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DNADNA序列分析之序列分析之雙脫氧末端終止法雙脫氧末端終止法預(yù)防醫(yī)學(xué)預(yù)防醫(yī)學(xué)14031403班班 又稱為又稱為SangerSanger法。法。 原理：利用原理：利用DNADNA聚合酶，以待測(cè)聚合酶，以待測(cè)單鏈單鏈DNADNA為模板，為模板，以以dNTPdNTP為底物，設(shè)立四種相互獨(dú)立的測(cè)序反應(yīng)體為底物，設(shè)立四種相互獨(dú)立的測(cè)序反應(yīng)體系，在每個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的系，在每個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的雙脫氧核苷三雙脫氧核苷三磷酸磷酸（ddNTPddNTP）作為鏈延伸終止劑。）作為鏈延伸終止劑。 在測(cè)序引物引導(dǎo)下，通過(guò)高分辨率的變性在測(cè)序引物引導(dǎo)下，通過(guò)高分辨率的變性聚丙烯聚丙烯酰胺凝膠電泳酰胺凝膠電泳分離，分離，放射自顯影放射自顯影檢測(cè)后，檢測(cè)后，合成鏈合成鏈序列序列，由此推知待測(cè)模板鏈的序列，由此推知待測(cè)模板鏈的序列 。 POHdNTPddNTP POHOH P P P POHDNA序列分析之化學(xué)降解法化學(xué)降解法基本原理：利用特異的基本原理：利用特異的選擇性試劑選擇性試劑，專一性的隨機(jī)斷裂專一性的隨機(jī)斷裂DNADNA成不同長(zhǎng)短的片成不同長(zhǎng)短的片段。根據(jù)試劑的選擇性及片段在高分段。根據(jù)試劑的選擇性及片段在高分辨力的辨力的聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳上的區(qū)帶上的區(qū)帶位置，判斷位置，判斷DNADNA片段末端核苷酸的種類，片段末

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