實驗七：土壤無機(jī)磷的測定(共3頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上實驗七：土壤無機(jī)磷的測定一、 實驗方法及目的采用SMT法測定土壤無機(jī)磷；掌握土壤無機(jī)磷的測定方法及分光光度法。二、 實驗原理1）樣品的前處理：用1mol/L的HCL溶液將土壤中無機(jī)磷轉(zhuǎn)移到提取液中。2）提取液中正磷酸鹽的測定：在酸性條件下，試液中的P（正磷酸鹽）與鉬酸形成配合物-磷鉬雜多酸（又叫磷鉬酸雜聚配合物）。 H3PO4 + 12H2MoO4 = H3P(Mo3O10)4 + 12H2O P多時呈黃色，少時無色在一定酸度下，加入還原劑后，雜多酸中的Mo被還原，產(chǎn)生特殊蘭色（鉬蘭），其中一部分Mo6+被還原成Mo5+或Mo3+，或Mo3+、Mo5+都有。在鉬蘭的吸

2、收光譜曲線中有兩個吸收峰(660nm或880nm)。測定時可以根據(jù)分光光度計的性能選用。我國國標(biāo)采用700nm波長。三、 實驗儀器與藥品1儀器：多用調(diào)速振蕩器，離心機(jī)，分光光度計。2試劑：1）1molL-1HCl溶液：準(zhǔn)確移取83.3ml濃HCl溶于定容至1L；2）（1+1）硫酸溶液3）磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液（50.0 g.mL-1）：稱取0.2197±0.001g于110干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氫鉀(KH2PO4)，用水溶解后轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加入大約800mL水、加5mL1+1硫酸用水稀釋至標(biāo)線并混勻。1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含50.0 g磷。4）抗壞血酸（10%）：溶解10

3、g抗壞血酸(C6H8O6)于水中，并稀釋至100mL。此溶液貯于棕色的試劑瓶中，在冷處可穩(wěn)定幾周。如不變色可長時間使用。5）鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨(NH4)6Mo7O244H2O于100mL水中。溶解0.35g酒石酸銻鉀KSbC4H4O7½H2O于100mL水中。在不斷攪拌下把鉬酸銨溶液徐徐加到300mL硫酸(1+1)中，加酒石酸銻鉀溶液并且混合均勻。此溶液貯存于棕色試劑瓶中，在冷處可保存二個月。6）過100目篩土樣0.2g。四、實驗步驟1）土壤干樣前處理：稱取0.2g土壤樣品于50ml離心管中，加入1molL-1HCl溶液20mL，塞緊塞子。在多用調(diào)速振蕩器上振蕩30mim，

4、取出在離心機(jī)上以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心10mim，得到上清液。如果不能在24h內(nèi)進(jìn)行，將上清液儲存在冰箱中備用。2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：A磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的配制（含磷2.0g/mL）：將10.0mL的磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：含磷50.0g/mL)轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線并混勻。 B取數(shù)支25mI具塞比色管，分別加入磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液0、0.5（1g）、1.00、3.00、5.00、10.0、15.0ml，加水至25mLC 顯色：向比色管中加入0.5mL10%抗壞血酸溶液，混勻。30s后加1mL鉬酸鹽溶液充分份昆勻，放置l5min。D 測量：用10mm比色皿，于700nm波長處，以零濃度溶液為參比，測量吸光度，以其測定的吸光值為縱坐標(biāo)，相應(yīng)磷濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。磷標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度值磷濃度(mg/L)00.040.080.240.40.81.2吸光度00.0080.0160.0560.0970.1940.2943）樣品測定取上清液2ml(使含磷量不超過30g)加入25mL比色管中，用水稀釋至標(biāo)線。以下按繪制校準(zhǔn)曲線的步驟進(jìn)行顯色和測量。減去空白試驗的吸光度，并從校準(zhǔn)曲線上查出含磷量。五、實驗結(jié)果土壤中無機(jī)磷含量（g·kg-1）=C×0.025×（20/V）/m 式中：C上清液正磷酸鹽濃度；