中國(guó)藥典-2015-四部通則-9205 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則

1、9205 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則 本指導(dǎo)原則是用于指導(dǎo)藥品微生物檢驗(yàn)用的潔凈室等受控環(huán)境微生物污染情況的監(jiān)測(cè)和控制。 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室是指用于藥品無(wú)菌或微生物檢驗(yàn)用的潔凈實(shí)驗(yàn)室、隔離系統(tǒng)及其他受控環(huán)境。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室的潔凈級(jí)別按空氣懸浮粒子大小和數(shù)量的不同參考現(xiàn)行“藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范”分為A、B、C、D 4個(gè)級(jí)別。為維持藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的穩(wěn)定性、確保藥品質(zhì)量安全及檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)對(duì)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)和控制，使受控環(huán)境維持可接受的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)水平。 本指導(dǎo)原則包括人員要求、初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室參數(shù)確認(rèn)、微生物監(jiān)測(cè)方法、監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)項(xiàng)目、監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、警戒限和糾

2、偏限、數(shù)據(jù)分析及偏差處理、微生物鑒定和微生物控制。 人員 從事藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制的人員應(yīng)符合現(xiàn)行中國(guó)藥典通則中“藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則（通則9203）”的相關(guān)要求。 確認(rèn) 初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行參數(shù)確認(rèn)，確認(rèn)參數(shù)包括物理參數(shù)、空氣懸浮粒子和微生物。潔凈實(shí)驗(yàn)室若有超凈工作臺(tái)、空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)等關(guān)鍵設(shè)備發(fā)生重大變化時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行參數(shù)測(cè)試。 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室物理參數(shù)的測(cè)試應(yīng)當(dāng)在微生物監(jiān)測(cè)方案實(shí)施之前進(jìn)行，確保操作順暢，保證設(shè)備系統(tǒng)的運(yùn)行能力和可靠性。主要的物理參數(shù)包括高效空氣過(guò)濾器完整性，氣流組織、空氣流速（平均風(fēng)速），換氣次數(shù)、壓差、溫度和相對(duì)濕度等，測(cè)試應(yīng)在模擬正常檢測(cè)條件下進(jìn)

3、行。 各級(jí)別潔凈環(huán)境物理參數(shù)建議標(biāo)準(zhǔn)及最長(zhǎng)監(jiān)測(cè)周期見(jiàn)表1，必要時(shí)，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)潔凈實(shí)驗(yàn)室使用用途、檢測(cè)藥品的特性等制定適宜的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。物理參數(shù)測(cè)試方法參照潔凈室施工及驗(yàn)收規(guī)范的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中附錄D3高效空氣過(guò)濾器現(xiàn)場(chǎng)掃描檢漏方法、附錄E12氣流的檢測(cè)、附 錄E1風(fēng)量和風(fēng)速的檢測(cè)、附錄E2靜壓差的檢測(cè)、附錄E5溫濕度的檢測(cè)進(jìn)行。 初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室其空氣懸浮粒子和微生物的確認(rèn)及監(jiān)測(cè)照以下“監(jiān)測(cè)”進(jìn)行。 監(jiān)測(cè) 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)，內(nèi)容包括非生物活性的空氣懸浮粒子數(shù)和有生物活性的微生物監(jiān)測(cè)，其中微生物監(jiān)測(cè)包括環(huán)境浮游菌和沉降菌監(jiān)測(cè)，及關(guān)鍵的檢測(cè)臺(tái)面、人員操作服表面及5指手套等的微

4、生物監(jiān)測(cè)。 當(dāng)潔凈區(qū)有超凈工作臺(tái)、空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)等關(guān)鍵設(shè)備發(fā)生重大改變時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行監(jiān)測(cè)；當(dāng)微生物監(jiān)測(cè)結(jié)果或樣品測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生偏離，經(jīng)評(píng)估潔凈區(qū)可能存在被污染的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，應(yīng)對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行清潔消毒后重新進(jìn)行監(jiān)測(cè)。 1. 監(jiān)測(cè)方法 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子的監(jiān)測(cè)照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測(cè)試方法的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；沉降菌的監(jiān)測(cè)照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；浮游菌的監(jiān)測(cè)照醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。 表面微生物測(cè)定是對(duì)環(huán)境、設(shè)備和人員的表面微生物進(jìn)行監(jiān)測(cè)，方法包括接觸碟法和擦拭法。接觸碟法是將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對(duì)規(guī)則表面或平面進(jìn)行取樣，然后

5、置合適的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間并計(jì)數(shù)，每碟取樣面積約為 25cm2，微生物計(jì)數(shù)結(jié)果以cfu/碟報(bào)告；擦拭法是接觸碟法的補(bǔ)充，用于不規(guī)則表面的微生物監(jiān)測(cè)，特別是設(shè)備的不規(guī)則表面。擦拭法的擦拭面積應(yīng)采用合適尺寸的無(wú)菌模板或標(biāo)尺確定，取樣后，將拭子置合適的緩沖液或培養(yǎng)基中，充分振蕩，然后采用適宜的方法計(jì)數(shù)，每個(gè)拭子取樣面積為約25cm2，微生物計(jì)數(shù)結(jié)果以cfu/拭子報(bào)告。接觸碟法和擦拭法采用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和時(shí)間同浮游菌或沉降菌監(jiān)測(cè)。表面菌測(cè)定應(yīng)在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行。 環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA），必要時(shí)可加入適宜的中和劑，當(dāng)監(jiān)測(cè)結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)

6、因素影響時(shí)，可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）。 在藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控中，監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)項(xiàng)目建議按表2進(jìn)行。 注：每月一次。工作臺(tái)面沉降菌的日常監(jiān)測(cè)采樣點(diǎn)數(shù)不少于3個(gè)，且每個(gè)采樣點(diǎn)的平皿數(shù)應(yīng)不少于1個(gè)。每季度一次 每半年一次。 如果出現(xiàn)連續(xù)超過(guò)糾偏限和警戒限、關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有污染微生物存在、空氣凈化系統(tǒng)進(jìn)行任何重大的維修、消毒規(guī)程改變、設(shè)備有重大維修或增加、潔凈室（區(qū)）結(jié)構(gòu)或區(qū)域分布有重大變動(dòng)、引起微生物污染的事故、日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)考慮修改監(jiān)測(cè)頻次。 2. 監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 各潔凈級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表3、微生物監(jiān)測(cè)的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表4。 表3 各潔凈級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn) 懸浮粒

7、子最大允許數(shù)/立方米 潔凈度級(jí)別 靜態(tài) 動(dòng)態(tài) 0. 5m 5. 0m 0.5m 5.0m A級(jí) 3520 20 3520 20 B級(jí) 3520 29 352000 2900 C級(jí) 352000 2900 3520000 29000 D級(jí) 3520000 29000 不作規(guī)定 不作規(guī)定 注：表中各數(shù)值均為平均值；單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于4小時(shí)，同一位置可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并累積計(jì)數(shù)。 3. 警戒限和糾偏限 藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)歷史數(shù)據(jù)，結(jié)合不同潔凈區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)，采用適宜的方法，制定適當(dāng)?shù)奈⑸锉O(jiān)測(cè)警戒限和糾偏限。限度確定后，應(yīng)定期回顧評(píng)價(jià)，如歷史數(shù)據(jù)表明環(huán)境有所改善，限度應(yīng)作出相應(yīng)調(diào)整

8、以反映環(huán)境實(shí)際質(zhì)量狀況。表5列出了各級(jí)別潔凈環(huán)境微生物糾偏限參考值。 注：數(shù)據(jù)表示建議的環(huán)境質(zhì)量水平，也可根據(jù)檢測(cè)或分析方法的類型確定微生物糾偏限度標(biāo)準(zhǔn)；可根據(jù)潔凈區(qū)域用途、檢測(cè)藥品的特性等需要增加沉降碟數(shù)；A級(jí)環(huán)境的樣本，正常情況下應(yīng)無(wú)微生物污染。 4. 數(shù)據(jù)分析及偏差處理 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)當(dāng)對(duì)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和回顧，通過(guò)收集的數(shù)據(jù)和趨勢(shì)分析，總結(jié)和評(píng)估潔凈實(shí)驗(yàn)室是否受控，評(píng)估警戒限和糾偏限是否適合，評(píng)估所采取的糾偏措施是否合適。 應(yīng)當(dāng)正確評(píng)估微生物污染，不僅僅關(guān)注微生物數(shù)量，更應(yīng)關(guān)注微生物污染檢出的頻率，往往在一個(gè)采樣周期內(nèi)同一環(huán)境中多點(diǎn)發(fā)現(xiàn)微生物污染，可能預(yù)示著風(fēng)險(xiǎn)增加，應(yīng)仔細(xì)評(píng)估

9、。幾個(gè)位點(diǎn)同時(shí)有污染的現(xiàn)象也可能由不規(guī)范的采樣操作引起，所以在得出環(huán)境可能失控的結(jié)論之前，應(yīng)仔細(xì)回顧采樣操作過(guò)程。在污染后的幾天對(duì)環(huán)境進(jìn)行重新采樣是沒(méi)有意義的，因?yàn)椴蓸舆^(guò)程不具有可重復(fù)性。 偏差處理 當(dāng)微生物監(jiān)測(cè)結(jié)果超出糾偏限度時(shí)，應(yīng)當(dāng)按照偏差處理規(guī)程進(jìn)行報(bào)告、記錄、調(diào)查、處理以及采取糾正措施，并對(duì)糾正措施的有效性進(jìn)行評(píng)估。 5. 微生物鑒定 建議對(duì)受控環(huán)境收集到的微生物進(jìn)行適當(dāng)水平的鑒定，微生物菌群信息有助于預(yù)期常見(jiàn)菌群，并有助于評(píng)估清潔或消毒規(guī)程、方法、清潔劑或消毒劑及微生物監(jiān)測(cè)方法的有效性，尤其當(dāng)超過(guò)監(jiān)測(cè)限度時(shí)，微生物鑒定信息有助于污染源的調(diào)査。關(guān)鍵區(qū)域分離到的菌落應(yīng)先于非關(guān)鍵區(qū)域進(jìn)行鑒定。微生物鑒定參照微生物鑒定指導(dǎo)原則（通則9204）進(jìn)行。 微生物控制 為了保證藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室環(huán)境維持適當(dāng)?shù)乃?，并處于受控狀態(tài)，除保持空調(diào)系統(tǒng)的良好運(yùn)行狀態(tài)，對(duì)設(shè)施進(jìn)行良好維護(hù)外，潔凈室內(nèi)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守良好的行為規(guī)范，并定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控，減少人員干預(yù)比監(jiān)測(cè)更有效。其次是通過(guò)有效控制人員和物品的移動(dòng)，適當(dāng)?shù)目刂茰囟群蜐穸?。微生物控制措施還包括良好的清潔和衛(wèi)生處理，應(yīng)定期對(duì)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔和消毒，應(yīng)當(dāng)監(jiān)測(cè)消毒劑和清潔劑的微生物污染狀況，并在規(guī)定