰蛋白酶 ,目的有何不同？答案第一次是將組織分散成單個細(xì)胞 ,第二次是將貼滿瓶壁的細(xì)胞分散成單個細(xì)胞。3.能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？答案胃蛋白酶作用的適宜pH約為2 ,多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.27.4 ,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性。4.動物細(xì)胞培養(yǎng)為什么需要無菌、無毒的環(huán)境？答案離體培養(yǎng)的細(xì)胞已失去了對微生物和有毒物質(zhì)的防御能力 ,一旦受到污染或自身代謝物質(zhì)積累等 ,培養(yǎng)的細(xì)胞就會死亡。1.以下說法正確的選項是()A.動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物組織培養(yǎng)無任何聯(lián)系B.在細(xì)胞培養(yǎng)中 ,有原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)之分C.原代培養(yǎng)比傳代培養(yǎng)進(jìn)行得晚D.在對動物成纖維細(xì)胞培養(yǎng)時 ,需用纖維

5、素酶將細(xì)胞分散開答案B解析動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物組織培養(yǎng)之間相互依存；原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)都屬于細(xì)胞培養(yǎng) ,且傳代培養(yǎng)較晚；纖維素酶是分解纖維素的 ,而動物細(xì)胞之間的連接物質(zhì)的成分主要為蛋白質(zhì) ,應(yīng)用胰蛋白酶使細(xì)胞分散開。2.以下有關(guān)植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比擬中 ,表達(dá)錯誤的選項是()A.所用的培養(yǎng)基的成分根本相同B.植物組織培養(yǎng)的結(jié)果是培育成植株 ,動物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是培育成很多細(xì)胞C.植物組織培養(yǎng)的目的是為了快速繁殖和獲得無病毒的植株 ,動物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)物或雜交細(xì)胞D.植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性 ,動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的增殖答案A解析動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常含

6、有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等 ,另外還有動物血清等。植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基包含植物生長和發(fā)育的全部營養(yǎng)成分 ,如礦質(zhì)元素、有機營養(yǎng)成分、植物激素 ,但沒有動物血清。題后歸納動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比擬比擬工程植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)生物學(xué)原理植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體液體培養(yǎng)基成分蔗糖、氨基酸、水、礦物質(zhì)、生長素、細(xì)胞分裂素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、水、動物血清等培養(yǎng)條件無菌、適宜的溫度和pH取材植物器官、組織或細(xì)胞動物胚胎、幼齡動物的組織或器官過程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)培養(yǎng)結(jié)果植株或組織細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物二、動物細(xì)胞融合與單克隆抗體技

7、術(shù)1.細(xì)胞融合(1)概念：在一些融合因子的作用下 ,將兩個或兩個以上的細(xì)胞合并成為一個細(xì)胞的技術(shù)。(2)融合方法物理、化學(xué)方法：與植物體細(xì)胞雜交相同 ,如聚乙二醇、電流刺激等。生物方法：滅活的病毒。2.單克隆抗體(1)定義：由一個B淋巴細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群所產(chǎn)生的單一型抗體分子。(2)制備過程取小鼠體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞和營養(yǎng)缺陷型的骨髓瘤細(xì)胞。用聚乙二醇誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合。利用選擇性培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞。在新的培養(yǎng)液中大量繁殖。注射到小鼠體內(nèi)培養(yǎng)或者在培養(yǎng)液中懸浮培養(yǎng)獲得單克隆抗體。(3)功能診斷試劑：快捷、準(zhǔn)確地診斷和治療一些疾病?！吧飳?dǎo)彈：單克隆抗體攜帶抗癌藥物 ,專一地殺死腫瘤細(xì)胞。完善單

8、克隆抗體制備過程 ,思考以下問題：1.為什么要對小鼠注射抗原？答案以獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)。2.制備單克隆抗體時 ,為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞？答案每一個B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體 ,但不能無限增殖；骨髓瘤細(xì)胞可大量快速增殖 ,卻不能產(chǎn)生抗體。假設(shè)將這兩種細(xì)胞融合在一起 ,既能分泌大量特異性抗體又能快速增殖。3.B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)聚乙二醇處理后 ,培養(yǎng)液中存在哪幾種細(xì)胞？答案未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞、B瘤融合細(xì)胞。3.用動物細(xì)胞工程獲得單克隆抗體 ,以下實驗步驟錯誤的選項是()A.將抗原注入小鼠體

9、內(nèi) ,獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B.用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C.用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑 ,使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D.篩選雜交瘤細(xì)胞 ,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群 ,培養(yǎng)后提取單克隆抗體答案B解析單克隆抗體的制備過程是：將一種抗原注入小鼠體內(nèi) ,獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 ,然后將B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞同時培養(yǎng) ,在聚乙二醇的誘導(dǎo)下 ,促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合 ,得到雜交瘤細(xì)胞。從中選出能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞群 ,即可得到單克隆抗體。因為動物細(xì)胞無細(xì)胞壁 ,所以在細(xì)胞融合過程中不需要使用纖維素酶處理。4.以下對植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比擬 ,描述

10、正確的選項是()A.動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的根本原理相同 ,誘導(dǎo)融合的方法也完全相同B.兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離 ,突破有性雜交方法的局限 ,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能C.利用動物細(xì)胞融合技術(shù)而開展起來的雜交瘤技術(shù) ,為試管嬰兒的誕生開辟了新途徑D.目前科學(xué)家終于實現(xiàn)了兩個植物物種間的體細(xì)胞雜交 ,得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的超級植物 ,并使它們的性狀全部得以表達(dá)答案B解析動物細(xì)胞融合可用滅活的病毒誘導(dǎo) ,而植物原生質(zhì)體是不能的；雜交瘤技術(shù)是細(xì)胞工程技術(shù) ,而試管嬰兒那么是胚胎工程內(nèi)容；生物性狀的表達(dá)是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果 ,“超級植物具有兩個親本的遺傳物質(zhì) ,但性狀不一定能全

11、部表達(dá)。題后歸納動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比擬植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性過程細(xì)胞A、B 去壁原生質(zhì)體A、B 融合融合的原生質(zhì)體雜種細(xì)胞 植物組織培養(yǎng)雜種植株細(xì)胞A、B 融合雜交細(xì)胞 有絲分裂多個相同雜交細(xì)胞相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原纖維酶融合方法物理法：離心、電流刺激、振動；化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞用途或意義克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 ,獲得雜種植株培育雜交細(xì)胞或大量獲得細(xì)胞產(chǎn)物1.進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時 ,最好選用的培養(yǎng)材料是()A.衰老退化的動物組織細(xì)胞B.成熟動物個體的體

12、細(xì)胞C.動物的卵細(xì)胞D.健康動物胚胎或幼齡動物個體的體細(xì)胞答案D解析在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時 ,用的是健康動物的胚胎或幼齡動物的組織或器官 ,這類細(xì)胞有旺盛的分裂能力。2.以下關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá) ,錯誤的選項是()A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的組織或器官B.將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個細(xì)胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離 ,制成細(xì)胞懸液D.動物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右 ,所培養(yǎng)的細(xì)胞會全部衰老死亡答案D3.關(guān)于單克隆抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用 ,錯誤的選項是()A.對小動物注射特定抗原以獲取所需的B淋巴細(xì)胞B.融合并篩選特定的雜交瘤細(xì)胞 ,原代培養(yǎng)發(fā)生遺傳

13、物質(zhì)改變后才能進(jìn)行傳代培養(yǎng)C.特定的單克隆抗體可制成試劑 ,用于檢測人體是否受某種抗原的感染D.治療癌癥的“生物導(dǎo)彈原理之一是利用單克隆抗體的特異性識別癌細(xì)胞答案B4.利用細(xì)胞工程方法 ,以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。以下相關(guān)表達(dá)正確的選項是()A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi) ,產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C.將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合 ,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不一定為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法不能診斷出SARS病毒感染者答案C5.答復(fù)以下有關(guān)動物細(xì)胞

14、培養(yǎng)的問題：(1)在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中 ,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞外表_時 ,細(xì)胞會停止分裂增殖 ,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_。此時 ,瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上別離下來 ,需要用酶處理 ,可用的酶是_。(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多 ,絕大局部細(xì)胞分裂停止 ,進(jìn)而出現(xiàn)_的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖 ,其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成_細(xì)胞 ,該種細(xì)胞的黏著性_ ,細(xì)胞膜外表蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量_。(3)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中 ,通常在_條件下保存細(xì)胞。因為在這種條件下 ,細(xì)胞中_的活性降低 ,細(xì)胞_的速率降低。答案(1)相互接觸接觸抑制單層(或一層)胰蛋白酶(或膠原纖維酶)

15、(2)衰老甚至死亡不死性降低減少(3)低溫酶新陳代謝根底過關(guān)1.20世紀(jì)30年代 ,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細(xì)胞 ,這些多核細(xì)胞最可能的來源是()A.細(xì)胞進(jìn)行無絲分裂形成的B.細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時 ,染色體復(fù)制后沒有分開形成兩個子細(xì)胞C.有絲分裂時 ,細(xì)胞核進(jìn)行了分裂 ,而細(xì)胞質(zhì)沒有進(jìn)行分裂D.細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了融合答案D解析選項C、D都可形成多核細(xì)胞 ,但結(jié)合題干信息 ,此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān) ,應(yīng)選項D最有可能。2.在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中 ,屬于原代培養(yǎng)的是()A.用胰蛋白酶使組織分散成單個細(xì)胞的過程B.從機體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過程C.

16、出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過程D.哺乳動物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長過程答案B解析原代培養(yǎng)是指從動物機體組織取得細(xì)胞后的立即培養(yǎng) ,直到細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制為止。因為細(xì)胞的接觸抑制 ,細(xì)胞停止分裂增殖 ,并逐漸走向衰亡 ,所以要想繼續(xù)細(xì)胞培養(yǎng) ,必須將細(xì)胞取下分裝后才能進(jìn)行 ,分裝后的細(xì)胞培養(yǎng)是傳代培養(yǎng)。3.一般來說 ,動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血清溫度與動物的體溫相近需要O2 ,也需要CO2 適宜的pHA. B.C. D.答案A解析動物細(xì)胞培養(yǎng)一般需要無菌、無毒的環(huán)境；一定的營養(yǎng)；一般與動物相近的體溫和適宜的pH以及氣體環(huán)境等。4.科學(xué)家用小鼠骨

17、髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合 ,得到雜交細(xì)胞 ,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞答案A解析單克隆抗體的產(chǎn)生是利用了細(xì)胞工程中的細(xì)胞融合技術(shù)。小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞 ,在體外培養(yǎng)的條件下無限繁殖 ,產(chǎn)生特異性的單一抗體。5.單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面與常規(guī)抗體相比 ,其特點是()A.單克隆抗體特異性強、純度低、靈敏度高、產(chǎn)量高B.單克隆抗體特異性強、純度高、靈敏度低、產(chǎn)量高C.單克隆抗體特異性強、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量低D.單克隆抗體特異

18、性強、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量高答案D解析單克隆抗體與常規(guī)抗體相比 ,特異性強、靈敏度高、純度高、產(chǎn)量高。6.用單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈由兩局部組成 ,一是“瞄準(zhǔn)裝置 ,二是殺傷性“彈頭。以下對此表達(dá)不正確的選項是()A.“瞄準(zhǔn)裝置是識別腫瘤的單克隆抗體B.“彈頭具有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能C.“彈頭由放射性同位素、化學(xué)藥物等物質(zhì)構(gòu)成D.“生物導(dǎo)彈的制備利用了細(xì)胞工程技術(shù)答案B解析“生物導(dǎo)彈由單克隆抗體和殺傷腫瘤細(xì)胞的藥物組成 ,所運用的原理就是單克隆抗體特異性地識別腫瘤細(xì)胞并與之結(jié)合 ,從而使其攜帶的藥物直接殺傷腫瘤細(xì)胞 ,所以“瞄準(zhǔn)裝置是單克隆抗體 ,“彈頭是單克隆抗體攜帶的藥物 ,它

19、不具有選擇性。能力提升7.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時 ,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。從該圖提供的信息不能獲得的結(jié)論是()A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C.培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大答案A8.以下關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá) ,正確的選項是()A.要進(jìn)行藥物測試的實驗研究 ,最好選擇傳代培養(yǎng)的細(xì)胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)答案D解析原代培養(yǎng)的細(xì)胞最接近于體內(nèi)組

20、織或細(xì)胞的生長特性 ,很適合用于藥物測試、基因表達(dá)等實驗研究。培養(yǎng)過程中 ,僅有極少數(shù)細(xì)胞的基因型會發(fā)生改變。二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去了。惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有不死性 ,可以進(jìn)行傳代培養(yǎng)。9.將基因型為Aa和基因型為Bb的動物體細(xì)胞混合 ,用滅活的仙臺病毒處理后 ,不可能獲得以下哪種基因型的細(xì)胞()A.AAaa B.AaBb C.Aabb D.BBbb答案C解析基因型為Aa和基因型為Bb的動物體細(xì)胞融合 ,它們之間可以自由融合 ,即Aa和Aa、Aa和Bb、Bb和Bb ,可產(chǎn)生AAaa、AaBb、BBbb三種基因型的細(xì)胞。10.以下是應(yīng)用動物細(xì)胞工程獲取單克隆抗X抗體的具體

21、操作步驟 ,其中對單克隆抗體制備的相關(guān)表達(dá)錯誤的選項是()從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細(xì)胞將X抗原注入小鼠體內(nèi) ,獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細(xì)胞將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細(xì)胞利用選擇性培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細(xì)胞從小鼠腹水中提取抗體利用促細(xì)胞融合因子促使細(xì)胞融合A.實驗順序應(yīng)該是B.過程產(chǎn)生多個雜交瘤細(xì)胞的過程稱為克隆C.過程獲得的細(xì)胞均可無限增殖D.利用細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體過程中通常要經(jīng)過兩次篩選答案C解析在細(xì)胞融合過程中 ,如果只考慮兩兩細(xì)胞的融合 ,有骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合、B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合、B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合 ,并不是所有融合細(xì)

22、胞都能無限增殖。11.如圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的根本過程示意圖。請據(jù)圖答復(fù)以下問題：(1)容器A中放置的是動物器官或組織 ,它一般取自_。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是_ ,然后用_酶處理 ,這是為了使細(xì)胞分散開 ,這樣做的目的是_。(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行 ,瓶中的培養(yǎng)基成分有_等。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分散到C瓶中 ,用_處理 ,然后配制成_ ,再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)一段時間后 ,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_。答案(1)胚胎或幼齡動物(2)剪碎胰蛋白(或膠原纖維)使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸(3)葡萄糖、氨基酸、無機鹽和動物血清(4)胰蛋白酶(或膠原纖維酶)細(xì)胞懸液(5)細(xì)

23、胞一般可傳到4050代 ,假設(shè)沒有發(fā)生遺傳信息改變 ,繼續(xù)培養(yǎng)將出現(xiàn)死亡危機12.如圖表示單克隆抗體的制備過程 ,請據(jù)圖答復(fù)以下問題：(1)據(jù)圖可知 ,_技術(shù)是動物細(xì)胞工程技術(shù)的根底 ,而_技術(shù)突破了有性雜交方法的局限 ,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(2)圖中過程常用的誘導(dǎo)因素是_ ,過程常在_培養(yǎng)基中完成。(3)A細(xì)胞為_細(xì)胞 ,其特點是_。(4)合成的單克隆抗體最終可以從_和_中提取。答案(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞融合(2)滅活的病毒(或聚乙二醇)選擇性(3)雜交瘤既能迅速大量增殖 ,又能產(chǎn)生專一抗體(4)培養(yǎng)液小鼠腹水解析(1)動物細(xì)胞工程技術(shù)的根底是動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) ,細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方

24、法的局限 ,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(2)過程中誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法很多 ,常用的主要有生物法(如用滅活的病毒)、化學(xué)法(如用聚乙二醇)、物理法(如電激等)。過程是單克隆抗體技術(shù)的篩選過程 ,是在特定的選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行的。(3)A細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞 ,雜交瘤細(xì)胞具有既能迅速大量增殖 ,又能產(chǎn)生專一抗體的特點。(4)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)一般有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式 ,體外培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng) ,培養(yǎng)后從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)是在小鼠腹腔中培養(yǎng) ,培養(yǎng)后從小鼠腹水中提取單克隆抗體。13.如圖為細(xì)胞融合過程示意圖 ,請據(jù)圖答復(fù)以下問題：(1)假設(shè)A、B是植物細(xì)胞 ,將其融合形成的D細(xì)胞培養(yǎng)成

25、植株 ,還要應(yīng)用_技術(shù)。(2)假設(shè)A、B是動物細(xì)胞 ,那么一般取自_或幼齡動物的器官、組織 ,然后用胰蛋白酶使其分散開來。A、B到C的過程中 ,常用的不同于植物細(xì)胞工程的方法是用_誘導(dǎo)細(xì)胞融合。(3)從A、B到C的過程中 ,可形成_種類型的C細(xì)胞(僅考慮兩個細(xì)胞間的融合)。假設(shè)該過程用于制備單克隆抗體 ,應(yīng)篩選出符合要求的D細(xì)胞 ,方法是用特定的_培養(yǎng)液培養(yǎng) ,篩選出的D細(xì)胞稱為_。常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種 ,前者是在_培養(yǎng)基中培養(yǎng) ,后者是在_內(nèi)增殖。答案(1)植物組織培養(yǎng)(2)胚胎滅活的病毒(3)3選擇性雜交瘤細(xì)胞液體動物的腹腔 真題體驗14.(2019·新課標(biāo) ,40)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z) ,每只小鼠免疫5次 ,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反響的血清最大稀釋倍